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LPS诱导小鼠子宫内膜炎模型的建立李伟诗;付开强;吕晓珮;王雨;曹荣峰【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2015(051)009【摘要】为了建立小鼠子宫内膜炎模型,为子宫内膜炎的发病机理及其防治方法的研究提供合适的动物疾病模型,在小鼠子宫内灌注不同浓度的脂多糖(LPS),分别于灌注后12、24、36h和48 h收集子宫,观察子宫组织形态学变化,检测子宫组织髓过氧化物酶(MPO)和一氧化氮(NO)的含量.结果在灌注LPS后可见小鼠子宫上皮细胞脱落、水肿、充血、出血和炎性细胞浸润.灌注1.25、2.5 mg/mL和5mg/mL的LPS作用12 h,小鼠子宫组织MPO和NO含量极显著高于对照组(P＜0.01);灌注2.5 mg/mL和5 mg/mL的LPS作用24 h,小鼠子宫组织MPO和NO含量极显著高于对照组(P＜0.01).表明采用子宫灌注LPS法成功建立小鼠子宫内膜炎模型,且每只小鼠灌注20 μL浓度为2.5～5.0 mg/mL的LPS作用12～24 h为最佳的建模条件.【总页数】4页(P96-98,中插3)【作者】李伟诗;付开强;吕晓珮;王雨;曹荣峰【作者单位】青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109【正文语种】中文【中图分类】S852.3【相关文献】1.LPS／D-GalN 诱导小鼠急性肝损伤模型的建立 [J], 吴小红;郭彦;刘晨风;高同同;于虹;孙世惠;周育森2.LPS体外诱导牦牛子宫内膜炎症模型的建立 [J], 甘富斌; 扎西卓玛; 吴庆侠; 白玛次仁; 李家奎; 董海龙; 王昌健3.LPS体外诱导牦牛子宫内膜炎症模型的建立 [J], 甘富斌; 扎西卓玛; 吴庆侠; 白玛次仁; 李家奎; 董海龙; 王昌健4.LPS诱导小鼠骨质疏松症模型及其细胞分子机制研究进展 [J], 曹康军; 潘亚磊; 李引刚5.致病性大肠杆菌诱导的小鼠子宫内膜炎模型建立 [J], 孙凯鑫;王友元;石丽颖;李前庆;刘红羽;赵静;王军;吕文发因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
常见出血实验模型的建立方法出血性疾病是临床常见病和多发病。
选择、建立合适的出血实验模型是研究出血性疾病和止血药物的重要手段。
探索和研究出血模型的建立方法对于止血药物的筛选和药效学评价等都具有重要意义。
近年来,许多学者将致损因素和中西医病因结合起来,应用各自设计的动物模型对止血药物及其作用机制进行了大量的实验研究,其中涉及到脑、眼、肺、胃、胰腺和子宫等常见出血部位。
现将不同部位常见出血动物模型建立方法在国内的研究进展介绍如下。
1 脑出血模型建立稳定、可重复、贴近人类的脑出血(ICH)模型是实验及临床研究的关键。
目前常用的ICH模型主要有脑内注入自体血模型、胶原酶诱导ICH 模型、自发性ICH 模型和微气囊植入ICH 模型。
实验动物常选用猪和大鼠,有以下几点原因:①猪在解剖、组织、生理、营养代谢等方面与人类极为接近,脑容量较啮齿类动物大20~30倍;②大鼠脑血管解剖及生理接近人类。
相关实验资料如生理、生化、药理、形态等较多,便于比较研究,大鼠价廉,且易繁殖获得纯种动物,利于实验结果的一致性。
曾锦旗等用颅内直接注血法建立大鼠出血性中风中经络模型以及动脉粥样硬化性家兔出血性中风中经络模型。
结果出血性中风大鼠出现明显血肿,组织病理学改变与人类出血性中风中经络相似。
兔脑出血模型建立在动脉粥样硬化的基础上,更接近于临床。
戴如飞等通过立体定向术向大鼠脑内注入一定量的自体血建立脑出血模型,成功率高(93.3%),方法简便,与临床脑出血相似。
研究者认为该模型适合研究脑实质出血的自然过程、病理形态学特点及药物疗效观察。
于海洲等在实验研究中发现家兔在造影后经常死亡,或出现昏迷、偏瘫、血尿等并发症,对实验结果存在一定的影响。
为此改进了以往经颈总动脉或股动脉插管至主动脉弓的造影方法,参照临床应用的经肱动脉穿刺逆行椎基底动脉造影方法,采用22号套管针穿刺腋动脉法行基底动脉造影,较好地解决兔模型造影死亡率高的问题。
建立蛛网膜下腔出血模型一般采用两种方式:一是将自体动脉血直接注入蛛网膜下腔;二是刺破颈内动脉颅内段某一部位,使血液自动流入蛛网膜下腔。
薄型子宫内膜小鼠模型的建立及初步鉴定张引红;王春芳;陈朝阳;长锐虎;李瑞娇;李红霞【摘要】目的探讨宫腔注射95％乙醇制作薄型子宫内膜小鼠模型的可行性. 方法雌性C57BL/6J小鼠30只,性成熟未交配,动情期规律.随机分为实验组、对照组、空白对照组,每组10只.实验组宫腔注射95％乙醇并滞留2 min进行损伤,对照组宫腔注射生理盐水,注射量和滞留时间与实验组相同,空白组进行开腹缝合手术但不对宫腔进行任何处理.造模结束后第3个动情期处死小鼠,取子宫样本进行外观、子宫内膜厚度和HE染色等观察分析. 结果宫腔注射95％乙醇后小鼠子宫迅速脱水,发白,失去弹性.3个动情期后子宫粗细不均,局部有出血点,红白相间.子宫内膜厚度变薄.HE染色后发现实验组子宫内膜层明显变薄,宫腔隙增大;腺体数量减少,内膜上皮及腺上皮细胞扁平化,局部血管稀疏. 结论宫腔注射95％乙醇形成的薄型子宫模型符合预期,可用于薄型子宫形成机制、修复等研究,是一种较理想的薄型子宫内膜动物模型.%Objective To explore the feasibility of establishing a stable mouse thin endometrium model by injecting ethanol into the uterine cavity.Methods Thirty female unmated C57BL/6J mice with sexual maturity and regular estrus were chosen for this research.They were randomly divided into experimental group,control group and blank control group.In experimental group,95％ ethanol was injected to the uterine cavity for 2 min to damage the uterine cavity.In control group,saline was injected to the uterine cavity,while other factors were the same as experimental group.In blank group,their abdomens were opened and then sewed without liquid injecting to the uterine cavity.The mice were sacrificed in the third estrus period at the end of the model establishing.The appearance ofthe uterus and the thickness of endometrium were observed,and HE staining were used to observe the morphology.Results After the injection of 95％ ethanol,the uterus of mice became rapidly dehydrated,white,and lose elasticity.After three estruses,the uterus looked uneven,some blood points were found in part of the uterus,and the uterus was white alternating with red in experimental group.In addition,the endometrial thickness became thinner.HE staining showed that the endometrium in experimental group significantly became thinner and the uterine cavity was enlarged,the number of glands was decreased,the epithelial and glandular epithelial cells were flattened,and the partial blood vessels were sparse.Conclusion The thin uterine model established by the injection of 95％ ethanol into the uterine cavity is in accordance with the expectation.It could be used for the study on the mechanism of formation and repair of the thin uterus.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2017(048)005【总页数】4页(P432-435)【关键词】薄型子宫内膜;95％乙醇;动物模型;动情期;HE染色【作者】张引红;王春芳;陈朝阳;长锐虎;李瑞娇;李红霞【作者单位】山西医科大学实验动物中心,实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室,太原030001;山西医科大学实验动物中心,实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室,太原030001;山西医科大学实验动物中心,实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室,太原030001;山西医科大学实验动物中心,实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室,太原030001;山西省生殖科学研究所;山西省生殖科学研究所【正文语种】中文【中图分类】R711近年来,女性子宫内膜过薄现象逐年严重,已经成为体外受精-胚胎移植中周期取消和种植失败的重要原因之一[1]。
反复流产项目细胞相关试验设计一、反复流产相关背景反复性自然流产（RSA）是指自然流产连续发生3次或以上者，过去常称习惯性流产。
现多认为，连续2次或2次以上的自然流产也可称为反复性自然流产，在育龄妇女中的发病率约为1% ～5%。
RSA病因不明确并且可能是多因素的，一般公认的病因包括：免疫因素、遗传因素、内分泌因素、子宫解剖异常、感染因素、微量元素环境因素和心理及应激因素等。
目前认为与免疫因素相关表现为母体排斥胎儿，其中涉及到人类白细胞抗原、血型抗原滋养层细胞膜抗原、封闭抗体、抗生殖免疫抗体、细胞因子、胞间粘附分子、补体功能紊乱等多种因素。
在正常的妊娠过程中，胚胎与母体之间形成母-胎界面，母-胎界面主要由来自胚胎的滋养细胞及来自母体的蜕膜组织组成。
母-胎界面细胞类型主要包括来自胚胎的滋养细胞及来自母体的蜕膜基质细胞、蜕膜腺上皮细胞以及免疫细胞，其中蜕膜基质细胞（DSC）约占蜕膜细胞总数的75%，早孕期免疫活性细胞占蜕膜细胞总数的15%，其中70%以上的蜕膜免疫细胞为CD56bright CD16-NK细胞，其余为T细胞和巨噬细胞，几乎没有B细胞。
母体在妊娠早期形成母-胎界面免疫耐受微环境，使胎儿及其附属物不被母体排斥并可在子宫内发育成熟。
免疫耐受的维持主要通过免疫调节细胞如蜕膜基质细胞（DSC）、蜕膜NK细胞、Treg细胞、滋养细胞等。
早期妊娠（妊娠第一期）DSC由非孕子宫内膜成纤维细胞样前体细胞受雌、孕激素作用后分化而来，DSC具有广泛的生物学功能，除参与蜕膜营养供给外，尚能分泌活性激素如泌乳素、多种细胞因子和酶类，表达孕激素受体，调节胚泡着床和胚胎发育，并作为以一种免疫潜能细胞，参与抗原提呈和分泌细胞因子，而发挥重要的免疫调节作用。
成熟的DSC可产生大量的纤维连接蛋白（fibronectin）、硫酸乙酰肝素蛋白多糖（Haparan sulfate proteoglycan，HSP）、Ⅳ型胶原以及层粘连蛋白（laminin），形成妊娠期特殊的ECM （细胞外基质），以供滋养细胞在其中迁移、游走。
恒河猴（Macacamnlatta）血型的研究
宋怀燕;刘雅诚;高富愿;贾淑芹;薛成海
【期刊名称】《中国实验动物学杂志》
【年(卷),期】1995(5)2
【摘要】用人血清、单克隆抗体进行凝集抑制实验。
对１１３只实验猕猴的血型进行了测试研究）建立了检测方法。
结果表明：在恒河猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ）红细胞表面及血清中均未证明有类人凝集原和凝集素存在；但可根据其唾液中类人ＡＢＨ型物质的存在情况判定该动物的类人血型。
本实验检出的血型分布频率分别为：Ａ型１７．７０％；Ｂ型５２．２１％；ＡＢ型２０．３６％；Ｏ型９．７３％。
该结果与国外报道的血型分布频率有差异。
【总页数】5页(P98-102)
【关键词】恒河猴;血型;ABH型物质;单克隆抗体
【作者】宋怀燕;刘雅诚;高富愿;贾淑芹;薛成海
【作者单位】中国医学科学院实验动物研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S865.16;Q95-33
【相关文献】
1.恒河猴睾丸内激素调控的离体研究Ⅲ--雌激素对恒河猴睾丸Leydig细胞睾酮分泌的影响 [J], 王训立;李荣皓;庄临之;魏振年
2.恒河猴睾丸内激素调控的离体研究Ⅰ.恒河猴睾丸Leydig细胞的离体培养及激素
分泌的研究 [J], 王训立
3.恒河猴睾丸内激素调控的离体研究Ⅱ.恒河猴睾丸Sertoli细胞的离体培养及激素分泌的研究 [J], 王训立
4.恒河猴（Macaca mulatta）血型的研究 [J], 宋怀燕
5.恒河猴和食蟹猴ABO血型竞争性等位基因PCR(KASP)检测方法的建立 [J], 杨玲焰;王立鹏;荣荣
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基金项目：国家市场监督管理总局科技计划项目（编号：２０２１ＭＫ１４１）；浙江省市场监管生物安全重点实验室开放项目（编号：２０２３ＢＳ００１）作者简介：励炯（１９８３—），男，杭州市食品药品检验研究院副主任技师，硕士。
Ｅ ｍａｉｌ：ｊｏｋｅｌｅｅ２＠１２６．ｃｏｍ收稿日期：２０２３ ０３ ０６ 改回日期：２０２３ ０５ ０９犇犗犐：１０．１３６５２／犼．狊狆犼狓．１００３．５７８８．２０２２．８１１１３［文章编号］１００３ ５７８８（２０２３）０５ ００４３ ０６ＤＮＡ条形码技术在食用血制品掺杂成分鉴别中的应用ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＤＮＡｂａｒｃｏｄｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｉｎｔｈｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｄｕｌｔｅｒａｔｅｄｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｏｆｅｄｉｂｌｅｂｌｏｏｄｐｒｏｄｕｃｔｓ励 炯１犔犐犑犻狅狀犵１ 吴 琼１犠犝犙犻狅狀犵１ 江 海１犑犐犃犖犌犎犪犻１ 扈明洁１犎犝犕犻狀犵 犼犻犲１ 徐新怡２，３犡犝犡犻狀 狔犻２，３（１．杭州市食品药品检验研究院，浙江杭州 ３１００１７；２．浙江方圆检测集团股份有限公司，浙江杭州 ３１００１７；３．浙江省市场监管生物安全重点实验室，浙江杭州 ３１００１７）（１．犎犪狀犵狕犺狅狌犐狀狊狋犻狋狌狋犲犳狅狉犉狅狅犱犪狀犱犇狉狌犵犆狅狀狋狉狅犾，犎犪狀犵狕犺狅狌，犣犺犲犼犻犪狀犵３１００１７，犆犺犻狀犪；２．犣犺犲犼犻犪狀犵犉犪狀犵狔狌犪狀犜犲狊狋犌狉狅狌狆犆狅．，犔狋犱．，犎犪狀犵狕犺狅狌，犣犺犲犼犻犪狀犵３１００１７，犆犺犻狀犪；３．犓犲狔犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔狅犳犅犻狅狊犪犳犲狋狔犇犲狋犲犮狋犻狅狀犳狅狉犣犺犲犼犻犪狀犵犕犪狉犽犲狋犚犲犵狌犾犪狋犻狅狀，犎犪狀犵狕犺狅狌，犣犺犲犼犻犪狀犵３１００１７，犆犺犻狀犪）摘要：目的：建立一种可食用血制品中７种动物源成分（包括猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、兔）掺杂鉴别的分析方法。
方法：血制品经ＤＮＡ提取纯化及ＰＣＲ扩增后，将克隆测序结果提交至７种血制品的ＤＮＡ条形码本地数据库进行序列比对。
蛛网膜下腔出血动物模型的研究进展蛛网膜下腔出血（SAH）动物模型是动物实验研究的基础和起点，对研究SAH后的病理生理变化及指导临床治疗具有重要的意义[1]，SAH的动物模型目前主要有3种[2，3]：（1）刺破动脉，使血液聚集于血管周围。
（2）外科手术暴露动脉，抽取自体动脉血注其周围。
（3）抽取其他部位动脉血注入蛛网膜下腔，使其积聚于动脉周围。
现就SAH的不同动物模型的制备、优缺点及应用综述如下。
1 脑池注血法脑池注血法是一种较常用的模型[4]。
可以根据注血的次数，分为单次和二次或多次注血法，也可根据注入血的部位分为：枕大池注血法、经视神经孔基底池穿刺注血法及经额极蛛网膜下腔穿刺注血法等；据注血的方式可分为容量控制型和压力控制型。
1.1 按注血的次数分为单次注血法和二次或多次注血法1.1.1 单次注血法：经单次直接注血于蛛网膜下腔Willis环周围建立SAH动物模型。
制备方法（以大鼠为例）：大鼠麻醉后，在股根部摸到股动脉搏动，作一长约1 cm皮肤切口，钝性分离股动脉，从股动脉抽取少量新鲜血（约0.3 ml）备用，在左右耳根连线摸到枕外隆凸下约0.5 cm处有一凹陷即小脑延髓形成的夹角，在此处分开皮肤，找到环枕膜并穿刺，进针约1 mm左右有突破感，把血缓慢注入。
保持动物俯卧并头低尾高位置，让血液靠重力作用下进入基底池，不至于很快扩散。
模型制作成功的大鼠一般在注血后2～3天，脑基底部蛛网膜下腔可见到凝血块，以后血块逐渐被吸收[5]。
这种单次注血法建立的SAH动物模型可以较真实地模拟SAH的病理过程[6]，且操作简单，出血易于控制，但该模型建立后迟发性血管痉挛的发生率不恒定，目前在脑血管（CVS）研究中已被二次或多次注血法取代。
1.1.2 二次或多次注血法：为了克服单次注血法引起的血管痉挛不恒定的缺点而建立的一种较适合于蛛网膜下腔出血后迟发性血管痉挛研究的动物模型，制备方法是在第一次枕大池注血48～72小时后重复注血，引起更严重更为持久的脑血管痉挛[7]。
２００４年５月第１１卷第５期 中国中医药信息杂志 ・４０７・ 通窍活血汤对脑缺血大鼠的保护作用及机制研究 汪 宁，刘青云，彭代银，戴 敏，章小兵，胡海滨 （安徽中医学院，安徽 合肥 ２３００３８） 摘要：目的 研究通窍活血汤对脑缺血大鼠的保护作用及其机制。
方法 采用大鼠颈总动脉注入混合血栓诱导剂（ＡＤＰ、凝血酶、肾上腺素）所致脑血栓模型及脑血栓加双侧颈总动脉结扎所致脑缺血模型，观察通窍活血汤抗脑血栓作用、脑缺血后脑组织的含水量、脑指数及脑组织中的ＭＤＡ、ＳＯＤ含量的变化。
结果 通窍活血汤对混合血栓诱导剂所致脑血栓有抑制作用，并能降低脑缺血大鼠脑组织含水量、脑指数，降低ＭＤＡ的含量，提高ＳＯＤ的活性。
结论 通窍活血汤具有较显著的脑缺血保护作用，其作用机制初步认为与抗脑血栓形成、减轻脑水肿、抑制脂质过氧化反应、减轻自由基对脑组织损伤及改善脑缺血后脑组织的病理学损伤等环节有关。
关键词：通窍活血汤；脑血栓；脑缺血；作用机制 中图分类号：R289.11 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2004)05-0407-03 Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ Ｔｏｎｇｑｉａｏｈｕｏｘｕｔａｎｇ ｉｎ Ｒａｔｓ ｏｆ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｉｓｃｈｅｍｉａ WANG Ning, LIOU Qing-yun, PENG Dai-yin, et al (Anhui College of TCM, Hefei 230038, China) Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ To study the protective effects and mechanisms of Tongqiaohuoxuetang (TQHXT) in rats of cerebral ischemia. Ｍｅｔｈｏｄｓ Model of cerebral thrombosis was made by injecting a co-thrombus inducer, a mixture of ADP, thrombin and epinephrine into rat cartid artery to induce cerebral thrombral. Cerebral ischemia model was also established on the basis of cerebral thrombus and at same time ligaturing bilateral carotid arteries. These models were used to observethe effects and mechanisms of anti-cerebral ischemia of TQHXT. Ｒｅｓｕｌｔｓ TQHXT can inhibit苷等，对三七的药理活性成分的研究主要集中在三七皂苷和氨基酸［１２］。
2003年10月第13卷 第5期中国比较医学杂志CHINESE JOURNA L OF COMPARATIVE ME DICINEOctober,2003V ol.13 N o.5技术方法恒河猴子宫内膜炎性出血模型的建立尤昭玲1,马红霞2,陈俊明2,王若光1,梁欣韫1,刘文娥1 (11湖南中医学院中西医结合临床教研室,长沙 410007;21广州中医药大学) 【摘要】 目的 建立恒河猴子宫内膜炎性出血模型。
方法 选择月经正常的雌性育龄恒河猴7只,随机分为实验组4只和对照组3只。
实验组在月经第三天,用致病性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、厌氧消化链球菌混合感染恒河猴的子宫内膜,宫腔细菌接种后第5天进行宫颈分泌物的细菌培养鉴定,继而连续观察三个月经周期经量、经期等的变化,于第四个月经周期分泌晚期取子宫内膜进行组织病理学检测。
对照组未进行宫腔细菌接种,其经量、经期的观察及内膜取材时间同实验组。
结果 ①实验组宫颈分泌物细菌培养鉴定证实三种细菌为本实验宫腔接种的细菌。
②实验组与对照组比较,月经量明显增多、经期明显延长。
③光镜观察显示:实验组为慢性子宫内膜炎症改变,表现为内膜上皮坏死,间质炎性细胞增多明显,以中性粒细胞为主,间质出血严重,表浅微血管、静脉窦扩张明显,螺旋动脉扩张较明显,特别是在扩张的、大量炎性分泌物的腺体周围。
其内皮细胞及平滑肌细胞变性严重、结构模糊、界限不清,平滑肌细胞排列紊乱。
对照组为正常行经前期图像,螺旋动脉强烈收缩,内皮细胞无变性。
结论 通过月经情况的改变及内膜形态学观察评价该模型是成功的。
【关键词】 恒河猴;子宫出血;子宫内膜炎【中图分类号】Q952336;Q49215 【文献标识码】A 【文章编号】167127856(2003)0520310203Establishment of Animal Model with Metrorrhagia I nduced byE ndometritis in Experimental Rhesus monkeyY OU Zhao2ling1,M A H ong2xia2,CHE N Jun2ming2,W ANG Ruo2guang1,LI ANG X in2yun1,LI U Wen2e1(1.C ombination teaching department of T C M and western medicine,Hunan Chinese medical college,Changsha410007,China;2.G uang zhou T radition Chinese Medicine University)【Abstract】 Objective T o establish metrorrhagia animal m odel induced by endometritis in experimental Rhesus monkey. Methods Seven normal menorrhea adult Rhesus monkeys were choosed and divided into experimental group and control group at random.Escherichia coli,staphylococcus aureus and peptostreptococcus were inoculated into uterine cavity of experimental group in the third day of menstruation.Then the cervical secretions were cultured and evaluated in the fifth day of inoculation and the changes of menstrual am ount and duration were observed in three continuous menstrual cycle.The sample of endometrium was ob2 tained in late secretory phase of the fourth menstrual cycle for examination under microscope.Endometrium of C ontrol group was not in fected,the other procedures were the same as experimental group.R esults1.The evaluation of cervical secretion culture and con firmed that the three kinds of bacteria were inoculants in the experimental group.2.C ompared with control group,experimental group was m ore excessive in menstrual am ount and much longer in duration.3.C ompared with control group,endometrium of ex2 perimental group showed the change of chronic in flammation,in which the degeneration of spiral arteriolar wall was m ore severe and dilatation of lumen m ore obvious.Conclusion the m odel comes true by evaluation of the menstrual change and endometrium m orphology observation.【K ey w ords】 Macaca malatta;Uterine hem orrhage;Endometritis[基金项目]国家自然科学基金(30271633);湖南省社会发展重大项目(01SSY1002-4);湖南省教重点项目资助(01A012)[作者介绍]尤昭玲,女(1949),教授,从事妇产科血证防治机理研究。
炎症因素所致的子宫异常出血是中西医妇产科临床常见病症,如急慢性盆腔炎、子宫内膜炎、宫内节育器或药物或人工流产后出血、产后出血及恶露不绝等均与炎症有直接或较密切的关系。
迄今有关子宫内膜出血、止血、修复的研究尚不深入,而炎症所致子宫异常出血及炎症、止血、修复的有关机理研究也报道较少。
西医对异常子宫出血治疗是治标难治本,且有一定的副作用,传统中医药对妇产科“血证”治疗效果显著、颇具特色。
化瘀止血法在妇产科“血证”中尤为常用,但其“化瘀止血”的作用途径仍不清楚。
因此建立炎性子宫内膜异常出血模型成了解决以上问题的一个关键。
鉴于国内外尚未见有关这方面的报道,作者以月经正常的雌性育龄恒河猴为研究对象,通过直接宫腔细菌接种的方法,建立炎性子宫内膜异常出血的动物模型,并对该模型进行了月经情况及内膜组织病理学的观察。
1 材料和方法111 实验动物及分组 选择生殖季节期月经正常的雌性育龄恒河猴7只,体重(515±118)kg( x±s),由军事医学科学院实验动物中心提供,动物质量合格证号为99001。
单笼(80cm×90cm×100cm)饲养,猴舍通风良好,自然光照,每天喂军事医学科学院研制的标准颗粒饲料和时令瓜果,自由进水。
将上述恒河猴用随机数字表法随机分为对照组3只和实验组4只。
112 细菌的准备 致病性大肠埃希菌(ATCC44136)、金黄色葡萄球菌(ATCC26001)均购买于湖南省防疫站。
消化链球菌为临床分离菌株,由湘雅医院细菌培养室提供。
上述三种细菌经活化、增菌,用麦氏比浊法比浊,配成浓度均为109C UF/ ml,分别取011、011、013ml混合。
113 实验组恒河猴宫腔细菌接种的方法 在月经第三天,用眠乃宁注射液(0102ml/kg)肌注全麻后置于手术台上,常规铺巾消毒后行宫腔细菌接种术,先用大号卵圆钳窥开阴道,暴露宫颈,宫颈钳钳夹宫颈下唇将子宫向外牵拉,然后用腰穿针绕过宫颈突起到达宫颈内口,将准备好的混合菌液015ml推注入宫腔。
114 细菌鉴定 于宫腔细菌接种后第5天取宫颈分泌物做镜检、细菌培养,并分别分离出消化链球菌、金黄色葡萄球菌及致病型大肠埃希菌。
再分别接种于培养基中,经培养后,做菌株鉴定。
115 检测性周期的方法7 性激素内分泌检测和观察性皮肤的方法了解性周期时相。
116 月经血标本的采集11611 受试恒河猴统一使用由本实验室自制的重量相同且经高温高压消毒的长条纱布,宫腔细菌接种后连续三个月,在月经期将纱布塞入阴道,一天两次,取出的纱布立即由专人精确称重并记录。
11612 按1986年WH O推荐的出血模式分析方法的数据收集方式,填写月经卡,记录出血天数1,3。
11613 月经量计算用称重法,事先称一条纱布的重量,月经干净后称重量减去纱布条数×每条纱布的重量,所得值即出血量,换算系数参考有关文献,并经本实验回收证实,以1g=0195ml换算成毫升数2,3。
117 子宫内膜的采集 实验组和对照组均在第四个月经周期(从采集经血标本的第一个月经周期算起)的分泌晚期取子宫内膜标本。
因恒河猴的子宫颈结构呈Z形,颈管内有两个突起,故将刮匙从阴道进入子宫颈操作较困难3。
本实验经腹部行部分子宫切除术,沿冠状面切开离体子宫,用眼科剪分离子宫前后壁内膜2条,立即放入10%甲醛固定。
118 组织病理学 将分泌晚期相的子宫内膜经10%甲醛固定、石蜡包埋、连续切片、HE染色、光镜观察。
光镜观察内容:表面上皮是否完整、炎性反应的轻重、螺旋动脉内皮细胞、平滑肌细胞和管壁胶原纤维的变化。
2 结果211 菌株鉴定结果21111 金葡菌的鉴定 镜检为革兰阳性球菌,无芽胞、荚膜排列不规则,堆集似葡萄状。
21112 大肠埃希菌的鉴定 ①镜检为革兰阴性无芽胞小杆菌。
②能发酵乳糖并产酸产气。
③I M Vic 试验为++--或-+--。
21113 消化链球菌的鉴定 ①镜检为革兰阳性球菌,成双、成对排列,无芽胞。
②过氧化酶试验阴性。
③硝酸盐还原试验阴性。
④氧化2发酵葡萄糖试验:发酵(F)。
⑤厌氧。
212 月经情况的观察结果 本研究结果显示,实验组与对照组比较,月经量明显增多、经期明显延长,差异有极显著意义(见表1)。
