免疫调节细胞
——滤泡辅助性T细胞(Tfh)的研究进展关键词：白细胞介素21；滤泡辅助T细胞;CXCR5;自身免疫疾病
摘要：如果Tfh细胞对自身反应性B细胞产生过强的辅助信号，使B细胞过度活化，可能引起抗体介导的自身免疫性疾病。与Tfh细胞功能相关的某些分子如CXCR5、CD40、ICOS等基因缺陷时，少量的CD4阳性细胞聚集在B细胞淋巴滤泡周围，导致GC形成障碍，影响天然和记忆性b细胞的发育，从而使免疫蛋白类别转换功能障碍你，机体便发生体液免疫缺陷。一些肿瘤患者例如免疫T细胞淋巴瘤、原发性皮肤CD4阳性多形性小、中T细胞淋巴瘤、滤泡树突状细胞肉瘤等，Tfh细胞通常都显性表达(Bcl-6、CXCR5、PD-1)。
CD4阳性T淋巴细胞亚群的分析和功能研究使今年免疫学研究的一个热点。由于表达的趋化因子、转录因子及分泌细胞因子的不同，CD4阳性T细胞被分为5类亚群：Th1、Th2、Th17、调节性T细胞及滤泡辅助T细胞（T follicular helper cells,Tfh）。Tfh是近年来新发现的真正意义上的辅助B细胞功能的CD4阳性T细胞亚群。现就Tfh细胞的分化最新研究进展及其在免疫疾病中发挥的作用进行综述。
Tfh细胞的功能与其表达的各种趋化因子、细胞因子、转录因子以及相应因子受体是密不可分的：CXCL13/BCA-1相互作用，使Tfh细胞被募集到淋巴细胞，参与B细胞的免疫应答；表达于Tfh细胞表面的CD40L和诱导性协同刺激分子分别与B细胞表面的CD40和配体相作用，为B细胞活化提供条件；Tfh细胞分泌的白细胞介素21，可刺激B细胞的增值、分化及分类转换。
1. 滤泡性辅助性T细胞的发现、定位及功能
尽管CD4阳性T细胞在B细胞体液免疫应答中起着重要的作用，但人们对于T细胞辅助B细胞体液免疫应答过程中的细胞和分子机制所知甚少。以往，人们认为Th2细胞通过分泌IL-4刺激B细胞增值和Ig类别转换，上调B细胞CD40和MHC II类分子的表达，是辅助B 细胞主要的T细胞亚群。目前已经明确，Tfh细胞是辅助B细胞的T细胞亚群之一，而Thl 和Th2所分泌的细胞因子在B细胞活化和Ig类别转化中只起到调节的作用。
近来研究发现在健康人外周血中存在一类CD4、CXCR5双阳性的T细胞亚群，占CD4阳性T淋巴细胞百分比为(11．9±0．38)％，平均荧光强度(MFl)值为25．78±0．72，低于B 细胞膜表面CXCR5的表达水平(MFI值为99．6±8．1)。由于这类细胞持续表达CXCR5，在CXCRl3的趋化下迁移到B细胞滤泡并同时高表达ICOS、Bcl-6和PD-l，分泌IL-21，执行辅助B细胞的功能，因此被称为滤泡性辅助性T细胞。Tfh细胞可选择性地表达Bcl-6来诱导自身相关基因的表达，且具有抑制其他Th细胞分化的功能。Tfh细胞的表型和基因型与其他CD4阳性Th细胞哑群(Th1、Th2)不同，包括趋化因子受体的表达(如CXCR5)、定位和迁移(Tfh细胞存在于B细胞滤泡)及其辅助B细胞的功能等。
2. Tfh细胞的相关分子标记物
Tth细胞的表面标记物有CXCR5、PD-1、ICOS、IL-21、Bcl-6等，它们对Tth细胞的迁移、定位、分化、发育起重要的辅助作用。这些标记物的异常表达可能成为诊断与治疗某些临床疾病的靶位点。
2.1 GC在活化的淋巴组织(例如扁桃腺)中，将近50％的CD4阳性T细胞表达CXCR5，并定位于GC。CXCR5的表达往往发生在细胞增殖和分化之前，初始T细胞和完全极化的T 细胞(如Thl和Th2)不表达CXCR5，活化后的T细胞可一过性表达CXCR5，且Tfh细胞与B 细胞的相互作用有利于CXCR5的表达。Tfh细胞辅助B细胞的作用发生在两个阶段，一是外周淋巴器官T细胞区，二是在GC中。CXCR5作为滤泡归巢趋化因子CXCR13的特异性受体，使Th细胞在CXCR13的趋化下，从外周淋巴器官T细胞区迁移到淋巴滤泡中心，并与B细胞定位和相互作用。因此，CXCR5成为Tfh细胞迁移，定位的重要转运分子，也是Tfh细胞表面的表面标志物。如果CXCR5缺陷，则会导致血清IgG抗体免疫缺陷。
2.2 PD-1 PD-1是在t细胞的活化中被单克隆抗体NAT-105表达的抑制性分子，是CD28家族的一员，其作为一种免疫抑制性受体，与其配体相互作用传递抑制性（阴性）信号，在抑制B细胞增殖、分化、Ig类型转换，建立和维持外周自身耐受中起重要作用。PD-1可抑制TCR介导的淋巴细胞增殖和细胞因子的产生，减弱ICOS、IL-4和IL-21的作用。在Tfh细胞中，PD-1作为一种高表达膜表面受体标记物，主要功能是协助B细胞促进GC的形成。
2.3 ICOS ICOS基因1999年克隆成功，2004年命名为CD278. ICOS作为诱导性协同刺激分子，是CD28家族的一员，为T细胞活化所诱导。在Tfh细胞中高表达的ICOS与B 细胞上的ICOS配体相互作用，传递协同刺激（阳性）信号，不仅对Tfh细胞的产生和存活，而且对IL-2的表达、GC和记忆B细胞的形成都发挥重要的作用。若ICOS基因突变，Tfh 细胞生成缺陷，导致体液免疫功能下降。
2.4 IL-21 IL-21是由Tfh细胞产生并对Tfh细胞的存活和b细胞的增殖分化起关键作用的细胞因子。IL-21通过以下三个方面实现对Tfh细胞的调节作用：1，诱导Tfh细胞分化，若缺陷，辅助性滤泡既不能发育也不能存活，导致Tfh细胞发育障碍，数量锐减；2，IL-21通过自分泌形式促进Tfh细胞ICOS表面CXCR5的表达，使其向淋巴小结和GC迁移，并在那里和B细胞相互作用。3，诱导Tfh细胞ICOS表达，发挥Tfh细胞辅助B细胞的功能。由于IL-21是Tfh细胞执行效应功能的主要细胞因子，因此又称其为Tfh细胞的辅助性细胞因子。Il。由于IL-21惊喜调节免疫应答的各个方面，抵抗具有侵袭性的外源抗原，所以缺乏IL-21的人体即使不会完全丧失免疫功能，机体也不会产生高亲和力的抗体，免疫功能会显著降低。
2.5 Bcl-6 Bcl-6是调控初始T细胞发育为Th细胞的一种转录调节因子。在GC的CD4阳性T细胞中，仅有10%~15%表达Bcl-6，且优先表达于Tfh细胞。同时Bcl转录因子的表达也受IL-6和IL-21的调控。Bcl-6和Blimp-1是一对相互拮抗的转录因子。Bcl-6是Tfh 细胞的关键调节因子，在Tfh细胞上高表达。而Blimp-1则在其他的非Tfh细胞的CD4阳性细胞上高表达。研究证明，Blimp-1抑制Bcl-6的表达和Tfh细胞的分化，但是对非Tfh细胞的CD4阳性细胞的增殖和分化起促进作用。如果Bcl-6过度表达则诱导Tfh细胞相关基因的表达并抑制其他类型Th细胞失望分化。而Bcl-6缺陷，则严重影响GC的形成，T细胞不能发育为Tfh细胞，这将导致机体无法对外来抗原产生正常的免疫应答，无法生成正常抗体。所以，Bcl-6与Blimp-1之间的表达平衡时决定Tfh细胞分化的关键因子。
3与Tfh细胞相关的疾病
研究表明，Tfh细胞与多种疾病的发生有关，包括自身免疫性疾病，免疫缺陷，感染性疾病和肿瘤等。虽然Tfh属于CD4阳性辅助性T细胞亚群，单其在表型，功能，分泌细胞因子等方面与其他CD4阳性辅助性T细胞显著不同，这就决定了Tfh细胞辅助B细胞参与体液
