球菌及检验

病原性球菌及检验● 考点葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属生物学性状微生物学检查法临床意义（致病性、所致疾病）【内容讲解】普及共性，单记个性生物学性状形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。

培养特性：对气体需求，营养要求，最适pH值，最适温度，在培养基中的生长现象。

生化反应：特殊生化。

抗原：分类：致病性致病物质所致疾病微生物学检查：针对生物学性状和致病性。

一、葡萄球菌属一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。

（一）生物学特性1.形态与结构G+，球形，0.5～1.5μm，呈葡萄串状成堆排列（在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列），无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

2.培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求不高，最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。

普皿：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。

可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。

血琼脂平板：几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。

液体培养基：生长迅速呈均匀混浊状。

3.生化反应触酶试验（+）；多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气；分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶（多数致病性葡萄球菌）。

4.抗原（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。

存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。

5.分类（1）《伯杰系统细菌学手册》（2）古典分类法6.抵抗力对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐。

是抵抗力最强的无芽胞细菌。

（二）临床意义葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。

金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。

（1）金黄色葡萄球菌致病物质：血浆凝固酶；葡萄球菌溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮溶解毒素；毒性休克综合征毒素。

病原性球菌的检验一、葡萄球菌属Staphylococcus⏹广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。

⏹致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。

分类与分型1）金黄色葡萄球菌(S. aureus)：多数致病。

（2）表皮葡萄球菌(S. epidermidis)：偶可致病。

（3）腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)：不致病。

（4）致病性菌株能产生黄色或柠檬色素。

（5）多数金黄色葡萄球菌可被相应噬菌体裂解，表皮葡萄球菌不敏感。

金黄色葡萄球菌的致病性⏹用噬菌体可将金葡萄菌分为4群23个型。

⏹肠毒素型食物中毒由Ⅲ和Ⅳ群金葡萄菌引起，Ⅱ群菌对抗生素产生耐药性的速度比Ⅰ和Ⅳ群缓慢很多。

⏹造成医院感染严重流行的是Ⅰ群中的52、52A、80和81型菌株。

⏹引起疱疹性和剥脱性皮炎的菌株经常是Ⅱ群71型。

金黄色葡萄球菌的流行病学⏹作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。

因而，食品受其污染的机会很多。

金黄色葡萄球菌及其检验⏹革兰氏阳性球状，排列呈葡萄串状。

无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，个别形成荚膜。

致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5~1um., 普通0.4~1.2um。

培养及生化特性1.在普通培养基上生长良好（需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、pH7.4 ，对营养要求不高，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。

），在麦康凯琼脂平板不生长。

2. 血平板上生长更佳，致病菌株β溶血3. 产生金黄色色素4. 高度耐盐: 可在7.5~15%NaCl肉汤中生长。

5. 分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，触酶阳性，致病菌株能分解甘露醇。

6. 金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶（致病因素P149）1）溶血毒素2）杀白细胞素3）血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。

4）脱氧核糖核酸酶：5）肠毒素6）溶纤维蛋白酶7）透明质酸酶抗原性1. 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁，借此可分群。

需氧革兰阳性球菌的检验导言：一、实验原理触酶试验：具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢生成水和新生态氧形成分子氧出现气泡，可区分葡萄球菌和链球菌；串珠试验：串珠实验实验主要用于炭疽芽孢杆菌的筛选，低浓度的青霉素可以破坏炭疽杆菌的细胞壁，使其形态从矩形变为球形，那么链状排列的炭疽杆菌就成了一串球菌，即串珠状。

二、实验目的1、掌握结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌的形态学检查；2、掌握白喉棒状杆菌的培养特征；3、掌握炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌的鉴定。

三、实验器材1、菌种：白喉杆菌（鸡蛋血清斜面纯培养物）、蜡样芽胞杆菌、炭疽芽胞杆菌（BA纯培养物）、结核杆菌（灭活、磨碎的悬液）2、培养基：BA、鸡蛋斜面培养基、亚碲酸钾血琼脂平板、卵黄琼脂平板3、其他：革兰染液、Albert染液、抗酸染液、青霉素纸片（5IU/ml、10IU/ml、100IU/ml）、显微镜、酒精灯、接种环、培养箱等。

四、实验内容（2人/组）1、蜡样芽胞杆菌、炭疽芽胞杆菌1）形态检查：革兰染色2）培养与鉴定：2、炭疽芽胞杆菌：BA、触酶试验、青霉素抑制试验和串珠试验3、蜡样芽胞杆菌：BA、触酶试验、乳光反应4、白喉杆菌1）形态检查：Albert异染颗粒染色2）培养（示教）：鸡蛋斜面培养基、BA、亚碲酸钾血琼脂平板结核分枝杆菌：抗酸染色37℃，24h培养次日观察。

五、实验结果炭疽芽孢杆菌巨大的革兰阳性杆菌两端平切无鞭毛有芽孢位于菌体中央灰色扁平干燥粗糙型菌落。

串珠试验：大而均匀的圆球状菌体成串珠样排列。

蜡样芽孢杆菌白喉杆菌革兰阳性大杆菌 菌体两端较钝圆多数呈链状排列 有芽孢有菌毛无荚膜BA: 灰白色 圆形凸起 表面有蜡光 不透明白蜡状 有明显β溶血环卵黄琼脂平板：乳白色大菌落 突起 不透明白蜡状 能见到卵磷脂酶作用后形成的白色混浊环革兰染色阳性菌 菌体大小长短不一 一端或两端呈棒状 长排列呈V 、L 等字母形 无荚膜无鞭毛无芽孢Albert 异染颗粒染色： 这些与菌体颜色不同的颗粒称为异染颗粒。

金黄色葡萄球菌及检验一、生物学特性典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。

金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。

金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。

平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。

血平板菌落周围形成透明的溶血环。

金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。

可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。

甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。

许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。

金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。

二.流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。

因而，食品受其污染的机会很多。

近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。

金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。

金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。

此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。

上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。

一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。

肠毒素形成条件：存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。

第十三章病原性球菌及检验一、A11、与淋病奈瑟菌无关的性状是（）。

A、革兰阴性肾形双球菌B、营养要求高C、初次分离需5%～10%CO2D、普通培养基上即可生长E、氧化酶试验阳性2、甲氧西林金黄色葡萄球菌是（）。

A、MRSAB、MRSEC、MRSD、MRCNSE、SPA3、抗链“O”试验可以辅助诊断（）。

A、结核病B、肺炎C、流脑D、百日咳E、急性肾小球肾炎4、有关细菌学检验的描述选项中错误的是（）。

A、原则上所有标本均应作病原分离培养B、脑膜炎奈瑟菌初次培养需用巧克力培养基C、结核杆菌需2～6周才长成菌落D、葡萄球菌分离培养的阳性率一般比直接涂片镜检的阳性率为低E、布氏杆菌初次培养时需5%～10%的CO25、下列何种细菌为革兰阴性球菌（）。

A、乙型溶血性链球菌B、肺炎链球菌C、铜绿假单胞菌D、脑膜炎奈瑟菌E、肺炎克雷伯菌6、有关肺炎链球菌不正确的描述（）。

A、革兰阳性双球菌B、有自溶现象C、对optochin敏感D、均对青霉素敏感E、可引起脑膜炎7、肺炎链球菌在血平板上生长，菌落周围的颜色是（）。

A、红色B、褐色C、绿色D、黑色E、金黄色8、卡他布兰汉菌在形态方面与下列哪种细菌相似（）。

A、流感嗜血杆菌B、淋病奈瑟菌C、军团菌D、放线菌E、支原体9、脑膜炎球菌侵入机体繁殖后，因自溶或死亡而释放内毒素，内毒素的主要作用是引起（）。

A、菌血症B、血小板解聚C、血液白细胞减少D、细菌素产生E、血管坏死和血栓形成，周围血管出血10、某患者餐后数小时出现头晕、恶心、腹痛、呕吐等症状。

呕吐物接种到血液琼脂平皿培养，出现完全溶血环，金黄色菌落。

培养滤液幼猫腹腔注射4小时后出现呕吐，此病可诊断为（）。

A、金黄色葡萄球菌引起的食物中毒B、产气荚膜梭菌引起的食物中毒C、肠沙门菌引起的食物中毒D、肉毒梭菌引起的食物中毒E、鼠伤寒沙门菌引起的食物中毒11、甲型溶血性链球菌生长时，菌落周围常出现溶血环，此现象称为（）。

A、α溶血B、β溶血C、γ溶血D、δ溶血E、ε溶血12、脑膜炎奈瑟菌属于（）。

球菌检验报告解释引言球菌是一类常见的细菌，以其球状细胞形态而得名。

球菌广泛存在于自然界中，包括土壤、水体、皮肤以及呼吸道等部位。

虽然大部分的球菌对人体没有害处，但某些特定的球菌却可能引起严重的感染和疾病。

为了准确诊断和治疗球菌感染，医疗机构常常进行球菌检验。

本篇文档将解释球菌检验报告的相关内容。

检验项目球菌检验报告通常包括以下几个主要项目：1.病原菌培养鉴定：通过将样本在适当的培养基上进行培养，可以分离出其中的球菌。

培养后，医学实验室将对分离出的菌株进行鉴定，确定其是否为球菌以及具体属种。

2.药敏试验：这一项目主要用于测试球菌对不同抗生素的敏感性。

医学实验室将在培养基上施加不同类型的抗生素，观察菌落的生长情况，以确定当前球菌对哪些药物敏感，哪些药物耐药。

3.血清学检测：通过检测患者体内的球菌相关抗体来判断球菌感染的存在与程度。

通常，这项检测用于检测球菌感染是否为初次感染，或者用于跟踪治疗效果。

报告解释球菌检验报告通常会提供以下信息：1.菌株鉴定：报告会详细说明培养出的球菌菌株的属种和亚种信息。

这对医生来说非常重要，因为不同的球菌可能导致不同类型和严重程度的感染。

2.抗生素敏感性：报告会列出球菌对不同抗生素的敏感性结果。

通常使用一个字符表示，例如“S”表示敏感，“R”表示耐药，或者使用数字来表示具体的抗生素最低抑菌浓度。

这些信息有助于医生选择合适的抗生素治疗感染。

3.血清学检测：如果进行了血清学检测，报告中会包含血清学结果。

这通常是一些数字或特定单位表示的抗体水平。

医生可以根据这些结果判断球菌感染的程度和临床治疗的效果。

结论球菌检验报告是诊断和治疗球菌感染的重要工具。

通过对球菌菌株的鉴定、抗生素敏感性和血清学结果的分析，医生可以制定相应的治疗方案，以最大程度地控制感染并促进患者康复。

在解读球菌检验报告时，医生需要全面了解每个项目的结果，并综合考虑患者的临床病情。

这样，才能做出准确的诊断和治疗决策。

病原性球菌及检验球菌种类很多，根据革兰氏染色的不同，分为G-、 G+两类球菌。

G+有：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和微球菌。

G-有：脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌、卡他布兰汉氏菌等。

对人体致病的球菌称病原性球菌，因能引起机体化脓性炎症，故又称为化脓性球菌。

常见的有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌。

一、葡萄球菌属(一)形态与染色葡萄球菌呈不规则堆集排列，形似葡萄串状，也可见单个、成对或短链排列。

为G+性球菌，直径0.5-1.5um，（致病性葡萄球菌菌体较非致病性葡萄球菌菌体小）无芽胞，无鞭毛、无荚膜；无动力。

(二)分类 1965年按血浆凝固酶分为：血浆凝固酶阴性葡萄球菌，血浆凝固酶阳性葡萄球菌。

1.血浆凝固酶阴性葡萄球菌包括：表皮、腐生葡萄球菌。

2.血浆凝固酶阳性葡萄球菌包括：金黄色、中间型、家畜葡萄球菌。

(三)抗原本菌水解后，用沉淀法可获两种抗原即蛋白抗原和多糖抗原。

1.蛋白抗原：是一种表面抗原，为完全抗原；有种特异性，无型特异性。

存在葡萄球菌细胞壁的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。

2.多糖抗原：是半抗原，存在于细胞壁上，是金黄色葡萄球菌的重要抗原。

有型特异性，分A、B、C三型。

(四)标本接种1.脓汁、尿道分泌物、脑脊液沉淀物，通常直接接种在血琼脂上，经37℃24-48h培养，可见直径2-3mm，产生不同色素的菌落。

2.粪便、呕吐物应接种卵黄高盐、高盐甘露醇琼脂平板上，经37℃24-48h培养可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。

3.疑为败血症者，抽取静脉血5ml，注入50ml葡萄糖肉汤培养基中。

(五)培养特性需氧或兼性厌氧，对营养要求不高。

在20%CO2环境中，有利于毒力产生。

最适温度37℃，最适PH7.4。

DNA中G+C含量：30-39%。

1.在普通琼脂平板上，经37℃、24-48h培养，可形成圆形，凸起、边缘整齐、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、脂溶性色素的菌落，直径一般为1-2mm，但大者也有4-5 mm的菌落。