微生物化验员应知应会学习资料讲解

检验师微生物检验知识点集锦微生物检验是现代医学中的重要检验项目之一，主要用于检测病原微生物的存在和种类，以及对药敏试验进行评估。

作为初级检验师，你需要掌握以下几个方面的知识点：1.微生物基础知识-微生物的分类和命名规则：包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等分类。

-微生物的形态和结构：掌握不同类别微生物的形态特征和结构组成，如细菌的形状、胞壁和胞质等。

-微生物的生长条件：了解微生物的生长条件，包括温度、湿度、pH值和营养物质等。

2.微生物检验方法-样品采集及处理：理解不同样品（如血液、尿液、分泌物等）的采集方法和处理步骤，以确保样品的准确性和可靠性。

-培养方法：熟悉不同微生物的培养方法，包括琼脂培养基的配制、接种方法和培养条件等。

-鉴定方法：了解常见微生物的鉴定方法，包括形态学鉴定、生化试验和分子生物学方法等。

-药敏试验：掌握药敏试验的原理和操作步骤，用于评估微生物对不同抗生素的敏感性，并为临床治疗提供参考。

3.常见病原微生物-常见病原菌：学习常见病原菌的分类、形态和致病特点，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。

-常见病毒和真菌：了解一些常见的病毒和真菌的致病性和检测方法，例如流感病毒、念珠菌等。

-传染病的检测：学习不同传染病的检测方法，包括艾滋病、结核病和流行性感冒等。

4.质控和质量管理-质量控制：了解微生物检验中的质量控制措施，如内外质控、质量标准和质量评估等，确保结果的准确性和可靠性。

-安全措施：掌握微生物检验过程中的安全措施，如个人防护、试剂的正确使用和实验室的卫生管理等。

除了以上的基础知识，你还需要掌握实验中的仪器操作、数据分析和结果解读等技能。

微生物检验是一个综合性较强的检验项目，需要不断学习和实践，提高自己的技术水平和判断能力。

微生物学检验重点知识总结微生物学是研究微生物的结构、生理、生化、生态以及与人类和环境的关系的一门学科。

在微生物学检验中，掌握以下重点知识是非常重要的。

1.微生物分类学：微生物可以分为原核生物和真核生物。

原核生物包括细菌和古细菌，真核生物包括真菌、原生动物和线虫等。

了解微生物的分类和命名体系，对于正确识别和鉴定微生物是至关重要的。

2.微生物培养技术：微生物的培养是检验微生物的基础。

掌握常见的微生物培养方法，如液体培养、平板培养和深层培养等，并了解培养基的配制和消毒操作的方法。

3.微生物的生长特性：微生物的生长特性包括生长曲线、生长速率、最适生长温度和最适生长pH等。

了解微生物的生长特性对于选择合适的培养条件和进行微生物检验是非常重要的。

4.微生物的鉴定方法：微生物的鉴定是微生物学检验的重点。

常见的微生物鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、免疫学检测和分子生物学检测等。

掌握常用的微生物鉴定方法和技术，可以准确快速地鉴定微生物。

5.微生物与人类健康的关系：微生物在人类健康中起着重要作用。

了解微生物对人类健康的影响，如微生物的致病机制、致病微生物的鉴定和抗微生物药物的应用等，有助于预防和治疗微生物引起的疾病。

6.微生物在环境中的作用：微生物在环境中起着重要的生态作用。

了解微生物在土壤、水体和大气中的功能和影响，对于环境保护和资源利用具有重要意义。

7.微生物学检验方法：微生物学检验方法包括微生物计数、微生物培养、抗微生物药敏试验、细菌鉴定和病毒检测等。

掌握常见的微生物学检验方法和技术，能够准确、快速地检测微生物。

8.检验结果的解读和分析：对于微生物学检验结果的解读和分析是非常重要的。

了解常见的微生物学检验参数和阈值，能够根据检验结果判断微生物的致病性和药物敏感性等。

总结起来，微生物学检验的重点知识包括微生物的分类和命名、微生物培养技术、微生物的生长特性、微生物的鉴定方法、微生物与人类健康的关系、微生物在环境中的作用、微生物学检验方法以及检验结果的解读和分析等。

微生物限度检查基本知识及操作培训资料基本知识：1、微生物限度检查法概念：系指检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。

检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。

2、微生物限度检查应在环境洁净度10 000级下的局部100级的单向流空气区域进行。

检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。

单向流空气区域、工作台面和环境应定期按《医药洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

3、供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂。

应证明其有效性及对微生物的成长和存活无影响。

4、除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30~35℃。

霉菌、酵母菌培养温度为23~28℃。

控制菌培养温度为35~37℃。

5、检验结果以1g 1ml 10g 10ml或10cm2为单位报告。

检验量：即一次实验所用的供试品量（g ml或cm2）。

除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml。

膜剂为100cm2 、贵重物品、微量包装药品的检验量可以酌减，要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g或20ml（其中10g 或10ml用于阳性对照试验）。

检验时，应从2个以上最小包装单位中抽取供试品。

一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。

6、培养基的配制和灭菌：培养基的配制按使用说明书上配制。

灭菌用手提式高压灭菌锅，灭菌温度及时间：营养琼脂pH7.0无菌氯化钠—蛋白胨缓冲液等不含糖的培养基、稀释瓶、稀释管等灭菌温度是121℃，时间为20min。

虎红琼脂、乳糖胆盐培养基等含糖的培养基灭菌温度为115℃，时间为20min.培养皿及吸管的灭菌用电热恒温干燥箱，温度为160℃以上2小时。

吸管为防止污染应在管口塞入棉花后灭菌。

7、微生物限度标准：非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药途径和对患者健康潜在的危害以及中药的特殊性而制订的。

我公司产品为口服给药制剂，其微生物限度标准为：7.1不含药材原粉的制剂：细菌数每1g不得过1000cfu。

食品生产车间一线员工微生物检测基础知识培训微生物基础知识培训◆◆微生物◆◆1.微生物是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见得的微小生物类群的总称。

包括病毒、细菌、真菌、原生动物和某些藻类。

2.微生物的特性:个体小、结构简单;种类多，数量大，已知道的微生物有10万种;分布广;繁殖快;代谢能力强;适应性强、易变异。

◆◆病毒◆◆1.病毒的概念:病毒是一种结构简单、能够自我复制并具有侵染性的独特非细胞生物体2.病毒的种类:分为真病毒和亚病毒3.微生物学性质:个体小:无细胞结构，仅为核酸包以蛋白质外壳的病毒粒子;每一种病毒只含有一种核酸;既无产能酶系，也无蛋白质和核酸合成酶系，只能在活细胞内专性寄生:只通过核酸复制和蛋白质合成、然后装配的方式增殖，不存在个体生长、和二等分裂的细胞繁殖方式;在离体条件下能以无生命大分子的状态存在，并保持其侵染性;对大多数抗生素不敏感。

4.鸡体常染病毒:禽流感、新城疫等致死温度:中心温度60-70C，2-10分钟能完全灭活◆◆细菌◆◆1.细菌是原核微生物的一个类群。

是单细胞原核生物，即细菌的个体是由一个原核细胞组成，一个细胞就是-一个生活个体。

2.细菌的形态:球状、杆状、螺旋状，分别称球菌、杆菌、螺旋菌。

3.细菌的基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核;特殊结构:有的还有荚膜、鞭毛、芽孢等4.芽孢:某些细菌当生长到一定时期繁殖速度下降，菌体的细胞原生质浓缩，在细胞内形成-一个圆形、椭圆形或圆柱形的结构，称为芽孢。

对外界理化因素有较强的抵抗力。

5.细菌的繁殖:主要是简单的二分裂方式进行繁殖，即由-个分为二个，二个分为四个...15-20分钟分裂一次，称为-代。

细菌繁殖快，代谢能力强，适应性强。

细菌的分裂繁殖如下:6.细菌的致死温度:一般细菌的繁殖体在70℃时，就会很快死亡;而芽孢能耐受高温，例如枯草杆菌的芽孢能在100℃的沸水中活1小时，肉毒杆菌的芽孢能在180℃下活10分钟。

食品微生物检测基础知识汇总一、微生物基础知识1、微生物的概念：微生物是一群体形细小，构造简单的微小生物的总称。

即凡是肉眼看不见的生物通称为微生物。

2、微生物的特点：个体小、结构简单、分布广、繁殖快、容易发生变异。

3、细菌生长的四个时期：平缓期、对数期、延滞期、衰老期。

4、微生物繁殖需要的条件：(1).充足的营养(2).合适的酸碱度(3).适宜的温度(4).必要的气候环境。

5、常用检验方法镜检接种培养二、无菌操作1、微生物操作要求迅速，结果正确且不污染周围环境。

因此，操作必须在无菌室内进行，使用的培养基及各种器材需经灭菌处理，整个过程还要符合无菌要求。

2、无菌室的要求工作室应矮小、平整，面积4平方米，采光面积宜大，周围需设缓冲走廊，无菌室缓冲间应有供消毒空气用的紫外灯。

3、无菌室的使用与管理（1）无菌室应保持清洁整齐，室内仅放最必须的检验用具。

每2-3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作台、门及地面，然后用3%石碳酸水溶液消毒空气，最后紫外灯杀菌半小时。

（2）无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作台，然后打开紫外灯杀菌30min。

进入无菌室前，必须清洁双手，在缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽、工作鞋。

（3）操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，以保持环境的无菌状态。

4、器材及场所的灭菌消毒高压蒸汽灭菌工作服、口罩、培养基稀、释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时，不同的培养基有不同的要求，应分别处理。

不能随便改变杀菌温度，温度过低，达不到杀菌效果，灭菌效果以芽孢是否杀死为判断标准。

温度过低，芽孢未被杀死，温度过高，则营养成分损失，状态也较差。

高温能杀死细菌的原因：细菌细胞基本是蛋白质，蛋白质不耐高温，生物催化剂-酶也是蛋白质，蛋白质受高温结构严重破坏，发生凝固便会死亡。

湿热比干热更容易杀菌的原因是：蛋白质含水越多，加热时越容易凝固，湿热作用的水蒸气传导力和穿透力都较强，更容易破坏蛋白质，从而更容易杀死细菌。

【化验员必备】微生物检验的基本操作技术汇总！食品实验室服务一、无菌操作基础知识（一）无菌操作技术1、定义是指在执行实验过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。

无菌操作技术是微生物实验的基本技术，是保证微生物实验准确和顺利完成的重要环节。

2、内容无菌操作技术主要包括两方面：（1）创造无菌的培养环境。

包括提供密闭的培养容器、培养容器的灭菌、培养基的灭菌等；（2）在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。

包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。

3、无菌操作原则（1）在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区，接种时必须穿工作服、戴工作帽，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球将手擦干净；（2）在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。

严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的钳、镊子等；（3）从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不能触及试管或平皿边；（4）接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒；（5）接种环或接种针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必须时还要烧到环和针与杆的连接处；（6）吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。

倾倒平板应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。

（二）无菌操作的环境要求1、无菌室（1）无菌室的结构：更衣间、缓冲间、操作间。

（2）无菌室的消毒和防污染：①每日（使用前）紫外线照射（0.5~1小时）；②每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒；③每季度用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时），特殊情况下可增加熏蒸频次。

绪论1. 微生物的定义与特点一，微生物的概念与特点; 微生物的分类；1. 微生物（microorganism ）是一群个体微小，结构简洁，肉眼不能直接观察，必需借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观看到的微小生物的总称；2. 微生物的特点个体微小，结构简洁比表面积大，吸取多，转化快繁衍快，代谢强适应强，易变异种类多，分布广1. 微生物类型依据微生物大小，结构和组成不同分为三类型2. 病原微生物的定义病原微生物：是指能引起动物，植物或人类产生疾病的微生物；3. 医学微生物学的进展简史；.微生物的发觉与讨论（1）列文虎克创造显微镜，最早观看到微生物；微生物学讨论的创始人：巴斯德，科赫，李斯特第一章第一节细菌的基本性状细菌的形状与结构1.细菌细胞壁的结构和功能，肽聚糖结构及其化学组成；革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区分（一）细胞壁化学组成与结构，革兰染色共有组分：肽聚糖特别组分：G+ 菌，G- 菌不同革兰阳性菌细胞壁特别组分：磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特别组分：外膜革兰阴性菌细胞壁肽聚糖2.细胞壁的功能：:聚糖骨架，四肽侧链（1）维护细菌固有形状和抗击低渗作用；（2）物质交换作用；（3）屏障作用；（4）免疫作用；（5）致病作用；（6）与细菌药物敏锐性有关；G+ 菌与G- 菌细胞壁结构比较. 细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同，. 细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称2.细菌荚膜，鞭毛和菌毛的功能；荚膜：功能：由磷脂和多种蛋白质组成，中介体；但不含胆固醇；有抗吞噬和抗击杀菌物质的杀菌作用，增强细菌的侵袭力，构成细菌致病力的重要因素之一；②具有免疫原性；③鉴别细菌和血清学分型鞭毛：功能：细菌的运动器官菌毛一般菌毛：具有黏附性，与细菌致病性有关；性菌毛：与细菌的遗传变异相关3.芽胞结构特点，意义，与消毒灭菌的关系；细菌L 型的形状特点，检验要点；芽胞：某些细菌（主要为革兰阳性杆菌）在肯定条件下，细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强，具有多层膜状结构，通透性很低的圆形或卵圆形的小体；L 型细菌：细胞壁缺陷的细菌；常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中；依据细胞壁缺陷程度分：原生质体（完全失去细胞壁，见于原生质球（细胞壁部分缺损，见于G+菌，仅在高渗环境中存活)G-菌，在高渗或非高渗环境中均能存活）4.G+ 菌和G- 菌细胞壁结构的差异及其意义；其次节细菌的生理细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC 试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义；细菌的生长繁衍（一）细菌生长繁衍的条件1. 充分的养分物质2. 相宜的酸碱度3. 合适的温度4. 必要的气体环境包括：水，碳源，氮源，生长因子等；多为～；多数病原菌为35℃～37℃；O2 和CO 2；主要是按细菌对O2 的需要与否，将细菌分为：细菌生长繁衍的规律细菌的繁衍方式：无性二分裂；细菌的繁衍速度：大多数细菌20～30 分钟即可分裂一次；2.细菌的养分类型和养分机制，自氧菌与异氧菌的概念；3.细菌的生长曲线及其特点；（一）能量代谢细菌猎取能量的途径——生物氧化；细菌能量代谢的主要类型：（二）分解代谢检测细菌糖分解产物的常用试验：糖发酵试验，甲基红试验，VP 试验等；检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验：吲哚（靛基质）试验，硫化氢试验，苯丙氨酸脱氨酶试验等；其他检测细菌分解产物的常用试验：尿素分解试验，枸橼酸盐利用试验等；第三节细菌与环境1 正常菌群的概念和生理功能；条件致病菌的概念2.正常菌群的生理功能；条件致病菌的概念3.消毒，灭菌，无菌，无菌操作等概念；高温消毒灭菌法及其应用；二，细菌的掌握（一）基本概念：消毒杀死物体或介质中病原微生物的方法；灭菌杀灭物体或介质中所有微生物的方法；无菌无活菌存在的状态；无菌操作防止微生物进入机体或物体的操作技术；防腐防止或抑制细菌生长繁衍的方法；4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用；噬菌体与宿主的相互关系；其次章真菌的基本性状真菌的概念真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的区分第三章病毒的基本性状病毒的大小病毒的结构病毒的增殖病毒的复制周期第四章微生物与感染细菌致病三大因素细菌内外毒素的区分毒血症，菌血症，败血症，脓毒血症的概念全身感染的类型其次篇第五章第一节微生物检验的基本技术细菌的检验技术细菌形状检验技术细菌染色的一般程序染色标本检查的一般程序革兰氏染色法，抗酸染色法的原理，方法； 2.革兰染色法【方法】其次节细菌的接种与培育技术调配—溶化—调Ph—过滤澄清—分装—灭菌—检定—储存细菌在各种培育基上的生长现象及观看要点；培育基的概念培育基的分类第三节细菌的生化鉴定技术糖( 醇,苷)类发酵试验，O/F 试验，MR 试验，VP 试验的原理，操作，结果判定要点及其应用；I 试验，C 试验，氧化酶，触酶，血浆凝固酶氢氧化钾拉丝试验及理，操作要领，观看结果要点及其应用；一，碳水化合物的代谢试验1，糖（醇，苷）类发酵试验KIA 和TSI 的试验原原理：多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物→pH ↓ →呈酸性变色(或显现气泡2，O/F 试验(或产气)原理：依据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同，将细菌分为氧化，发酵和产碱型三类3，甲基红试验原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，进一步分解生成大量混合酸，使培育pH 下降至以下，加入甲基红后，出现红色反应；为甲基红试验阳性；4，V-P 试验原理：细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中，乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与胍基化合物结合，生成红色化合物，是为V-P 试验阳性；5，β-半乳糖苷酶试验（ONPG ）原理：有的细菌可产生β -半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D 半乳糖苷(ONPG) 而生成黄色的邻硝基苯酚，该试验也称为ONPG 试验；6，七叶苷水解试验原理：某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素，七叶素与培育基中的Fe2+结合后，形成黑色的化合物，使培育基变黑；二，蛋白质和氨基酸的代谢2，硫化氢试验硫化氢与培育基中的亚铁盐或铅盐结合生原理：细菌产生酶，分解含硫氨基酸生成硫化氢，成黑色化合物；3，尿素酶试验原理：细菌产生脲酶，水解尿素生成氨和二氧化碳，培育基呈碱性反应4，苯丙氨酸脱氨酶试验使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸，苯丙酮酸与三氯化铁作用，原理：细菌产生苯丙氨酸脱氨酶，形成绿色化合物三，碳源利用试验枸橼酸盐利用试验细菌在生长过程中分解枸橼酸原理：有的细菌能利用培育基中的枸橼酸盐作为唯独的碳源，盐产生碳酸盐，使培育基呈碱性反应四，酶类试验1，氧化酶（细胞色素氧化酶）试验，能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧原理：某些细菌具有氧化酶（细胞色素氧化酶）化生成红色的醌类化合物2，触酶试验继而形成氧分子显现原理：细菌产生的触酶（过氧化氢酶）能催化过氧化氢放出初生态氧，气泡；3，凝固酶试验（试管法）原理：金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白；4，凝固酶试验（玻片法）原理：金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白5，硝酸盐仍原试验原理：某些细菌能仍原培育基中的硝酸盐为亚硝酸盐，亚硝酸盐与醋酸作用，生成亚硝酸，亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸，再与α-萘胺结合，生成N- α-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物第六章真菌检验技术真菌感染性疾病的微生物学检查原就第七章病毒检验技术病毒标本的采集和运输留意事项；第八章细菌对抗菌药物敏锐试验药物敏锐试验的基本概念，常用方法抗菌药物敏锐试验方法纸片扩散法稀释法E-test 法需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏锐试验告）；（K-B 法和稀释法的原理，方法，结果判定及正确发报第三篇第十章常见微生物鉴定技术需氧和兼性厌氧球菌葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌，淋病奈瑟菌的主要形状特点，培育特性，分类依据及分类；病原性球菌标本采集种类，检验鉴定程序，鉴定要点，检验鉴定依据及报告要点；第十一章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌第一节肠杆菌科概述肠杆菌科细菌：杆菌，多数有鞭毛，菌毛2.发酵葡萄糖，兼性厌氧3.氧化酶阴性4.仍原硝酸盐为亚硝酸盐5.触酶（＋）肠道挑选性培育基：麦康凯琼脂，伊红美蓝琼脂，SS琼脂等肠杆菌科抗原：O抗原（菌体抗原），K 抗原（荚膜抗原），H抗原（鞭毛抗原）等肠杆菌科鉴定依据： 1.革兰染色2. 触媒，氧化酶，硝酸盐仍原3.KIA ，MIU ，IMViC , 其他生化反应4.血清玻片凝集（鉴定到种，型或血清型）IMViC 试验：吲哚（I ），甲基红（M），VP（V），枸橼酸盐利用（C）四种试验，常用于鉴定肠道杆菌；二，埃希菌属形状染色： 1. 短杆菌2. 革兰染色阴性3. 有鞭毛4. 有菌毛培育特性：符合肠杆菌特点EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S-S ——桃红色乳糖发酵菌落生化反应：IMViC（++-- ）大肠杆菌KIA：A A ＋－血清型表示法：O：K：HETEC肠毒素：耐热肠毒素（ST）o不耐热肠毒素（L T），65 C30min 被破坏引起腹泻的大肠埃希菌：肠产毒性大肠埃希菌ETEC肠致病性大肠埃希菌EPEC肠侵袭性大肠埃希菌EIEC肠出血性大肠埃希菌EHEC肠凝结性大肠埃希菌EAECEIEC 毒力测定试验：豚鼠眼结膜试验卫生学标准：每ml 饮水中细菌总数≤100 个，每1000ml 水中大肠杆菌菌群数≤ 3 个，每100 ml 瓶装汽水，果汁中，大肠杆菌菌群数≤三，沙门菌属5 个；对人类有致病性：肠热症；食物中毒；败血症-形状染色：G杆菌；周身鞭毛培育和生化反应：不分解乳糖分解葡萄糖；分解蛋白质，产生H2S伤寒沙门菌菌落特点（EMB，MA C）：无色透亮菌落伤寒沙门菌菌落特点（SS）：无色透亮或半透亮，中心黑色菌落伤寒沙门菌KIA：K A－＋标本实行：第1-2W，血，骨髓；第2-3W，粪便，尿；全程取骨髓肥达反应: 用已知伤寒沙门菌O，H 和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H 抗原与病人血清做定量凝集试验，用以帮助诊断肠热症；TO≥1：80，TH≥1：160；PA，PB 均≥1：80 才有意义；动态观看：双份血清抗体四倍上升有诊断意义四，志贺菌属形状染色：符合肠杆菌特点，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区分点培育特性：肠道鉴别培育基上的无色透亮，乳糖不发酵菌落抗原分类：依据O抗原分4 群，40 余型，我国常见 B 群A 群——痢疾志贺菌群——福氏志贺菌BC群——鲍氏志贺菌群——宋氏志贺菌D培育和生化反应：不分解乳糖分解葡萄糖菌落特点（EMB，MA C）：无色透亮菌落KIA：K A－－MIU：－－－外毒素： A 群（Ⅰ，Ⅱ型）产生志贺毒素（ST）有3 种生物活性1. 肠毒素：类似ETEC毒素，霍乱肠毒素作用——水样泻2. 细胞毒性：对人肝细胞，肠黏膜细胞有毒性，引起变性坏死3. 神经毒性：损耗动物神经系统（麻痹，死亡）快速诊断：荧光菌球试验；协同凝集试验六，变形杆菌属形状染色：有周鞭毛培育特性：扩散生长，有迁徙生长现象；在培育基中（含5％琼脂）加入％石炭酸就形成单个菌落；肠道挑选性培育基上形成无色透亮菌落变形杆菌KIA：K A+ +MIU：+ +/- +八，耶尔森菌属历史：三次世界性大流行，是我国重点监控的自然疫源性传染病；—形状染色：G 球杆菌，两极浓染培育特性：一般培育基，生长缓慢，24-48h ，R 型“破草帽”状菌落菌落特点（EMB，MA C）：无色透亮菌落甲类烈性传染病：鼠疫（黑死病）常见临床类型：腺鼠疫，败血型鼠疫，肺鼠疫标本采集：临床标本（淋巴结穿刺液，血液或痰标本）；非临床标本（尸检取病变组织，鼠标本应严格消毒体表，再进行采集）其次节弧菌科一群菌体短小，弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性细菌；具有一端单一鞭毛，运动快速；弧菌科细菌广泛分布于自然界，以水中最为多见弧菌属（一）霍乱弧菌霍乱弧菌的疫源地：印度恒河三角洲（O1群，古典生物型）；印尼苏拉威西岛（O1群，埃托生物型）；孟加拉湾（O139 群）已发生七次世界性的霍乱大流行：均由霍乱弧菌的O1群引起，前六次为霍乱弧菌的古典生物型，第七次为埃尔托生物型形状：新从患者标本中分别出的细菌革兰染色阴性，弧形或逗点状；在患者“米泔水”样便中，可呈头尾相接的“鱼群”样排列；菌体一端有鞭毛，悬滴观看时呈“穿梭”样运动培育特性：养分要求不高，故用Ph8.4-9.2 碱性培育基；分别（挑选）能在无盐培育基中生长（区分其它弧菌）；在的碱性胨水中经35℃4~6h 增菌后可在液体表面大量繁衍形成菌膜抗击力：较弱；水源性传播，水性爆发；怕酸，正常胃酸4min霍乱肠毒素（C T）：最猛烈的致泻毒素吐泻期：猛烈吐泻，米泔样免疫力：病人愈后可获得坚固免疫O1 群霍乱弧菌的O 抗原：由A，B，C 三种抗缘由子组成；通过不同组合可形成三个型别：由AB组成小川型，AC组成稻叶型，ABC组成彦岛型常用的挑选性培育基：1. 硫代硫酸盐- 枸橼酸盐- 胆盐- 蔗糖(TCBS) 琼脂平板：霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色2.4 号琼脂，庆大霉素琼脂：生长并将培育基中的碲离子仍原成元素碲, 形成灰褐色菌落中心3. 能在无盐培育基上生长古典生物型和埃尔托生物型的区分试验：羊红细胞溶血；鸡红细胞凝集；V-P 试验；多粘菌素 B 敏锐试验；Ⅳ组噬菌体裂解；Ⅴ组噬菌体裂解标本采集和运输：在发病早期，尽量在使用抗菌药物之前采集标本；取患者“米泔水”样便，亦可实行呕吐物或尸体肠内容物，或实行肛门拭子；标本应防止接触消毒液；实行的标本最好就地接种碱性胨水增菌；不能准时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子直接插入卡－布运输培育基中动力和制动试验：直接取“米泔水”样便，制成悬滴( 或压滴) 标本后，在暗视野或相差显微镜下直接观看呈穿梭样运动的细菌；同法重新制备另一标本涂片，在悬液中加入 1 滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清( 效价≥1：64) ，可见最初呈穿梭状运动的细菌停止运动并发生凝集，就为制动试验阳性快速诊断：将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中，经37℃4～6h，如有霍乱弧菌，在荧光显微镜下可见发荧光的菌球；本法适用于做大量标本的初筛SPA协同凝集试验：以霍乱弧菌IgG 型抗体与SPA阳性葡萄球菌结合作为试剂，与米泔水样便或增菌液作玻片凝集，立刻显现明显凝集者（＋＋＋）为阳性粘丝试验：将％去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成深厚菌液，1min 内悬液由混变清，并变得粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝来（二）副溶血性弧菌具有嗜盐性形状：革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛）培育特性：在无盐培育基上不能生长，最适合生长的氯化钠浓度为 3.5%，超过8%不能生长TCBS琼脂平板: 蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落第三节非发酵革兰阴性杆菌非发酵革兰阴性杆菌：一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧，无芽胞的革兰阴性杆菌一，假单胞菌属铜绿假单胞菌所致疾病：条件致病菌；医院感染的重要病原菌；大面积烧伤创面感染的重要病原菌生物学特性：革兰阴性，长短不一，单鞭毛，氧化酶阳性生长温度：25～42℃分别培育与鉴定： 1. 血平板上毛玻璃样，金属光泽，生姜味2. 可产生多种色素：荧光素与绿脓素血琼脂平板：透亮溶血环O/F 试验：氧化型第四节其他革兰阴性苛氧菌一，嗜血杆菌属流感嗜血杆菌所致疾病：原发化脓性感染及继发性感染，包括脑膜炎，鼻咽炎，关节炎，心包炎，鼻窦炎及中耳炎等生物学特性：革兰阴性短小球杆菌分别培育：需要X，V 因子；养分要求高，血琼脂平板培育基，巧克力琼脂培育基菌落特点：巧克力琼脂培育基, 小，无色透亮菌落卫星现象：当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培育时，靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大，远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较小四，布鲁菌属传染源：病兽，以羊，牛，猪多见传播途径：病兽的组织，尿，乳液等通过人体的皮肤，呼吸道，消化道进入人体易感人群：发病以青壮年为主，从事兽医，皮毛加工，屠宰的工人发病率较高临床表现：长期发热，多汗；关节疼痛及全身乏力，疼痛微生物特性：革兰阴性短小球杆菌培育特性：需氧菌，养分要求较高；生长缓慢（5~7 天）第十二章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌革兰阳性无芽胞杆菌白喉棒状杆菌+形状与染色: G瘦长微弯的杆菌；一端或两端膨大呈棒状；常排列呈V，L，X 等文字形；异染颗粒——形状上的鉴别特点培育特性：养分要求高，吕氏血清斜面或鸡蛋斜面亚碲酸钾BAP：挑选鉴别培育基，黑色菌落——鉴别依据毒力试验： 1. 体外法：琼脂平板毒力试验（Elek 平板毒力测定）；SPA协同凝集试验；对流电泳2. 体内法：用豚鼠作毒素革兰阳性需氧芽胞杆菌属- 抗毒素中和试验其次节炭疽芽胞杆菌临床意义：炭疽是人兽共患的急性传染病，皮肤炭疽，肠炭疽，肺炭疽等炭疽毒素：爱护性抗原，致死因子，水肿因子传染源：患病食草动物及其制品或被污染物传播途径： 1. 接触——皮肤炭疽食用——肠炭疽2.吸入——肺炭疽3.+形状染色: 致病菌中最大的G杆菌；两端平切，竹节状；有毒株可有明显荚膜芽胞： 1. 椭圆形，小于菌体，位于菌体中心2. 多在有氧条件下形成，25～30℃，在培育基中，土壤内，动物尸体解剖后暴露在空气中，都易形成芽胞3. 在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸体严禁解剖培育特性： 1. 一般培育基上卷发状菌落：12～15h 不溶血，18～24h 稍微溶血3. 肉汤：絮状沉淀生长4. 明胶：37℃18～24h 表面液化成漏斗状，由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状；5.NaHC O3BAP：有毒株-- 黏液型菌落，挑取时呈粘丝状( 鉴别要点)无毒株—粗糙型菌落抗原构造： 1. 菌体多糖抗原：与毒力无关，耐热，耐腐败，长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应（Ascoli 热沉淀反应），特异性不高，可作追溯性诊断2. 荚膜多肽抗原：荚膜肿胀试验，对本菌鉴定有意义标本的采集与处理: 死于败血症的动物，严禁宰杀和解剖，可消毒皮肤后割取耳朵，舌尖采集少量血液串珠试验: 炭疽芽胞杆菌在每毫升含有0.05-0.5U 青霉素的培育基中，可发生形状变异，形成大而匀称的圆球状并相连如串珠状第十三章分枝杆菌属分枝杆菌是一类瘦长略带弯曲的杆菌，含有分枝菌酸，有分枝生长的趋势而得名；具有抗酸性，故又称抗酸杆菌；结核分枝杆菌所致疾病：通过呼吸道，消化道和损耗的皮肤等多途径感染机体，引起多种脏器的结核病，其中以肺结核为多见致病物质：荚膜，脂质和蛋白质等菌体成分免疫性：有菌免疫或称传染性免疫，细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用微生物特性： 1. 分枝状，略带弯曲的抗酸杆菌，抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色2. 专性需氧，养分要求较高，最适生长温度为35℃，生长缓慢, 2 ~5w 才显现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落；结核菌素试验：纯蛋白衍生物(PPD)，注入皮内后如受试者已感染结核，就结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，形成迟发型超敏反应性炎症机体抗结核免疫特点：传染，免疫，超敏反应共存第十四章厌氧性细菌破伤风梭菌，产气荚膜梭菌，肉毒梭菌的形状特点，培育特性；厌氧性细菌的检验鉴定要点和报告方式；第十五章螺旋体，支原体，衣原体，立克次体第一节螺旋体螺旋体：是一种瘦长，松软，螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物钩端螺旋体所致疾病：钩端螺旋体病传染源与储存宿主: 自然疫源性疾病，鼠类和猪为主要储存宿主传播途径：间接接触传播（接触被含菌尿液污染的水源），血液传播，垂直传播生物学特性： 1. 螺旋一端或两端呈钩状2. 有两根周浆鞭毛，运动活泼-3. G，但不易着色，镀银染色成棕褐色梅毒螺旋体所致疾病：梅毒1. 先天性：母体通过胎盘传给胎儿2. 获得性：性传播获得性梅毒临床分期：分为三期1. Ⅰ期（初期）梅毒：感染后 3 周左右局部显现无痛性硬下疳，感染性极强；2. Ⅱ期梅毒：发生于硬下疳显现后2~8 周，全身皮肤，粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大3. Ⅲ期（晚期）梅毒：发生感染 2 年后，病变可波及全身组织和器官；基本损害为慢性肉芽肿；病损内螺旋体少但破坏性大-生物学特性：G，但不易着色，镀银染色呈棕褐色；对青霉素，四环素，红霉素等抗生素敏感微生物学检查：标本：Ⅰ，Ⅱ期梅毒取下疳渗出液，梅毒疹渗液或淋巴结穿刺液；先天性梅毒取脐血其次节支原体支原体：是一类没有细胞壁，形状上呈多样性，可通过细菌滤器，能在无生命培育基中生长-的最小的原核细胞型微生物；因其生长后能形成分枝长丝，故命名为支原体；G，但不易着色，Giemsa 染色呈淡紫色；油煎蛋样的菌落所致疾病：支原体肺炎冷凝集试验: 肺炎支原体感染后，患者血清中显现冷凝集素，能在0-4 ℃条件下凝集人红细胞（37℃时却无此效应）；此凝集试验为非特异性的，是肺炎支原体感染的帮助诊断试验衣原体：是一类专性活细胞内寄生，具有特殊发育周期，且能通过细菌滤器的，介于立克次体与病毒之间的原核细胞型微生物第一胜利分别鉴定出沙眼衣原体：我国学者汤飞凡于1956 年能引起人类疾病的衣原体：主要有沙眼衣原体和肺炎衣原体-立克次体：是一类专性活细胞内寄生的G原核细胞型微生物，是引起斑疹伤寒，恙虫Q病，热等传染病的病原体；与节肢动物关系亲密，大多是人畜共患病的病原体反应（外斐反应）：大部分立克次体与一般变形杆菌某些菌株（X19，X k，X2）的Weil-Felix菌体抗原有共同的抗原成分，故可用这些变形杆菌的菌体抗原与不同稀释度的患者血清做凝集反应，诊断立克次体病；第十六章常见真菌1.真菌的概念，生物学性状；真菌感染性疾病的微生物学检查原就；皮肤癣真菌，白假丝酵母菌，新生隐球菌的形状特点及微生物学检验；2.真菌感染性疾病的微生物学检查原就；皮肤癣真菌，白假丝酵母菌，新生隐球菌的形状特征及微生物学检验；第十七章常见病毒第一节呼吸道病毒1.正粘病毒(流感病毒)的结构，型别，抗原变异与流行的关系；微生物学检验；2.正粘病毒(流感病毒)的型别，抗原变异与流行的关系；其次节肝炎病毒1. HAV ，HBV ，HCV ，HDV ，HEV 五型肝炎病毒的生物学特性，微生物学检验；2.乙肝五项的结果分析及临床意义第三节逆转录病毒HIV 的微生物学检验；1. HIV 的生物学特性，致病性，免疫性与防治原就；2.HIV 的生物学特性；第四节其他病毒1.流行性乙型脑炎病毒，出血热病毒，狂犬病毒，疱疹病毒，人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性；以上病毒的微生物学检验；2.流行性乙型脑炎病毒，出血热病毒，狂犬病毒，疱疹病毒，人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性；第五节肠道病毒1.肠道病毒的共性，种类；2.脊髓灰质炎病毒的生物学特性，致病性与微生物学检验；第十八章临床常见标本的细菌学检验1.临床常见标本采集及运输，检验程序，报告方式，血液标本的细菌学检验，痰液标本的细菌学检验，脑脊液标本的细菌学检验；2.粪便标本的细菌学检验，尿液标本的细菌学检验，脓标本的细菌学检验；。