冬虫夏草菌液体发酵过程中酶活性的测定与分析
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临床医药文献杂志(电子版)冬虫夏草及虫草制品中活性成分检测方法的建立及含量测定韩贵香青海珠峰虫草药业有限公司810001冬虫夏草的药用价值主要来源于其中的活性成分,而劣质的虫草制品中,这些活性成分的含量非常低,部分假冒产品中甚至完全不含活性成分。
这些劣质、假冒的虫草制品的药用价值非常低下,有些甚至含有有毒成分,对使用者的健康危害很大。
因此,对冬虫夏草相关产品的质量检测必须从活性成分的检测入手,一方面检测其是否有虫草特有的多种活性成分,另一方面测定这些活性成分的具体含量,以保证产品的能效和药用价值。
一、冬虫夏草和虫草制品概述虫草是一种特殊的药用真菌,其中最主要的一种就是冬虫夏草,由于其产生方式非常奇妙,而且药用价值很高,所以在我国具有很高的知名度。
从生理功效上来看,这种药物对高血脂、动脉硬化、免疫力低下、心脑血管疾病等都有很好的疗效。
遗憾的是,冬虫夏草的生长地域极其有限,人工培育技术也还未成熟,因此目前人们往往使用蛹虫草代替冬虫夏草作为虫草制品的原料。
以超临界萃取、水提法、醇提法等分离方式将冬虫夏草或蛹虫草中的活性成分提取出来,制作成丸剂、胶囊、口服液等虫草制品,不仅服用方便,而且由于提取精制时去除了虫草中的部分有害成分,所以毒副作用更小,这使得虫草制品在近些年的市场愈发火爆。
二、冬虫夏草和虫草制品的活性成分检测方法冬虫夏草有多种活性成分,其中最主要的是虫草酸、核苷类物质、氨基酸、虫草多糖。
这些成分中以虫草酸和核苷类物质对虫草制品的药用价值影响最大,因此这里将主要针对这两种活性成分讨论其种类与含量的检测方法。
(一)虫草酸的检测方法虫草酸又被称为D-甘露醇,对抗自由基和机体免疫能力都有很好的提升效果,而且能补肺益肾、抑制病菌,因此其含量的检测对虫草质量具有决定性意义。
针对虫草酸的检测方法可以分为定性检测和定量检测,其中定性检测的机理是虫草酸和三氯化铁的反应,这种反应只能在碱性溶液中发生,反应结果会生成无法通过振荡消失的棕黄色沉淀,但只需再添加过量碱液,沉淀就会溶解,令整个溶液呈现棕黄色。
液态发酵冬虫夏草菌制备生物活性钙的研究曾雨雷;胡家俊;杨波;刘志刚;王天执;胡征【期刊名称】《食品与发酵科技》【年(卷),期】2012(048)002【摘要】以冬虫夏草菌作为生物载体,开发新型生物活性补钙剂.首先研究了菌丝体对Ca2+的富集能力,结果表明冬虫夏草菌具有极强的富集Ca2+的能力,当添加Ca2+浓度高达3g/L时,菌体仍能将80.5%的Ca2+吸收进细胞内;通过原子吸收光谱法测定菌丝体中各组分的钙含量,结果显示62.4%的Ca2+通过微生物的作用转化为有生物活性的蛋白质钙;在Ca2+的总添加量为3g/L时,以氯化钙、碳酸钙、硝酸钙作为钙源的组合,研究口感与生物量之间的关系,结果发现以40%Ca(NO3)2+60%CaCO3组合作为钙源,冬虫夏草菌的生物量高达32.1g/L,且口感最好;卫生学指标检测表明虫夏草菌活性钙制剂符合食品卫生标准,能够作为一种新型补钙制剂.【总页数】4页(P16-19)【作者】曾雨雷;胡家俊;杨波;刘志刚;王天执;胡征【作者单位】湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室,湖北武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉 430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室,湖北武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉 430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室,湖北武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室,湖北武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉 430068;湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室,湖北武汉 430068;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉 430068【正文语种】中文【中图分类】TS201.4【相关文献】1.罗非鱼骨制备CMC活性钙的工艺及生物利用的研究 [J], 吴燕燕;李来好;林洪;杨贤庆;刁石强;石红2.一株冬虫夏草菌的液态发酵条件研究 [J], 罗园香;盛嘉俊;叶克难3.利用固态法白酒微生物群制备液态发酵剂研究 [J], 张健;张超;陈泽军;孙传则;步金海;苟民明4.灵芝深层发酵制备多糖蛋白生物活性钙的研究 [J], 秦卫东;高明侠;吕兆启5.钛合金表面高频感应热梯度新方法制备生物活性钙磷涂层探索 [J], 熊信柏;邹春莉;冯岩鹏;曾燮榕;谢盛辉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
虫草发酵菌粉的活性成分分析许春燕;李恒;陆震鸣【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)034【摘要】[目的]比较虫草头孢和蝙蝠蛾被孢霉2种发酵菌粉中活性组分的差异,为虫草发酵菌种的开发提供数据参考.[方法]采用重量法测定多糖含量,采用离子色谱法检测粗多糖的单糖组成,采用高效液相色谱法测定核苷类物质含量,采用Folin-Ciocalteu法测定总多酚含量,采用香草醛-高氯酸法测定总三萜含量.[结果]2种菌粉中粗多糖含量在7%左右,均由6种单糖构成;发酵菌粉中均检测到含量较高的胞苷、鸟苷和腺苷等核苷类化合物;2种虫草发酵菌粉中总多酚的含量约5 mg/g,三萜物质含量约8 mg/g.[结论]虫草头孢和蝙蝠蛾被孢霉2种发酵菌粉在多糖、核苷、多酚和三萜类物质的含量上无显著差异,均具有较高的药用活性和良好的开发前景.【总页数】3页(P168-169,231)【作者】许春燕;李恒;陆震鸣【作者单位】江苏省微生物研究所有限责任公司,江苏无锡214063;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】S567【相关文献】1.蛹虫草孢子粉活性成分分析 [J], 温鲁;张平;唐玉玲2.虫草头孢菌粉抗心律失常活性成分的分离纯化及结构鉴定 [J], 邹峥嵘;陈贝贝;王如伟;姚新生3.三种替代冬虫夏草发酵菌粉的营养成分和活性成分的比较研究 [J], 曾化伟;王文风;马猛华;徐国华;孙见凡;厉文成;杨亚威4.虫草头孢菌粉发酵液饮料的研制 [J], 李鑫;池景良;杨泽涛;谢玺文5.虫草蝙蝠蛾拟青霉(C1501)发酵菌粉、灵芝提取物及葛根提取物对化学性肝损伤的辅助保护作用 [J], 李娜;郭素萍因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
在逆境条件下(旱、盐碱、热、冷、冻),植物体内脯氨酸(proline,Pro)的含量显著增加。
植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性,抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。
因此测定脯氨酸含量可以作为抗旱育种的生理指标。
另外,由于脯氨酸亲水性极强,能稳定原生质胶体及组织内的代谢过程,因而能降低冰点,有防止细胞脱水的作用。
在低温条件下,植物组织中脯氨酸增加,可提高植物的抗寒性,因此,亦可作为抗寒育种的生理指标。
一、原理用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中,然后用酸性茚三酮加热处理后,溶液即成红色,再用甲苯处理,则色素全部转移至甲苯中,色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。
在520nm波长下比色,从标准曲线上查出(或用回归方程计算)脯氨酸的含量。
二、材料、仪器设备及试剂(一)材料:待测植物(水稻、小麦、玉米、高粱、大豆等)叶片。
(二)仪器设备:1. 722型分光光度计;2. 研钵;3. 100ml小烧杯;4. 容量瓶;5. 大试管;6. 普通试管;7. 移液管;8. 注射器;9. 水浴锅;10. 漏斗;11. 漏斗架;12. 滤纸;13 剪刀。
(三)试剂1. 酸性茚三酮溶液:将1.25g茚三酮溶于30ml冰醋酸和20ml6mol/L磷酸中,搅拌加热(70℃)溶解,贮于冰箱中;2. 3%磺基水杨酸:3g磺基水杨酸加蒸馏水溶解后定容至100ml;3. 冰醋酸;4. 甲苯。
三、实验步骤1. 标准曲线的绘制(1)在分析天平上精确称取25mg脯氨酸,倒入小烧杯内,用少量蒸馏水溶解,然后倒入250ml 容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,此标准液中每ml含脯氨酸100μg。
(2)系列脯氨酸浓度的配制取6个50ml容量瓶,分别盛入脯氨酸原液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5及3.0ml,用蒸馏水定容至刻度,摇匀,各瓶的脯氨酸浓度分别为1,2,3,4,5及6μg/ml。
(3)取6支试管,分别吸取2ml系列标准浓度的脯氨酸溶液及2ml冰醋酸和2ml酸性茚三酮溶液,每管在沸水浴中加热30min。
DNS法对食用菌发酵液淀粉酶活力的测定DNS法对食用菌发酵液淀粉酶活力的测定摘要选取广泛栽培的著名食用菌香菇、平菇和姬菇菌丝体为研究菌种,采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法检测供试食用菌的淀粉酶产生能力。
以2%可溶性淀粉为唯一碳源的查氏液体培养基诱导发酵,供试食用菌产生的淀粉酶活力在1.513~3.417 U/ mL,为食用菌工业发酵菌种的选育提供了参考依据和分析方法。
AbstractEnzyme energy of amylase from edible fungi was determinated based on 3,5-dinitryl-salicyle(DNS).Taking czapek as induction medtum in whith the only carbon source was 2% soluble starch,and amylase energy ranged from 1.513 to 3.417 U/mL among Lentinula edodes,Pleurotus ostreatus,Pleurotus cornucopiae,so as to put forward a reference and analysis method for the edible fungistrain selection.Key wordsedible fungi;fermention;DNS;amylase;activity determination经过人工驯化培养的食用真菌的菌丝体,可以栽培扭结成食药用价值很高的子实体。
近年来,人们发现食用真菌菌丝体也可以仿效青霉菌发酵,大规模生产食用菌多糖、抗生素、酶制剂等亟待研发的生物活性物质[1]。
食用菌发酵有赖于适宜的工艺条件与生物反应器,但更取决于具工业开发价值的生产菌种的生理性状,其中包括食用菌生产菌种对环境的适应性,归结为食用菌的代谢能力,能够利用廉价原料迅速生长并大量合成目的产物。
收稿日期:2004205221 3河南省医药学校参 考 文 献1 黎磊石,郑平,田劲,等1冬虫夏草防治肾毒性急性肾功能衰竭的实验研究1解放军医学杂志,1991,16(5):32312 潘晓勤,王晓燕,姜新蝤1肾小球系膜细胞培养及鉴定1南京大学学报,1995,15,222~22413 谈培毅,高蓉,高扬1凉山虫草和冬虫夏草化学成分比较1中草药,1985,16(5):414 M ullerW E ,Seibert G ,Beyer R ,et al.Effect of co rdycep s on nucleic acidm etabo li m in L 5178cells and on nucleic acid syn the sizing enzym e system s .Cancer R es ,1977,37:3824.5 王莜霞,吴兆龙1冬虫夏草对离体人肾小球系膜细胞增殖的影响1中国临床药学杂志,2001,10(1):24~2616 M iyazak i T ,O ikaw a N ,Yam ada H ,Studies onfangalpo lysaceharides.xx .galactom anan of co rdycep s sinersis .Chem Phar m Bull ,1977,25(12):33241 文章编号:100424337(2005)0320251202 中图分类号:S 56713+5 文献标识码:A・药学研究・人工冬虫夏草发酵培养基的优化研究王化河 李明奇3(河南大学药学院 开封475001)摘 要: 采用正交试验法对冬虫夏草子实体发酵培养基实施优化,使菌丝体干重收率达2%以上,化学主成分虫草酸含量不低于12%,腺苷含量不少于114%,且成本降低,发酵周期缩短。
关键词: 正交试验设计; 发酵培养基; 菌丝体干收率 天然冬虫夏草系名贵中草药,具有补肝益肾之功效。