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常用染料的激发与发射 Company Document number：WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料的使用吖啶橙：吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA 荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜，因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题：1．每种荧光染料，均有自己的最适PH值，此时荧光最强。
当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2．一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定，温度升高常出现温度猝灭。
3．在荧光观察中，常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭，造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察，需照相时再适当增强激发光。
4．一般荧光染液的浓度在万分之一以下，甚至亿万分之一，也能使标本着色。
在一定的限度内，荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强，但超过限度，荧光强度反而下降，这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
常用荧光染料的激发和发射波长备注：发射波长的颜色及频率荧光染料的使用吖啶橙：吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA 荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜，因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题：1．每种荧光染料，均有自己的最适PH值，此时荧光最强。
当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2．一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定，温度升高常出现温度猝灭。
3．在荧光观察中，常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭，造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察，需照相时再适当增强激发光。
4．一般荧光染液的浓度在万分之一以下，甚至亿万分之一，也能使标本着色。
在一定的限度内，荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强，但超过限度，荧光强度反而下降，这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
荧光染料激发波长和发射波长荧光染料激发波长和发射波长荧光染料是一种广泛应用于科学研究和工业领域的物质。
通过受到特定波长光的激发，荧光染料可以发射出具有特定颜色的荧光，并被广泛用于生物医学成像、材料科学、独特效果的光学标记等领域。
在使用荧光染料之前，了解荧光染料的激发波长和发射波长非常重要。
本文将介绍荧光染料激发波长和发射波长的相关知识，并探讨其在生物医学领域的应用。
1. 什么是荧光染料的激发波长和发射波长？荧光染料的激发波长指的是激发荧光染料所需要的波长范围。
每种荧光染料都有其对应的激发波长范围，只有在这个波长范围内的光线照射到荧光染料上才能激发其发光性质。
而荧光染料的发射波长则是指荧光染料在受到激发后所发射出的荧光的波长范围。
荧光染料的激发波长和发射波长往往存在一定的关联性，但并不总是一致的。
2. 为什么了解荧光染料的激发波长和发射波长很重要？了解荧光染料的激发波长和发射波长对于正确选择和使用荧光染料至关重要。
如果不了解荧光染料的激发波长，我们可能会选择错误的激发光源，导致荧光染料无法被激发，从而无法得到准确的实验结果。
同样地，如果不了解荧光染料的发射波长，我们也无法选择合适的检测方法来观察荧光染料发射的荧光。
深入了解荧光染料的激发波长和发射波长可以帮助我们更好地设计和进行实验。
3. 荧光染料激发波长和发射波长的应用荧光染料的激发波长和发射波长在生物医学领域有着广泛的应用。
在生物荧光成像中，选择适合的激发波长可以准确地观察细胞或组织中的特定分子，从而实现对疾病发展或生物过程的研究。
荧光染料的发射波长还可以与其他分子或材料的发射波长相互配合，实现多种荧光信号的同时检测，从而提高实验的灵敏度和准确性。
4. 个人观点和总结荧光染料的激发波长和发射波长是我们在科学研究和实验中必须要考虑的重要因素。
通过了解激发波长和发射波长，我们可以选择合适的实验条件，确保荧光染料可以被有效地激发和检测，并获得准确的实验结果。
流式细胞仪测定常用的荧光染料
流式细胞仪测定常用的荧光染料有多种,他们分子结构不同,激发光谱和发射光谱也各异,选择荧光染料时必须依据流式细胞仪所配备的激光光源的发射光波长(如氩离子气体激光管,它的发射光波488ηm,氦氖离子气体激光管发射光波长633ηm）。
488ηm激光光源常用的荧光染料有FITC（异硫氰酸荧光素）、PE （藻红蛋白）、PI（碘化丙啶）、CY5（化青素）、preCP(叶绿素蛋白)、ECD(藻红蛋白-得克萨斯红)等。
他们的激发光和发射光波长分别是：
激发光波长（ηm）发射光峰值（ηm）
FITC 488 525（绿）
PE 488 575（橙红）
PI 488 630（橙红）
ECD 488 610（红）
CY5 488 675（深红）
PreCP 488 675（深红。
常用荧光染料的激发及发射波长FLUOROCHROME EXCITATION EMISSION3-Hydroxypyrene 5,8,10-Tri Sulfonic acid 403 513 5-Hydroxy Tryptamine 380-415 520-5305-Hydroxy Tryptamine (5-HT) 400 530Acid Fuchsin 540 630Acridine Orange (bound to DNA) 502 526Acridine Red 455-600 560-680Acridine Yellow 470 550Acriflavin 436 520AFA (Acriflavin Feulgen SITSA) 355-425 460 Alizarin Complexon 530-560 580Alizarin Red 530-560 580Allophycocyanin 650 661ACMA 430 474Aminoactinomycin D 555 655Aminocoumarin 350 445Anthroyl Stearate 361-381 446Astrazon Brilliant Red 4G 500 585Astrazon Orange R 470 540Astrazon Red 6B 520 595Astrazon Yellow 7 GLL 450 480Atabrine 436 490Auramine 460 550Aurophosphine 450-490 515Aurophosphine G 450 580BAO 9 (Bisaminophenyloxadiazole) 365 395BCECF 505 530Berberine Sulphate 430 550Bisbenzamide 360 600-610BOBO 1 462 481Blancophor FFG Solution 390 470Blancophor SV 370 435Bodipy Fl 503 512BOPRO 1 462 481Brilliant Sulphoflavin FF 430 520Calcien Blue 370 435Calcium Green 505 532Calcofluor RW Solution 370 440Calcofluor White 440 500-520Calcophor White ABT Solution 380 475Calcophor White Standard Solution 365 435Cascade Blue 400 425Catecholamine 410 470Chinacrine 450-490 515Coriphosphine O 460 575Coumarin-Phalloidin 387 470CY3.1 8 554 568CY5.1 8 649 666CY7 710 805Dans (1-Dimethyl Amino Naphaline 5 Sulphonic Acid) 340 525 Dansa (Diamino Naphtyl Sulphonic Acid) 340-380 430Dansyl NH-CH3 in water 340 578DAPI 350 470Diamino Phenyl Oxydiazole (DAO) 280 460 Dimethylamino-5-Sulphonic acid 310-370 520 Diphenyl Brilliant Flavine 7GFF 430 520 Dopamine 340 490-520Eosin 525 545Erythrosin ITC 530 558Ethidium Bromide 510 595Euchrysin 430 540FIF (Formaldehyde Induced Fluorescence) 405 435 Flazo Orange 375-530 612Fluorescein Isothiocyanate (FITC) 490 525Fluo 3 485 503Fura-2 340-380 512Genacryl Brilliant Red B 520 590Genacryl Brilliant Yellow 10GF 430 485Genacryl Pink 3G 470 583Genacryl Yellow 5GF 430 475Gloxalic Acid 405 460Granular Blue 355 425Haematoporphyrin 530-560 580Hoechst 33258 (bound to DNA) 346 460Indo-1 350 405-482Intrawhite Cf Liquid 360 430Leucophor PAF 370 430Leucophor SF 380 465Leucophor WS 395 465Lissamine Rhodamine B200 (RD200) 575 595Lucifer Yellow CH 425 528Lucifer Yellow VS 430 535Magdala Red 524 600Maxilon Brilliant Flavin 10 GFF 450 495Maxilon Brilliant Flavin 8 GFF 460 495MPS (Methyl Green Pyronine Stilbene) 364 395 Mithramycin 450 570NBD Amine 450 530Nile Red 515-530 525-605Nitrobenzoxadidole 460-470 510-650 Noradrenaline 340 490-520Nuclear Fast Red 289-530 580Nuclear Yellow 365 495Nylosan Brilliant Flavin E8G 460 510 Pararosaniline (Feulgen) 570 625 Phorwite AR Solution 360 430 Phorwite BKL 370 430Phorwite Rev 380 430Phorwite RPA 375 430Phosphine 3R 465 565Phycoerythrin R 480-565 578 Pontochrome Blue Black 535-553 605 Primuline 410 550Procion Yellow 470 600Propidium Iodide 536 617Pyronine 410 540Pyronine B 540-590 560-650Pyrozal Brilliant Flavin 7GF 365 495 Quinacrine Mustard 423 503 Rhodamine 123 511 534Rhodamine 5 GLD 470 565Rhodamine 6G 526 555Rhodamine B 540 625Rhodamine B 200 523-557 595 Rhodamine B Extra 550 605 Rhodamine BB 540 580Rhodamine BG 540 572Rhodamine WT 530 555Rose Bengal 540 550-600Serotonin 365 520-540Sevron Brilliant Red 2B 520 595 Sevron Brilliant Red 4G 500 583 Sevron Brilliant Red B 530 590 Sevron Orange 440 530Sevron Yellow L 430 490SITS (Primuline) 395-425 450SITS (Stilbene Isothiosulphonic acid) 365 460Stilbene 335 440Snarf 1 563 639sulphO Rhodamine B Can C 520 595Sulpho Rhodamine G Extra 470 570Tetracycline 390 560TRITC (Tetramethyl Rhodamine Isothiocyanate) 557 576Texas Red 596 615Thiazine Red R 510 580Thioflavin S 430 550Thioflavin TCN 350 460Thioflavin 5 430 550Thiolyte 370-385 477-484Thiozol Orange 453 480Tinopol CBS 390 4.3TOTO 1 514 533TOTO 3 642 661True Blue 365 420-430Ultralite 656 678Uranine B 420 520Uvitex SFC 365 435Xylene Orange 546 580XRITC 582 601YO PRO 1 491 509、红640—780nm，橙640—610，黄610—530，绿505—525，蓝505—470，紫470—380。
