奈达铂对裸鼠MGC-803胃癌移植瘤抑制作用及对p53基因表达影响

顺铂缓释剂对人胃癌裸鼠移植瘤生长以及CD44V6＼PTEN表达的影响目的:观察顺铂植入剂对人胃癌裸鼠移植瘤模型中肿瘤细胞生长及CD44V6与PTEN蛋白在胃癌组织中表达的影响，并探讨其作用的相关机制。

方法建立裸鼠皮下移植瘤模型，随机分4组: PBS 尾静脉注射组( A 组)、顺铂尾静脉注射组( B 组)、顺铂瘤内注射组(C组)，顺铂植入剂植入组(D组)。

药物干预后，通过免疫组化法检测CD44V6、及PTEN 表达水平，并进行流式细胞凋亡检测。

结果顺铂植入剂能显著抑制移植瘤的生长，促进其凋亡并能较显著提高PTEN的表达【D组( 62.46±4.36) 与A组（6.44±2.84）比较，差异有统计学意义( P <0. 05)】，降低CD44V6 的表达【D组( 28.7±8.10) 与A组（80.48±8.18）比较，差异有统计学意义( P <0. 05)】。

结论顺铂植入剂可能通过下调CD44V6表达、上调PTEN 表达来发挥抗肿瘤的作用。

标签：顺铂植入剂；胃癌，裸鼠，cd44v6；PTENThe Effect of the human gastric transplantable tumor from nude mice implanted cisplatin-implants on its growth and on the expression of CD44V6 and PTEN Cai Tingting1，Yan Liping2*，Li Ping2(1Graduate School，Guilin Medical School，Guilin 541001; 2 Dept of Gastroenterology，The Second People’s Hospital of Guilin，Guilin 541001) Abstract:ObjectiveTo observe the PTEN /CD44V6gene proteins expression level in nude mouse with gastric carcinoma subcutaneous transplanted by sustained-release cisplatin implantation，and discuss the mechanism of sustained-release cisplatin. MethodsTo establish the gastric carcinoma subcutaneous transplanted model ，and divided into 4 groups randomly: the control group respectively the tail intravenous injection of PBS( A group) ，the tail intravenous injection of cisplatin group( B group) ，the intratumor injection of cisplatin group( C group) ，the implant of sustained-release cisplatin group( D group) . After the drugs intervening，the tumor tissues weredetected by IHC with the PTEN /CD44V6.Besides ,the cell suspensions were tested by FCM.ResultsCisplatin-implants can promote the apoptosis as well as suppress the tumor growth significantly and it also can enhance the expression of pten ( D group: 62.46±4.36vs A group:6.44±2.84，P＜0. 05) ，reducing the expression of cd44v6( D group:28.7±8.10vs A group:80.48±8.18，P＜0. 05). Conclusion Cisplatin-implants can develop the anticancer function in apoptosis by enhancing the expression of pten and reducing the expression of cd44v6.Keywords:cisplatin-implants;gastric cancer;nude mice; cd44v6；PTEN由于恶性度高，预后差，生存率不理想，胃癌——特别是进展期胃癌治疗方面的研究有着重要的意义。

国产奈达铂为主化疗方案在放疗增敏中的作用【摘要】目的探讨奈达铂(NDP)放疗增敏作用、毒性反应以及处理措施。

方法NDP化疗为主方案(NDP+5-FU)的应用和放射治疗同步进行。

结果近期疗效CR 10例,PR 5例;骨髓抑制:WBC多为Ⅰ度,约占60%,PLTⅠ度5例,约占30%,Hb Ⅰ度8例,约占53.3%。

胃肠道反应轻。

结论增敏作用肯定,耐受好。

WBC影响相对小,而PlT、Hb影响略高,胃肠反应较小,无需水化。

【关键词】奈达铂; 放疗增敏;放射治疗;头颈部肿瘤国产奈达铂(捷佰舒,Nedaplatin、NDP)是第二代有机铂类抗癌新药[1]。

日本学者进行的临床研究显示奈达铂对多种实体瘤有良效,可用于头颈部肿瘤、肺癌、食管癌、膀胱癌、睾丸肿瘤、卵巢癌以及子宫颈癌等治疗,但国内有关的临床文献较少[1-3],用于放射治疗(RT)增敏还是初次尝试。

1材料与方法1.1病例选择2004年3月至2005年3月,住院头颈部肿瘤,有淋巴结(L、N)转移的患者,共15例,男10例,女5例,年龄26～68岁,平均47岁。

鼻咽癌10例,舌癌1例,扁桃体癌1例,喉癌3例,均为鳞癌。

Ⅲ期11例,Ⅳ期4例(UICC,1992,TNM 分期标准)。

入选标准:①病理证实;②L.N.≥1 cm; ③Karnofsky评分≥70分,预计生存＞3个月;④年龄18～70岁;⑤肝、肾功、血象正常;⑥无铂类药物过敏史;⑦初次治疗。

1.2治疗方法1.2.1放疗增敏方案:NDP+5-FU NDP:80 mg/m2 +NS 500 ml静脉滴注,第1天常规静脉滴速;5-FU 500 mg/m2 + NS 500 ml静脉滴注,第1～5天维持4～6 h。

注意事项:①21～28 d,为1周期,与放疗同步;②每次化疗,水化≥1 000 ml(4例老年患者,因不愿输液,入量≤1 000 ml,未见肝、肾功能异常);③化疗前后,恩丹西酮4 mg 静脉推注,1次/d,地塞米松5 mg静脉推注,1次/d,对症处理;④每周期复查血象及生化指标;⑤应用2～6周期(Ⅲ、Ⅳ期患者增敏化疗2周期+巩固化疗4周期)。

顺铂植入剂对裸鼠人胃癌模型的抗肿瘤作用蔡婷婷;颜丽萍;李弘;石晓萍;梁勇;申美荣【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2014(0)20【摘要】目的:观察新型顺铂植入剂(cisplatin forinjection)与常规顺铂注射液在人胃癌裸鼠移植瘤模型中促肿瘤细胞凋亡以及对脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,SYK)、人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factorreceptor 2,HER2)、黏附分子CD44的变异体6(CD44v6)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(phosphate and tensionhomology deleted on chromsome ten,PTEN)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinylaspartate specific protease 3,Caspase3)、存活素或凋亡抑制基因(Survivin)在胃癌组织中表达水平的影响差异,探讨新型顺铂植入剂在胃癌发生发展过程中的治疗优势.方法:用人胃癌SGC7901细胞株建立Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,随机分4组:PBS尾静脉注射组(A组)、顺铂尾静脉注射组(B组)、顺铂瘤内注射组(C组),顺铂植入剂植入组(D组),每组5只.经药物干预后,记录瘤质量,计算抑瘤率,并对瘤体进行HE染色,通过免疫组织化学法检测SYK、HER2、CD44v6、PTEN、Caspase3、Survivin表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况.结果:与对照组比较后发现新型顺铂植入剂能显著抑制移植瘤生长,促进其凋亡并能较显著提高SYK、PTEN、Caspase3的表达:SYK的表达[D组与C组比较(73.42±4.92 vs 30.42±3.92),差异有统计学意义(P<0.05);而B组与A组比较(14.14±2.84 vs5.06±2.96),差异有统计学意义(P<0.05)],PTEN的表达[D组与C组比较(62.46±4.36 vs 29.82±2.22),差异有统计学意义(P<0.05);而B组与A组比较(16.06±4.26 vs 6.44±2.84),差异有统计学意义(P<0.05)]、Caspase3的表达[D 组与C组比较(77.58±6.28 vs 31.26±4.76),差异有统计学意义(P<0.05);而B组与A组比较(15.24±4.64vs 10.82±2.72),差异有统计学意义(P<0.05)],降低HER2、CD44v6、Survivin表达.HER2的表达[D组与C组比较(16.32±4.82 vs34.82±7.32),差异有统计学意义(P<0.05);而B组与A组比较(45.8±6.60 vs 77.34±9.04),差异有统计学意义(P<0.05)],CD44v6的表达[D组与C组比较(28.7±8.10 vs 48.88±9.28),差异有统计学意义(P<0.05);而B组与A组比较(65.74±6.34 vs 80.48±8.18),差异有统计学意义(P<0.05)],Survivin的表达[D组与C组比较(18.42±4.62 vs 31.3±9.50),差异有统计学意义(P<0.05);而B组与A 组比较(69.66±9.46 vs 84.64±5.04),差异有统计学意义(P<0.05)].结论:新型顺铂植入剂能更显著下调HER2、CD44v6、Survivin或上调SYK、PTEN、Caspase3的表达来抑制肿瘤生长,减少不良反应以达到靶向治疗的目的,为临床胃癌早期预防、进展期治疗及预后提供新思路.【总页数】9页(P2817-2825)【关键词】顺铂植入剂;胃癌;裸鼠;SYK;HER2;CD44v6;PTEN;Caspase3;Survivin 【作者】蔡婷婷;颜丽萍;李弘;石晓萍;梁勇;申美荣【作者单位】桂林医学院科学实验中心消化内科实验室;桂林市第二人民医院消化内科【正文语种】中文【中图分类】R739.8【相关文献】1.奥沙利铂结合参芪扶正注射液对脾虚型人胃癌裸鼠腹膜移植模型抗肿瘤作用的实验研究 [J], 刘杰;赵彦宾;程玉达;胡晓光;周军2.异甘草酸镁对奥沙利铂在人胃癌裸鼠模型中抗肿瘤作用的影响研究 [J], 郭曼;赵园园;何信佳;于丽;张蕊;叶宝玲3.CIK细胞对脾虚型人胃癌裸鼠腹膜移植模型抗肿瘤作用及其机制的实验研究 [J], 赵群;李勇;杨进强;陈少轩;范立侨;王力利;宋振川;邝刚4.奥沙利铂结合CIK细胞对人胃癌裸鼠腹膜移植模型体内抗肿瘤作用的实验研究[J], 赵群;李勇;张辉;陈少轩;杨进强;范立侨;宋振川;王力利;邝刚;焦琨;周宏伟5.顺铂结合CIK细胞对裸鼠人胃癌模型体内的抗肿瘤作用 [J], 孙利兵;杨光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

重组人p53腺病毒在乳腺癌裸鼠体内耐药逆转作用及其对P-糖蛋白表达的影响纪楠;董懿;唐欣;刘爱惠;王钢乐【摘要】目的研究重组人p53腺病毒(rAd-p53)对人乳腺癌MCF-7/ADR裸鼠移植瘤的耐药逆转作用及其对耐药相关P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响.方法建立人乳腺癌MCF-7/ADR裸鼠耐药模型,随机分为对照组、rAd-p53组、阿霉素组、联合组,分别给予不同治疗.观察裸鼠肿瘤体积的变化,western blot检测P-gp蛋白表达情况.结果成瘤后rAd-p53组、阿霉素组、联合组抑瘤率分别为42.05％、49.21％、69.97％,各治疗组体积与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),且联合组显著优于rAd-p53组和阿霉素组(P＜0.05).对照组、rAd-p53组、阿霉素组、联合组P-gp表达水平分别为(0.5964±0.0806)、(0.5506±0.0127)、(0.5641±0.0055)、(0.4652±0.0982),联合组P-gp表达水平低于其他各组.结论Ad-p53对人乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF4/ADR建立的裸鼠移植瘤具有多药耐药的逆转作用,并可下调P-gp的表达.【期刊名称】《武警医学》【年(卷),期】2014(025)004【总页数】4页(P376-378,382)【关键词】乳腺癌;p53基因;多药耐药;P-糖蛋白【作者】纪楠;董懿;唐欣;刘爱惠;王钢乐【作者单位】100026,首都医科大学附属北京妇产医院乳腺科;100026,首都医科大学附属北京妇产医院乳腺科;100026,首都医科大学附属北京妇产医院乳腺科;100026,首都医科大学附属北京妇产医院乳腺科;100026,首都医科大学附属北京妇产医院乳腺科【正文语种】中文【中图分类】R737.9肿瘤细胞的多药耐药(multi-drug resistance, MDR)是指肿瘤细胞对多种结构类型和作用机制不同的药物同时产生抗药性，从而降低化疗药物的疗效。

P53在三阴性乳腺癌中的表达及其与铂类化疗药物敏感性的关系尼杰;智英辉;只向成【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2013(41)4【摘要】目的探讨P53对三阴性乳腺癌(TNBC)预后的意义及其与铂类化疗药物敏感性的关系.方法选取291例原发性乳腺癌患者的新鲜癌组织(新发组),采用肿瘤原代细胞胶原凝胶体包埋化疗药物敏感性检测技术(CD-DST法)进行常用化疗药物(多西他赛、表柔比星、吡柔比星、诺维本、顺铂)的体外检测,用免疫组化方法检测患者中P53的表达,分析其与各临床病理特征及化疗药物敏感性的关系.同时回顾性收集有完整临床和随访资料及完整的生物学指标检测结果的153例TNBC患者资料作为随访组,采用Cox回归分析影响患者无瘤生存期的因素.结果 291例原发性乳腺癌患者中,TNBC患者43例,其中P53阳性表达率为62.79％(27/43),高于非三阴性乳腺癌(30.65％,76/248).在组织学Ⅲ级患者中,P53的阳性表达率为66.04％,高于组织学Ⅰ级(23.73％)和Ⅱ级(30.17％)的阳性表达率.P53是影响TNBC患者无瘤生存期的影响因素,其阳性表达者的5年无瘤生存率低于阴性者(69.7％vs89.4％,P=0.001).对顺铂化疗药物敏感的TNBC中P53阳性表达率低于耐药组,差异有统计学意义(P=0.018).结论 P53阳性是判断TNBC预后较差的指标之一,其表达和铂类化疗药物敏感性呈负相关.%Objective To investigate the relationship between the expression of P53 and the prognosis and platinum-based chemosensitivity in triple negative breast cancer (TNBC).Methods A total of 291 fresh breast cancer samples werecollected .The collagen gel droplet embedded culture drug sensitivity tests (DC-DST) were used to measure the different chemosensitivities of usual chemotheray drugs including docetaxel, epirubicin, pirarubicin navelbine and cisplatin in cultured primary cells in vitro.The expression of P53 was tested by immunohistochemistry.The relationship between P53 expression and clinicopathological characteristics and prognosis was analyzed.The full clinical and follow-up data and biological indicator results in 153 patients with TNBC were retrospectively collected.The Cox regression analysis was used to detect the factors affecting tumor-free survival in patients.Results There were 43 TNBC patients in 291 patients with primary breast cancer, There was a higher rate of P53 expression (62.79% , 27/43) in patients with TNBC than that of patients with non-TNBC (30.65%, 76/248).The positive expression of P53 was higher in patients with grade Ⅲ breast cancer (66.04%) than that in patients with grade Ⅰ (23.73%) and grade Ⅱ (30.17%) breast cancer.The expression of P53 was an independent factor influencing tumor-free survival in patients with TNBC.There was a significantly lower 5-year tumor-free survival rate in patients with the positive expression of P53 than that of patients with negative expression of P53 (69.70% vs 89.40%,P= 0.001).The positive rate of P53 expression was significantly lower in patients with TNBC who were sensitive to cisplatin than that in patients with drug-resistance (P =0.018).Conclusion The positive expression of P53 suggests a poor prognosis in TNBC patients.The expression of P53 is negatively correlated with the chemosensitivity of platinum-based chemotherapy.【总页数】4页(P317-320)【作者】尼杰;智英辉;只向成【作者单位】天津医科大学附属肿瘤医院,乳腺癌防治教育部重点实验室,天津市“肿瘤防治”重点实验室 300060【正文语种】中文【相关文献】1.p53对三阴性乳腺癌预后的意义及与铂类化疗药物敏感性的关系 [J], 王燕2.晚期非小细胞肺癌中ERCC1蛋白表达与铂类化疗药物敏感性的关系 [J], 伍建蓉;郑玲;谷焰;王晓毓;白娟3.乳腺癌中p73α和p53表达与化疗药物敏感性的关系 [J], 周鑫;孙治君4.雄激素受体、肿瘤抑制蛋白P53在三阴性乳腺癌中的表达及其与预后的关系[J], 刘现义;李中;王晓春;史鸿云;游冀鹏5.p53和TAZ在三阴性乳腺癌中的表达和意义 [J], 祝景伟;孟超;佟经伟;许培权因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

新型吲哚类衍生物对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响滕玉鸥;赵红叶;周瑶;韩开林;陆斌;孙华【摘要】为了深入研究吲哚类衍生物对胃癌细胞增殖的作用及其机制，本文研究了19种吲哚类衍生物对人胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用并进行了构效关系分析，最终筛选出结构全新且具有明显抗肿瘤活性的候选化合物16.进一步的研究发现：化合物16能诱导MGC-803细胞发生G2/M期阻滞；同时，AnnexinV/PI双染的结果表明化合物16能诱导MGC-803细胞的凋亡．%In order to study the effect of indole derivatives on human gastric cancer cell proliferation and its mechanism,the structure-activity relationships of 19 indole derivatives were analyzed,and compound 16 with a novel structure was finally screed,which had significant anti-tumor activities.In further research,it was found that compound 16 can induced G2/M phase arrest in MGC-803 cells.After treatment,compound 16 also caused apoptosis in MGC-803 cells.【期刊名称】《天津科技大学学报》【年(卷),期】2016(031)003【总页数】4页(P16-19)【关键词】吲哚类衍生物;细胞增殖;细胞凋亡【作者】滕玉鸥;赵红叶;周瑶;韩开林;陆斌;孙华【作者单位】天津科技大学生物工程学院，天津 300457;天津科技大学生物工程学院，天津 300457;天津科技大学生物工程学院，天津 300457;天津科技大学生物工程学院，天津 300457;天津科技大学生物工程学院，天津 300457;天津科技大学生物工程学院，天津 300457【正文语种】中文【中图分类】R962吲哚类衍生物具有广泛的生物活性，如抗癌、抗抑郁、抗惊厥、抗真菌、抗HIV 及消炎等［1］.在过去的几十年中，越来越多的工业界和学术界研究人员已着手开发新的吲哚类抗癌药物［2］.2006年FDA批准的用于治疗胃肠道间质肿瘤和晚期肾细胞癌的化疗药舒尼替尼（Sutent）即为吲哚类衍生物.本课题组在前期工作中合成了一系列新型吲哚类衍生物，并对其抑制人白血病细胞K562的增殖作用进行了初步研究［3-4］.胃癌近年来呈现高发病率和高致死率的趋势，在世界范围内发病率仅次于肺癌，位居第二位.每年胃癌发病率约为万分之六，死亡率约为万分之三，居恶性肿瘤死亡第一位［5］.本文以人胃癌MGC-803细胞为实验对象，研究了吲哚类衍生物对胃癌细胞增殖的影响及其初步的作用机制.首先通过MTT法［6］对19种化合物的抗肿瘤活性进行测试，通过构效关系分析筛选出具有明显抗肿瘤活性的候选化合物.然后观察候选化合物对胃癌MGC-803细胞形态学的影响，并应用流式细胞技术检测候选化合物对MGC-803细胞周期及凋亡的影响，从而阐明候选化合物抑制MGC-803细胞增殖的初步作用机制.深入研究吲哚类衍生物对胃癌细胞增殖的作用及其机制，对扩展该类化合物的抗肿瘤谱及日后开发新型吲哚类抗癌药物具有重要意义.1.1 细胞株与细胞培养人胃癌细胞MGC-803（天津科技大学生物工程学院药物设计与合成研究室保存）用体积分数为10%，胎牛血清的DMEM培养基，置于37，℃、5%，CO2恒温培养箱中培养.取对数生长期细胞用于实验.吲哚类衍生物加入培养基前均用二甲基亚砜（DMSO）溶解.1.2 试剂与仪器PRMI-1640细胞培养液、巴西胎牛血清、0.25%，胰蛋白酶（1×）溶液、青霉素-链霉素溶液，赛默飞世尔科技公司；MTT、RNase A，北京索莱宝科技有限公司；乙醇（分析纯），国药集团化学试剂有限公司；喜树碱（分析纯），北京偶合科技有限公司；二甲基亚砜，美国Amresco公司；Annexin V-FITC 凋亡试剂盒，美国BD公司；碘化丙啶（PI），西格玛奥德里奇中国有限公司；本实验使用的吲哚类衍生物由天津科技大学生物工程学院药物设计与合成研究室成员韩开林等人合成. TX323L型电子分析天平，岛津国际贸易有限公司；Model 3100 series型CO2培养箱、MULTISKAN MK3型基础酶标仪，赛默飞世尔科技公司；CKX41型奥林巴斯倒置显微镜，奥林巴斯（中国）有限公司；TGL-20M型高速台式冷冻离心机，湘仪离心机仪器有限公司；VORTEX-6型漩涡混合器、LX-300型迷你离心机，海门市其林贝尔仪器制造有限公司；YXQ-LS-50SI型立式压力蒸汽灭菌锅，上海博迅实业有限公司.1.3 吲哚类衍生物抑制MGC-803细胞增殖的IC50值的测定取对数生长期的MGC-803细胞，用0.25%，胰蛋白酶消化，以5×104，mL-1浓度接种于96孔培养板内，每孔100，μL，置37，℃、5%，CO2培养箱孵育24，h.吲哚衍生物组（2—20）加药终浓度分别为：10，μmol/L、1，μmol/L、0.1，μmol/L、10，nmol/L、1，nmol/L.同时设置等体积DMSO 溶剂对照组和阳性对照组（喜树碱），每组设3个平行孔.24，h后，每孔加入药物0.5，μL，溶剂对照组加入等体积DMSO.37，℃、5%，CO2培养箱孵育48，h后，每孔加入MTT 20，μL，37，℃、5%，CO2培养箱继续孵育4，h后终止培养，小心吸弃孔内培养基上清液，每孔加入DMSO 100，μL，置于培养箱10，min，使甲臜结晶充分溶解，酶标仪492、630，nm波长下测定吸光度，用Graph Pad Prism 5.0软件计算药物对细胞生长的半数抑制浓度IC50值［7］.1.4 化合物16对MGC-803细胞形态学的影响取对数生长期的MGC-803细胞，用0.25%，胰蛋白酶消化，以5×104，mL-1浓度接种于6孔培养板内，37，℃、5%，CO2培养箱培养24，h.每孔加入10，μL终浓度为 300，nmol/L化合物16，继续作用24，h.将各组细胞置于奥林巴斯倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化.1.5 化合物16对MGC-803细胞周期的影响取对数生长期的MGC-803细胞，用0.25%，胰蛋白酶消化，以5×104，mL-1浓度接种于6孔培养板内，在37，℃、5%，CO2培养箱培养，24，h后每孔加入10，μL终浓度为 300，nmol/L化合物16，同时溶剂对照组加入等体积DMSO，继续培养6，h.以2，500，r/min离心5，min后收集细胞，并用预冷的PBS缓冲液500，μL清洗2次，2，500，r/min再次离心5，min收集细胞，缓缓加入预冷75%，乙醇，4，℃下固定过夜.1，000，r/min离心5，min后收集细胞，并用1，mL PBS清洗2次，最后用含有100，μg/mL RNase A、50，μg/mL PI、0.2%， Triton X-100 的PBS缓冲液500，μL重悬细胞，4，℃避光孵育30，min，立即用流式细胞仪测定细胞周期，得到其细胞周期的分布时相. 1.6 化合物16对MGC-803细胞凋亡的影响收集对数期细胞铺板，细胞浓度为5×104，mL-1，化合物16加药终浓度为300，nmol/L，溶剂对照组加入等体积DMSO，加药刺激24，h后，以2，500，r/min离心5，min后收集细胞.然后用预冷的500，μL PBS清洗2次，以2，500，r/min离心5，min后收集细胞.用100，μL 1×Binding buffer 重悬细胞，使细胞浓度为1×106，mL-1，置于新的EP管，加5，μL FITC Annexin V 和5，μL PI，25，℃避光放置15，min，每管加400，μL 1×Binding buffer用流式细胞仪进行细胞凋亡测定［8］.2.1 吲哚类衍生物抑制MGC-803细胞增殖的IC50值的测定结果通过MTT法检测5-取代吲哚类衍生物2—9对人胃癌细胞MGC-803体外抗肿瘤活性，其中化合物1（喜树碱）为阳性对照，化合物2（靛红）为母核化合物，结果见表1.从表1中的数据可以看出，在C-5位引入甲基丙烯酸酯的化合物9表现出的抗肿瘤活性比母核化合物2至少提高130～230倍.因此，将化合物9作为先导化合物，进一步研究了N-衍生物的构效关系，结果见表2.由表2可知，在N-1的位置引入苄基并在苯环的对位引入溴时，化合物16抑制MGC-803细胞生长的IC50值为最低，达到了0.08，μmol/L.与溴苄基的对位取代化合物16相比，间位和邻位溴苄基取代的化合物17和化合物18的生物活性有所降低，其IC50值分别为0.35，μmol/L和0.51，μmol/L.这一结果说明：R2处溴苄基取代的空间位置对化合物的活性有较大影响，对位的溴苄基取代能提高至少4～6倍的抗肿瘤活性.表1和表2的构效关系分析结果表明：在19个新型吲哚类衍生物中，化合物16较其他衍生物具有更高效的抗肿瘤活性.因此，将选择化合物16为候选化合物，进一步研究该化合物对MGC-803细胞形态学产生的影响和对细胞周期及细胞凋亡的诱导作用.2.2 化合物16对MGC-803细胞形态学的影响在普通光学显微镜下观察MGC-803细胞生长状况时发现（图1）：溶剂对照组细胞生长旺盛，细胞形态完整；而化合物16（300，nmol/L）刺激24，h后，细胞形态出现变化，细胞从不规则形态变成圆形并呈漂浮状态，且多数呈漂浮状态.2.3 化合物16对MGC-803细胞周期的影响化合物16对MGC-803细胞周期的影响如图2所示.从图2中可以看出：浓度为300，nmol/L的化合物16处理细胞6，h后，与溶剂对照组相比，化合物16组的G1期以及S期细胞明显下降，G2/M期细胞明显上升（从12.7%，增加至32.8%）.说明化合物16能够显著引起MGC-803细胞周期发生G2/M期阻滞.2.4 化合物16对MGC-803细胞凋亡的影响化合物16对MGC-803细胞凋亡的影响如图3所示.从图3中可以看出：化合物16 以300，nmol/L处理MGC-803细胞24，h后，右下象限早期凋亡细胞显著增加（31.3%），比溶剂对照组的早期凋亡率（3.7%）增加了27.6%，说明候选化合物16能够诱导MGC-803细胞的凋亡.这可能是该化合物抑制MGC-803细胞增殖的另一个作用机制.吲哚类生物碱具有重要的生物活性，在已发现的天然吲哚类化合物中，有40多种可作为治疗型药［9］，如可治疗心血管病、糖尿病及肺癌等多种疾病.吲哚类化合物在医药领域的应用非常广泛，如主要由5-甲氧基吲哚制取的松果腺素（又名脑白金）直接作用于下丘脑，具有促进睡眠、调节内分泌及增强免疫力等多种生理功能［10］.本文从吲哚衍生物的构效关系分析入手，由于一些N-苄基靛红衍生物表现出广泛的生物活性，我们以化合物9作为一个潜在的先导化合物，进一步集中N-衍生化类似物的构效关系.首先通过在C-5位改变取代基，通过分析化合物2—9对MGC-803胃癌细胞增殖抑制作用，发现C-5丙烯酸酯基团取代的靛红衍生物有潜在抗肿瘤活性，而后对C-5丙烯酸酯基团取代的靛红衍生物进行了一系列N取代，取代合成了10—20的化合物.以同样的方法对10—20这一系列化合物进行MTT法分析，从数据和不同取代基团分析选用活性较好的化合物16进行进一步的作用机制研究.化合物16对MGC-803细胞的形态学影响和对细胞周期及凋亡的影响实验结果显示：MGC-803细胞经化合物16刺激后变成圆形，呈漂浮状态；化合物16能够显著引起MGC-803细胞周期发生G2/M期阻滞.肿瘤细胞过度增殖的本质是细胞周期调控异常，主要是两方面原因：其一为细胞周期的驱动机制失控（如Cyclins 过表达，Cdk表达异常，CKI表达不足和突变Cyclins、Cdk和CKI表达异常）；其二为监控机制受损，其主要原因为G1/S、G2/M检查点异常［11］.化合物16对这些细胞周期调控蛋白的影响正在进一步的研究中.同时，在研究化合物16对MGC-803细胞凋亡的影响时发现，化合物16能够诱导MGC-803细胞凋亡.细胞凋亡是机体生长、分化、发育和病理过程中由基因编码调控的细胞主动自杀过程，机体通过凋亡使衰老、畸变和能导致疾病的细胞清除［12］.化合物16具体是通过哪个通路诱导MGC-803细胞凋亡的，有待进一步的研究.综上，化合物16对胃癌细胞MGC-803增殖有较好的抑制作用，该化合物能诱导G2/M期的阻滞和细胞凋亡.这一结果对深入研究具有自主知识产权的新型吲哚类抗肿瘤药物具有重要意义.目前，关于化合物16更加深入的作用机制研究正在进行中.【相关文献】［1］张屹，孟霞，秦大伟，等. 吲哚类抗肿瘤药物的研究进展［J］. 化工中间体，2011，1（1）：15-18.［2］孙祥军，徐继光，段启虎，等. 吲哚类化合物的抗肿瘤作用［J］. 聊城大学学报：自然科学版，2010，23（2）：28-32.［3］ Zhou Yao，Zhao Hongye，Han Kailin，et al. 5-（2-carboxyethenyl）isatin derivative induces G2/M cell cycle arrest and apoptosis in human leukemia K562 cells ［J］. Biochemical & Biophysical Research Communications，2014，450（4）：1650-1655. ［4］ Han Kailin，Zhou Yao，Liu Fengxi，et al. Design，synthesis and in vitro cytotoxicity evaluation of 5-（2-carboxyethenyl）isatin derivatives as anticancer agents［J］. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters，2014，24（2）：591-594.［5］陈凛，李涛. 胃癌综合治疗现状与进展［J］. 世界华人消化杂志，2008，16（6）：571-574.［6］于玲媛，李洁. MTT法在抗肿瘤药物对细胞杀伤力测定中的应用［J］. 哈尔滨师范大学自然科学学报，2006，22（5）：93-95.［7］ Wang Haomeng，Zhang Li，Liu Jiang，et al. Synthesis and anti-cancer activity evaluation of novel prenylated and geranylated chalcone natural products and their analogs［J］. European Journal of Medicinal Chemistry，2015，92：439-448.［8］王珊，李宁，于力方，等. 流式细胞术检测细胞凋亡比较研究［J］. 标记免疫分析与临床，2005，12（3）：168-170.［9］李记太，代红光，蔺志平. 3-取代吲哚衍生物的合成［J］.化学进展，2007，19（5）：751-761.［10］段传凤，杨依军. 褪黑激素（N-乙酰基-5-甲氧基色胺）的合成［J］. 药学学报，1996，31（3）：182-185.［11］Houtgraaf J H，Versmissen J，Van d G W J. A concise review of DNA damage checkpoints and repair in mammalian cells ［J］. Cardiovascular Revascularization Medicine，2006，7（3）：165-172.［12］Kaczanowski S，Sajid M，Reece S E. Evolution of apoptosis-like programmed cell death in unicellular protozoan parasites ［J］. Parasites & Vectors，2011，4（4）：250-254.。

人胃癌MGC803细胞紫杉醇耐药细胞系初步建立的实验研究张萌;费洪新;丁晨羲;韩婷婷【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(8)15【摘要】目的:探讨胃癌MGC803对紫杉醇的耐药机制,初步建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系,研究耐药过程中的变化.方法:采用逐步递增紫杉醇浓度,间歇作用体外诱导法建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,做相关检测;MTT法测定药物敏感性;光学显微镜、电子显微镜、MTT法等方法观察其生物学指标的改变.结果:经过4个月建成人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,2、3、4个月的耐药指数分别为5.12、11.46、15.98,并且与其他多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性,MGC803/PA的细胞形态逐渐发生改变,生长曲线逐渐改变.结论:MGC803/PA细胞具有耐药表型,且耐药性能稳定,MGC803/PA 的增殖能力逐渐下降,MTT法及其电镜可以较早地提示MGC803/PA的耐药特征.%Objective: To explore the mechanism of resistance of gastric cancer to Paclitaxel, this study is designed to establish a Paclitaxel-induced human gastric cancer drug-resistant cell line and study its changes of resistance.Methods: A resistant gastric cancer cell line (MGC803/PA) each month maked the correlation detection; drug sensitivity was detected by MTT assay; the changes of its biological characteristics were determined by using light microscopy, electron microscopy, cell counting by MTT assay.Results: MGC803/PA cell line was developed after 4 months with stable resistance to Paclitaxel and each month (2、3、4 month) theresistance index was 5.12, 11.46, 15.98; MGC803/PA cell exhibited cross-resistance to other chemotherapeutic agents.The morphology ofMGC803/PA gradually changed.Conclusion: MGC803/PA cells line shows the typical and stable resistant phenotype, multiplication of MGC803/PA cell line gradually decreased, MTT assay and electron microscopy early prompts resistance of MGC803/PA cell line.【总页数】3页(P22-24)【作者】张萌;费洪新;丁晨羲;韩婷婷【作者单位】齐齐哈尔医学院组织学与胚胎学教研室,黑龙江齐齐哈尔,161000;齐齐哈尔医学院组织学与胚胎学教研室,黑龙江齐齐哈尔,161000;齐齐哈尔医学院组织学与胚胎学教研室,黑龙江齐齐哈尔,161000;齐齐哈尔医学院组织学与胚胎学教研室,黑龙江齐齐哈尔,161000【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.三氧化二砷对人胃癌细胞系MGC803凋亡及耐药基因表达影响的实验研究 [J], 郑著家;李长福;博挽澜2.胃癌细胞系SGC7901耐阿霉素和顺铂细胞系的建立及其耐药可持续性的质控研究 [J], 杜静平;陈鹏;费洪新;杨明慧;陈正华3.紫杉醇耐药人肺腺癌细胞系的建立及生物学活性 [J], 戴明;罗荣城;钟华成;梁卫江;陈晓华;刘辉4.人成骨肉瘤MG63紫杉醇耐药细胞系建立及生物学特性研究 [J], 吴文欣;李维5.AS2O3及联合紫杉醇对胃癌MGC803细胞的生长和耐药性的影响 [J], 蔡朋朋;王东红;李雪松;郭佳佳;李晶;侯魁元;周丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

紫杉醇纳米微粒对人胃癌细胞MGC803增殖和凋亡影响的研究石艳会;费洪新;卢长柱;孙丽慧;郭志鸿【期刊名称】《中国现代医生》【年(卷),期】2008(46)23【摘要】目的观察不同浓度(紫杉醇)PA纳米微粒在不同时间段对人胃癌MGC803细胞生长和凋亡的影响.方法应用MTT法测定不同浓度的PA纳米微粒、PA和5-FU对MGC803细胞分别在0.6、12、24、48、60、72h的细胞生长抑制率.流式细胞仪分析MGC803细胞周期的改变,细胞免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达,检测端粒酶活性.结果 MTT法显示不同浓度的PA纳米微粒可抑制MGC803细胞增殖(16μg/mL作用72h时的抑制率达69%),并且与浓度和时间均呈正相关,流式细胞仪细胞周期分析提示PA纳米微粒可将MGC803细胞阻滞于G2M期,16μg/mL作用48h明显,细胞免疫组化法显示凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下调,端粒酶活性水平下降.结论 PA纳米微粒可诱导人胃癌细胞MGC803发生凋亡且具有控释效应,可延长药物对胃癌细胞的有效作用时间,载药纳米微球没有改变PA成分的生物学活性.【总页数】3页(P22-24)【作者】石艳会;费洪新;卢长柱;孙丽慧;郭志鸿【作者单位】齐齐哈尔市第一医院,黑龙江齐齐哈尔,161005;齐齐哈尔医学院,黑龙江齐齐哈尔,161042;齐齐哈尔医学院,黑龙江齐齐哈尔,161042;齐齐哈尔医学院,黑龙江齐齐哈尔,161042;中国科学院寒区旱区环境与工程研究所,兰州,730070【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.紫杉醇体外诱导人胃癌细胞凋亡对端粒酶活性影响的研究 [J], 秦云才;亓玉琴;等2.紫杉醇对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响 [J], 张炜;崔洪尊;嵇振岭3.白藜芦醇纳米微粒对体外人胃肿瘤MGC803细胞增殖和凋亡的影响 [J], 李永涛;费洪新;沈雷;姜杨;谢立平;黄小义4.毛茛有效部位D1对人胃癌细胞MGC803细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步研究 [J], 朱峰妍;虞迪;成旭东;曹志飞;王薇丹;鲍美美;蒋小岗;顾振纶5.蟾蜍毒素联合紫杉醇抑制人胃癌MGC803细胞增殖和诱导凋亡的作用 [J], 朱志图;王锴;李恩泽;刘阳阳;哈敏文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Survivin基因沉默抑制胃癌MGC-803细胞增殖并增强其对塞来昔布的敏感性方雷;吴海滨;陈晓岗【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2011(031)011【摘要】Objective To investigate the effect of small interfering RNA (siRNA)-mediated survivin knock-down on the proliferation of human gastric cancer MGC-803 cells and their sensitivity to celecoxib. Methods The siRNA against survivin was constructed and transfected into MGC-803 cells via LipofectamineTM 2000. The expression of survivin in the transfected cells was detected by RT-PCR and Western blot, and flow cytometry was used to detect the cell cycle changes. The sensitivity of the cells to celecoxib after transfection was examined using MTT assay and clonogenic assay. Results The protein and mRNA levels of survivin in MGC-803 cells were decreased significantly after siRNA transfection, which also caused cell cycle arrest in G0/G1, phase. The sensitivity of MGC-803 cells to celecoxib was significantly increased after siRNA transfection. Conclusion siRNA-mediated survivin silencing causes growth suppression of MGC-803 cells and enhances their sensitivity to celecoxib in vitro.%目的研究Survivin 基因沉默对人胃癌MGC-803细胞增殖和对化疗药物塞来昔布敏感性的影响.方法设计合成Survivin的siRNA序列,LipofectamineTM2000转染入MGC-803细胞.采用RT-PCR和Western blotting检测Survivin在干扰后mRNA和蛋白的表达情况,利用流式细胞仪检测细胞周期.通过MTT法和细胞克隆形成试验法察Survivin基因沉默后MGC-803细胞对塞来昔布的敏感性.结果 Survivin基因沉默48 h后,MGC-803细胞的Survivin基因和蛋白表达明显降低(P＜0.05).细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少(P＜0.05).Survivin基因沉默组细胞对塞来昔布的敏感性显著性增强(P＜0.05).结论 Survivin特异性siRNA能显著沉默MGC-803细胞Survivin基因,抑制细胞增殖,并增强MGC-803细胞对塞来昔布的敏感性.【总页数】5页(P1944-1948)【作者】方雷;吴海滨;陈晓岗【作者单位】宁波市第一医院普通外科,浙江宁波315010;宁波大学医学院,浙江宁波315211;宁波市第一医院普通外科,浙江宁波315010【正文语种】中文【中图分类】R.735.2;R979.1【相关文献】1.三物白散含药血清对胃癌MGC-803细胞增殖、凋亡及survivin基因表达的影响 [J], 王燚霈;朱莹;邹君君;李擎虎2.Survivin基因沉默对膀胱癌T24细胞增殖及对塞来昔布敏感性的影响 [J], 滕立新3.siRNA介导的LPXN沉默可抑制SHI-1细胞增殖及增强SHI-1细胞药物的敏感性 [J], 朱国华;戴海萍;段元勋;余泽霖4.巴弗洛霉素A1抑制胃癌MGC-803细胞增殖及增强奥沙利铂的敏感性 [J], 李良庆;谢文焌;潘敦5.血管内皮生长因子激酶功能区受体基因沉默抑制肺癌A549细胞增殖并增强其对多西他赛的敏感性 [J], 张秀义因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。