2017年初级检验技师《微生物检验》讲义第13章病原性球菌及检验

病原性球菌及检验● 考点葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属生物学性状微生物学检查法临床意义（致病性、所致疾病）【内容讲解】普及共性，单记个性生物学性状形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。

培养特性：对气体需求，营养要求，最适pH值，最适温度，在培养基中的生长现象。

生化反应：特殊生化。

抗原：分类：致病性致病物质所致疾病微生物学检查：针对生物学性状和致病性。

一、葡萄球菌属一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。

（一）生物学特性1.形态与结构G+，球形，0.5～1.5μm，呈葡萄串状成堆排列（在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列），无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

2.培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求不高，最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。

普皿：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。

可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。

血琼脂平板：几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。

液体培养基：生长迅速呈均匀混浊状。

3.生化反应触酶试验（+）；多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气；分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶（多数致病性葡萄球菌）。

4.抗原（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。

存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。

5.分类（1）《伯杰系统细菌学手册》（2）古典分类法6.抵抗力对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐。

是抵抗力最强的无芽胞细菌。

（二）临床意义葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。

金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。

（1）金黄色葡萄球菌致病物质：血浆凝固酶；葡萄球菌溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮溶解毒素；毒性休克综合征毒素。

第十八章病原性球菌及检验本章考点：（掌握，熟练掌握）（1）概念（2）生物学性状（3）微生物学检查方法与原理（4）临床意义（致病性、所致疾病）普及共性，单记个性生物学性状形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。

培养特性：对气体需求，营养要求，最适pH值，最适温度，在培养基中的生长现象。

生化反应：特殊生化。

抗原：分类：致病性致病物质所致疾病微生物学检查：针对生物学性状和致病性一、葡萄球菌属（一）概念一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。

（二）生物学特性1.形态与结构：本属菌革兰染色阳性，呈圆球形，直径0.5～1.5／μm，不规则成堆排列，形似葡萄串状，在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列。

无鞭毛和芽胞，有些细菌能形成荚膜。

2.培养特性：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，通常在肉浸液及肉浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。

最适pH为7.4，最适温度为35℃～37℃。

在普通琼脂平板上经35℃24～48h培养，可形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。

可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。

在血琼脂平板上，几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。

对人致病的主要是α溶血素。

在液体培养基（普通肉浸液）中生长迅速呈均匀混浊状。

3.生化反应：触酶试验（+），对糖的发酵反应不规则，多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气。

多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。

4.抗原：葡萄球菌水解后，用沉淀法可获得两种抗原，即蛋白抗原和多糖抗原。

（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。

存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。

5.分类6.抵抗力：对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。

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检验技师-微生物检验1、微生物的分类：(三型八大类)**全部是重点**2、(正常菌群)条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。

3、G+菌特有成分：磷壁酸(重要表面抗原，可用于细菌血清学分型)(外毒素)4、G-菌特有成分：外膜层(由脂多糖(内毒素)、脂质双层(磷脂)、脂蛋白)5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。

结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥(G-菌无。

是溶菌酶、青霉素作用部位)6、细菌的主要遗传物质：核质(染色体)、质粒(存在于胞质，双链闭合环状DNA分子)、转位因子7、细菌特殊结构：荚膜(保护，致病，抗原性，鉴别)、芽胞、鞭毛(运动器官)、菌毛(普通菌毛—粘附，致病性;性菌毛—接合方式转移遗传物质)*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型(细胞壁缺陷)菌落：①“油煎蛋”(荷包蛋)样菌落(典型L型细菌)。

②颗粒型菌落(简称G型菌落)③丝状菌落(简称F型菌落)。

高渗环境生长。

(环丙沙星)9、自营菌：以无机物为原料;异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质;寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。

10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。

11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长12、细菌分类(伯杰)等级依次为界、门、纲、目、科、属、种(最小分类单位)。

13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法;14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。

15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。

病原性球菌的检验一、葡萄球菌属Staphylococcus⏹广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。

⏹致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。

分类与分型1）金黄色葡萄球菌(S. aureus)：多数致病。

（2）表皮葡萄球菌(S. epidermidis)：偶可致病。

（3）腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)：不致病。

（4）致病性菌株能产生黄色或柠檬色素。

（5）多数金黄色葡萄球菌可被相应噬菌体裂解，表皮葡萄球菌不敏感。

金黄色葡萄球菌的致病性⏹用噬菌体可将金葡萄菌分为4群23个型。

⏹肠毒素型食物中毒由Ⅲ和Ⅳ群金葡萄菌引起，Ⅱ群菌对抗生素产生耐药性的速度比Ⅰ和Ⅳ群缓慢很多。

⏹造成医院感染严重流行的是Ⅰ群中的52、52A、80和81型菌株。

⏹引起疱疹性和剥脱性皮炎的菌株经常是Ⅱ群71型。

金黄色葡萄球菌的流行病学⏹作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。

因而，食品受其污染的机会很多。

金黄色葡萄球菌及其检验⏹革兰氏阳性球状，排列呈葡萄串状。

无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，个别形成荚膜。

致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5~1um., 普通0.4~1.2um。

培养及生化特性1.在普通培养基上生长良好（需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、pH7.4 ，对营养要求不高，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。

），在麦康凯琼脂平板不生长。

2. 血平板上生长更佳，致病菌株β溶血3. 产生金黄色色素4. 高度耐盐: 可在7.5~15%NaCl肉汤中生长。

5. 分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，触酶阳性，致病菌株能分解甘露醇。

6. 金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶（致病因素P149）1）溶血毒素2）杀白细胞素3）血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。

4）脱氧核糖核酸酶：5）肠毒素6）溶纤维蛋白酶7）透明质酸酶抗原性1. 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁，借此可分群。

第十三章病原性球菌及检验一、A11、与淋病奈瑟菌无关的性状是（）。

A、革兰阴性肾形双球菌B、营养要求高C、初次分离需5%～10%CO2D、普通培养基上即可生长E、氧化酶试验阳性2、甲氧西林金黄色葡萄球菌是（）。

A、MRSAB、MRSEC、MRSD、MRCNSE、SPA3、抗链“O”试验可以辅助诊断（）。

A、结核病B、肺炎C、流脑D、百日咳E、急性肾小球肾炎4、有关细菌学检验的描述选项中错误的是（）。

A、原则上所有标本均应作病原分离培养B、脑膜炎奈瑟菌初次培养需用巧克力培养基C、结核杆菌需2～6周才长成菌落D、葡萄球菌分离培养的阳性率一般比直接涂片镜检的阳性率为低E、布氏杆菌初次培养时需5%～10%的CO25、下列何种细菌为革兰阴性球菌（）。

A、乙型溶血性链球菌B、肺炎链球菌C、铜绿假单胞菌D、脑膜炎奈瑟菌E、肺炎克雷伯菌6、有关肺炎链球菌不正确的描述（）。

A、革兰阳性双球菌B、有自溶现象C、对optochin敏感D、均对青霉素敏感E、可引起脑膜炎7、肺炎链球菌在血平板上生长，菌落周围的颜色是（）。

A、红色B、褐色C、绿色D、黑色E、金黄色8、卡他布兰汉菌在形态方面与下列哪种细菌相似（）。

A、流感嗜血杆菌B、淋病奈瑟菌C、军团菌D、放线菌E、支原体9、脑膜炎球菌侵入机体繁殖后，因自溶或死亡而释放内毒素，内毒素的主要作用是引起（）。

A、菌血症B、血小板解聚C、血液白细胞减少D、细菌素产生E、血管坏死和血栓形成，周围血管出血10、某患者餐后数小时出现头晕、恶心、腹痛、呕吐等症状。

呕吐物接种到血液琼脂平皿培养，出现完全溶血环，金黄色菌落。

培养滤液幼猫腹腔注射4小时后出现呕吐，此病可诊断为（）。

A、金黄色葡萄球菌引起的食物中毒B、产气荚膜梭菌引起的食物中毒C、肠沙门菌引起的食物中毒D、肉毒梭菌引起的食物中毒E、鼠伤寒沙门菌引起的食物中毒11、甲型溶血性链球菌生长时，菌落周围常出现溶血环，此现象称为（）。

A、α溶血B、β溶血C、γ溶血D、δ溶血E、ε溶血12、脑膜炎奈瑟菌属于（）。

病原真菌及检验技术一、感染性病原真菌1、组织胞浆菌属♦本属为典型的双相型真菌，37℃呈酵母样细胞，25℃培养形成菌丝体。

♦重要的致病菌有荚膜组织胞浆菌及假皮疽组织胞浆菌，分别致犬、猫肉芽肿及马的淋巴管炎。

①荚膜组织胞浆菌引起人兽共患病是致犬、猫和人常发的高度接触性传染性组织胞浆菌病。

严重者，可损伤全身器官。

淋巴瘤、白血病、霍奇金病、AIDS或用肾上腺皮质激素治疗者常可感染本菌。

主要侵犯网状内皮系统，寄生在网状内皮细胞的胞浆内，使感染组织形成肉芽肿。

奶牛、马、羊、猪及啮齿类动物也可自然感染，小鼠易感染。

微生物特性♦在巨噬细胞和网状细胞内寄生时呈细小的、包有荚膜的圆球样细胞，直径l~3μm。

在陈旧的病灶内，菌体较大，胞浆浓缩于菌体中央，与细胞壁之间出现一条空白带。

♦ 22~25℃培养时，在培养基上缓慢形成丝状菌落，开始为白色，逐渐变为棕黄色。

菌丝分支分隔，宽2.5μm。

产生椭圆形光滑或多刺小分生孢子，直径2.5~3μm，随后可产生圆形或椭圆形大分生孢子，称棘状厚壁大孢子，直径8~15μm，表面光滑、均匀间隔的，像手指一样凸起，是本菌的特征性形态.♦在高湿、高浓度的二氧化碳中37℃培养时，在营养丰富的血培养基上，可形成湿润、有光泽、表面有皱褶的细小酵母样菌落；在肉汤中呈絮团状生长，镜检可见分支分隔的菌丝和少量孢子。

♦镜检如发现特征性的棘厚壁大孢子，可做出诊断。

♦活体病变组织末梢血及骨髓触片或涂片瑞氏染色，在单核细胞或多形核细胞中如有小的、呈洋葱切面样卵圆形孢子，亦可做出诊断。

♦病料接种小鼠可引起发病死亡，并可检出本菌。

♦补体结合反应一般在发病后2~3周呈阳性反应。

♦皮内变态反应试验可用于犬感染的流行病学调查。

♦亦可采用PCR和核酸探针技术鉴定,微生物检验(1)标本直接显微镜检查♦痰液标本涂片后先用甲醇固定10 min，再用姬姆萨染色镜检，如巨噬细胞发现卵圆形孢子，直径2～4μm 的较小，一端有出芽，可疑为荚膜组织胞浆菌。

第十三章病原性球菌及检验一、A11、不符合脑膜炎球菌送检标本要求的是A、采集标本注意无菌操作B、采集标本立即送检C、采集标本一般在使用抗菌药物之前D、根据该病原菌主要存在部位取材E、标本送检过程中要保持低温和干燥2、对低温敏感的细菌是A、肺炎链球菌B、脑膜炎奈瑟菌C、脆弱类杆菌D、伤寒沙门菌E、布鲁菌3、淋病奈瑟菌的主要传播途径是A、呼吸道传播B、消化道传播C、创伤伤口感染D、性接触传播E、节肢动物叮咬4、关于金黄色葡萄球菌，下列哪种说法是错误的A、耐盐性强B、在血平板上形成完全透明的溶血环C、引起局部化脓性感染时病变比较局限D、不易产生耐药性，抵抗力强E、革兰阳性菌5、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点A、血浆凝固酶试验阳性B、产生溶血素C、分解甘露醇D、产生耐热核酸酶E、胆汁溶解试验阳性6、葡萄球菌致急性胃肠炎的致病因素是A、杀白细胞素B、溶血毒素C、肠毒素D、血浆凝固酶E、红疹毒素7、以下叙述正确的是（）。

A、淋病奈瑟菌感染主要由呼吸道传播B、淋病奈瑟菌为革兰阳性球菌C、人是淋病奈瑟菌唯一宿主D、淋病奈瑟菌不产生β－内酰胺酶E、淋病奈瑟菌有毒株无菌毛8、化脓性炎症，其脓汁黏稠、病灶局限，这是由于病菌产生了A、玻璃质酸酶B、血浆凝固酶C、耐热核酸酶D、链道酶E、葡激酶9、分离培养淋病奈瑟菌时，不能采用的方法是A、标本要立即送检B、标本要保湿保暖C、在含5%～10%CO2的环境中培养D、接种于预温的巧克力色血平板上E、厌氧环境培养10、用于监测血浆凝固酶的细菌为A、肺炎链球菌B、表皮葡萄球菌C、甲型溶血性链球菌D、乙型溶血性链球菌E、金黄色葡萄球菌11、下列哪种细菌感染一般不侵入血流A、葡萄球菌B、淋球菌C、脑膜炎球菌D、伤寒杆菌E、链球菌12、经验治疗链球菌引起的感染，应首选A、红霉素B、链霉素C、青霉素D、克林霉素E、多黏菌素13、脑膜炎奈瑟菌在人体的定植部位一般为A、肠道黏膜B、口腔黏膜C、皮肤表面D、鼻咽部E、脑膜14、肺炎链球菌的主要致病物质是A、透明质酸酶B、溶血毒素C、普通菌毛D、荚膜E、外毒素15、关于乙型溶血型链球菌，下列哪项是错误的A、是链球菌属中致病力最强的B、感染容易扩散C、可引起超敏反应性疾病D、产生多种外毒素，故可用类毒素预防E、对青霉素敏感二、A21、某一脓标本，涂片革兰染色镜检：革兰阳性球菌，直径1μm左右，呈单个、成对或短链排列；血琼脂平板分离培养：菌落表面光滑湿润，圆形，边缘整齐，黄色，凸起，直径1～1.5mm，菌落周围有完全透明的溶血环；菌落涂片革兰染色镜检：革兰阳性球菌，呈单个、双、短链和葡萄串状排列，以葡萄串状排列为主；生化试验：触酶阳性，血浆凝固酶（试管法）阳性，发酵葡萄糖产酸，发酵甘露醇产酸，对新生霉素敏感。

病原性球菌及检验一、葡萄球菌属（1）分类.......................了解（2）临床意义...................熟悉（3）生物学特性.................熟练掌握（4）微生物学检验...............熟练掌握（一）生物学特1.形态与结构本属细菌革兰染色阳性，呈圆球形，直径0.5～1.5μm，不规则排列，形似葡萄串状，在脓汁或液体培养基中，可呈单个、成对或短链排列。

无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

2.培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求不高。

最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。

在普通琼脂平板上经37℃24～48h培养，可形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐、不透明菌落，直径为2～3mm。

可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。

葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶素。

在液体培养基中生长迅速、呈均匀混浊状。

3.生化反应本属菌触酶试验阳性，多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气。

致病性葡萄球菌一般能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。

4.抗原葡萄球菌的抗原包括蛋白抗原和多糖抗原。

（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性。

存在于葡萄球菌的表面，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性。

协同凝集试验5.分类（1）《伯杰系统细菌学手册》（1986）据DNA及表型特征等将葡萄球菌分为19个种。

继之，各国学者又从人和动物中检出数种凝固酶阴性葡萄球菌新种，共27种。

（2）古典分类法：根据其产生色素的不同分为金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌。

1965年，葡萄球菌国际分类委员会将葡萄球菌分为凝固酶阳性与凝固酶阴性葡萄球菌（CNS），凝固酶阳性葡萄球菌主要为金黄色葡萄球菌。

CNS常包括表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。

6.抵抗力对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。

（二）致病性1.侵袭性疾病⑴皮肤及软组织感染，如毛囊炎、疖、痈等；⑵全身性感染，如败血症、脓毒血症、骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎等；⑶呼吸道感染，如支气管肺炎、肺炎、脓胸等；⑷医院内感染。