脑脊液常规检查
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娄底市第三人民医院检验科
操作文件 文件编号:JZ-CZ-17
生效日期:2012年6月01日
责任部门:急诊化验室 第 1 页 共 5 页
编写:伍海波 制定日期:2011.01.01
审核:周可成
核准:伍海波 修订日期:2012.06.01
1.项目名称
脑脊液常规
(1)标本处理
1.标本送验必须及时,收到标本后应立即检验。久置可致细胞破坏,影响细胞计数及分类检查;葡萄糖分解使含量降低;病原菌破坏或溶解。
2.细胞计数管应避免标本凝固,遇高蛋白标本时,可用EDTA盐抗凝。
(2)一般性状检查
主要观察颜色与透明度,可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌,并应及时接种培养基。
1)红色:
如标本为血性,为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤,应注意:
(1)将血性脑脊液试管离心沉淀(1500r/min),如上层液体呈黄色,隐血试验阳性,多为蛛网膜下腔出血,且出血的时间已超过4h。如上层液体澄清无色,红细胞均沉管底,多为穿刺损伤或因病变所致的新鲜出血。
(2)红细胞皱缩,不仅见于陈旧性出血,在穿刺外伤引起出血时也可见到。因脑脊液渗透压较血浆高所致。
2)黄色:
除陈旧性出血外,在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时,也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。
3)米汤样:
由于白(脓)细胞增多,可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。
4)绿色:
可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。
5)褐或黑色:
见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。
(3)潘氏(Pandy)球蛋白定性试验 娄底市第三人民医院检验科
操作文件 文件编号:JZ-CZ-17
颅内常见感染性疾病的脑脊液改变特点
压力(kPa) 常规分析 生化分析
其他
外观 Pandy试验 白细胞(×106/L) 蛋白(g/L) 糖mmol/L 氯化物mmol/L
正常 0.69~1.96
新生儿:0.29~0.78 清亮透明 - 0~10
婴儿:0~20 0.2~0.4
新生儿:0.2~1.2 2.8~4.5
婴儿:3.9~5.0 117~127
婴儿:110~122
化脓性脑膜炎 不同程度增高 米汤样混浊 +~+++ 数百~数千,多核为主 增高或明显增高 明显降低 多数降低 涂片Gram染色和培养可发现致病菌
结核性脑膜炎 不同程度增高 微浑,毛玻璃样 +~+++ 数十~数百,淋巴为主 增高或明显增高 明显降低 多数降低 薄膜涂片抗酸染色及培养可发现抗酸杆菌
病毒性脑膜炎 不同程度增高 清亮,个别微浑 -~+ 正常~数百,淋巴为主 正常或轻度增高 正常 正常 特异性抗体阳性,病毒培养可能阳性
隐球菌性脑膜炎 高或很高 微浑,毛玻璃样 +~+++ 数十~数百,淋巴为主增高或明显增高 增高或明显增高 明显降低多数降低 明显降低多数降低 涂片墨汁染色和培养可发现致病菌
一、适应证和标本采集
1.适应证
① 有脑脊膜刺激症状时可检查脑脊液协助诊断。
② 疑有颅内出血时。
③ 有剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪等症状和体征而原因不明者。
④ 疑有脑膜白血病患者。
⑤ 中枢神经系统疾病进行椎管内给药治疗、手术前腰麻、造影等。
要严格掌握禁忌证、凡疑有颅内压升高者必须做眼底检查,如有明显视乳头水肿或有脑疝先兆者,禁忌穿刺。凡病人处于休克、衰竭或濒危状态以及局部皮肤有炎症、颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者均禁忌穿刺。
2.标本采集
脑脊液由临床医师进行腰椎穿刺采集,必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。穿刺后应由医师用压力测定,正常人脑脊液压力卧位为0.78~1.76 kpa (80~180 mmH2O),儿童为0.4~1.0 kpa (40~100 mmH2O)。任何病变使脑组织体积或脑脊液量增加时,脑脊液压力均可升高。待压力测定后将脑脊液分别收集于3个无菌试管中,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查。每管收集1~2毫升。脑脊液标本必须立即送验及时检查,放置过外将影响检验结果,是细胞破坏、变性、或细胞包裹于纤维蛋白凝块中,导致细胞数降低、分类不准确等。存放中的脑脊液葡萄糖会分解,使之含量降低;细菌自溶或残废可影响细菌检出率等。
脑脊液常规检查简易操作程序
一、一般性状检查
观察颜色、透明度、有无凝块,可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。
二、潘氏(Pandy)球蛋白定性试验
取5%苯酚溶液2—3m1,置于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液l一2滴,衬以黑背景,立即观察结果。
结果判断
阴性:清晰透明,不显雾状。
极弱阳性(土):微呈白雾状,在黑色背景下,才能看到。
弱阳性(十):灰白色云雾状。
阳性(2十):白色浑浊。
强阳性(3十):白色浓絮状沉淀。
最强阳性(4十):白色凝块。
三、细胞计数
(一)、细胞总数
1、对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池,计数10个大方格内红、白细胞数,其总和即为每μl的细胞数。再换算成每升脑脊液中的细胞数。如细胞较多,可计数一大格内的细胞×10,即得每μl脑脊液中细胞总数。如用升表示,则再乘以106。
2、浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20μl,加入含红细胞稀释液0.38m1的小试管内,混匀后滴入计数池内,用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数,乘以50,即为每μl脑脊液的细胞总数。
(二)、白细胞数
1、非血性标本:
小试管内放入冰乙酸1—2滴,转动试管,使内壁沾有冰乙酸后倾去之,然后滴加混匀的脑脊液3—4滴,数分钟后,混匀充入计数池,按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。
2、血性标本:
将混匀的脑脊液用1%冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数,用下式进行校正:
每μl脑脊液内白细胞校正数=每μl脑脊液内白细胞未校正数
每μl脑脊液内内红细胞数×每μl血液内白细胞
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每μl血液内红细胞
(三)、细胞分类
在高倍镜下根据细其胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞,计算出百分率。
如直接分类不易区分细胞,可将脑脊液离心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清l滴,推片制成均匀薄膜,置室温或37℃温箱内待干,进行瑞氏染色后用油镜分类。
脑脊液常规检查的注意事项
(1)脑脊液采集后应在1小时内进行计数,如搁置过久,细胞破坏,或沉淀与纤维蛋白凝成块,导致计数不准。标本必须摇匀方可滴入计数室,否则影响检验结果。
(2)穿刺损伤血管,导致血性脑脊液,此时细胞总数计数已无意义,白细胞计数亦须校正才有临床价值。通常的做法是:将混匀的脑脊液用1 %冰乙酸溶液稀释后进行计数,为排除血性脑脊液中红细胞的影响,可用以下公式进行校正。
(3)细胞计数时,如发现较多的红细胞有皱缩或肿胀现象,应予以描述报告,以协助临床医生鉴别陈旧性或新鲜出血等。
(4)细胞计数时,须注意红细胞或淋巴细胞与新型隐球菌相区别:
① 新型隐球菌具有“出芽” 现象,不溶于乙酸,滴加0.35 mol/L 乙酸后,显微镜下仍保持原形, 而红细胞被乙酸溶解消失,淋巴细胞的核和胞浆则更为明显;
② 加印度墨汁(或优质绘图细墨汁)1滴,加盖玻片,高倍镜下见新型隐球菌有厚荚膜,不着色,而红细胞和淋巴细胞无此现象。
(5)涂片固定时间不能太长,以免细胞皱缩,使分类计数发生困难;更不能高温固定。