南五味子中粗多糖提取与总糖含量测定(精)
- 格式:doc
- 大小:24.00 KB
- 文档页数:2
茯苓多糖的提取及含量测定目的:建立茯苓多糖的含量测定方法。
方法:用水提醇沉法提取茯苓多糖,酚-硫酸法紫外分光光度法测定茯苓多糖的含量。
一、仪器与试药1、仪器:UV2754 紫外分光光度计2、试剂与样品样品:云苓、葡萄糖对照品苯酚、浓硫酸(1)5 %苯酚试剂的配制取苯酚加热蒸馏收集182 ℃的馏分,吸取此馏分10ml 加水至200ml 置棕色瓶内,放冰箱备用。
(2)对照品溶液的配制精密称取105 ℃干燥恒重的葡萄糖50mg 加水溶解并定容至1000ml 量瓶中,即得。
(3)供试品溶液的配制精密称取茯苓提取物50mg ,加水溶解并定容至500ml 量瓶中,过滤,滤液备用,即得。
二、提取准确称取茯苓500g ,切成碎片,加入4~6 倍量的水,回流提取 3 次,时间分别是3 ,2 和1h。
合并 3 次提取液滤过,除去不溶性杂质,得2000ml 滤液。
取600ml减压蒸馏浓缩成76ml ,在搅拌下加入乙醇,使含醇量达到80 % ,静置12h ,离心,收集沉淀,加蒸馏水60ml 溶解煮沸,趁热滤除不溶物,滤液在搅拌下再加入乙醇,使含醇量达到80 % ,放置,析出褐色沉淀后,低温干燥,即得茯苓多糖粗品。
3、吸收波长的选择精密吸取对照品溶液1. 0ml ,和供试品溶液1. 0ml ,分别置于20ml 的试管中,各精密加入5 %的苯酚液1. 0ml ,然后缓慢精密加入 5. 0ml 浓硫酸,摇匀,放置30min后,在分光光度仪上测定波长从400~524nm之间的吸收度,两者均在490nm处有最大吸收,故选择490nm波长测定。
4、重现性实验分别吸取对照品溶液0. 5ml 5 份置试管中,同前操作,吸光度为:0. 614 ,0. 612 ,0. 614 ,0. 613 和0. 615 ,结果RSD = 0. 199 %( n = 5) 。
5 、样品含量测得吸取供试品溶液 1. 0ml 3 份,分别置于20ml 试管中,加入5 %苯酚溶液2. 0ml ,混合后加入浓硫酸6. 0ml ,放置30min ,在490nm处分别测得其吸收度 A 值:A1 =0. 871 ,A2 = 0. 872 ,A3 = 0. 876 ,根据回归方程求出百分含量为74. 16 % , 74.27 %和74. 62 % , 平均含量74. 35 %。
中华芦荟多糖提取和粗多糖中总糖的含量测定
毕肖林;郭胜伟;狄留庆
【期刊名称】《南京中医药大学学报》
【年(卷),期】2005(21)4
【摘要】贝克曼高速冷却离心机,752型可见分光光度计,旋转蒸发仪和榨汁机。
【总页数】1页(P269-269)
【作者】毕肖林;郭胜伟;狄留庆
【作者单位】南京中医药大学新药及海洋药物研究中心,江苏,南京,210029;南京中
医药大学研究生部,江苏,南京,210029;南京中医药大学新药及海洋药物研究中心,江苏,南京,210029
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.地黄炮制前后粗多糖的提取和总糖含量测定 [J], 刘晓茵;纪耀华;章春宇;田子强
2.佛手粗多糖的提取及总糖的含量测定 [J], 张颜彤;纪耀华;邢文善
3.南五味子中粗多糖提取与总糖含量测定 [J], 纪耀华;孙莹;张晓滨;韩璟辰;卢志平
4.仙人掌茎粗多糖提取与总糖含量测定 [J], 靳丹虹;纪耀华;崔玉辉;李淑惠
5.白鲜皮粗多糖提取与总糖含量测定 [J], 李淑惠;纪耀华;崔玉辉;靳丹虹
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
粗多糖的检验方法(卫生部内统法)1.方法原理食品中高分子物质在80%乙醇溶液中沉淀,与水溶液中单糖和低聚糖分离,用碱性二价铜试剂选择性的从其它高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的多糖,用苯酚-硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量,其显色强度与水溶性粗多糖中葡聚糖的含量成正比,以此计算食品中水溶性粗多糖含量。
2.检测设备和材料本方法所用试剂除特殊注明外,均为分析纯;所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
2.1.乙醇溶液(80%):20ml水中加入无水乙醇80ml,混匀。
2.2.氢氧化钠溶液(100g/L):称取100g氢氧化钠,加水溶解并稀释至1L,加入固体硫酸钠至饱和,备用。
2.3.铜储备液:称取3.0gCuSO4 5H2O,30.0g柠檬酸钠,加水溶解稀释至1L,混匀,备用。
2.4.铜试剂溶液:取铜储备液50ml,加水50ml,混匀后加入固体无水硫酸钠12.5g并使其溶解。
临用新配。
2.5.洗涤剂:取水50ml,加入10ml铜试剂溶液:10ml氢氧化钠溶液,混匀。
临用新配。
2.6.硫酸溶液(10%):取100ml浓硫酸加入到800ml左右水中,混匀,冷却后稀释至1L。
2.7.苯酚溶液(50g/L):称取精制苯酚5.0g,加水溶解并稀释至100ml,混匀。
溶液置冰箱中可保存一月。
2.8.葡聚糖标准储备溶液:精密称取相对分子质量5X10²干燥至恒重的葡聚糖标准0.5000g,加水溶解,并定容至50ml,混匀,置冰箱中保存。
此溶液每1ml含10.0mg葡聚糖。
2.9.葡聚糖标准使用液:吸取葡聚糖标准储备液1.0ml,置于100ml容量瓶中,加水至刻度,混匀,置冰箱中保存。
此溶液每1ml含葡聚糖0.10mg。
2.10.分光光度计2.11.离心机(3000r/min)2.12.旋转混匀器3.样品收集和准备3.1.试样提取:称取混合均匀的固体试样2.0g,置于100ml容量瓶中,加水80ml左右,于沸水浴上加热2h,冷却至室温后补加水至刻度,混匀后,过滤,弃去初滤液,收集余下滤液供沉淀多糖。
粗多糖含量测量:1、称量0.2克的短序落葵薯的根粉末,加水4ml,100摄氏度水浴4小时。
2、4000转每分离心10min,将上清液全部转入另一个新管中(约3ml),加入7ml无水乙醇进行醇降,5000转每分离心10min,倒掉上清液,向每管中加入5ml无水乙醇,震荡起沉淀,然后5000转每分离心10min,倒掉上清,放入烘箱烘干。
3、向每个试管中加入6ml的蒸馏水,放入水浴锅中溶解,用sevag法除蛋白,加入氯仿和正丁醇混合液2ml(氯仿:正丁醇=4:1),5000转每分离心10min,通过几次预试实验后,确定所用多糖溶液的量为10ul,进行测量,具体方法如下:硫酸酚法:1)葡萄糖标准液的配制2)准确称取干燥恒重的葡萄糖100 mg,蒸馏水准确定容至100 mL的1 mg/L的葡萄糖液,摇匀后准确吸取10 mL该溶液,用蒸馏水稀释定容至100 mL,即得100 ug/mL的葡萄糖标准液。
3)2)苯酚液的配制4)准确移取苯酚6 mL,蒸馏水定容至100 mL,即得6%苯酚液,棕色瓶中避光保存。
表1 标准曲线的制作步骤取8支干净的具塞试管按表2方法操作,摇匀后放置5 min,置沸水浴中加热15min,取出迅速冷却至室温,以0号作为空白调零,在最大吸收波长处测定吸光度。
以葡萄糖浓度Y 为纵坐标(ug/mL),吸光度X为横坐标,从而来绘制标准曲线。
用exceL软件求得回归方程。
计算百分含量:百分含量=L*600*10^(-6)/0.2蒽酮法:1.葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml具寒试管,编号,按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。
在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂,再缓慢地加入5ml浓H2SO4,摇匀后,打开试管塞,置沸水浴中煮沸10分钟,取出冷却至室温,在620nm波长下比色,测各管溶液的光密度值(OD),以标准葡萄糖含量为纵坐标,光密度值为横坐标,作出标准曲线。
样品含量测定:百分含量= L*600*10^(-6)/0.2。
苯酚-硫酸显色光度法测定五味子多糖徐小娜;蒋军辉;黄海龙【摘要】测定了五味子多糖的含量,探讨了不同品种的五味子在总多糖含量上的差异.采用单因素实验对五味子多糖进行超声辅助提取,采用苯酚-硫酸显色光度法测定多糖的含量.结果显示:辽宁五味子多糖的含量为32.10 mg/g,湖北五味子多糖的含量为19.27 mg/g.其余5个不明产地的药材,其多糖的含量处于9.43~ 23.13mg/g之间.辽宁五味子中多糖的含量比湖北五味子的高,差异达到显著水平,其余不明产地的5个五味子样品,其多糖含量都比辽宁五味子的低,且仅有一个样品的多糖含量比湖北五味子的高.所得结果可为五味子多糖的深入研究提供参考.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2014(042)009【总页数】3页(P111-112,122)【关键词】五味子;多糖;苯酚-硫酸【作者】徐小娜;蒋军辉;黄海龙【作者单位】南华大学公共卫生学院,湖南衡阳421001;南华大学化学化工学院,湖南衡阳421001;南华大学公共卫生学院,湖南衡阳421001【正文语种】中文【中图分类】R282.5五味子(schisandra chinesis(Turcz).Bail1)为木兰科植物五味子的干燥成熟果实,味酸、性甘温,归肺、心、肾经,具有收敛固涩、生津止渴、宁心安神、兴奋呼吸、调节血压、增强视力及改善智力活动等多种功效。
临床上常用于久咳虚喘、遗尿尿频、久泻不止、自汗盗汗、津伤口渴、内热消渴、心悸失眠等症[1]。
产于我国东北地区如辽宁、吉林,习称北五味子;产于华中地区如湖北、江西,习称南五味子[2]。
挥发油、木脂素和多糖为其主要活性成分[3]。
有研究报道,五味子多糖具有调节免疫、抗肿瘤、抗氧化、调血脂、降血糖、抗衰老等多种药理作用[4-6]。
本实验利用超声波辅助提取技术,提取不同来源的五味子总多糖,采用苯酚-硫酸显色光度法测定,为研究五味子多糖的深入研究提供实验依据。
粗多糖含量测定方法学研究资料一、仪器与试药 (1)二、方法的研究 (2)1.检测波长的测定 (2)2.样品及对照制备方法 (2)三、方法学验证 (3)1.线性 (3)2.精密度实验 (4)3.稳定性实验 (4)4.重复性试验 (5)5.中间精密度实验 (5)6.准确度试验 (6)芪参颗粒粗多糖含量测定方法起草说明标志性成分粗多糖含量测定的方法来源于《保健食品功效成分检测方法》白鸿主编(中国中医药出版社)的第二法,该方法的原理是:多糖经乙醇沉淀分离后,去除其他可溶性糖及杂质的干扰,糖与硫酸在沸水浴中加热脱水生成羟甲基呋喃甲醛(羟甲基呋喃糠醛),再与蒽酮缩合成蓝绿色化合物,其显色强度与溶液中糖的浓度成正比,在625nm波长下比色测定。
主要研究资料如下:一、仪器与试药1、仪器(1) 离心机(湘南湘仪实验室仪器开发有限公司,型号TD25-WS);(2) 离心管:50ml;(3) 水浴锅(上海精宏实验设备有限公司,型号 DK-S26);(4) 旋涡混合器(DioCote,SA8);(5) SHIMADZU UV-1800 紫外可见光分光光度计;(6) JB760-68 石英比色皿(宜兴市伟鑫仪器有限公司);(7) TU-1901 双光束紫外可见光分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);2、试药(1) 葡萄糖:广州化学试剂厂,分析纯,批号为-1;(2) 无水乙醇:西陇化学股份有限公司,分析纯,批号为160802 1;(3) 蒽酮:国药集团化学试剂有限公司,分析纯,批号为;(4) 硫酸:广州化学试剂厂,分析纯,批号为-1;(5) 葡萄糖标准液:标准称取干燥恒重的分析纯级葡萄糖,加水溶解,并定容至50ml,此溶液1ml含10mg葡萄糖,用前稀释100倍为使用液(ml)。
(6) %蒽酮硫酸溶液(W/V):准确称取蒽酮置于烧杯中,缓缓加入100ml 80%硫酸溶解,溶解后呈黄色透明溶液。
现用现配。
3、试样v1.0 可编辑可修改(1) 样品颗粒:XXXXX 有限公司提供。
附录C(规范性附录):多糖含量测定方法
C.1 粗多糖的提取
称取生命PACK产品中棕色胶囊内容物和白色胶囊内容物5g精密至0.0001g,置圆底烧瓶内,加入100毫升的水,回流提取4小时,乘热过滤,再重复上述实验1次,合并滤液,加热浓缩,用80%乙醇醇沉过夜,离心干燥,称重,即得粗多糖样品。
C.2 标准曲线的制备
称取105˚C干燥至恒重的无水葡萄糖60mg,精密至0.0001g,至100ml容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度(每1ml中含无水葡萄糖0.6mg)。
精密吸取该溶液0.1,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml,分别置50ml容量瓶中,加水至刻度,摇匀。
精密吸取上述各浓度的标准溶液2ml,于具塞的试管中,加入4%苯酚 1.0ml,混匀,迅速加入浓硫酸7.0ml,摇匀,于40˚C水浴中保温30分钟后,移至冰水浴中,放置30分钟,取出后于490nm处,测定吸光度A(以第一份为空白)。
以吸光度为纵坐标,标准品浓度(μg/ml)为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程。
C.3 样品多糖浓度的测定
取D.1中制得的样品5mg于5ml容量瓶中,加水并定容,取1ml样品加1ml水于具塞的试管中,以后操作同标准曲线方法,测得的吸收度,由回归曲线(A=0.0444+0.0121C)计算出相当于葡萄糖的浓度。
C.4 样品多糖浓度的计算
F×f×c
多糖含量(%)= ×100
G
F为稀释倍数f为换算因子(f=1)C为样品多糖相当于葡萄糖的含量(μg/ml)G为样品溶液对应的原料的质量。
主要参考标准及文献:
《中华人民共和国药典》2000版
丰朝霞等,分光光度法测定茯苓中多糖总糖含量。
2.粗多糖的测定2.1 原理:样品中多糖经沸草酸水溶液提取,乙醇沉淀分离后,去除其他可溶性糖及其杂质,在硫酸沸水浴中加热脱水生成羟甲基呋喃甲醛(羟甲基糖醛),再与蒽酮缩合生成蓝色化合物,以比色法求其含量。
2.2 试剂除特殊注明外,本方法所用试剂均为分析纯;所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
2.2.1无水葡萄糖2.2.2 乙醇2.2.3 蒽酮2.2.4 浓硫酸2.2.5 葡萄糖标准液:精密称取经98~100℃干燥至恒重的无水葡萄糖1.0000g,加水溶解后定容至1000ml,此溶液葡萄糖含量为1mg/ml。
用前稀释10倍(0.1mg/ml),现用现配。
2.2.6 0.2%硫酸蒽酮溶液:取蒽酮0.2g,加浓硫酸100ml使溶解即得,贮于棕色瓶中。
临用新配。
2.3 仪器2.3.1 分光光度计2.3.2 离心机:4000r/min.2.3.3 水浴锅2.4 标准曲线的绘制:精密量取葡萄糖标准液(0.1mg/ml)0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8、1.0ml于具塞比色管中,加水至1ml,加入蒽酮试液5.0ml,摇匀,置沸水浴中加热10min,取出,自来水冷却至室温,静置30min,在620nm 波长处测定吸光度值,绘制标准曲线。
2.5供试样品溶液制备:准确称取均匀研碎的样品粉末2.5g,置于100ml的离心瓶中,加15ml热水,在沸水浴中加热30min后过滤,定容。
取此溶液15ml,加75ml无水乙醇搅拌均匀。
在离心机中以4000r/min离心10min,并小心弃去上清液,再加15ml热水(温度>90℃)冲洗离心瓶中沉淀物,或用1.5ml热水冲洗离心管中沉淀物,重复一次后再以4000r/min离心10min,小心地用吸管将上层液体吸去。
用玻璃棒将沉淀物取出并转移至500ml酸水解瓶底部,取50ml热水(温度>90℃),其中部分用来冲洗离心瓶中剩余的沉淀物,将沉淀物一并转移至500ml酸水解瓶中,加入15ml浓盐酸于酸水解瓶中,开启冷凝水,在沸水浴中加热2h,然后转移至100ml容量瓶中,加水定容。
佛手粗多糖的提取及总糖的含量测定【摘要】本文采用水提醇沉法从佛手中提取粗多糖,硫酸-苯酚法测定佛手粗多糖中总糖的含量,结果表明佛手中粗多糖回收率为28.33%,总糖的含量为95.21%,平均回收率为100%,RSD=1.30。
【Abstract】The content of total polysaccharide in the coarse polysaccharide extraction from foshou was determined with phenol-sulfuric acid method.The results showed that the coarse polysaccharide extraction was 28.33%and the content of total polysaccharide was 95.21%.The average recovery was 100.11%.RSD=1.30.【Key words】Foshou;Polysaccharide;Phenol-sulfuric acid method;Content determination佛手为芸香科植物佛手的干燥果实,具有舒肝理气、和胃止痛的功效[1]。
其中含有多种化学成分,近年来的药理实验研究表明,佛手糖能提高机体免疫力[2],但佛手粗多糖中总多糖的含量尚未见报道,本文仅对水提醇沉法所得佛手粗多糖中总糖进行含量测定。
1 仪器与药品1.1 仪器TU1901双光束紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器责任有限公司)。
1.2 材料佛手购自长春市药材公司。
1.3 试剂葡萄糖标准品(上海试剂三厂),其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1 佛手粗多糖的提取取佛手药材用90%乙醇浸泡后渗漉,然后将剩余药渣用水煎煮3次,过滤,合并3次滤液,浓缩至浸膏状,加乙醇放置过夜,抽滤,将沉淀分别用95%乙醇、丙酮和乙醚洗涤,即得佛手粗多糖,产出率约为28.33%。
注射用五味子多糖的含量测定郑小亮;蔡亚平;冯宇飞【摘要】目的:建立注射用五味子多糖有效成分含量测定的简便新方法.方法:采用改良的硫酸-苯酚显色法,于490nm处测定吸光度,计算五味子多糖的含量.结果:五味子多糖注射液中五味子多糖的质量分数达到9.85%,平均加样回收率达到100.32%.结论:改良硫酸-苯酚法实验操作简便、快速、准确,可用于五味子多糖注射液的含量测定.【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2010(038)002【总页数】3页(P99-101)【关键词】五味子多糖;含量测定;改良硫酸-苯酚法【作者】郑小亮;蔡亚平;冯宇飞【作者单位】黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江,大庆,163319【正文语种】中文【中图分类】R284.3五味子,又名五梅子、玄及、会及、山花椒等,为五味子科植物的果实,它具有兴奋呼吸、调节血压、升高血糖、增强视力及皮肤感受器的辨别力等作用,也能显著改善人体的智力活动,提高工作效率。
其中的主要成分只有突出的五味子多糖药用价值,如:增强人体免疫力、抗肿瘤、降血脂等方面,这些突出的药理作用已经引起医药界的普遍重视。
现代研究证明,注射用五味子多糖的疗效是其口服用药的100倍[1],但多糖的分子量较大,一般都在3000以上,常用的高效液相法很难对它进行含量测定,而传统的硫酸-苯酚法,误差大,重现性差,因而将五味子多糖制成注射用剂型,提高其生物利用度,并建立相应的质量标准,成为亟待解决的问题。
本实验采用改良的硫酸-苯酚显色法,对制备的注射用五味子干燥多糖进行含量测定,以期建立其有效成分的含量测定的方法。
1 仪器与药品五味子购于哈药集团世一堂中药饮片公司,经鉴定为北五味子;GOA型电热真空干燥箱(天津东郊机械加工厂);RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);WFJ 2100型可见分光光度计(UNIC仪器有限公司);TD5A台式多架离心机(长沙英泰仪器有限责任公司);芬兰可调试移液器(1000μL);QL-901旋涡混合器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司);其它试剂均为国产分析纯。
五味子五味子中其他成分的分析方法五味子为木兰科植物五味子的干燥成熟果实,习称“北五味子”。
北五味子主产地为辽宁、黑龙江、吉林等,本草中列为上品,认为有益气、明目、补不足、养五脏、壮筋骨的作用,且具有滋肾敛肺、生津收汗、涩精、安神之功能。
迄今为止,国内外学者在五味子的化学成分和药理作用、临床应用等方面均已取得一定研究成果,现结合国内外文献将五味子的化学成分研究进行汇总分析,以期对五味子的发药品及保健品有参考作用。
五味子中化学成分为挥发性成分、木脂素类、有机酸类、多糖类、苷类、其他成分等。
一.化学成分1.挥发性成分五味子中挥发性成分主要成分为萜类化合物,另外还含有少量的醇、酯、醛、酮以及苯和奈的衍生物等,主要为α-蒎烯(α-pinem )、茨烯(camphene )、β-蒎烯(β- pinem )、月桂烯(myrcene )、α-萜品烯(α-terpinene )、柠檬烯(limonene )等。
周英等报道,从五味子属植物中分离鉴定了200个成分,其中包括34 个三萜类成分。
秦波等报道,五味子挥发油含有单萜类、含氧单萜类、倍半萜类、含氧倍半萜类和少量醇、酸等含氧化合物。
芮和恺等从五味子挥发油中鉴定了29 中化合物,站挥发油总量的39.65%,除澄茄烯、依兰烯、防风根烯外,其余成分均属首次从五味子挥发油中发现,包括倍半蒈烯、α-花柏醇等。
刘风雷等用气相色谱法测定北五味子油中亚油酸的含量为12.1%,12.7%和13.0%。
戴好富等对辽宁北五味子的干燥果实经水蒸气蒸馏得到其挥发油并对其中的化学成分进行GC-MS 定性定量分析,共检出81个组分,鉴定了其中的5O个化合物。
李晓宁等。
2.木脂素类我国学者先后从北五味子中分离出五味子甲素(shiandrin A)、五味子乙素(shiandrin B)、五味子丙素(shiandrin C)、五味子醇甲(sehizandrol A)、五味子醇乙(sehizandrol B)、五味子酯甲(wuweizi ester A)、五味子酯乙(wuweizi ester B)等化合物。
五味子粗多糖提取工艺的研究
李巧云;居红芳;翟春
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2004(025)005
【摘要】本文对五味子中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响,结果显示温度和料液比是影响多糖提取率的主要因素,最佳工艺为料液比1:25,温度100℃,时间4h,在最佳提取工艺时,五味子的多糖提取率为5.38%.对常用的醇析方法进行改进,在传统Sevag法除蛋白的基础上采用Sevag法结合酶法除蛋白,大大缩短了除蛋白时间,又用改良的蒽酮-硫酸法测定多糖含量.
【总页数】5页(P105-109)
【作者】李巧云;居红芳;翟春
【作者单位】常熟高等专科学校化学系,江苏,常熟,215500;常熟高等专科学校化学系,江苏,常熟,215500;常熟高等专科学校化学系,江苏,常熟,215500
【正文语种】中文
【中图分类】O629.12
【相关文献】
1.云南野生粗网柄牛肝菌粗多糖提取工艺及抗氧化能力的研究 [J], 王浩华;谢美华;宋信信
2.北五味子木脂素和北五味子粗多糖对异丙肾上腺素诱导小鼠心室重构作用的研究
[J], 孙红霞;陈建光
3.五味子粗多糖提取工艺的研究 [J], 李巧云
4.北五味子多糖最佳提取工艺条件研究 [J], 张恒文
5.五味子多糖的提取工艺研究进展 [J], 柳玥雯
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
北五味子藤茎多糖的提取及含量测定【摘要】目的从不同品种的北五味子藤茎中提取多糖并测定多糖含量。
方法经脱脂、醇提后,用水提醇沉法提取多糖,用苯酚-硫酸法测定其含量。
结果五味子藤茎中多糖含量为2.46%~4.44%,平均回收率为100.26%,RSD=1.55% (n=6)。
结论不同品种的北五味子藤茎多糖的含量有一定的差异。
【关键词】北五味子; 多糖; 提取; 苯酚-硫酸法北五味子Schisandra chinensis ( Turcz.) Baill.为木兰科北五味子属植物,主产东北,为常用中药,《神农本草经》将其列为上品,具有补肾、益气、生津、固涩等功效。
北五味子的化学成分主要是五味子木脂素、挥发油、多糖等[1]。
北五味子粗多糖具有保肝作用,能对抗肝细胞脂质过氧化、促进肝再生和利胆作用[2];具有增强机体抗应激能力和免疫功能,还具有改善体内自由基代谢紊乱的作用;能明显提高小鼠耐氧及抗疲劳能力,增加正常小鼠免疫器官重量,并明显增强小鼠网状内皮系统的吞噬功能,有较好的免疫兴奋作用和抗衰老作用[3]。
通过我们的初步研究,五味子藤茎也含有大量的多糖类成分,因此对五味子藤茎中多糖含量进行了测定。
本文采用热水浸提法,用苯酚-硫酸法测定北五味子藤茎中多糖的含量。
1 材料与仪器1.1 药材来源北五味子藤茎供试品共9种,黄果一年生,461一年生,461两年生,462一年生,462两年生,抚松1号一年生,抚松1号两年生,抚松2号一年生,抚松2号两年生。
洗净,切断,55℃烘干,粉碎,粉末混合均匀后,装于自封袋中,置于干燥器中保存,备用。
样品于2009-11采自吉林左家中国农业科学院特产研究所药用植物资源圃,经中国农业科学院特产研究所沈育杰研究员鉴定为木兰科(Magnoliaceae)五味子属(Schisandra Michx)植物。
1.2 试剂无水乙醇、铝片、NaHCO3、丙酮、氯仿、正丁醇、浓硫酸、苯酚、葡萄糖、蒸馏水等均为国产分析纯。
南五味子中粗多糖提取与总糖含量测定
更新日期:2011-05-18 点击:纪耀华孙莹张晓滨韩璟辰卢志平
提要采用比色法测定南五味子粗多糖中总糖含量,南五味子粗多糖收率为9.7%,总糖含量为58.27%。
关键词南五味子;比色法;多糖;含量测定
The Collect Rate of Polysacharides and the Determinatio n of Polysacharides Content in South Wuweizi
Ji Yaohua, Sun Ying, Zhang Xiaobin, et al
Specialized Institute of Higher Learning in Medicine, Changchu n 130031
Abstract Polysacharide content in South Wuweizi is de termined by using the method of comparing colours. The collect rate of coarse Po lysacharides is 9.7%, polysacharides content is 58.27%.
Key words South Wuweizi; Method of comparing; P olysacharides; Content determination
南五味子为木兰科植物华南五味子的干燥果实。
五味子是在化学、药理和临床上研究较为深入的中药之一,尤其是近几年发现五味子多糖具有保肝[1]、抗衰老、耐缺氧[2]、增强机体免疫力[3]等活性,已经引起人们的广泛兴趣和注意。
为了充分利用五味子资源,本文对南五味子中多糖进行了提取和含量测定。
1 材料与仪器
1.1 材料:经鉴定为木兰科植物华南五味子Schisan dra sphenanthera Rehd et will的干燥成熟果实,购自长春市药材公司。
1.2 仪器:721型分光光度计,电光分析天平,其它试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 南五味子粗多糖的提取:取生药500 g,用90%乙醇渗漉,醇提后的五味子用蒸馏水提取3次,合并提取液,浓缩至100 ml左右,加95%乙醇至含醇量为 80%,放置过夜,抽滤,依次用乙醇、丙酮、乙醚洗,挥散溶剂至干,即得南五味子粗多糖无定型粉末,收率为9.7%。
2.2 标准曲线的制备
据报道五味子总多糖是由七种以上单糖组成的杂多糖的混合物[4]。
因此本实验是以与总多糖组分相似的干燥至恒重的标准单糖混合物为标准品,精密称定,用蒸馏水溶解定容,使其浓度为101.00 μg/ml的标准溶液。
精密吸取标准溶液10,20,40,60,80,100 μl,分别置于具塞试管中,各加蒸馏水使体积为2.0 ml,再各加苯酚试液1.0 ml,摇匀,迅速滴加浓硫酸5.0 ml,摇匀后放置5 min,置水浴上加热15 min,取出冷却至室温,另以蒸馏水2 ml,加苯酚和浓硫酸,同上操作为空白对照。
于490 nm处测定吸收度,绘制标准曲线,建立回归方程: A=0. 005584 W-0.005400,
γ=0.9989。
2.3 南五味子粗多糖中总糖的含量测定:精密称取干燥至恒重的南五味子粗多糖约 2.5 mg(3份),用蒸馏水溶解,并稀释至刻度,使其浓度约为100 μg/ml的样品液,按标准曲线项下方法测定吸收度,依回归方程求得南五味子粗多糖中总糖平均含量为58.27%, RSD 为1.57%,n=3。
2.4 回收率试验:精密吸取样品液0.5 ml(5份),再分别精密加入浓度不同的标准溶液0.5 ml,依样品测定方法测定吸收度,计算回收率平均值为101.51%, RSD=1.46%,n=5。
2.5 精密度试验:同批南五味子样品,重复测定5次,RSD=1.21%,n=5。
3 小结与讨论
3.1 实验结果表明,南五味子粗多糖的含量略高于北五味子(7% )[4],说明药材中多糖的含量与产地及生长环境有关。
同时,也说明南五味子在多糖的开发利用上颇具前景。
3.2 硫酸-苯酚法测定多糖,方法简便易行,重现性好。
作者简介:纪耀华:女,1961年生,讲师,学士
作者单位:纪耀华孙莹张晓滨:长春医学高等专科学校,长春130031;韩璟辰:长春市绿园区中医院130062
卢志平:东北师范大学,长春130024
参考文献
1 睢大,高普军,吕忠智,等.北五味子保肝作用的药理研究.吉林中医药,199 5(1)∶37
2 李巧如.五味子药理作用的研究进展.西北药学杂志,1995,10(1)∶46~50
3 李岩,曲绍春,张明淑.北五味子粗多糖对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下的保护作用 .白求恩医科大学学报,1995,21(6)∶583~585
4 徐世忱,李广全,孙莹.北五味子粗多糖的提取与成分分析.吉林医药工业,1992,(4) ∶15~18。