北京地区犬猫弓形虫病流行病学调查
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中国人兽共患病学报C h i n e s e J o u r n a l o f Z o o n o s e s㊀2020,36(1)D O I :10.3969/j.i s s n .1002-2694.2019.00.182 监测分析2017-2019北京地区犬钩端螺旋体病流行病学调查娄银莹,周梦洁,张颖欣,郑文潇,于咏兰北京市科技计划项目(N o .Z 171100001517008)通讯作者:于咏兰,E m a i l :g a o d i f e i h a o @c a u .e d u .c n O R C I D :0000G0003G4615G3478作者单位:中国农业大学动物医学院,北京㊀100193摘㊀要:目的㊀了解北京地区犬钩端螺旋体的感染情况.方法㊀采用快速实时荧光快速聚合酶链式反应(R a pi dr e a l Gt i m e f l u o r e s c e n c e q u a n t i t a t i v e p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n ,q P C R )对2017年1月至2019年2月从宠物医院㊁犬舍㊁流浪动物基地收集到的1600份血液和尿液样本进行分子学检测,以及风险因素分析.并对q P C R 阳性病例样本进行血清学和P C R 鉴定.结果㊀q P C R 检出阳性样本17份,检出率为1.01%(95%C I 0.6-1.7).其中尿液阳性检出率2.00%(16/800)显著高于血液检出率0.13%(1/800)(χ2=11.653,P <0.01).地区(χ2=17.828,P <0.05)㊁季节(χ2=10.916,P <0.05)㊁样本来源(χ2=9.432,P <0.01)是犬钩体感染的风险因素,但不同年龄(χ2=1.103,P =0.613)㊁性别(χ2=1.124,P =0.223)㊁品种(χ2=0 427,P =0 448)的犬感染钩体的差异无统计学意义.显微凝集试验显示12份q P C R 阳性病犬血清样本存在澳洲群和拜伦群抗体;菌株经P C R 鉴定均为问号钩端螺旋体.结论㊀北京部分地区存在犬钩体病的流行,应加强疾病监测和宠物犬定期疫苗接种以降低其向人类传播的风险.关键词:钩端螺旋体病;犬;流行病学中图分类号:R 377+ 5;S 851.3㊀㊀㊀文献标识码:A ㊀㊀㊀文章编号:1002-2694(2020)01-0056-04E p i d e m i o l o g i c a l i n v e s t i g a t i o no f c a n i n e l e p t o s p i r o s i s i nB e i j i n g,2017-2019L O U Y i n Gy i n g ,Z HO U M e n g Gj i e ,Z H A N G Y i n g Gx i n ,Z H E N G W e n Gx i a o ,Y U Y o n gGl a n (V e t e r i n a r y M e d i c i n eC o l l e g eC h i n aA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y ,B e i j i n g 100193,C h i n a )A b s t r a c t :T h e a i mo f t h i s s t u d y w a s t o i n v e s t i g a t e t h e p r e v a l e n c e o f c a n i n e l e p t o s p i r o s i s i nB e i j i n g .B l o o d s a m pl e s a n d u r i n e s a m p l e s (n =1600)w e r e c o l l e c t e d f r o m p e t h o s p i t a l s ,k e n n e l s a n d s h e l t e r s d u r i n g J a n u a r y 2017t oF e b r u a r y 2019.A l l s a m p l e s w e r e p e r f o r m e db yq u a n t i t a t i v e r e a l Gt i m e p o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n (q P C R )a s s a y s .T h e na n t i b o d y de t e c t i o na n dc o n v e n t i o n a l P C Ra s s a y sw e r e c o n d u c t e df o r q P C R Gp o s i t i v e s a m pl e s .T h e o v e r a l l p o s i t i v e r a t eo f q P C R w a s1.01%(17/1600).W h i l e t h e p o s i t i v e r a t e o f u r i n e s a m p l e s (2.00%)w a s s i g n i f i c a n t h i g h e r t h a n t h a t o f b l o o d s a m p l e s (0.13%).T h e c h i Gs qu a r e t e s t s h o w e d r e g i o n (χ2=17.828,P <0.05)s e a s o n (χ2=10.916,P <0.05)a n d s o u r c e (χ2=9.432,P <0.01)w e r em a j o r r i s k f a c t o r s a s s o c i Ga t e dw i t h l e p t o s p i r o s i s .H o w e v e r ,n os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e sw e r e f o u n da m o n g a g e (χ2=1.103,P =0.613),ge n d e r (χ2=1 124,P =0.223)a n db r e e d (χ2=0.427,P =0.448)i n i n f e c t e dd o g s .M i c r o s c o p i c a g g l u t i n a t i o n t e s t (MA T )r e s u l t s s h o w e d 12s e r u ms a m p l e sw e r e p o s i t i v e f o r t h e a n t i b o d i e s o fA u s t r a l i a s e r o g r o u p a n dB a l l u ms e r o g r o u p .T h e i s o l a t e sw e r e i d e n t i f i e d a s L e p t o s p i r a i n t e r r o ga n sb y P C R .T h i s s t u d y i n d ic a t e s t h e c a n i n e l e p t o s p i r o s i s p r e v a l e n c e i n p a r t o f B e i j i n g .D i s e a s e s u r v e i l l a n c e a n dv a c c i n a t i o na t a r e g u l a r i n t e r v a l s h o u l db e r e c o mm e nde df o r d og o w n e r s t o r e d u c e th e ri s ko f i n f e c t i o n a n d t r a n s m i s s i o n t o h u m a n .K e yw o r d s :l e p t o s p i r o s i s ;d o g ;e p i d e m i o l o g y S u p p o r t e db y t h eB e i j i n g S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y P r o g r a m (N o .Z 171100001517008)C o r r e s p o n d i n g a u t h o r :Y uY o n g Gl a n ,E m a i l :ga o d i f e i h a o @c a u .e d u .c n ㊀㊀钩端螺旋体病(l e p t o s pi r o s i s ,简称钩体病)是可感染人㊁犬及其他多种动物呈全球性分布的人兽共患病.其病原为致病性钩端螺旋体(简称钩体).自1886年被报道以来,钩体就一直活跃于除南极洲以外的区域[1].目前我国已发现并分离了75种血清型,18种血清群钩体,主要属于问号钩端螺旋体属(L e p t o s p i r ai n t e r r o ga n s )和博氏钩端螺旋体属(L .b o r g pe t e r s e n i i )[2].由于地理条件㊁流行血清型65的多样性,以及宿主动物地域性分布,中国不同地区人钩体病流行具有明显的特征[3].人或动物可通过接触污染的水源㊁土壤而感染.有的感染者无症状,其他或因急性肾功能衰竭㊁肝损伤或肺出血综合征等症状而危及生命[4].犬作为钩体的重要储存宿主,可从尿液中排泄病原.当人与犬亲密接触时,增加了人暴露钩体病的风险.北京地区养犬数量巨大,但却缺乏犬钩端螺旋体流行情况的相关数据调查.因此掌握北京地区的犬钩体病流行特征对预防人钩体病具有公共卫生学意义.1㊀材料与方法1.1㊀试剂㊀钩端螺旋体快速实时荧光聚合酶链式反应检测试剂盒购自北京世纪元亨有限公司.1.2㊀样品来源㊀2017年1月至2019年2月于中农大动物医院㊁流浪动物基地㊁犬舍随机采集北京各区犬血液㊁尿液样本各800份,样本均来源于不同的动物.其中医院样本916份,流浪动物样本392,犬舍样本292份.采集0.5m L全血样品放入E D T A抗凝管中,保存于4ħ冰箱;采集5m L尿液样品装入洁净离心管,保存于-20ħ于冰箱备用.1.3㊀检测方法1.3.1㊀D N A提取㊀本实验采用钩端螺旋体快速实时荧光P C R试剂盒进行D N A提取,具体步骤如下:若为尿液样本,将尿液样本置于2m L离心管中,13000r/m i n离心10m i n,弃去上清,留沉渣200μL于离心管中;直接吸取全血样本200μL于离心管中备用;吸取R D消化液于离心管中,再加入20μLR D蛋白酶K,混匀,56ħ水浴3次,每次3m i n;取出冷却后,加入300μL的R D结合液,颠倒混匀,将离心管液体吸入吸附柱中,10000r/m i n离心1m i n;弃去收集管中液体,吸取500μL的R D洗涤液,10000r/m i n离心1m i n;重复上述步骤1次;弃去收集管中液体,吸附柱放回空收集管中,13000r/m i n离心2m i n,除去洗涤液;将吸附柱移入新的离心管中,于吸附柱中央加入30μL洗脱液,室温放置2m i n,10000r/m i n离心1m i n,并重复步骤1次;D N A于-20ħ保存.1.3.2㊀样本检测㊀采用北京世纪元亨公司快速实时荧光P C R仪进行钩端螺旋体的检测,其具体操作如下:取反应管放置室温融化,吸取模板2μL加入反应管中,专用离心机离心1m i n后,放入仪器中开始程序L E P(钩端螺旋体)的扩增检测.结果判定:若C t值ɤ36并出现特征性扩增曲线,即为阳性;C t 值>36时,并出现特定的扩增曲线,需重新取样D N A进行扩增,如仍出现特定的扩增曲线,则可判定为阳性;其它情况均判定为阴性.1.3.3㊀P C R鉴定㊀对q P C R检测为阳性的样本,采用文献[5]报道的致病性钩体特异性扩增引物G1/ G2和文献[6]报道的s e c Y基因引物进行钩体菌属的P C R鉴定.1.3.4㊀血清学检测㊀将q P C R阳性病犬的血清样本送吉林大学动物医学院人兽共患病重点实验室进行显微凝集试验,对其进行血清群分型鉴定[7].1.4㊀数据分析㊀采用χ2检验对流行病学风险因素如:区域分布㊁季节㊁个体差异等因素进行分析.检验水准α=0.05.2㊀结㊀果2.1㊀犬钩端螺旋体感染情况㊀试验共采集样本1600份(血液㊁尿液各800份).采用q P C R方法检测犬致病性钩端螺旋体病原,结果共检测出17份(1.06%)阳性(见表1).其中尿液阳性样本16份(2.00%),血液阳性样本1份(0.13%).尿液和血液样本检出率差别有统计学意义(χ2=11.653,P<0.01),尿液样本检出率远远高于血液样本.表1㊀犬钩端螺旋体q P C R检测结果T a b.1㊀q P C Rr e s u l t s o f c a n i n e l e p t o s p i r a分类样本数/份阳性样本数/份阳性率(%)95%C I(%)尿液800162.001.1-3.2血液80010.130-0.7总计1600171.060.6-1.72.2㊀P C R与血清学检测结果㊀P C R鉴定结果显示,12份检测样本在285b p或549b p处出现特异性扩增条带.扩增产物测序后经G e n B a n k序列比对鉴定为问号钩端螺旋体.此外12份送检血清样本经显微凝集实验检测抗体均为阳性(其中包含5份普通P C R扩增为阴性病例血清样本),主要凝集血清群为澳洲群(9/12)㊁拜伦群(11/12).综上,犬钩端螺旋体感染率为1.06%(17/1600).2.3㊀流行病学风险因素分析2.3.1㊀地区分布㊀如表2所示为犬钩端螺旋体感染样本的地区分布情况,样本遍布北京各个城区,但延庆和怀柔等地由于位置太偏,采集样本较少.各地区犬钩端螺旋体感染差异具有统计学意义(χ2=17.828,P<0.05).751期娄银莹,等:2017-2019北京地区犬钩端螺旋体病流行病学调查表2㊀犬钩端螺旋体感染与地区分布T a b.2㊀R e g i o n a l d i s t r i b u t i o no f c a n i n e l e p t o s p i r a i n f e c t i o n风险因素感染/感染率(n=17)(%)未感染(n=1583)χ2P地区17.8280.048①㊀东城0(0)81㊀西城0(0)100㊀石景山0(0)87㊀大兴0(0)120㊀昌平0(0)140㊀延庆0(0)6㊀顺义1(0.71)140㊀海淀5(2.75)178㊀丰台5(4.03)119㊀门头沟1(1.35)73㊀怀柔0(0)47㊀平谷0(0)74㊀密云0(0)55㊀朝阳4(2.84)137㊀通州1(1.19)83㊀房山0(0)82㊀㊀注:①表示差异有统计学意义(P<0.05).2.3.2㊀季节分布㊀样本季节分布与感染情况如表3所示.不同季节钩体感染阳性率差异性较大,秋季钩体感染率(2.39%)显著高于其他3个季节,季节性差异有统计学意义(χ2=10.916,P<0.05).表3㊀犬钩端螺旋体感染与季节分布T a b.3㊀S e a s o n a l d i s t r i b u t i o no f c a n i n e l e p t o s p i r a i n f e c t i o n风险因素感染/感染率(n=17)(%)未感染(n=1583)χ2P季节10.9160.022①春季(3-5月)2(0.59)339夏季(6-8月)2(0.41)489秋季(9-11月)11(2.39)450冬季(12-2月)2(0.65)305㊀㊀注:①表示差异有统计学意义(P<0.05).2.3.3㊀个体因素㊀样本个体因素(年龄㊁性别㊁品种以及来源)分布见表4.在年龄方面,以1~6y年龄段发病率最高,但与其他2个分组年龄段差异无统计学意义(χ2=1.103,P>0.05).同样在性别方面,雄性犬较雌性犬高发,然而统计学显示性别间感染率差异无统计学意义(χ2=1.424,P>0.05).在来源方面,由于家养犬尿液样本收集较流浪犬和犬舍犬更容易,所以阳性检出率较高.患犬来源差异无统计学意义(χ2=9.432,P<0.01).由于犬品种繁多,不利于统计分析,特简化品种分类,将其分为杂种犬和纯种犬.不同品种间感染率差异无统计学意义(χ2=0.427,P>0.05).表4㊀犬钩端螺旋体感染与个体因素T a b.4㊀I n d i v i d u a l f a c t o r s o f c a n i n e l e p t o s p i r a i n f e c t i o n 风险因素感染/感染率(n=17)(%)未感染(n=1583)χ2P 年龄1.1030.613㊀<1y2(0.99)200㊀1~6y11(1.32)825㊀>6y4(0.71)558性别1.4240.223㊀雌性3(0.55)545㊀雄性14(1.33)1038来源9.4320.0058①㊀家养16(1.75)900㊀流浪1(0.26)391㊀犬舍0(0)292品种0.4270.448㊀杂种犬14(0.74)539㊀纯种犬13(1.23)1044㊀㊀注:①表示差异有统计学意义(P<0.01).2.4㊀阳性病例信息㊀17例病犬均表现为厌食㊁呕吐㊁腹痛㊁多饮多尿以及黄疸等一种或多种症状,且均未进行钩体疫苗免疫.病史信息统计显示患犬均曾接触死水或在野外游泳.电话回访发现,7例患犬表现出严重的肝肾损伤而死亡或被安乐死;其宠物主人目前尚未有感染钩体的症状.3㊀讨㊀论钩端螺旋体病是重要的自然疫源性疾病.我国受钩体病危害较大,虽然近年来(2001-2013年)钩体病流行率逐渐降低,但是病死率依然维持在1 10%~3.90%[8].北京地区早在上世纪90年代就有关于人钩体病的报道[9].犬作为我国华北地区钩体感染的主要宿主之一[2],特别是在养犬数量最大的北京,对于人钩体病感染具有潜在威胁.3.1㊀感染情况㊀世界各地均有犬钩体病的报道:美85中国人兽共患病学报2020,36(1)国犬钩体病血清学阳性率为12%[10],欧洲各地区P C R阳性率1.50%~8.00%不等[11].我国关于犬钩体病的流行病学却报道不多.2010年齐海霞等[12]运用P C R方法获得北京地区犬钩体病阳性率为28.60%(尿液样本),远远高于其他国家.本次试验得出北京地区犬钩端螺旋体分子流行率达1 06%,远低于前人试验结果,与试验选择的样本和区域范围有关.同时临床抗生素广泛使用,极大的降低了钩体抗原的检出率[13],北京地区犬钩体病阳性率可能被低估.此外,试验发现尿液样本检出率高于血液样本(χ2=11.653,P<0.01).急性期钩体病菌血症持续时间短[14].所以在临床对疑似钩体病犬,我们要同时进行尿液P C R的检测.3.2㊀风险因素分析㊀任何年龄㊁品种和性别的犬都有感染钩体病的风险[15].本次试验显示这三者均不是北京地区犬钩体病感染的风险因素.然而其他研究显示幼年犬的钩体感染率显著高于老年犬[11].雄性犬感染率虽远高于雌性犬,但差异无统计学意义.这也与K o i z u m i等[16]人的研究结果类似.由于流浪犬和犬舍犬尿液样本获取困难,导致家养犬钩体阳性率显著高于其他来源的犬.虽然如此,这些家养犬的感染很大可能与野外游玩或接触水源密切相关.季节变化与地区分布是犬钩体病感染的风险因素.钩体病是季节性疾病,我国人钩体病以夏季(7㊁8月)㊁初秋(9月)为流行高峰[3].试验结果显示秋季钩体感染率显著高于其他季节,这也与美国[17]和瑞士[11]等国家犬钩体病流行情况一致.北京地处温带地区,钩体发病率较低.但犬钩体病在城区分布上呈现出差异性,高度提示在部分区域需要重视犬钩体病.北京地区存在犬钩体病的流行,但容易被大众忽视.因此我们应当加强对宠物主人关于钩端螺旋体病的宣传教育,加强对宠物犬钩体疫苗的定期预防免疫,以降低犬钩体病带来的环境卫生风险.利益冲突:无引用本文格式:娄银莹,周梦洁,张颖欣,等.2017-2019北京地区犬钩端螺旋体病流行病学调查[J].中国人兽共患病学报,2020,36(1):56G59.D O I:10.3969/j.i s s n.1002G2694.2019.00.182参考文献:[1]A d l e rB.L e p t o s p i r aa n dl e p t o s p i r o s i s[M].M i s s o u r i:E l s e v i e r I n c,2015.D O I:10.1007/978G3G662G45059G8[2]Z h a n g C,W a n g H,Y a nJ.L e p t o s p i r o s i s p r e v a l e n c e i nC h i n e s ep o p u l a t i o n s i nt h e l a s t t w od e c a d e s[J].M i c r o b e s&I n f e c t i o n,2012,14(4):317G323.D O I:10.1016/j.m i c i n f.2011.11.007[3]严杰,戴保民,于恩庶.钩端螺旋体病学[M].北京:人民卫生出版社,2006.[4]S y k e sJ E,H a r t m a n n K,L u n n K F,e t a l.2010A C V I M s m a l l a n i m a l c o n s 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犬、猫钩端螺旋体病的流行病学调查齐海霞;张海云;邓小雨;杨秀环;白如念;蒋秀高;聂一新;李秀文【摘要】In order to investigate the infective situation of leptospirosis on dogs and cats, 20 pet disease monitoring sites were established in the Beijing area in 2011. 396 serum and urine samples of dogs and cats were collected at random for the investigation. Survey results showed that 106 antibody-positive samples in 200 serums by the microscope agglutination test, with positive rate of 53%. Among these positive samples, there were 20 derived from cats with positive rate of 27. 8% , and others were dog serums with positive rate of 67. 2%. A total of 196 urine samples were tested by RT-PCR, there were 54 positive ones founded with the positive rate of 27. 6% , of which 21 copies of the cat urine with 4 positive samples, the positive rate was 19%. Dog positive urine sample were 50 copies in 175, the positive rate of 28. 6%.%为了解钩端螺旋体病在犬、猫体内的感染情况,2011年,在北京地区建立了20个宠物疫病监测点,随机收集了犬、猫血清及尿液样本396份,进行犬、猫钩端螺旋体病的流行病学调查.调查结果为显微镜凝集试验检测犬、猫血清共计200份,抗体阳性的样品共有106份,阳性率为53%,其中猫血清为阳性的样品有20份,阳性率为27.8%;犬血清为阳性的样品有86份,阳性率为67.2%. RT-PCR检测犬、猫尿液共计196份,阳性的样品共有54份,阳性率为27.6%,其中猫尿样21份,阳性样品4份,阳性率为19%;犬尿样175份,阳性样品50份,阳性率为28.6%.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2012(039)011【总页数】4页(P203-206)【关键词】钩端螺旋体病;犬;猫;人兽共患病;调查【作者】齐海霞;张海云;邓小雨;杨秀环;白如念;蒋秀高;聂一新;李秀文【作者单位】北京市朝阳区动物疫病预防控制中心,北京100018;北京市朝阳区动物疫病预防控制中心,北京100018;北京市朝阳区动物疫病预防控制中心,北京100018;北京市畜牧兽医总站,北京 100107;北京市畜牧兽医总站,北京 100107;中国疾病预防控制中心,北京 102206;中国疾病预防控制中心,北京 102206;中国疾病预防控制中心,北京 102206【正文语种】中文【中图分类】S851.3钩端螺旋体病是由致病性钩端螺旋体(Leptospira)感染引起的一种人兽共患病,该病多发生于热带及亚热带地区。
2016年北京地区犬猫弓形虫抗体检测与分析
张启龙;傅彩霞;张玮;刘海莹;周德刚;王素萍;余春明
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2017(038)010
【摘要】为贯彻落实“北京市中长期动物疫病防治规划(2013-2020)”,依据“2016年北京市动物疫病监测与流行病学调查计划”,采集北京16个区犬血清892份,猫血清835份,进行弓形虫抗体血清学调查.经IHA检测发现,犬弓形虫抗体阳性率2.24%,猫弓形虫抗体阳性率1.92%,不同区县以及不同场户类型的犬猫弓形虫感染率存在差异.
【总页数】3页(P132-134)
【作者】张启龙;傅彩霞;张玮;刘海莹;周德刚;王素萍;余春明
【作者单位】北京市动物疫病预防控制中心,北京102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京102629【正文语种】中文
【中图分类】S858.293;S858.292
【相关文献】
1.北京地区犬猫弓形虫和新孢子虫感染的检测与分析 [J], 于珊珊;钱伟锋;许建海;刘群
2.北京地区犬猫弓形虫病流行病学调查 [J], 崔丽丽;于咏兰;刘帅;王贝贝;张兆霞;汪明
3.北京地区犬猫弓形虫病血清学调查 [J], 于咏兰;付丽娟;汪明
4.犬猫弓形虫抗体检测及临床治疗效果 [J], 赵国英
5.不孕妇女抗弓形虫抗体抗精子抗体及IFN-的检测与分析 [J], 王慧玲;周永华;王瑞兵;蒋创
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北京地区犬猫弓形虫病流行病学调查崔丽丽,于咏兰,刘 帅,王贝贝,张兆霞,汪 明(中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人畜共患病重点实验室农业部国家动物原虫实验室,北京海淀100193)摘要:为初步调查北京地区犬猫弓形虫感染的流病学特征,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测2010年5月至2011年4月采集的家养犬猫、流浪猫血清样本。
其中,家养犬血清样本1 876份,家养猫血清样本561份,检测发现,家养犬动物弓形虫IgG抗体阳性率24.9%;家养猫弓形虫IgG阳性率21.2%;同时检测流浪猫样本201份,阳性率30.3%。
家养犬弓形虫血清抗体阳性率不同季节间差异显著(P<0.05),夏季最高,为30.0%,家养猫弓形虫血清抗体阳性率不同季节间无显著差异(P>0.05)。
不同性别犬猫弓形虫血清抗体阳性率无显著差异(P>0.05)。
随着年龄增长,犬猫弓形虫抗体阳性率均有明显增长。
对25例弓形虫抗体阳性家养犬病例和37例弓形虫抗体阳性家养猫病例进行了回访调查,结果发现,该62例动物主人的弓形虫检测结果均为阴性。
关键词:犬;猫;弓形虫;酶联免疫检测中图分类号:852.72+3 文献标识码:A 文章编号:0529-6005(2012)03-0007-03Epidemiological investigations of Toxoplasmosisin dogs and cats in Beijing areaCUI Li-li,YU Yong-lan,LIU Shuai,WANG Bei-bei,ZHANG Zhao-xia,WANG Ming(Key Laboratory of Zoonosis of the Ministry of Agriculture,National Animal Protozoal Laboratory,College of Veterinary Medicine,China Agricultural University,Beijing 100193,China)Abstract:An epidemiological survey of Toxoplasmainfection in dogs and cats was carried out in Bei-jing.All serum samples were collected from 1876domestic dogs,561domestic cats,201street cats duringthe period from May 2010to April 2011.Serum IgG against Toxoplasma was detected by ELISA.The se-roprevalence of Toxoplasma were 24.9%in domestic dogs,21.2%in domestic cats and 30.3%in streetcats.In domestic dogs,the differences of seroprevalence among different seasons were statistically signifi-cant(P<0.05),the prevalence was the highest in summer,while,in domestic cats,the differences werenot significant(P>0.05).There were no significant differences in positive rates between sex(P>0.05)in both dogs and cats.The seropositivity increased with the age of dogs and cats apparently.We examinedToxoplasmain the owner of 25seropositive dogs and 37seropositive cats,all of them were negative ofToxoplasma.Key words:dogs;cats;Toxoplasma gondii;ELISACorresponding authors:WANG Ming;YU Yong-lan 龚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界范围分布的能够感染多种动物的寄生性原虫。
2021年第03期试验研究2018年,本实验室开展疑似中毒死亡犬猫动物样本的生物检材取样工作,主要采集样品包括动物血液、胃内容物以及异常的内脏器官等。
截至2019年底,共计对13只疑似中毒死亡犬猫进行解剖检查、生物检材样品采集,经北京市公安局朝阳分局检验检测确诊8只动物为中毒死亡,主要的致毒药物为氟乙酰胺、氟乙酸、异烟肼。
根据以上结果,本实验室对中毒犬猫的流行病学情况进行调查。
通过对中毒动物死亡前的一系列情况调查,排查导致其中毒药物的种类,深入探讨动物中毒剖检中的主要表现,为临床兽医治疗提供有效的建议。
1犬猫尸体剖检本中心实验室具有犬猫尸体剖检的专用场所和设施,配备专业兽医师,并制定了动物解剖操作的基本规范以及生物安全处置的技术要求。
在剖检前,对动物基本信息、流行病学、临床症状、治疗经过等进行调查了解,并进行详细的记录和风险评估,对可能携带病原微生物疑似炭疽的尸体禁止剖检,怀疑有重大动物疫病的按《中华人民共和国动物防疫法》的要求上报疫情。
2犬猫的情况简介2.2.1剖检动物的营养状况良好无论是流浪动物还是家庭饲养的宠物,所有被剖检动物的整体营养状况的评估均为良好。
由此排除消耗性致病因素以及传染性疾病致死的可能,符合中毒死亡的流行病学特点。
2.2.2群发事件的中毒几率高通过统计2018年6月19朝阳区中毒犬猫尸体剖检的流行病学调查王雅琴1,康若青2★,李方舟1,许连站1,王丹怡1(1.北京市朝阳区动植物疫病预防控制中心,北京100018;2.北京市朝阳区农业农村综合服务中心,北京100018)关键词:动物尸检;氟乙酰胺;氟乙酸;异烟肼D O I:10.3969/J.I S S N.1671-6027.2021.03.010★通信作者表1剖检动物信息调查表192021年第03期日的3只宠物犬以及2019年9月26日的2只宠物犬的毒检结果,可推断局部地区的投毒事件确有发生。
2.2.3宠物犬更易发生中毒事件在剖检的13只动物中,包括8只犬和5只猫,最终确定中毒死亡的为7只宠物犬和1只宠物猫,虽然在数量上不具有统计学意义,但结合宠物犬需要外出牵遛的特点,笔者认为宠物犬发生中毒的可能性高于宠物猫,甚至高于流浪猫。
北京地区犬猫弓形虫病流行病学调查2012-05-19 09:15:33 来源:阳光畜牧网--中国兽医杂志浏览:1319次崔丽丽,于咏兰,刘帅,王贝贝,张兆霞,汪明(中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人畜共患病重点实验室农业部国家动物原虫实验室,北京海淀100193)摘要:为初步调查北京地区犬猫弓形虫感染的流病学特征,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测2010年5月至2011年4月采集的家养犬猫、流浪猫血清样本。
其中,家养犬血清样本1876份,家养猫血清样本561份,检测发现,家养犬动物弓形虫IgG抗体阳性率24.9%;家养猫弓形虫IgG阳性率21.2%;同时检测流浪猫样本201份,阳性率30.3%。
家养犬弓形虫血清抗体阳性率不同季节间差异显著(P<0.05),夏季最高,为30.0%,家养猫弓形虫血清抗体阳性率不同季节间无显著差异(P>0.05)。
不同性别犬猫弓形虫血清抗体阳性率无显著差异(P>0.05)。
随着年龄增长,犬猫弓形虫抗体阳性率均有明显增长。
对25例弓形虫抗体阳性家养犬病例和37例弓形虫抗体阳性家养猫病例进行了回访调查,结果发现,该62例动物主人的弓形虫检测结果均为阴性。
关键词:犬;猫;弓形虫;酶联免疫检测龚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种呈世界范围分布的能够感染多种动物的寄生性原虫。
目前研究表明,孕妇感染弓形虫后可导致早产、流产胎儿发育畸形。
此外,弓形虫感染与艾滋病(AIDS有密切的关系[1]。
在我国,1978年崔君兆首次在国内进行流行病学研究,采用统一的IHA方法检测全国81963人血清平均感染率为5.17%[2]。
2005年公布的全国人体重要寄生虫病现状调查报告显示,国人弓形虫病平均感染率为7.88%[3]。
赵树馨等1984~1986年期间检测了1297例早孕妇女血清抗弓形虫抗体,其感染率为12.5%[4]。
与人类关系密切的犬、猫弓形虫感染率也非常普遍。
据统计,1985~2006年期间,我国犬弓形虫感染率在0.66%~62.3%之间不等,猫弓形虫感染率在14.06%~78%之间[5]。
此外,有调查显示,对接触动物、生肉制品等暴露机会较多从业者,其弓形虫感染率亦较其他人员高得多[6]。
随着宠物品种和数量的急剧增加,人类与动物接触的日益频繁,通过动物将宠物源人畜共患病传播给人类的风险日益加大,给人类健康和正常生活带来了威胁[7]。
因此,无论是就动物本身的健康而言,还是考虑到公众健康,充分了解犬猫的弓形虫发病及感染情况都具有重要现实意义。
为此,笔者运用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对北京地区2541只家养犬猫及201只流浪猫的弓形虫感染情况进行了调查,并对部分阳性病例进行了回访调查。
1材料与方法1.1主要试剂动物弓形虫IgG抗体酶联免疫检测试剂盒,珠海海泰生物制药有限公司生产,生产批号:20100614;20100803;20110501。
1.2主要仪器及器材酶标仪iMark,购自BIO-RAD公司;Centrifuge5810R台式高速冷冻离心机,购自德国Eppendorf公司。
1.3样本采集及处理采集家养犬2100只、家养猫588只、流浪猫201份血样。
每只动物采取1.5mL~2mL静脉血,3000r/min离心5min,分离血清置-20℃保存备检。
1.4检测方法ELISA检测方法按照珠海海泰生物制药有限公司生产说明书进行操作。
应用SPSS11.5统计分析软件进行统计分析。
2结果2.1家养犬、猫弓形虫感染情况2010年5月至2011年4月份期间,共采集到2541份家养犬、猫血清样本(家养犬1876份,家养猫561份)。
采用ELISA检测方法对其进行了血清弓形虫IgG抗体的检测,共检测出犬猫弓形虫IgG抗体阳性样本615份(24.2%),其中犬阳性样本467份(24.9%),猫阳性样本119份(21.2%)。
用配对资料卡方检验分析显示,家养犬、猫检测结果差异不显著(P>0.05)(表1)。
表1北京市家养犬猫弓形虫IgG抗体检测结果动物种类样本数阳性样本数阳性率(%)家养犬187646724.9家养猫56111921.2未知1042927.92.1.1家养犬弓形虫感染情况调查2.1.1.1不同季节家养犬弓形虫血清抗体阳性率在1876份犬血清中,不同季节采集的犬血清弓形虫抗体阳性率变化较大(表2),其中夏季弓形虫阳性率最高为30.0%,与阳性率最低的春季20.4%差异显著(P<0.05)。
2.1.1.2不同性别家养犬弓形虫血清抗体阳性率对已知性别的1368只犬的检测结果进行统计分析(表3),发现雌性犬血清弓形虫抗体阳性率为25%,雄性犬血清弓形虫抗体阳性率为24.0%。
用配对资料卡方检验分析显示,二者差异不显著(P>0.05)。
表2家养犬血清弓形虫IgG抗体检测结果季节分布家养犬血清数阳性血清数阳性率(%)夏季79424030.0秋季69414420.7冬季2465522.4春季1372820.4总计187646724.9表3不同性别家养犬弓形虫血清抗体阳性率家养犬血清数阳性血清数阳性率(%)雌性60015025.0雄性76818424.0未知50813326.2总计187646724.92.1.1.3不同年龄段家养犬弓形虫血清抗体阳性率对已知年龄的1474只犬的检测结果进行统计分析(表4),我们的检测结果发现,随着犬年龄增长,弓形虫血清抗体阳性率呈逐渐上升趋势。
9月龄以内犬弓形虫血清抗体阳性率仅为15.1%,而大于6岁的犬弓形虫血清抗体阳性率达到了27.2%。
用配对资料卡方检验分析显示,两个年龄段之间,犬弓形虫血清抗体阳性率差异显著(P<0.05)。
表4各个年龄阶段家养犬弓形虫血清抗体阳检测结果家养犬年龄血清数阳性血清数阳性率(%)≤9月龄1261915.1>9月龄≤3岁3668723.8>3岁≤6岁2836924.4>6岁69919027.2未知40210225.4总计187646724.92.1.2家养猫弓形虫感染情况调查2.1.2.1不同季节家养猫弓形虫血清抗体阳性率对561只猫的血清弓形虫抗体检测结果,根据季节进行统计分析显示(表5),随着季节变化,猫弓形虫抗体阳性率也有不同,其中春季阳性率最高为25.8%,秋季阳性率最低为15.3%,用配对资料卡方检验分析,结果表明,不同季节家养猫血清弓形虫抗体阳性率差异显著(P<0.05)。
表5家养猫血清弓形虫IgG抗体检测结果季节分布猫血清数阳性血清数阳性率(%)夏季1693621.3秋季1502315.3冬季1142723.7春季1283325.8总计56111921.22.1.2.2不同性别家养猫弓形虫血清抗体阳性率对312份已知性别的家养猫血清抗体检测结果按性别分类统计(表6),结果显示,雄性家养猫弓形虫阳性率较雌性家养猫弓形虫阳性率高,但是用配对资料卡方检验分析显示,二者没有显著差异(P>0.05)。
表6不同性别家养猫弓形虫血清抗体阳性率猫血清数阳性血清数阳性率(%)雌性1242318.5雄性1884423.4未知2495220.9总计56111921.22.1.2.3不同年龄段家养猫弓形虫血清抗体阳性率对398份已知年龄的家养猫血清抗体检测结果,按年龄分类统计(表7)显示,随着年龄增长家养猫弓形虫血清抗体阳性率有明显升高。
其中大于6岁的家养猫弓形虫血清抗体阳性率显著高于3月龄~9月龄(P<0.05)和3岁~6岁之间的家养猫(P<0.05)。
表7各个年龄阶段家养猫弓形虫血清抗体阳检测结果家养猫年龄血清数阳性血清数阳性率(%)≤9月龄1715.9>9月龄≤3岁841315.5>3岁≤6岁951414.7>6岁2125726.9未知1533422.2总计56111921.22.2流浪猫弓形虫感染情况收集流浪猫血清201份,经检测阳性样本61份,弓形虫抗体阳性率为30.3%,明显高于家养猫的弓形虫抗体阳性率21.2%。
用配对资料卡方检验分析显示,二者检测结果差异显著(P<0.05)。
2.3家养犬猫弓形虫抗体阳性病例回访调查对25例弓形虫抗体阳性家养犬病例和37例弓形虫抗体阳性家养猫病例进行了回访调查,结果发现,该62个动物主人弓形虫检测结果均为阴性。
同时笔者发现,家养犬都有天天外出遛的习惯,而家养猫大都很少外出。
大多数动物主人对动物的饮食也都比较注意,考虑到动物的身体健康,坚持选择喂给狗粮、猫粮,也有少数的主人会喂给动物生鱼生肉。
其中此次调查回访的37例弓形虫抗体阳性家养猫中有4只是主人收养的流浪猫。
3讨论从1908年Nicolle及其同事发现弓形虫至今已有百年的历史,许多国家都有关于弓形虫的血清流行病学的调查报道。
不同国家和地区的弓形虫阳性率有很大差异,我国人口标准化感染率为6.02%,国际人口标准化感染率为5.52%[2]。
现已报道的各国人口弓形虫阳性率最低的为韩国4%,最高的为巴西92%[8]。
Dubey等人发现不同年龄、性别和品种的猫对弓形虫都易感[8]。
世界各地也有犬的相关报道,1998年Lin发现犬的弓形虫阳性率随着年龄增长而升高[9]。
目前研究表明,人类可以通过感染弓形虫的猫,食生肉或未完全煮熟的肉,或者通过胎盘由母体垂直传播而感染弓形虫,还可以通过接触被弓形虫阳性猫粪便污染的宠物狗而感染[8]。
因此,与人类关系密切的犬猫,在弓形虫的传播过程中起着非常重要的作用,充分了解犬猫的弓形虫发病及感染情况都具有重要的现实意义。
本次试验发现,弓形虫感染对于家养犬、家养猫、流浪猫都比较普遍。
但不同动物弓形虫血清抗体阳性率不同,流浪猫阳性率最高为30.3%,其次是家养犬24.9%,家养猫21.2%。
通过对62例弓形虫阳性病例的调查回访发现,弓形虫的感染可能与犬、猫的饮食有关,流浪猫接触感染源的机会较多,而作为宠物的家养犬猫,有些是长期生活在室内,饲喂商品犬、猫粮,不接触生肉,所以比例较低。
另外,家养犬一般都有外出遛的习惯,而家养猫很少外出,这就大大增加了家养犬感染弓形虫的机会。
本试验结果显示,北京家养犬、猫血清弓形虫阳性率略高于上海市家养犬、猫的阳性率[10],相对于2006年于咏兰[11]的检测结果也较高。
不同季节弓形虫阳性率也有差别,家养犬夏季阳性率最高30.0%,家养猫春季阳性率最高25.8%。
不同性别家养犬猫弓形虫血清阳性率没有显著差异,这与于咏兰[11]报道的结果一致。
Dubey[12]和Omata[13]等认为犬猫不仅可以通过后天感染弓形虫而产生相应抗体,幼龄的犬、猫也可以从母体获得较低滴度的母源抗体。
事实上,我们的检测结果也发现,9月龄以下家养犬、猫也存在一定的弓形虫感染。
同时,我们也发现随着年龄增长,家养犬、猫弓形虫阳性率均有明显增高。