毛细管电泳芯片的临床应用现状
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电泳技术的临床应用-完整版电泳技术的临床应用简介电泳技术是一种用电场对带电粒子进行排序的技术,包括凝胶电泳、毛细管电泳等多种方法。
这些技术在临床应用中具有重要意义,可以用于基因检测、蛋白质分析、药物筛选等领域。
章节一、凝胶电泳在临床基因检测中的应用1.1 基本原理凝胶电泳是将DNA分子或RNA分子按照大小和电荷在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶中进行排序的方法。
利用电荷作用力和凝胶孔径可以实现DNA分子的分离和检测。
1.2 检测方法通过对DNA分子进行各种特定的处理,如限制性内切酶切割、PCR扩增等,然后进行凝胶电泳,可以检测基因变异、突变等。
1.3 实际应用凝胶电泳在临床基因检测中应用广泛,可以用于遗传病的诊断、个体基因分型等。
章节二、毛细管电泳在临床蛋白质分析中的应用2.1 基本原理毛细管电泳是利用毛细管的小孔径和电场作用力对蛋白质进行分离和分析的方法。
根据蛋白质的电荷和大小的不同,可以实现蛋白质的分离。
2.2 分析方法通过对蛋白质进行化学修饰和标记,然后进行毛细管电泳分析,可以获得蛋白质的分子量、等电点等信息。
2.3 实际应用毛细管电泳在临床蛋白质分析中被广泛运用,可以用于疾病标志物的检测、药物代谢产物的分析等。
章节三、电泳技术在药物筛选中的应用3.1 基本原理电泳技术在药物筛选中的应用主要是通过分析化合物的电荷、极性等性质,来确定药物的分子特征。
3.2 筛选方法通过对化合物进行毛细管电泳分析,可以确定其在电场下的迁移率,从而进一步进行相关的筛选实验。
3.3 实际应用电泳技术在药物筛选中具有广泛的应用前景,可以用于药物新品种的开发和质量控制。
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法律名词及注释:1、限制性内切酶:指一类能够识别DNA的特定序列并在该序列的特定位点上切割DNA分子的酶。
2、PCR扩增:聚合酶链式反应,是一种体外生物分子复制技术,通过循环反应过程,可以扩增出特定的DNA片断。
3、药物代谢产物:指药物在人体内发生代谢反应后形成的新的化学物质。
电泳技术在医学中的应用电泳技术在医学中的应用电泳技术在医学中的应用自从1946年瑞典物理化学家Tiselius教授研制的第一台商品化移界电泳系统问世以来,在近半个多世纪的时间里,电泳技术发展极其迅速。
基于电泳原理的各种仪器设备不断问世,特别是20世纪80年代后, 许多自动化电泳仪器相继为临床实验室所采用,电泳技术已成为基础医学和临床医学研究的重要工具之一。
目前,该技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、有机物、无机离子等的分离和鉴定,甚至病毒与细胞的研究。
特别是电泳所用支持介质由流动相改为固相支持物后,各种各样的电泳分析装置不断推出以适应不同教学、临床和科研工作的需要。
当今,电泳技术与质谱技术联用在后基因组学研究中,正发挥者着巨大的作用,为临床检验的发展带来新的生机与活力。
一、电泳分析仪电泳分析仪可分为两大类:临床实验室常规类,如全自动荧光/可见光双系统电泳仪、全自动醋纤膜电泳仪、全自动琼脂糖电泳仪和全自动琼脂糖电泳仪;科研为主兼做临床样本类,如双向电泳及双向电泳2液相色谱2质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳2质谱联用、高效毛细管芯片电泳、DNA测序系统。
1. 全自动荧光/可见光双系统电泳仪:具有荧光/可见光双系统,在使用荧光试剂项目如肌酸激酶(CK) 、乳酸脱氢酶(LD)同工酶时为全自动。
只需将样品、试剂、琼脂糖凝胶电泳胶片放好后,操作人员可离机完成试验并得到结果,此为全自动电泳仪。
但是使用可见光项目如蛋白电泳,中途人员需返回,将电泳胶片由电泳槽放入染色系统中才可完成试验。
而最大优点是荧光系统全自动且灵敏度高,准确度高并且采用高压、低温系统,只需要20 min即可完成电泳分析,速度非常快。
2. 全自动醋纤膜电泳仪:为可见光单系统,使用醋纤膜电泳片。
自动化程度高,只需将样品、试剂、电泳片放好,人员可离机完成试验得到结果。
但是因为使用醋纤膜致使灵敏度低,无法分析尿蛋白/脑脊液蛋白,对同工酶分析效果也不理想,多半实验室只用于血清蛋白电泳分析。
毛细管电泳仪核酸分离分析毛细管电泳仪核酸分离分析是一种广泛应用于生物技术和生物医学研究领域的分析方法。
它通过将DNA、RNA或其他核酸样品注入到毛细管中,利用电场的作用使核酸在毛细管内迁移,在电泳分离过程中根据核酸分子的大小、电荷和构象差异,实现对核酸样品的分离和定量分析。
本文将从毛细管电泳仪的原理、实验操作和应用领域三个方面展开介绍。
一、毛细管电泳仪的原理毛细管电泳仪是以电泳为基础的仪器设备,主要由高压电源、注射器、分离柱、检测器和数据处理系统等组成。
核酸样品首先通过注射器被导入到毛细管内,然后通过电场力将核酸分子在毛细管内迁移。
毛细管内的分离柱起到了筛选和分离核酸的作用,不同长度或不同带电性质的核酸分子将被分离开来。
分离完成后,检测器会检测样品,根据检测信号进行数据处理和分析。
二、毛细管电泳仪的实验操作1. 样品制备:将待测核酸样品提取并纯化,测定浓度和纯度。
2. 缓冲液的配制:根据实验需要选择合适的缓冲液,调节缓冲液的pH值和离子强度,以优化分离效果。
3. 毛细管的选择:根据样品特性和分离目标,选择合适的毛细管材料、内径和长度。
4. 样品注入:使用专用注射器将核酸样品注入到毛细管中。
5. 分离条件设置:根据样品的性质和实验需要,设置适当的分离电压、电流和温度等条件。
6. 分析与结果解读:根据检测器所得到的信号,进行数据处理和结果解读。
三、毛细管电泳仪的应用领域毛细管电泳仪核酸分离分析广泛应用于生命科学研究、医药领域以及法医学等领域。
具体应用包括但不限于以下几个方面:1. 生物医学研究:在基因工程、遗传学、分子生物学等领域中,毛细管电泳仪被广泛应用于核酸样品的分离、纯化和测序等方面。
2. 临床诊断:毛细管电泳仪可用于检测和分析人体内的基因突变、染色体异常等,对临床疾病的诊断、预测和治疗具有重要意义。
3. 食品安全监测:毛细管电泳仪可以对食品中的转基因成分、有害物质和添加剂等进行快速准确的分析,为食品安全监测提供科学依据。
说明毛细管电泳特点及应用
毛细管电泳是一种高效液相色谱技术,其基本原理是利用电场将带电粒子在毛细管中的移动速率和荷电量的差异进行分离和富集。
毛细管电泳具有高分离效率、快速分离、小量样品、自动化程度高等特点,已经成为了化学、生物、环境学等领域的一个重要分析工具。
其主要应用领域和特点如下:
1.分离生化分子
毛细管电泳可以用于分离和富集DNA、RNA、蛋白质、糖类和小分子有机物等生物分子。
这些生物分子在酸碱性、水解、氧化还原等条件下有不同的化学性质和电荷性质,可以被毛细管电泳技术精确分离和定量。
例如在DNA分离和定量方面,毛细管电泳已经成为PCR扩增产物检测、基因测序、DNA指纹鉴定等分子生物学技术中的重要手段。
2.分析环境污染物
毛细管电泳可以用于环境监测和食品安全检测等领域,可以对水、空气、土壤和食品中的有机和无机污染物进行快速准确定量分析。
例如利用毛细管电泳技术可以分析环境中的氨、硝酸盐、荧光增白剂、PESTICIDE 等有害物质含量,以及酒类中的苯甲酸、乙酸等有害物质。
3.分析药品和代谢产物
毛细管电泳可以快速、灵敏地分离和鉴定药品和代谢产物,具有药动学和毒理学研究的重要意义。
毛细管电泳技术节省反应时间,减少实验操作时间,可对液-液、液-固、固-液等反应进行分离和分析,得到精确的数据和结果。
如利用毛细管电泳技术,可以分析身体内的有机酸、氨基酸、代谢产物等物质。
总之,毛细管电泳技术在化学分析和生物分析中均有广泛应用,且已成为学术研究和工业生产的一种重要分离分析手段。
毛细管电泳分析法在药物分析中的应用摘要毛细管电泳技术又称为高效毛细管电泳。
作为一种新的分离分析技术,以其高效,快速,低实验消耗等优点,受到了广泛重视,而其在药物分析中的应用得到迅速的发展。
在原料分析中的中药材鉴别和质量控制,中药有效成分的分离与测定和中成药制剂。
而在西药复方制剂中,广泛用于解热镇痛药、抗组胺药、消炎药和止咳药,降压药和抗生素、合成抗菌剂及生物技术产品等药物和制剂的分离,鉴定和分析及其对手性分子的拆分,基于手性主—客体络合的毛细管电泳手性拆分,基于手性胶束增溶的毛细管电泳手性拆分和基于蛋白质亲和的毛细管电泳手性拆分,还有临床用药中,都显示了其高效,快速的特点。
毛细管电泳技术正广泛用于药物分析的各个相关的部分中,正越来越受到人们的重视。
AbstractCapillary electrophoresis technology called high performance capillary electrophoresis. As a new kind of separation and analysis technology, with its rapid, efficient, low consumption advantages of experiment was Received widely attention, and its application in pharmaceutical analysis is rapid development. The analysis of Chinese herbal medicine in raw material identification and quality control, the TCM separation and determination and proprietary Chinese medicine preparations. But in western medicine compound preparations, widely used in antipyretic analgesics, the antihistamine drugs, expectorant and cough, antihypertensives and antibiotics, synthetic antibacterial agent and biotechnology product such drugs and preparation of separation, appraisal and analysis and the opponent of chiral molecule split, based on chiral Lord - object complexation of capillary electrophoresis chiral resolution, based on chiral dissociation of increase soluble adopted capillary electrophoresis chiral separation and based on protein affinitive capillary electrophoresis chiral resolution, and clinical medicine, shows its high efficiency, fast characteristic. Capillary electrophoresis technology is widely used in pharmaceutical analysis of each relevant sections, are becoming more and more attention by people.关键词:毛细管电泳技术药物分析应用Keywords: Capillary electrophoresis drug analysis application前言毛细管电泳(CE) 又称为高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),它以弹性石英毛细血管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分的淌度和分配行为上的差别进行分离和分析。
2011-12-31 毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用分析化学毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用摘要:毛细管电泳技术(CE)作为现今一种主要的分析技术,凭借其高效、灵敏、快速、设备简单、广泛适用性等特点,广泛应用于各个领域。
本文简要概述了CE技术的原理及特点,并简述了它在环境分析、食品分析、药物分析、生物大分子分析等各个领域的应用。
关键词:毛细管电泳;分析;应用1.毛细管电泳技术简介1.1 产生与发展毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)是一种在电泳技术的基础上发展的一种现代分离技术。
电泳技术作为一种分离技术已有近百年历史,1937 年A.Tiselius首先提出:传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热。
1967年,Hjerten最先提出了毛细管电泳的雏形,即在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳。
但他并没有完全克服传统电泳的弊端。
直至1981年Jorgenson和Lukacs提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 这时现代毛细管电泳技术真正产生。
1984 年Terabe将胶束引入毛细管电泳,开创了毛细管电泳的重要分支:胶束电动毛细管色谱(MEKC)。
1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。
同年,Cohen 发表了毛细管凝胶电泳的工作。
近年来,将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中,又发展了电色谱,扩大了电泳的应用范围。
毛细管电泳技术兼有高压电泳及高效液相色谱等优点,其突出特点是:(1)所需样品量少、仪器简单、操作简便。
(2)分析速度快,分离效率高,分辨率高,灵敏度高。
(3)操作模式多,开发分析方法容易。
(4)实验成本低,消耗少。
(5)应用范围极广。
自1988年出现了第一批毛细管电泳商品仪器,短短几年内, 由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶,抗体)、核苷酸乃至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求,得到了迅速的发展。
毛细管电泳仪1.1毛细管电泳仪国内外发展现状1.1.1国内发展现状近几年,国产毛细管电泳仪无论从外部造型,光路系统,测量准确性上都有了长足的进步。
国产毛细管电泳仪在化学物质分离的测定方法,测定时间,样品含量,一体化结构,人机界面等方面,测定稳定性方面还有着很大的发展空间。
1.1.2国外毛细管电泳仪的发展现状欧美一些发达国家,已经在便携操作性,稳定性能上有着新的突破,多项组分的测量已经摆脱传统高效液相色谱法,或是在传统高效液相色谱基础上进行技术上的突破并有很多自己的独创专利。
1.1.2.1 PACE MDQ毛细管电泳仪美国PACE MDQ毛细管电泳仪,这款毛细管电泳仪仪可测量核酸/核苷酸、蛋白质/多肽、糖类/糖蛋白分析、PTA、无机盐酸等的分析。
PACE MDQ毛细管电泳仪的维护PACE MDQ毛细管电泳仪提供了人性化的操作流程,最大程度上减轻了维护工作,但由于样品质量参差不齐,需要定时对其进行维护,防止仪器损坏。
笔者从事此仪器日常维护及故障处理,针对某项目PTA检测,基本维护方法如下。
2.1冷却液添加PACE MDQ毛细管电泳仪在运行过程中冷却液存在损耗,冷却液不能完全填充毛细管柱外壁,影响分离效果,需要定期添加冷却液。
①将制冷剂接头添加接到制冷剂加注口。
②直到制冷剂视窗液位到3/4位置。
③移除注射器并关闭制冷剂添加门。
2.2更换电极PACE MDQ毛细管电泳仪再使用过程,电极需要深入到电解液试剂瓶中。
再穿透瓶盖过程中,电极容易折弯,当电极发生折弯时,电极需要更换,更换方法如下:①利用直接控制,托盘移动到加样位置。
②移除接口模块的毛细管卡盒。
③移除弹片盖和弹簧夹。
④捏住电极前方的弹片,将其移除。
⑤用一面镜子观察电极孔的位置,拆开尼龙一字螺丝,然后下拉移除电极。
⑥更换新的电极,用镜子观察电极位置。
⑦回装碳片及弹簧夹,弹片盖,毛细管卡盒。
⑧降低插入杆并拧紧蝶行螺丝,关上卡盒盖门。
芯片毛细管电泳黎俊杰广东药学院药科学院药物分析09 学号:0903504104摘要:芯片毛细管电泳(ICEC)是一种新型的微全分析系统,具有它、可以在几分钟甚至更短的时间内进行上百个样品的同时分析,得到极高的单位信息量的优点。
文中介绍了芯片毛细管电泳的材料、结构、样品处理和衍生、检测手段、主要应用等方面的研究发展,并展望于其发展前景。
关键词:芯片毛细管电泳(IECE)芯片前景最近几年,以毛细管电泳为核心技术、以芯片为操作平台的芯片毛细管电泳技术迅速崛起,并成为微全化学分析系统的主流技术,有可能在化学分析领域引起新一轮变革。
所谓芯片毛细管电泳技术就是将样品处理、进样、分离、检测均集成在一块几平方厘米的芯片上的一项微型实验室技术,又称集成毛细管电泳芯片。
它可以在几分钟甚至更短的时间内进行上百个样品的同时分析,这种快速分析的能力及分离泳道的阵列化,可以得到极高的单位信息量。
芯片通常只消耗pL 级的样品,并且可以在线实现样品的予处理及分析全过程,所有这些特点使得芯片毛细管电泳在新一代毛细管电泳仪的研制中,成为一个极为活跃的热点。
1、芯片的结构毛细管电泳芯片狭缝的深度一般为10~40μm ,宽度为60~200μm21 。
在最近几年中,毛细管电泳芯片的结构设计已取得了显著的进展。
最初的毛细管电泳芯片制作在表面积比较大的基片(14. 8 ×3. 9cm) 上,只有一条微通道。
几年后出现了包括两条交叉通道及4 个缓冲池(分别为样品池、废液池、阳极和阴极池) 的芯片。
Jacobson 等通过将分离通道制作成弯曲的蛇形来增加分离有效距离。
为了进一步增加分离距离,Manz 等设计出了同步循环毛细管电泳芯片:通道为环行,每一边均带有一对电极,转换电极间的电压就可使分离物沿着环行迁移,从而延长分离距离。
在芯片上制作微反应室可以在线实现样品予处理及柱后衍生为了提高单位信息量, 又产生了阵列毛细管电泳芯片。
带有多条分离通道的毛细管电泳芯具有其独特的设计要求,通常会受到底片的大小及检测等限制。
毛细管电泳及其应用摘要:毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE),是近二十年来发展最为迅速的新型液相分离分析技术之一。
CE实际上包含电泳、色谱及其相互交叉的内容,是继高效液相色谱之后的又一重大进展,具有分离效率高、简单、经济、快速和微量、自动化程度高等优点。
毛细管电泳这些特点使其成为一种极为有效的分离技术,目前已是生命科学及其它学科中一种常用的分析手段,已广泛应用于蛋白质、氨基酸、无机离子、有机化合物等的分离分析。
关键词:毛细管电泳,分离效率高,生命科学引言毛细管电泳是在传统电泳技术的基础上逐步发展起来的。
电泳技术的出现可以追溯到100多年前[1]。
1807-1809年,俄国物理学家F.F.Reuss首次发现黏土颗粒的电迁移现象,并开始研究带电粒子在电场中的电迁移行为,测定它们的迁移速度。
起初电泳只是作为一种物理化学现象来研究。
电泳真正意义上进入分析化学被视为一种重要意义的技术,是在瑞士化学家Tiselius[2]公布了移动界面电泳技术的细节之后。
他首先将电泳现象成功的应用于人血清的分离,获得了多种血清蛋白,他制成第一台电泳仪,并进行自由溶液电泳。
Tisedius对电泳技术的发展和应用所做的巨大贡献,使他获得了1948年诺贝尔化学奖。
但是传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热。
1967年Hjerten[3]最先使用慢速旋转的内径为3 mm的石英玻璃管进行自由溶波电泳,以UV进行检测,成功地分离了蛋白质、多肽、无机离子、有机离子等,Hjerten最早证明可以把高电场用于细内径的毛细管电泳,但他没有完全克服传统电泳的弊端。
1974年Virtanen提出使用细毛细管提高分离效率,阐明电渗流就像泵一样可以驱动液体流过毛细管,并说明了使用更细内径的毛细管做毛细管电泳的特点。
1979年Everaerts和Mikkers[4]使用内径为200μm聚四氟乙烯毛细管,提高了毛细管的分离效率,成功分离了16种有机酸。