实验4--水中细菌总数的测定

细菌总数的测定实验报告细菌总数的测定实验报告引言：细菌是一类微小的单细胞生物，广泛存在于自然界的各个角落中。

它们在环境中的分布和数量对人类的生活和健康有着重要的影响。

因此，准确测定细菌总数对于环境监测、食品安全等领域具有重要意义。

本实验旨在通过一系列方法，测定细菌总数，并探讨其应用前景。

材料与方法：1. 样品准备：从不同环境中采集样品，如水源、土壤、食品等。

2. 细菌培养基制备：根据不同的需求，选择适宜的培养基，如营养琼脂、大肠杆菌培养基等。

3. 细菌培养：将样品分别接种到不同的培养基上，通过恒温培养，促使细菌生长繁殖。

4. 细菌计数：采用平板计数法，将培养好的细菌涂布于琼脂平板上，以形成菌落。

通过计数菌落的数量，间接测定细菌总数。

结果与讨论：通过实验，我们成功测定了不同样品中的细菌总数。

结果显示，不同环境中的细菌总数存在显著差异。

例如，水源中的细菌总数相对较低，而土壤中的细菌总数较高。

这与细菌在不同环境中的适应能力有关。

水源中的细菌数量较少，可能是由于水中的氧气含量较低，限制了细菌的生长。

而土壤中的细菌数量较多，可能是由于土壤中丰富的有机物质提供了充足的营养。

此外，我们还发现食品样品中的细菌总数也较高。

这一结果提醒我们在食品加工和储存过程中要加强卫生管理，以避免细菌污染对人体健康的威胁。

同时，对于食品行业来说，测定食品中的细菌总数也是保证产品质量和安全的重要手段之一。

细菌总数的测定方法中，平板计数法是最常用的方法之一。

它的优点在于简单易行、结果直观可靠。

然而，平板计数法也存在一定的局限性。

首先，这种方法只能测定可生长的细菌数量，无法测定处于休眠状态或无法在特定培养基上生长的细菌。

其次，平板计数法需要较长的培养时间，通常需要24小时以上。

因此，在紧急情况下，需要快速测定细菌总数时，平板计数法可能不适用。

结论：细菌总数的测定是一项重要的实验工作，它对于环境监测、食品安全等领域具有重要意义。

通过实验，我们成功测定了不同样品中的细菌总数，并发现了不同环境中的细菌总数存在显著差异。

水中细菌总数的测定在正确制备培养基的基础上，能正确运用平板接种法正确举行细菌总数的测定；把握饮用水、水源水的细菌总数测定办法、步骤和要点。

一、养分琼脂培养基(供细菌总数的测定) 称取：蛋白陈2.5g，牛肉膏0.75g, NaCl1.25g于500ml烧杯中，加150ml蒸馏水溶解，另称取琼脂5g加100ml蒸馏水溶解，待所有溶解后，混匀，加10％ NaOH，调pH =7.4～7.6，熟化1h，除垢，用棉花过滤，分装，在121℃条件下，灭菌20min，备用。

二、仪器 1．高压蒸汽灭菌器。

2．干热灭菌(烘箱)。

3．水浴隔热培养箱。

4．冰箱。

5.培养皿(直径9ml)。

6．吸管(10.0ml、1.0m1)。

三、菌落计数原则 1．一个平皿有较大片菌落生长时，不宜采纳； 2．无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数； 3．成片状菌落不到平皿的一半，其余一半的菌落数分布匀称，则将半皿计数×2报告之。

四、注重事项 1．检验中所用玻璃器皿应洗净后采纳干热灭菌法(160℃，2h)举行灭菌； 2．培养基的pH值调整要正确； 3．培养基配制和储存是以2周为限； 4．培养基不宜反复多次灭菌，防止pH值下降； 5．灭菌间隔时光普通不超过4h; 6．培养基如发觉产气、混浊、有菌膜、变色、有菌落、沉淀等应废弃； 7．平皿菌落计数时，肉眼观看，须要时可用放大镜，以防遗漏，计下各平皿的菌落。

[任务实施] 一、生活饮用水 1．取三个培养皿，分离是一个空白、另两个加1.0ml水样； 2．浇养分琼脂培养基(冷却至45℃～50℃，无菌操作)2～3 mm，冷却至室温、凝固后倒置； 3．在37℃，培养24小时后，观看结果并记录。

二、水源水 1．用无菌水稀释水样分离为0.1、0.01、0.001 ml的稀释比； 2．取四个培养皿，分离是空白、0.1、0.01、0.001ml的稀释比的水样加1.0ml水样； 3．浇养分琼脂培养基(冷却至45～50℃，无菌操作)2～3mm，冷却至室温、凝固后倒置； 4．在37℃，培养24h后，观看结果并记录。

自来水中细菌总数的测定自来水是我们生活中必需的一种水源，但由于其经过管道输送，可能会受到外界环境的影响，其中细菌是其中一种污染物。

因此，对自来水中的细菌总数进行测定，有助于判断自来水是否符合生活饮用水标准。

一、实验原理本实验采用了膜过滤法对自来水中的细菌总数进行测定。

其原理是通过将水样通过微孔膜滤器，将水中的微生物捕捉在滤膜的表面，再将滤膜培养在含有营养物质的琼脂培养基中，使细菌能够生长形成菌落，然后再通过计数器进行计数。

二、实验步骤1. 实验前处理：先将实验室的玻璃仪器清洗干净，用工业酒精将滤器放入灭菌杯中斜着着火杀菌，备用。

2. 取一个样品瓶，将自来水（1L）倒入瓶中。

将样品瓶放入一个不透明的塑料袋中，用胶带密封塑料袋，防止紫外线照射导致细菌死亡。

3. 首先将滤装置组装好，将滤膜放入滤装置的中间柄内，放入开口的滤膜夹中。

然后用无菌注射器将琼脂培养基吸入滤装置的压力室中，将压力室旋好。

4. 用烧杯等容器将自来水倒入滤装置中，通过压力室将水样通过滤膜，滤膜表面残留的微生物被滤装置中的滤膜抓住，滤液通过过滤口流出。

滤液需丢弃。

5. 将滤膜夹子取下，将滤膜放入用滤膜侧朝上的营养琼脂培养基培养皿中，培养皿需用无菌手套拆开。

将其覆盖好，标明标识，并用胶带作为封口。

6. 将培养皿竖起放入培养箱中，温度设定为37℃左右，需要放置24h以上，17~25℃下也可进行培养，培养天数也需要视不同微生物而定。

7. 取出培养皿，用目镜进行菌落计数。

计数时需要注意，培养皿中的菌落数量需要控制在20~200个之间。

计数完后将数据进行转换，得出升级菌落数，即水样中的细菌总数。

三、实验注意事项1. 玻璃仪器需要在实验前清洗干净，并且需要消毒处理，防止样品污染。

2. 在进行实验前，实验人员需要洗手，并穿戴洁净的实验服和手套，防止手部细菌对实验结果的影响。

3. 滤装置和培养皿需要在无菌条件下进行处理，避免细菌的交叉感染。

4. 培养皿中需要加盖，防止紫外线照射导致细菌死亡，同时也可以避免污染。

实验水中细菌总数的测定前言水是我们生活的重要组成部分，无论是生命的起源，还是人类生活和生产都与水密不可分。

但是随着工业化进程的加快，水质越来越受到污染，水中细菌总数也成为常见的水质指标之一。

本文将介绍如何进行水中细菌总数的测定实验。

实验目的1.掌握测定水中细菌总数的方法；2.熟悉细菌结构及其生长条件；3.加深对水质检测的认识。

实验原理水中的细菌一般通过卫生污染途径进入自来水、地下水、河流等水体，污染水源后就会对人们的生活、工作和生产带来很大的危害。

痢疾、霍乱、伤寒、腹泻等疾病多是由于口腔、消化系统中的有害菌群外移至消化道。

测定方法主要是基于发酵方法，通过统计水中微生物的数量，其基本依据在于微生物在适宜的温度和环境下，利用某些碳水化合物发酵而产生可测定的气体。

常用的指标为断氧时间（DT），根据氧的量来判断细菌数量的多少，一定程度上可以反映出水的卫生状况。

实验步骤1.取水样：从自来水水源处取出应检样品，需注意的是要使用无菌容器，最好是预先消毒过的。

在取水样前，最好流动5分钟以上方可取样，避免得到不实际的结果；2.加入营养元素：滤上滤膜后，再将约5ml的最少粉末培养基、4-5滴的氯化甲烷胺（1%）和约200ml无菌水混合均匀，将混合溶液倒入水样中；3.发酵过程：将水样发酵瓶通过逆时针旋紧，摇晃均匀；4.测定结果：记录下发酵瓶开始发酵的时间，水样中的气体不断地逸出，瓶内逐渐产生负压下降，直到完全断氧的时间。

断氧时间愈短，水质愈差，水中微生物愈多，反之亦然。

实验要点1.无菌取样，避免二次污染，结果更加准确；2.取样量及试剂加入的量要准确，否则会影响实验结果；3.发酵瓶要紧闭，防止气体泄漏；4.营养元素中含有的碳源、氮源等应与微生物的生长有适当的关系。

通过测定水中细菌总数，可以更加准确地判断水的卫生状况。

通过本实验的学习和操作，可以更加深入地了解微生物结构、生长条件以及水质检测的方法，具有较高的理论和实际应用价值。

水质细菌总数的测定
水质是指水中所含有的各种物质的性质和数量，其中包括细菌总数。

细菌总数是指水中细菌的数量，是评价水质的重要指标之一。

细菌总数的测定可以反映水中细菌的污染程度，为保障人们的健康提供了重要的依据。

细菌是一类微生物，它们广泛存在于自然界中，包括水体中。

有些细菌对人体有害，如致病菌，会引起各种疾病。

因此，水中细菌总数的测定对于保障人们的健康至关重要。

测定水中细菌总数的方法有多种，其中最常用的是培养法。

培养法是将水样放入含有营养物质的培养基中，使细菌在培养基上生长繁殖，然后通过计数器或显微镜等设备进行计数。

这种方法简单易行，但需要一定的实验室设备和技术。

除了培养法外，还有一些快速检测方法，如流式细胞术、荧光定量PCR等。

这些方法可以快速准确地测定水中细菌总数，但需要更高的实验室设备和技术。

水中细菌总数的标准是由国家制定的，不同的水质标准对细菌总数的要求也不同。

例如，生活饮用水的细菌总数标准为1000个/mL 以下，而游泳池水的标准为200个/mL以下。

如果水中细菌总数超过标准，就说明水质存在问题，需要采取相应的措施进行处理。

维护水质是保障人们健康的重要措施之一。

通过测定水中细菌总数，
可以及时发现水质问题，采取相应的措施进行处理，保障人们的健康。

因此，对于水质的监测和管理，应该引起足够的重视。

细菌总数测定实验报告细菌总数测定实验报告引言：细菌是一类微小的生物体，广泛存在于自然界的各个角落。

细菌的数量对于环境卫生和食品安全至关重要。

本实验旨在通过测定细菌总数的方法，了解样品中细菌的数量，并探讨不同环境条件对细菌总数的影响。

实验方法：1. 样品采集：我们选择了不同环境中的样品，包括自来水、空气、餐具表面和人体皮肤表面。

通过无菌棉签或无菌采样器，分别采集样品，并放入无菌试管中。

2. 稀释液的制备：我们准备了一种稀释液，以免细菌过多导致结果不准确。

稀释液的配方为：1克氯化钠和1克蛋白胨溶解在100毫升蒸馏水中。

3. 稀释样品：将采集到的样品取出一定量，加入稀释液中，进行逐级稀释。

我们选择了1:10、1:100和1:1000三个不同的稀释倍数。

4. 培养：将稀释后的样品分别接种在琼脂平板上，利用无菌棉签均匀涂抹样品。

然后将琼脂平板倒置放置于恒温培养箱中，温度设定为37摄氏度。

培养时间为24小时。

5. 细菌总数计算：在培养箱中，我们观察到琼脂平板上的菌落。

根据菌落的数量和稀释倍数，可以计算出原始样品中的细菌总数。

实验结果：我们进行了多次实验，得到了不同样品中的细菌总数。

结果显示，自来水中的细菌总数最低，空气中次之，餐具表面和人体皮肤表面的细菌总数较多。

此外，我们还发现，稀释倍数越高，细菌总数越低。

讨论：细菌总数的测定对于环境卫生和食品安全具有重要意义。

通过本实验，我们了解到不同环境中细菌总数的差异，为进一步研究提供了基础数据。

自来水中的细菌总数较低，这可能是由于自来水经过了严格的处理和消毒。

空气中的细菌总数稍高，这是因为空气中存在着大量的微生物，例如细菌和真菌。

餐具表面和人体皮肤表面的细菌总数较多，这与人们日常接触物体和环境有关。

稀释倍数的选择对于测定细菌总数至关重要。

过高的稀释倍数会导致菌落过少，难以准确计数；而过低的稀释倍数则会导致菌落过多，影响结果的准确性。

因此，在实际应用中，我们需要根据实际情况选择适当的稀释倍数。

生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法-
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生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法
测定生活饮用水中细菌总数的一种方法是平皿计数法，本文将对这种方法进行详细介绍。

一、实验原理
平皿计数法是利用细菌在液体培养基表面生长成菌落的原理，通过计算菌落个数来确定水中的细菌总数。

二、实验步骤
1. 准备培养基，将培养基倒入无菌平皿中；
2. 取样，将水样取自自来水管道或自然水源中；
3. 稀释，将取样液进行10倍、100倍、1000倍稀释，分别将每份稀释液分别均匀分散在培养基表面，避免液滴残留；
4. 写标签，标注菌落计数的相关信息，例如样品名称、稀释倍数、菌落计数的日期等；
5. 培养，将培养皿放置在恒温培养箱中，设定温度为37℃，并在3-5天内进行观察和计数。

三、实验注意事项
1. 取样应避免超过24小时，以免菌群失去代表性；
2. 取用的平皿应事先灭菌处理，以避免外来细菌的污染；
3. 实验室应有专门的抽风设备、消毒液等清洁工具，以维持实验室的高度卫生。

通过以上三个步骤，我们就可以精确地测定出生活饮用水中细菌总数。

同时，这种方法也可以应用在其他领域，例如食品安全、环境监测等
方面。

但需要注意的是，实验过程中必须遵守实验室操作规程，以保
证实验结果的可靠性。

水中细菌总数的测定步骤在环境监测和饮用水管理中，测定水中细菌总数是非常重要的一项工作。

它可以帮助我们了解水质的卫生情况，评估水是否符合生活饮用水标准，从而保障人们的健康。

那么，究竟应该如何测定水中细菌的总数呢？下面我将结合常用的方法，为大家详细介绍一下。

1. 收集水样我们需要准备好需要测定的水样。

这些水样可以来自自来水、地表水、井水或者其他水源。

在收集水样的过程中，需要注意使用无菌瓶或者消毒过的玻璃瓶，避免外界细菌的污染。

在收集水样的过程中，也需要避免使用含氯的消毒剂，以免对后续操作产生影响。

2. 制备稀释液收集好水样之后，接下来需要制备稀释液。

一般来说，我们会选择生理盐水或者蒸馏水作为稀释液的基质。

在制备稀释液的过程中，需要进行严格的无菌操作，以确保稀释液不会受到外界细菌的污染。

3. 进行稀释将收集到的水样加入到制备好的稀释液中，进行适当的稀释。

一般情况下，我们会选择进行多次等比稀释，以确保在测定范围内可以准确计数。

稀释完成后，需要进行摇匀，确保水样和稀释液充分混合。

4. 填充平板接下来，我们需要将稀释后的水样填充到已经准备好的平板上。

填充平板的过程中，需要采用无菌技术，避免细菌污染。

填充完成后，需要在平板上进行横向和纵向的晃动，以确保水样均匀分布在平板表面。

5. 孵育培养填充好水样的平板需要置于培养箱中进行孵育。

一般情况下，会选择在35-37摄氏度下进行孵育，孵育的时间一般为24小时。

在孵育过程中，需要注意防止平板干燥，以免影响细菌的生长。

6. 计数和分析经过孵育后，我们可以观察到在平板上形成的菌落。

这时候就需要进行计数和分析了。

一般来说，我们会选择菌落计数板或者显微镜进行观察和计数。

通过计数和分析，我们就可以得到水样中细菌的总数。

测定水中细菌总数的步骤主要包括收集水样、制备稀释液、进行稀释、填充平板、孵育培养和计数分析。

这些步骤需要严格遵守无菌操作和实验室安全规范，以确保测定结果的准确性和可靠性。

水中细菌总数的测定和大肠菌群的检测（1）录入时间:2010-9-25 11:17:29 来源：生物信息网（一)实验目的(1)了解和学习水中细菌总数和大肠菌群的测定原理和测定意义。

(2)学习和掌握用稀释平板计数法测定水中细菌总数的方法。

(3)学习和掌握水中大肠菌群的检测方法。

（二)实验原理水是微生物广泛分布的天然环境。

各种天然水中常含有一定数量的微生物。

水中微生物的主要来源有：水中的水生性微生物(如光合藻类)、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。

水中的病原菌主要来源于人和动物的传染性排泄物。

水的微生物学的检验，特别是肠道细菌的检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。

国家饮用水标准规定，饮用水中大肠菌群数每升中不超过3个，细菌总数每mL不超过100个。

所谓细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数，所用的方法是稀释平板计数法，由于计算的是平板上形成的菌落(colony-forming unit，cfu)数，故其单位应是cfu/g(mL)。

它反映的是检样中活菌的数量。

所谓大肠菌群，是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称，主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。

水的大肠菌群数是指100mL水检样内含有的大肠菌群实际数值，以大肠菌群最近似数(MPN)表示。

在正常情况下，肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽胞杆菌等多种细菌。

这些细菌都可随人畜排泄物进入水源，由于大肠菌群在肠道内数量最多，所以，水源中大肠菌群的数量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。

目前，国际上已公认大肠菌群的存在是粪便污染的指标。

因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。

水中大肠菌群的检验方法，常用多管发酵法和滤膜法。

多管发酵法可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。