脑脊液常规检查简易操作程序
一、一般性状检查
观察颜色、透明度、有无凝块，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。
二、潘氏(Pandy)球蛋白定性试验
取5％苯酚溶液2—3m1，置于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液l一2滴，衬以黑背景，立即观察结果。
结果判断
阴性：清晰透明，不显雾状。
极弱阳性(土)：微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。
弱阳性(十)：灰白色云雾状。
阳性(2十)：白色浑浊。
强阳性(3十)：白色浓絮状沉淀。
最强阳性(4十)：白色凝块。
三、细胞计数
（一）、细胞总数
1、对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数，其总和即为每μl的细胞数。再换算成每升脑脊液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞×10，即得每μl脑脊液中细胞总数。如用升表示，则再乘以106。
2、浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20μl，加入含红细胞稀释液0.38m1的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每μl脑脊液的细胞总数。
（二）、白细胞数
1、非血性标本：
小试管内放入冰乙酸1—2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液3—4滴，数分钟后，混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。
2、血性标本：
将混匀的脑脊液用1％冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正：
每μl脑脊液内白细胞校正数＝每μl脑脊液内白细胞未校正数
每μl脑脊液内内红细胞数×每μl血液内白细胞
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每μl血液内红细胞
（三）、细胞分类
在高倍镜下根据细其胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞，计算出百分率。
如直接分类不易区分细胞，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清l滴，推片制成均匀薄膜，置室温或37℃温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分类。
岳阳市一人民医院
The First People’s
Hospital of Yueyang 文件编号：SOP-JZ-003.00 第1版/第0次修改
文件名称：
脑脊液常规检查标准操作规程 编写人：李林
审核人：彭进
批准人：刘培香
第1页，共 6 页 实施日期：2011-9-1
一、目的
规范脑脊液常规检查。
二、适用范围
适用于脑脊液的常规检测，包括：一般性状的检查、潘氏试验、细胞总数计数、白细胞计数与分类、革兰氏染色、抗酸染色、墨汁染色。
三、支持性文件
《全国临床检验操作规程》(第三版)、《临床检验基础》（第三版）
四、标本处理
1、标本收集后应立即送验，一般不能超过1h。收到标本后应立即检查，久置可致细胞破坏，影响细胞计数及分类检查；葡萄糖分解使含量降低；病原菌破坏或溶解。
2、细胞计数管应避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA盐抗凝。
五、一般性状检查
主要观察颜色与透明度，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌，并应及时接种培养基。
1、红色：
如标本为血性，为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤，应注意：
(1)将血性脑脊液试管离心沉淀(1500r／min)，如上层液体呈黄色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，且出血的时间已超过4h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤或因病变所致的新鲜出血。
(2)红细胞皱缩，不仅见于陈旧性出血，在穿刺外伤引起出血时也可见到。因脑脊液渗透压较血浆高所致。
2、黄色：
除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时，也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。
3、米汤样：
由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。
4、绿色： 岳阳市一人民医院
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脑脊液常规检查及注意事项
王永春,毕经丽(山东省潍坊市脑科医院检验科261021
【关键词】脑脊液; 蛋白定性; 细胞计数
DOI:lO.3969/j.issn.1672—9455.2010.21.080
中圈分类号:R446.14文献标志码:B 文章编号:1672—9455(201021—2428-02
脑脊液常规检查包括一般性状检查、蛋白定性、细胞计数、 细胞分类、蛋白质定量、葡萄糖定量测定、氯化物定量测定、微 生物学检查、细胞学检查等[1]。脑脊液常规检查是多种中枢神 经系统疾病诊断、治疗、病情衍变等方面不可缺少的监测项目, 且其采集方法有一定困难,操作繁琐,易受主观因素影响。做 好脑脊液检壹的质量控制,提高实验的准确性、可靠性、精密度 具有重要意义,现总结如下。
1标本收集和处理
用带盖无菌管收集3管脑脊液,第1管做细菌培养,第2管做化学检查和免疫学检查,第3管做一般性状检查和细胞学 检查。标本采集后要立即送检,一般不超过1h。放置过久,性 质发生改变,影响检验结果。
2一般性状检查
2.1标本为血性 常由于穿刺损伤(新鲜出血或蛛网膜下腔 出血(陈旧性出血引起,二者鉴别结果见表1。
表1穿刺损伤和蛛网膜下腔出血鉴别
2.2蛛网膜下腔的陈旧性出血红细胞破坏、溶解,出血4~ 8h即出现红色。蛛网膜下腔梗阻由于脑脊液长期滞留,当蛋 白含量超过去1.5g/L时,颜色变黄,其黄色程度与蛋白含量 成正比。当蛋白含量达到30~50g/L时,脑脊液可自凝而呈 黄色胶冻状。脑脊液胆红素浓度超过8.5/tmol/L时即可被黄 染。 2.3穿刺出血 脑脊液中有红细胞,可引起微浊。白细胞数 如超过300×106/1,可变为浑浊。
3细胞计数、分类
3.1因穿刺损伤血管引起血性脑脊液,白细胞计数结果必须 校正。其校正方法:(1可以以红细胞和自细胞之比(700:1的 关系估计自细胞;(2通过外周血红细胞及自细胞和脑脊液中 红细胞数计算出从血液中带人脑脊液中的白细胞数。
脑脊液常规检查对隐球菌性脑膜炎的诊断意义
目的 分析脑脊液常规检查对隐球菌性脑膜炎的诊断意义。方法 细胞计数板直接观察和墨汁染色法确认。结果 23例隐脑患者脑脊液中均在脑脊液常规检查中找到隐球菌,后经墨汁染色确认。结论 脑脊液常规检查找到隐球菌即可诊断隐球菌性脑膜炎。
标签： 脑脊液常规检查; 新型隐球菌; 墨汁染色; 隐球菌性脑膜炎
新型隐球菌脑膜炎是真菌直接侵犯中枢神经系统引起的脑或脑膜炎症,常呈亚急性或慢性起病。由于临床表现及脑脊液检查与结核性脑膜炎极为相似,所以早期容易被误诊。新型隐球菌脑膜炎病程长,治疗困难,预后较差,即使是正规的治疗,病死率仍高达20%～30%[1]。因此为临床提供早期的诊断依据是治疗的关键。依据近几年来的工作经验,笔者认为脑脊液的常规检查是诊断隐球菌性脑膜炎的快速、简便、检出率极高的一种方法,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
我院2004～2009年6月脑膜炎住院患者共328例,其中隐球菌性脑膜炎23例中男15例,女8例。年龄8～65岁,平均51岁。诊断标准:首发症状为头痛,常伴有恶心、呕吐及发热,多为不规则发热,多数患者早期脑膜刺激征阳性,颅内压增高,脑脊液墨汁染色查隐球菌阳性。
1.2 方法
腰穿抽取患者脑脊液2～4mL,分2管送检。第一管分别进行物理检验(颜色、透明度)、化学检验(蛋白、糖和氯化物含量)及细胞计数。在低倍镜下调节到光线最暗,然后调整微调,可见到菌体的双层反射光圈,在转至高倍镜下,有时可见到哑铃状菌体。另一管做墨汁染色,3000r/min离心10min,取沉淀加入适量的墨汁,镜下观察可见黑色背景下一圆形透亮菌体,外包一层透明的荚膜。
1.3 器材
双目电光源生物显微镜、血细胞计数板、离心机、墨汁。
2 结果
23例隐球菌性脑膜炎患者均在脑脊液常规检查中找到隐球菌,后经墨汁染色法证实。
3 讨论
一般情况下,因为隐球菌性脑膜炎在临床的脑膜炎病例中还占少数,检验技术人员对隐球菌镜下形态识别的经验不足,加上隐球菌性脑膜炎与结核性脑膜炎的临床症状极为相似,临床医生很少会单独开出墨汁查隐球菌的申请单,这是临床上隐球菌性脑膜炎漏诊、误诊的主要原因。所以,临床医生应加强与检验人员的沟通,在临床经结核性脑膜炎的药物治疗无好转后,应考虑隐球菌性脑膜炎的可能性,在开出隐球菌申请单的同时主动与检验人员联系,使检验人员在做脑脊液常规检查注意辨别隐球菌。
