第六节 多杀性巴氏杆菌
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李昕,张正刚,郭亚男,等.多杀性巴氏杆菌诊断技术及防控策略研究进展[J ].中南农业科技,2023,44(10):218-221.多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida )是条件致病菌,可引起多种家畜和野生动物及人类的感染[1]。
由Louis Pasteur 于1887年在禽霍乱病例中分离得到,命名为巴斯德氏菌。
其主要存在于动物的口腔、鼻咽和上呼吸道,通过呼吸道分泌物和飞沫进行传播,致使宿主的呼吸道系统、淋巴系统等发生感染,从而致病,是一种重要的人畜共患疾病。
但其对人的感染报道较少,在人体中主要通过动物咬伤传播,感染后可导致呼吸系统感染,引发败血症、脑膜炎等。
1994年起列为3个亚种,即多杀亚种(P.mul⁃tocida ssp.multicida )、败血亚种(P.multocida ssp.Septzca )及杀禽亚种(P.multocida ssp.Gallicida )[2]。
1巴氏杆菌的特性1.1巴氏杆菌的结构和培养特性P.multocida 是小型、非运动兼性厌氧革兰氏阴性球杆菌,无鞭毛,无芽孢,常以单个或成双分布。
中央微凸,宽度为0.3~1.0μm ,长度为1.0~2.0μm 。
P.multocida 菌株对培养条件营养要求苛刻,可以在营养丰富的培养基上培养,如在胰蛋白酶大豆琼脂、巧克力琼脂或脑心浸液琼脂上生长良好,在5%无菌脱纤维羊血平板上可生长形成直径约1mm 灰白色、黏稠状菌落,无溶血环产生[3]。
在普通培养基和麦康凯(MacConkey )琼脂培养基上不生长[4]。
P.multocida 在培养过程中可分解果糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖,产酸而不产气体;对过氧化氢酶、氧化酶、吲哚和鸟氨酸脱羧酶反应呈阳性,但对脲酶、甲基红试验和VP 试验均为阴性,不液化明胶、石蕊牛乳无变化,能产生硫化氢[5]。
1.2巴氏杆菌的发病机制P.multocida 作为重要的呼吸道病原体,可通过诱发宿主上皮屏障的功能障碍,从而导致细菌入侵以及气道和肺炎症性疾病的发展[6]。
多杀性巴氏杆菌病的研究高家登;扎西达瓦;曲久;强巴贡桑【摘要】多杀性巴氏杆菌(P.multocida)是引起多种畜禽巴氏杆菌病(Pasteurellosis)的病原菌,主要引起动物发生出血性败血病或传染性肺炎.畜禽巴氏杆菌病的防治主要使用多杀性巴氏杆菌疫苗.目前防制巴氏杆菌病的疫苗主要有强毒灭活菌苗、弱毒菌苗和亚单位疫苗,这些疫苗在一定程度上对巴氏杆菌病的防治起到了一定的作用,但由于多杀性巴氏杆菌的血清型多,免疫效果不理想,有关巴氏杆菌病防治还有待进一步研究.本文就多杀性巴氏杆菌的病原、流行病学、致病性等进行综合阐述.【期刊名称】《中国畜禽种业》【年(卷),期】2017(013)009【总页数】3页(P35-37)【关键词】多杀性巴氏杆菌;病原;流行病学【作者】高家登;扎西达瓦;曲久;强巴贡桑【作者单位】西藏那曲地区畜牧兽医技术推广总站 852000;西藏那曲县农牧业科学技术服务站 852000;西藏那曲地区畜牧兽医技术推广总站 852000;西藏那曲地区畜牧兽医技术推广总站 852000【正文语种】中文多杀性巴氏杆菌 (Pasteurella multocida,Pm)是一种较常见的病原菌,主要使动物发生的疾病有牛出血性败血症、犊牛肺炎、禽霍乱、猪肺疫等多种疾病,给世界的养殖业带来了巨大的经济损失,在有些情况下人也可感染多杀性巴氏杆菌[1]。
Pasteur最早于1878~1879年发现并描述了牛、禽霍乱以及其他动物的出血性败血症,后人为了纪念巴斯德做出的贡献,将此菌命名为巴斯德杆菌[2]。
目前,国内、外学者有两种公认的血清学鉴定分类方法。
一种是Carter于1984年提出的按血清学标准对多杀性巴氏杆菌进行分型,随着后来的不断发展,将该菌分为A、B、D、E和F 5个荚膜血清群[3]。
另一种是Heddleston,根据多杀性巴氏杆菌的耐热抗原的不同将其分为1、2……16等16个血清型[4]。
1998年Brickell等报道牛发生的出血性败血症的血清型为B型[5]。
禽多杀性巴氏杆菌病病原的分离鉴定和药敏试验1 巴氏杆菌属概述巴氏杆菌[1]属(Pasteurella )分类地位未定的1属,为无芽孢,不运动,兼性厌氧,菌体两端常染色浓重的革兰氏染色阴性小杆菌[2],因1880 年巴斯德氏首先自病鸡分离到本属中的多杀巴氏杆菌而得名。
[3]该属已确定的种有多杀巴氏杆菌、嗜肺巴氏杆菌、溶血巴氏杆菌、尿巴氏杆菌和鸭疫巴氏杆菌等。
属中的多杀巴氏杆菌危害畜、禽最严重,主要引起动物发生出血性败血症。
从发病动物体液或组织中培养分离到的菌落基本有两型:一为在过45°折光,低倍显微镜下,呈现鲜明的蓝绿色而带金光,边缘有狭窄的红黄色带的Fg 菌落型,相当于血清型乙型;另一为在45°折光下,低倍显微镜下,菌落呈现橘红色、边缘稍带狭窄的黄绿光的F0菌落型,相当于血清型甲型[4]。
在中国,牛、猪、驴和马的多杀巴氏杆菌病绝大多数为Fg型菌所致,家禽流行性巴氏杆菌病都是F0型菌所致[5]。
多杀巴氏杆菌菌体抗原有12个型,荚膜抗原有5 个型,前者以阿拉伯数字表示,后者以英文大写字母表示,如1:A,2; A,1:B等,已知组成的菌型有16个。
本菌血清型与宿主的分布有一定关系,其细胞壁含有明显的内毒素活性,但未发现外毒素。
本菌可引起家禽霍乱的暴发性流行,牛的出血性败血病、原发性或继发性肺炎等,国外免疫用的菌苗以加不同佐剂的灭活菌为主,也使用禽霍乱弱毒活菌,中国已于1959年使用弱毒活苗[6] 。
2 多杀性巴氏杆菌及其危害多杀性巴氏杆菌( Pasteurella multocida ,Pro )是一种重要的病原菌,对多种动物和人均有致病性,可以导致猪肺疫、禽霍乱、牛羊兔出血性败血症等危害严重的畜禽传染病。
多杀性巴氏杆菌正常存在于多种健康动物的肺和咽喉部黏膜,当动物处于应激状态、机体抵抗力低下时,细菌侵入体内,大量繁殖并致病,发生内源性传染。
此菌类在同种或不同种动物间可相互传染,蝉和蚤被认为是自体传播的媒介昆虫[7] 。
2019年第02期猪多杀性巴氏杆菌病也称猪肺疫,是猪群中比较常见的一种呼吸道传染病,大、小猪只都能够感染,其中小猪和中猪具有较高的发病率。
该病全年任何季节都能够发生,尤其是春秋季节更容易发生,常呈地方流行性。
该病与气候变化、饲养管理不当等应激因素紧密相关,也可继发于其他传染病,对养猪业危害较大。
1流行病学猪多杀性巴氏杆菌有多个血清群,且不同血清群的宿主有一定差异,不同的血清群之间的交叉免疫性较差。
许多种动物对该病都有易感性,如鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、羊、马、兔等,猪只是其中一种。
目前大部分猪群的感染都与气候突变和饲养管理不当有关。
如环境气候突变、圈舍潮湿、拥挤,通风不良等。
此外,猪群中普遍存在的免疫抑制性疾病会明显降低机体的抵抗力、造成猪只的免疫效果差,病菌非常容易侵入体内,引起猪只感染肺疫。
该病没有明显的季节性,多发于气候骤变、环境冷热交替明显、气温高热且多雨、经历长距离的运输、通风效果不好、舍内环境潮湿闷热的时节,常呈散发,初期只有少数猪只出现发病,后期逐渐扩散开来。
2患病表现患猪一般都呈败血症,体温快速升高达41~42℃,食欲废绝,黏膜主要呈青紫色,患猪的咽喉部发生红肿,病猪呈犬坐式呼吸并张口喘气,常因窒息死亡,病程1~2d 。
生产中时常有不见症状突然死亡的现象。
患猪的体温常高于41℃,临床表现短暂的痉孪性咳嗽,呼吸困难,伴有喘鸣音,鼻孔中有脓样粘液流出,按压胸部有疼痛反应,皮肤表面有红斑和出血点,经常先便秘,后又腹泻,如果患猪长达几天卧地不起,会以死亡告终。
患猪在生产中表现的主要症状是咳嗽和呼吸困难,有的病猪表现气喘,机体明显消瘦无力,食欲不定,疾病后期出现下痢,排恶臭粪便,多极度衰弱而死。
3诊断方法本病可根据临床症状、流行特点、剖检变化,结合实验室检测进行确诊。
无菌采取病猪的渗出液、心血、肝脾、淋巴结等病料进行涂片或触片,用美兰和瑞氏染色,镜检可见两极着染的短杆菌。
将无菌采集的病料接种于血液琼脂平板和麦康凯琼脂平板培养基上培养。
132浅析牛多杀性巴氏杆菌病的综合防制措施旦增曲宗(西藏日喀则市仲巴县农牧综合服务中心,西藏日喀则 858800)摘 要:牛多杀性巴氏杆菌病是一种急性传染病,俗称牛出败,疾病的产生与多杀性巴氏杆菌有关,该病临诊为败血呈出血性下痢;浮肿型呈颈部、咽喉部及胸部水肿,呼吸高度困难;肺炎呈呼吸困难,胸腔积液为特征。
该病可发生在一年四季,病菌在病畜的全身各组织、体液、分泌物、排泄物存在,在各种因素的影响下极易诱发该病,如潮湿、拥挤、寒冷、缺乏营养、通风不良等。
近年来,随着动物防疫体系的日益完善,虽然牛出败尽管能够得到一定控制,但是由于牧民群众缺乏防疫意识,导致该病时常发生,为此就需要采取一系列切实可行的综合防制措施。
关键词:牛多杀性巴氏杆菌病;综合防制;措施仲巴县作为一个纯牧业大县,牛羊养殖过程中难免会出现这样或那样的疾病,我县13各乡(镇)中尤其是南部乡(镇)中牛巴氏杆菌疾病影响最严重、发病最常见一种疾病,该病的出现已经给广大牧民群众造成严重的经济损失,甚至还会对人体健康、生命安全造成严重威害。
是一种人畜共患的慢性疾病,会严重影响牛、人的身体健康,特别是近年来牛羊专业合作社的迅猛发展,该病发生率逐年增加,为此提前做好群众宣传该病并采取综合防制措施至关重要[1]。
1 概述牛巴氏杆菌病是由于感染多杀性巴氏杆菌而发生的一种常见的传染性疾病,具有较大的危害。
现如今,随着畜牧业的发展,乡村合作社不断成立,在一定程度上帮助牧民群众提高经济效益,满足人们的牛肉需求。
为更好地防控牛巴氏杆菌病,在放牧过程中避免传染,需要认真做好隔离、死畜无害化处理、圈舍消毒、检疫等工作。
再加上此病在牛群中具有很高的传染性,还会严重伤害到养牛专业合作社,为此更需要做好重大动物疫病防控工作。
2 症状此病可分为败血型、浮肿型、肺炎型三种。
我县区域内多为水肿型为主;潜伏期一般会出现2~5d的,病牛体温超过41~42℃,会伴有呼吸促迫、困难的情况,最初会表现为咳嗽,鼻流粘液或泡沫样,严重带血。
猪多杀性巴氏杆菌病的流行病学、症状、诊断及防控措施1 流行病学多杀性巴氏杆菌是一种条件致病菌,即正常情况下不会导致猪出现发病,只有在环境较差,如闷热、寒冷、气候突然发生改变、潮湿、缺乏营养、通风较差、饲养密度过大、长途运输、过度疲劳等,导致机体抵抗力减弱,就会促使病原菌大量繁殖,从而引起发病。
任何年龄的猪都能够感染该病。
病猪经由排泄物、分泌物将病菌排到体外,导致外界环境、饲料、饮水以及各种用具被污染,然后通过消化道导致其他健康猪发生感染,这也是重要的传染途径;另外,通过打喷嚏、咳嗽排出的病菌,主要以飞沫的形式经由呼吸道进行传播;此外,黏膜伤口、吸血昆虫叮咬皮肤等也能够传播该病。
该病一年四季都能够发生,其中气候多变、冷热交替的时候容易发生。
2 临床症状最急性型。
通常在流行初期出现,猪往往突然发病,快速死亡,体温明显升高,停止采食,体质衰弱,不停寒战,可视黏膜发绀,耳根、颈部、腹部等处的皮肤存在紫色斑。
比较典型的症状是心跳过快,呼吸急促,伸颈呼吸,呈犬坐姿势,有时会发出喘鸣音,有泡沫状的白色液体从口鼻流出,有时会混杂血液。
只要出现呼吸症状,就会导致病情急剧加重,快速发生死亡。
病程通常可持续1~2天,病死率能够达到100%。
急性型。
这是该病比较常见的类型,主要症状是纤维素性胸膜肺炎。
病猪体温明显升高,能够达到大约41℃,初期出现干性短咳,后期出现湿性痛咳,并有脓黏液咳出,且往往混杂血丝,并伴有浆性或者脓性分泌物从鼻孔流出,对胸部触诊会表现出严重疼痛,听诊可听到哕音,皮肤上存在红斑。
初期发生便秘,后期发生腹泻,机体消瘦无力。
通常发病经过2~7天死亡,如果没有死亡就会变成慢性型。
慢性型。
病猪在发病初期不会表现出明显的症状,经过一段时间就会表现出精神较差,食欲不振,体温忽低忽高,咳嗽,渐进性消瘦,走动无力。
有时关节发生肿胀,出现跛行,皮肤出现湿疹。
最终。
兽医临床科学 | Veterinary clinical science452018.22·0 引言猪多杀性巴氏杆菌病是严重危害猪养殖产业的重要传染性疾病,常呈现地方流行或散发流行,除感染猪外,还可以感染多种动物。
临床上,猪多杀性巴氏杆菌病主要造成猪出现典型的呼吸道症状。
新疫区发病,常由于引种不当导致隐性带菌猪引入猪群,使病情快速流行传播。
老疫区发病主要是由于猪群中存在隐性带菌猪,隐性带菌猪和健康猪反复接触,使病原不断传播、不断流行,患病猪不断出现临床症状。
由于猪多杀性巴氏杆菌病发生与猪身体健康有很大关系。
一旦猪群中发生该种疾病,预示猪群身体抵抗能力下降,如果不能及时采取措施进行针对性防治,还很容易引起其他致病原的混合感染,加重传播速度,增加致死率。
1 流行特点多杀性巴氏杆菌广泛存在于自然界中,除对猪造成危害外,还可以感染其他家畜、家禽和野生动物,同时对人类也具有一定的致病性,其中在家畜中比较容易染病的是猪、牛。
当养殖场出现发病情况后,通常无法查出传染源,普遍认为在发病前,该种动物已经携带该种致病菌。
在日常生猪养殖中,如果气候寒冷、气温突变、潮湿闷热、饲养密度过大、饲料营养价值差、突然更换饲料、长途运输、感染寄生虫等因素影响,导致身体抵抗能力下降时,很容易导致该种疾病传播流行。
养殖场的患病猪和隐性带菌猪是主要的传染源,在患病猪和隐性带菌猪的分泌物、排泄物中,均存在大量多杀性巴氏杆菌,致病菌通过污染周围环境、饮用水、饲料和饲养用具,健康猪通过接触这些途径导致感染致病菌。
昆虫也是导致多杀性巴氏杆菌在猪群中传播流行的一个重要渠道。
人感染多杀性巴氏杆菌,通常是由于被动物咬伤、抓伤而导致致病菌传播。
在养殖场内多杀性巴氏杆菌病一年四季均可流行,而在气候突变、冷热交替、潮湿多雨的季节更容易流行发生。
2 临床症状在新疫区常呈现急性型经过,老疫区主要呈现慢性经过。
在该种疾病流行高发期,患病猪表现为突然发病,并在较短时间内死亡。
慢性猪巴氏杆菌病症状图谱病原多杀性巴氏杆菌(pasteurella multocida),为细小球杆菌,宽0.25~0.4 m,长0.5~1.5 m。
单个存在,有时成双排列。
革兰氏染色为阴性。
无鞭毛不形成芽孢,无运动性。
在血液和组织中的病原菌,用美蓝、瑞氏或姬姆萨液染色后镜检,菌体两端着色深,中央着色较浅,呈明显的两极着色特点。
新分离的强毒菌株具有荚膜,但在培养基培养时,荚膜迅速消失。
本菌为需氧及兼性厌氧菌,最适生长温度为37℃,pH 7.2~7.4。
添加血液或血清时,则生长良好。
在血液琼脂平板上,形成湿润、光滑、边缘整齐的圆形露珠样灰白色小菌落,有荧光,不溶血。
在肉汤中培养呈均匀一致的中等度浑浊,有黏性沉淀物,培养久时,表面形成菌膜。
在麦康凯和含有胆盐的培养基上不生长。
本菌可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和半乳糖,产酸不产气。
对乳糖、鼠李糖、杨苷、菊糖、肌醇不发酵。
可形成靛基质,接触酶和氧化酶阳性,甲基红和VP试验阴性,不液化明胶,石蕊牛乳无变化,产生H2S。
根据巴氏杆菌特异性荚膜(K)抗原吸附于红细胞上做被动血凝试验的结果不同,分为A、B、D、E和F 5个血清群,利用菌体(O)抗原做凝集反应,将本菌分成12个血清型。
利用耐热抗原做琼脂扩散试验,将本菌分成16个血清型。
K抗原用大写英文字母表示,O 抗原用阿拉伯数字表示,将菌体型和荚膜型两者结合起来表示,如5:A,6:B,2:D等。
我国对本菌血清学鉴定表明,只有A、B、D三个血清群,没有E血清群。
在猪以A型及B型为最常见。
本菌对外界环境的抵抗力不强,直射阳光下经10~15min 死亡,在表层土壤中存活7~8天;在疏松的粪便中经14天死亡;如堆积发酵则2天可死亡,说明腐败易致死亡。
在60℃加热10min,加热到100℃立即死亡。
一般常用的消毒药,都可在数分钟杀死本菌。
但10%克辽林在1 h内尚不能杀死此菌,不宜采用流行病学在健康猪上呼吸道中常带有本菌,但多半为弱毒或无毒的类型。
第三篇主要的病原微生物
第十三章病原细菌
第六节多杀性巴氏杆菌
多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是畜禽巴氏杆菌病的病原,能使多种畜禽发生出血性败血症或传染性肺炎。
本菌分布广泛,正常存在于多种健康动物的口腔和咽部黏膜,是一种条件性致病菌。
一、生物学特性
(一)形态与培养本菌为球杆状或短杆状,两端钝圆,大小为0.25~0.4μm ×0.5~2.5μm,单个存在,有时成双排列。
无鞭毛,不形成芽孢,新分离的强毒株具有荚膜,革兰氏染色阴性。
病畜的血液涂片或组织触片经美蓝或瑞氏染色时,可见典型的两极着色,即菌体两端染色深,中间浅(图13-12)。
本菌为需氧或兼性厌氧菌,对营养要求较严格,在普通培养基上生长贫瘠,在麦康凯培养基上不生长,在加有血液、血清或微量血红素的培养基上生长良好,最适温度为37℃,pH为7.2~7.4。
在血清琼脂平板上培养24h,可形成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。
在血琼脂平板上,长成水滴样小菌落,无溶血现象。
在血清肉汤中培养,开始轻度浑浊,4~6d后液体变清朗,管底出现黏稠沉淀,振摇后不分散,表面形成菌环。
本菌可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和半乳糖,产酸不产气。
大多数菌株可发酵甘露醇,一般不发酵乳糖,可产生吲哚,MR和V-P试验均为阴性,不S,触酶和氧化酶均为阳性。
液化明胶,产生H
2
(二)血清型本菌主要以其荚膜抗原和菌体抗原区分血清型,前者有6个型,后者有16个型。
1984年Carter提出本菌血清型的标准定名:以阿拉伯数字表示菌体抗原型,大写英文字母表示荚膜抗原型。
我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以5∶A为多,其次为8∶A;猪的以5∶A和6∶B为主,8∶A和2∶D其次;羊的以6∶B为多;家兔的以7∶A为主,其次是5∶A。
C型菌是犬、猫的正常栖居菌,E型主要引发牛、水牛的流行性出血性败血症(仅见于非洲),F型主要发现于火鸡。
(三)抵抗力多杀性巴氏杆菌抵抗力不强,在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡。
在阳光暴晒10min,或在56℃15min或60℃10min可被杀死。
厩肥中可存活1个月,埋入地下的病死鸡,经4个月仍残存活菌。
在干燥的空气中2~3d 可死亡。
3%石炭酸、3%福尔马林、10%石灰乳、2%来苏尔、1%氢氧化钠等5min 可杀死本菌。
对青霉素、链霉素、四环素、土霉素、磺胺类及许多新的抗菌药物敏感。
二、致病性
本菌对鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、羊、马、兔等都有致病性,家畜中以猪最敏感,致猪肺疫,禽类中以鸭最易感,其次是鹅、鸡,致禽霍乱。
急性型呈出血性败血症迅速死亡;亚急性型于黏膜关节等部位,发生出血性炎症等;慢性型则呈现萎缩性鼻炎(猪、羊)、关节炎及局部化脓性炎症等。
实验动物中小鼠最
易感。
三、微生物学诊断
(一)镜检采取新鲜病料(渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等)涂片或触片,用碱性美蓝或瑞特氏染色液染色,镜检,如发现典型的两极浓染的短杆菌,结合流行病学及剖检,即可作初步诊断。
但慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体,需进行分离培养和动物试验。
(二)分离培养最好用血琼脂平板和麦康凯琼脂同时进行分离培养,麦康凯培养基上不生长,在血琼脂平板上生长良好,形成水滴样小菌落,不溶血,革兰氏染色为阴性球杆菌。
将此菌接种在三糖铁培养基上可生长,使底部变黄。
必要时可进一步做生化反应鉴定。
(图13-13)
(三)动物试验用病料研磨制成1:10乳剂或24h肉汤培养液0.2~0.5ml,皮下注射小鼠、家兔或鸽,动物多于24~48h死亡。
由于健康动物呼吸道内常可带菌,所以应参照患畜的生前临床症状和剖检变化,结合分离菌株的毒力试验,作出最后诊断。
若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型,则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。
检测动物血清中的抗体,可用试管凝集、间接凝集、琼脂扩散试验或ELISA。
四、防治
疫苗免疫是控制畜禽巴氏杆菌的有效方法,猪可选用猪肺疫氢氧化铝甲醛苗,或用猪瘟-猪丹毒-猪肺疫三联苗,禽用禽霍乱弱毒苗,牛用牛出血性败血症氢氧化铝苗。
预防和治疗还可用抗生素、磺胺类、喹诺酮类药物等,尤其在养猪、养禽生产中,药物预防也是行之有效的措施。