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名称：乙肝疫苗(安在时成人)介绍:［药品名称］通用名：重组(酵母)乙型肝炎疫苗商品名:安在时（ＥngｅrｉxＢ）ﻫ英文名:Hｅｐａtitis B Ｖaｃcｉne Madｅｂy Rebｉned DNAＴechｎiqueｓin Yeａstﻫ汉语拼音：Cｈoｎgzｕ（Ｊiaoｍu)Yixing Ganｙａn Yｉmiaoﻫ［成分与性状］主要成分ﻫ1剂量（1、0mｌ)含有吸附得２0微克重组乙肝病毒表面抗原（S蛋白）。
辅料: 氢氧化铝、聚山梨醇脂20、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、注射用水.性状:重组（酵母）乙型肝炎疫苗装于玻璃小瓶或预充注射器内,为注射用悬液。
ﻫ小瓶与预充注射器由I 型中性玻璃制成,符合欧洲药曲规定。
ﻫ贮存状态下得内容特呈现细微白色沉淀与无色透明上清液。
振摇后疫苗稍呈混浊。
[接种对象］重组(酵母）乙型肝炎疫苗适用于乙型肝炎病毒得易感者,进行主动免疫，预防乙肝病毒感染引起得乙型肝炎.［作用与用途］用重组(酵母）乙型肝炎疫苗进行预防乙型肝炎得主动免疫, 预防乙肝病毒感染引起得乙型肝炎。
［规格］２0微克／1、０毫升/支ﻫ［免疫程序与剂量］剂量学剂量２0μg剂量疫苗（1、０ml 悬液)：用于成人与1５岁以上儿童接种.初免程序为达到最佳免疫效果,需连续进行三次肌肉注射。
推荐有两种初免程序：加速程序,即0、1、2月免疫程序.该程序可快速诱导保护性抗体得产生。
在１２个月时应进行第４剂量加强免疫。
第2针与第3针间隔较长得程序，即0、1、6月免疫程序。
该程序提供保护所需得时间较长,但可诱导较高滴度得抗—HBs抗体。
在某些特殊情况下成人需要更快得产生保护性抗体，例如到高流行区旅行者，在出发前一个月内开始接种本品,可以使用0、7、２1天３剂肌肉注射程序.当应用这一程序时，推荐在首剂接种后１2个月进行第４剂量加强免疫。
（见血清阳转率得药效学特征)。
加强剂量虽然接受全部初免程序得健康个体就是否需要加强剂量尚未明确,但就是应该注意到当前一些官方免疫程序推荐接种加强剂量。
名称：乙肝疫苗（安在时成人）介绍：［药品名称］通用名：重组（酵母）乙型肝炎疫苗商品名：安在时（EngerixB）英文名：Hepatitis B Vaccine Made by Recombined DNA Techniques in Yeast汉语拼音：Chongzu （Jiaomu）Yixing Ganyan Yimiao［成分和性状］主要成分1剂量（1.0ml）含有吸附的20微克重组乙肝病毒表面抗原（S蛋白）。
辅料: 氢氧化铝、聚山梨醇脂20、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、注射用水。
性状:重组（酵母）乙型肝炎疫苗装于玻璃小瓶或预充注射器内,为注射用悬液。
小瓶和预充注射器由I型中性玻璃制成,符合欧洲药曲规定。
贮存状态下的内容特呈现细微白色沉淀和无色透明上清液。
振摇后疫苗稍呈混浊。
［接种对象］重组（酵母）乙型肝炎疫苗适用于乙型肝炎病毒的易感者，进行主动免疫，预防乙肝病毒感染引起的乙型肝炎。
［作用与用途］用重组（酵母）乙型肝炎疫苗进行预防乙型肝炎的主动免疫, 预防乙肝病毒感染引起的乙型肝炎。
［规格］20微克/1.0毫升/支［免疫程序和剂量］剂量学剂量20μｇ剂量疫苗（1.0ml 悬液）：用于成人和15岁以上儿童接种。
初免程序为达到最佳免疫效果，需连续进行三次肌肉注射。
推荐有两种初免程序：加速程序，即0、1、2月免疫程序。
该程序可快速诱导保护性抗体的产生。
在12个月时应进行第4剂量加强免疫。
第2针与第3针间隔较长的程序，即0、1、6月免疫程序。
该程序提供保护所需的时间较长，但可诱导较高滴度的抗-HBs抗体。
在某些特殊情况下成人需要更快的产生保护性抗体，例如到高流行区旅行者，在出发前一个月内开始接种本品，可以使用0、7、21天3剂肌肉注射程序。
当应用这一程序时，推荐在首剂接种后12个月进行第4剂量加强免疫。
（见血清阳转率的药效学特征）。
加强剂量虽然接受全部初免程序的健康个体是否需要加强剂量尚未明确，但是应该注意到当前一些官方免疫程序推荐接种加强剂量。
重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)药品名称:通用名称：重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)英文名称：Hepatitis B Vaccine Made by Recombined DNA Techniques in Yeast商品名称：安在时成份:主要成份：1剂量(1.0ml)含有吸附的20微克重组乙肝病毒表面抗原（S蛋白）*。
1剂量(0.5ml)含有吸附的10微克重组乙肝病毒表面抗原（S蛋白）*。
由基因工程酵母细胞(Saccharomyces...适应症:用重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）进行预防乙型肝炎的主动免疫，预防乙肝病毒感染引起的乙型肝炎。
规格:成人剂量：20μg/l.Oml/支儿童剂量：10μg/0.5ml/支用法用量:剂量学剂量20μg剂量疫苗：20μg剂量疫苗(1.0ml悬液)用于成人和15岁以上青少年接种。
10μg剂量疫苗：10μg剂量疫苗(0.5ml悬液)用于15岁以下（包括15岁）儿童及新生儿接种。
如果预见...不良反应:临床试验以下安全数据基于5300多个受试者的研究结果。
报告中频率的定义如下：非常常见：（≥1/1 0）常见：（≥1/100,1/10）不常见：（≥1/1,000，1/100）罕见：（≥1/10,00...禁忌:已知对疫苗任何成分超敏者及以往接种重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）后出现超敏症状者不能接种本品。
同其它疫苗一样，急性严重发热性疾病患者应推迟接种重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）。
然而轻微感染不是接种的禁忌症。
由于乙型肝炎的潜伏期长，在免疫时可能已有未被识别的感染存在，在这种情况下疫苗可能不能预防乙肝感染。
本疫苗不能预防甲型、丙型、戊型肝炎病毒及其它已知感染肝脏的病原体导致的感染。
对乙型肝炎疫苗的免疫应答与...孕妇及哺乳期妇女用药:妊娠尚未评价HBsAg对胎儿发育的影响。
尽管灭活病毒疫苗不会对胎儿造成损伤，但是在对孕妇进行接种前，仍需要权衡接种疫苗后的风险和利益，当确定利益大于风险并确实需要接种时，才能将重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵...药物相互作用:重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）和标准剂量的乙肝免疫球蛋白(HBlg)在不同注射部位同时接种不会导致抗-HBs抗体滴度降低。
重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）说明书药品名称：通用名称：重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）成分和性状：本品系由重组酿酒酵母表达的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）经纯化，加入铝佐剂制成。
为乳白色混悬液体，可因沉淀而分层，易摇散，不含任何防腐剂。
有效成分：乙型肝炎病毒表面抗原。
辅料：氢氧化铝，氯化钠。
接种对象：本疫苗适用于16岁及16岁以上的乙型肝炎易感者。
作用与用途：接种本疫苗后，可刺激机体产生抗乙型肝炎病毒的免疫力。
用于预防乙型肝炎。
不良反应常见不良反应：一般接种疫苗后24小时内。
在注射部位可出现疼痛和触痛，多数情况下2～3天内自行消失。
罕见不良反应1：一般接种疫苗后72小时内，可出现一过性发热反应，一般持续1～2天后自行缓解，不需处理。
2；接种部位，中度的红肿，疼痛，一般持续1～2天后自行缓解，不需处理。
3：接种部位可出现硬结，一般1～2月可自行吸收。
极罕见不良反应1：局部无菌性化脓：一般要用注射器反复抽出脓液，严重时（如出现破溃）需扩创清除坏死组织，病时较长，最后可吸收愈合。
2：过敏反应：过敏性皮疹，阿瑟反应。
阿瑟反应一般出现在接种后10天左右，局部红肿持续时长，可用固醇类药物进行全身和局部治疗。
3：过敏性休克：一般在接种疫苗1小时内发生，应及时注射肾上腺素等抢救措施进行治疗。
禁忌：1：已知对该疫苗所含任何成分，包括辅料以及甲醛过敏者。
2：患急性疾病，严重性慢疾病，慢性疾病，的急性发作和发热期和发热者。
3：妊娠期妇女。
4：患未控制的癫痫和其他进行性神经系统疾病者。
注意事项：1：以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史，患慢性疾病者，有癫痫史者，过敏体质者。
2：使用时应充分摇匀，如疫苗有裂纹，标签不清或失效者，疫苗瓶内有异物者均不得使用。
3：疫苗瓶开启后应立即使用。
4：应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应发生时急救用。
接受注射者在注射后应在现在观察至少30分钟。
5：注射第1针后出现高热，惊厥等异常情况者，一般不再注射第2针。
接种乙肝疫苗的不良反应及预防护理分析摘要：目的：分析小儿接种乙肝疫苗不良反应的相关因素及预防护理方法。
方法：总结分析我站使用深圳康泰生物制品股份有限公司生产的10μg重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）接种乙肝疫苗不良反应40例次的分布及干预结果。
结果：小儿接种乙肝疫苗不良反应 40 例次均为一般反应，无罕见反应。
结论：小儿接种乙肝疫苗安全有效，不良反应轻微，均可自愈或干预后缓解，但也非常有必要做好处理疫苗接种严重不良反应的预案。
关键词：乙肝疫苗；预防接种；不良反应Abstract：Objective：To analyze the related factors and prevention methods of adverse reactions of hepatitis B vaccine in children. Methods：The distribution and intervention results of 40 cases of hepatitis B vaccine inoculated with 10μg recombinant hepatitis B vaccine（Saccharomyces cerevisiae）produced by Shenzhen Kangtai Biological Products Co.，Ltd. were analyzed. Results：There were no adverse reactions in 40 cases of adverse reactions of hepatitis B vaccine in children. Conclusion：Inoculation of hepatitis B vaccine in children is safe and effective，mild adverse reactions，can be self-healing or mitigation after intervention，but it is also necessary to do a good job to deal with serious adverse reactions vaccination plan.Key words：hepatitis B vaccine；vaccination；adverse reactions前言：乙型肝炎疫苗已广泛应用于人群，特别是在0—6岁小儿阶段，有效的全程接种可持续保护作用 15 年，对乙型肝炎的预防控制起到了决定性的重要作用。
名称：乙肝疫苗（安在时成人）介绍：［药品名称］通用名：重组（酵母）乙型肝炎疫苗商品名：安在时（EngerixB）英文名：Hepatitis B Vaccine Made by Recombined DNA Techniques in Yeast汉语拼音：Chongzu （Jiaomu）Yixing Ganyan Yimiao［成分和性状］主要成分1剂量（1.0ml）含有吸附的20微克重组乙肝病毒表面抗原（S蛋白）。
辅料: 氢氧化铝、聚山梨醇脂20、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、注射用水。
性状:重组（酵母）乙型肝炎疫苗装于玻璃小瓶或预充注射器,为注射用悬液。
小瓶和预充注射器由I型中性玻璃制成,符合欧洲药曲规定。
贮存状态下的容特呈现细微白色沉淀和无色透明上清液。
振摇后疫苗稍呈混浊。
［接种对象］重组（酵母）乙型肝炎疫苗适用于乙型肝炎病毒的易感者，进行主动免疫，预防乙肝病毒感染引起的乙型肝炎。
［作用与用途］用重组（酵母）乙型肝炎疫苗进行预防乙型肝炎的主动免疫, 预防乙肝病毒感染引起的乙型肝炎。
［规格］20微克/1.0毫升/支［免疫程序和剂量］剂量学剂量20μｇ剂量疫苗（1.0ml 悬液）：用于成人和15岁以上儿童接种。
初免程序为达到最佳免疫效果，需连续进行三次肌肉注射。
推荐有两种初免程序：加速程序，即0、1、2月免疫程序。
该程序可快速诱导保护性抗体的产生。
在12个月时应进行第4剂量加强免疫。
第2针与第3针间隔较长的程序，即0、1、6月免疫程序。
该程序提供保护所需的时间较长，但可诱导较高滴度的抗-HBs抗体。
在某些特殊情况下成人需要更快的产生保护性抗体，例如到高流行区旅行者，在出发前一个月开始接种本品，可以使用0、7、21天3剂肌肉注射程序。
当应用这一程序时，推荐在首剂接种后12个月进行第4剂量加强免疫。
（见血清阳转率的药效学特征）。
加强剂量虽然接受全部初免程序的健康个体是否需要加强剂量尚未明确，但是应该注意到当前一些官方免疫程序推荐接种加强剂量。
.....重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (Niangjiu Jiaomu)Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques inSaccharomyces Cerevisciae Yeast本品系由重组酵母菌表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原（HBsAg）经纯化、加入铝佐剂制成，用于预防乙型肝炎。
1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。
2 制造2.1 生产用菌种2.1.1 名称及来源生产用菌种为美国默克公司以DNA重组技术构建的表达HBsAg的重组酿酒酵母原始菌种，菌种号为2150-2-3（pHBS56-GAP347/33）。
2.1.2 种子批的建立应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。
由美国默克公司提供的菌种经扩增1代为主种子批，主种子批扩增1代为工作种子批。
2.1.3 种子批检定主种子批及工作种子批应进行以下项目的全面检定。
2.1.3.1 培养物纯度培养物接种于哥伦比亚血琼脂平板和酶化大豆蛋白琼脂平板，分别于20~25℃和30~35℃培养5~7天，应无细菌和其他真菌被检出。
2.1.3.2 HBSAg基因序列测定应与美国默克公司提供菌种的HBSAg基因序列保持一致。
2.1.3.3 质粒保有率采用平板复制法检测。
将菌种接种到复合培养基上培养，得到的单个克隆菌落转移到限制性培养基上培养，计算质粒保有率，应不低于95%。
PR%= [A /（A+L）] ×100式中PR为质粒保有率，（％）；A为在含腺嘌呤的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿；A+L为在含腺嘌呤和亮氨酸的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿2.1.3.4 活菌率采用血细胞计数仪器，分别计算每毫升培养物中总菌数和活菌数，活菌率应不低于50%活菌率=活菌数/总菌数×100%.....2.1.3.5抗原表达率取种子批菌种扩增培养，采用适宜的方法将培养后的细胞破碎，分别用Lowry法测定破碎液的蛋白质含量，并采用酶联免疫法或其他适宜方法测定HBsAg含量。
(10)申请公布号 (43)申请公布日 2013.10.02C N 103333938 A (21)申请号 201310306827.0(22)申请日 2013.07.19C12P 21/02(2006.01)C07K 14/02(2006.01)C07K 1/16(2006.01)A61K 39/29(2006.01)A61P 31/20(2006.01)A61P 1/16(2006.01)(71)申请人深圳康泰生物制品股份有限公司地址518000 广东省深圳市南山区科技园科发路6号(72)发明人甘建辉 饶洪冲 朱征宇 梁全关敏 肖坚(74)专利代理机构深圳市盈方知识产权事务所(普通合伙) 44303代理人杨贤(54)发明名称重组酿酒酵母表达的乙肝表面抗原及其生产方法、乙肝疫苗及其生产方法(57)摘要本发明公开一种重组酿酒酵母表达的乙肝表面抗原的生产方法，包括：将提取到的抗原用XAD-4柱循环去除曲通，得到去曲通抗原样液；将孔径为1000A 、颗粒大小为35μm ～70μm 的大孔硅胶装入层析柱中，并用pH 值为7.6±0.2的磷酸缓冲液平衡；将去曲通抗原样液用NaOH 调pH值至7.6±0.2后，上样大孔硅胶柱；用pH 值为7.2±0.2的磷酸缓冲液洗杂，在47～49℃温度下用pH 值为8.7±0.2的硼酸缓冲液对洗杂后的大孔硅胶柱进行洗脱处理并收集洗脱液，对洗脱液超滤浓缩，得到澄清抗原。
本发明还公开了相应的重组酿酒酵母表达的乙肝表面抗原、乙肝疫苗及其生产方法。
本发明可大大降低产品污染几率、减轻人工劳动强度、节省设备投资和维修成本、减少设备占用空间，缩短生产时间。
(51)Int.Cl.权利要求书2页 说明书7页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书2页 说明书7页(10)申请公布号CN 103333938 A*CN103333938A*1.一种重组酿酒酵母表达的乙肝表面抗原的生产方法，该方法包括有用重组酿酒酵母种子培养酵母菌的酵母培养步骤、从所述酵母菌中提取抗原的抗原提取步骤和对所述抗原进行纯化的纯化步骤，所述纯化步骤包括有依次进行的粗纯化步骤和精纯化步骤，其特征在于，在所述抗原提取步骤之后和纯化步骤之前，还包括有：去曲通步骤，将所述抗原提取步骤提取到的抗原用XAD-4柱循环去除曲通，得到去曲通抗原样液；所述粗纯化步骤包括：装柱步骤，将孔径为1000A、颗粒大小为35μm～70μm的大孔硅胶装入层析柱中形成大孔硅胶柱后，用pH值为7.6±0.2的磷酸缓冲液对所述大孔硅胶柱进行平衡处理；上样步骤，将所述去曲通抗原样液用NaOH调pH值至7.6±0.2后，上样到所述大孔硅胶柱，其中，所述大孔硅胶柱与去曲通抗原样液上样量的体积比为1:1～1:3，上样温度为2～8℃；后处理步骤，用pH值为7.2±0.2的磷酸缓冲液对上样步骤所得的大孔硅胶柱进行洗杂后，在45～49℃温度下用pH值为8.7±0.2的硼酸缓冲液对洗杂后的大孔硅胶柱进行洗脱处理并收集洗脱液，对所述洗脱液进行超滤浓缩处理，得到澄清抗原。
.....重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (Niangjiu Jiaomu)Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques inSaccharomyces Cerevisciae Yeast本品系由重组酵母菌表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原（HBsAg）经纯化、加入铝佐剂制成，用于预防乙型肝炎。
1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。
2 制造2.1 生产用菌种2.1.1 名称及来源生产用菌种为美国默克公司以DNA重组技术构建的表达HBsAg的重组酿酒酵母原始菌种，菌种号为2150-2-3（pHBS56-GAP347/33）。
2.1.2 种子批的建立应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。
由美国默克公司提供的菌种经扩增1代为主种子批，主种子批扩增1代为工作种子批。
2.1.3 种子批检定主种子批及工作种子批应进行以下项目的全面检定。
2.1.3.1 培养物纯度培养物接种于哥伦比亚血琼脂平板和酶化大豆蛋白琼脂平板，分别于20~25℃和30~35℃培养5~7天，应无细菌和其他真菌被检出。
2.1.3.2 HBSAg基因序列测定应与美国默克公司提供菌种的HBSAg基因序列保持一致。
2.1.3.3 质粒保有率采用平板复制法检测。
将菌种接种到复合培养基上培养，得到的单个克隆菌落转移到限制性培养基上培养，计算质粒保有率，应不低于95%。
PR%= [A /（A+L）] ×100式中PR为质粒保有率，（％）；A为在含腺嘌呤的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿；A+L为在含腺嘌呤和亮氨酸的基本培养基上生长的菌落数，CFU/皿2.1.3.4 活菌率采用血细胞计数仪器，分别计算每毫升培养物中总菌数和活菌数，活菌率应不低于50%活菌率=活菌数/总菌数×100%.....2.1.3.5抗原表达率取种子批菌种扩增培养，采用适宜的方法将培养后的细胞破碎，分别用Lowry法测定破碎液的蛋白质含量，并采用酶联免疫法或其他适宜方法测定HBsAg含量。
抗原表达率应不低于0.5%抗原表达率=抗原含量/蛋白含量×100%2.1.4 菌种保存主种子批和工作种子批菌种应于液氮中保存，工作种子批菌种保存于-70℃应不超过6个月。
2.2 原液2.2.1 发酵取工作种子批菌种，于适宜温度和时间经锥形瓶、种子罐和生产罐进行三级发酵，收获的酵母菌应冷冻保存。
2.2.2 培养物检定2.2.2.1 培养物纯度同2.1.3.1项。
2.2.2.2 质粒保有率平板复制法测试的质粒保有率应不低于90%。
2.2.3 培养物保存于－60℃以下保存不超过6个月。
2.2．4 纯化用细胞破碎器破碎酵母菌，除去细胞碎片，以硅胶吸附法粗提HBsAg，疏水层析法纯化HBsAg，经硫氰酸盐处理后，稀释和除菌过滤后即为原液。
2.2.4 原液检定按3.1项进行。
2.2.5 原液保存于2－8℃保存不超过3个月。
2. 3 半成品2.3.1甲醛处理原液中按终浓度为100μg/ml加入甲醛，于37℃保温适宜时间。
2．3.2 铝吸附每微克蛋白和铝剂按一定比例置2-8℃吸附适宜的时间，用无菌生理氯化钠溶液洗涤去上清后再恢复至原体积，即为铝吸附产物。
2.3.3 半成品配制蛋白质浓度为20.0~27.0 µg/ml的铝吸附后原液可与铝佐剂等量混合后，即为半成品。
2. 3. 3 半成品检定按3.2项进行。
2. 4 成品2.4.1 分批应符合“生物制品分批规程”规定。
2.4.2 分装应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.4.3规格每瓶0.5 ml、1.0 ml。
每1次人用剂量0.5 ml（含HBsAg 5 µg或10µg）或1.0 ml（含HBsAg 10 µg）。
2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。
3 检定3.1 原液检定3.1.1无菌检查依法检查（附录XⅡ A），应符合规定。
3.1.2 蛋白质浓度应为20.0~27.0 µg/ml（附录VI B二法）。
3.1.3 特异蛋白带依法测定(附录IV C)，采用非还原性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，还原性电泳，上样量为0.5μg，银染法染色，分离胶浓度为15%，上样量为0.5μg，银染法染色应有分子量为20~25kD蛋白带，可有低于24kD蛋白带及HBsAg二聚体蛋白带。
3.1.4 N末端氨基酸序列测定（每年至少进行一次该项测定）N末端氨基酸序列应为…………….3.1.5 纯度采用免疫印迹法测定（附录VIII A），所测供试品不得出现国家药品检定机构认可以外的酵母杂蛋白；采用高效液相色谱法（附录III B），亲水硅胶高效体积排阻色谱柱；排阻极限1000kD；孔径45nm，流动相：pH7.0含0.05%叠氮钠，0.1%SDS的磷酸盐缓冲液；上样量：100μl；检测波长：280nm。
HBsAg含量应不低于99.0%，或杂蛋白应不高于1.0%。
3.1.6 细菌内毒素检查应小于10EU/ml（附录XⅡ E 凝胶限量试验）。
3.2 半成品检定3.2.1 吸附完全性取供试品于6500g离心5分钟取上清，依法测定（附录X A）参考品、供试品及其上清中HBsAg含量。
以参考品HBsAg含量的对数对应其吸光度值(或响应值)对数进行直线回归，相关系数应不低于0.99，将供试品及其上清的吸光度值(或响应值)代入回归方程，计算其HBsAg含量，再按下式计算吸附率，应不低于95%。
CsP％=100 －───×100Ct式中P为吸附率（%）；Cs为供试品上清的HBsAg含量（µg/ml）；Ct为供试品的HBsAg含量（µg/ml）3.2.2 化学检定3.2.2.1硫氰酸盐含量将供试品于6500 g 离心5分钟，取上清。
分别取含量为1.0、2.5、5.0、10.0 µg/ml的硫氰酸盐标准溶液、供试品上清、生理氯化钠溶液各5.0 ml于试管中，每一供试品取2份，在每管中依次加入硼酸盐缓冲液（pH9.2）0.5 ml，2.25 %氯胺T-生理氯化钠溶液0.5 ml，50 %吡啶溶液（用生理氯化钠溶液配制）1.0 ml，每加一种溶液后立即混匀，加完上述溶液后静置10分钟，以生理氯化钠溶液为空白对照，在波长415 nm处测定各管吸光度。
以标准溶液中硫氰酸盐的含量对应其吸光度均值进行直线回归，计算相关系数，应不低于0.99，将供试品上清的吸光度均值代入回归方程，计算硫氰酸盐含量，应小于1.0 µg/ml。
3.2.2.2 Triton X-100含量将供试品于6500 g 离心5分钟，取上清。
分别取含量为5、10、20、30、40 µg/ml的Triton X-100标准溶液、供试品上清、生理氯化钠溶液各2.0 ml于试管中，每一供试品取2份，每管分别加入5%（V/V）苯酚溶液1.0 ml，迅速振荡，室温放置15分钟。
以生理氯化钠溶液为空白对照，在波长340 nm处测定各管吸光度。
以标准溶液中Triton X-100的含量对应其吸光度均值进行直线回归，计算相关系数，应不低于0.99，将供试品上清的吸光度均值代入回归方程，计算Triton X-100含量，应小于15 µg/ml。
3.2.2.3 pH值应为5.5~7.2（附录V A）。
3.2.2.4游离甲醛含量应小于20 µg/ml（附录VI L）。
3.2.2.5 铝含量应为0.35~0.62 mg/ml（附录VⅡF）。
3.2.2.6 渗透压摩尔浓度应为280±65 mOsmol/L（附录V H）。
3.2. 3无菌检查依法检查（附录XⅡ A），应符合规定。
3.2.4 细菌内毒素检查应小于5 EU/ml（附录XⅡ E 凝胶限量试验）。
3.3 成品检定3.3.1 鉴别试验采用酶联免疫法检测，应证明为HBsAg。
3.3.2 外观应为乳白色混悬液体，可因沉淀而分层，易摇散，不应有摇不散的块状物。
3.3.3 装量按附录I A 装量项进行，应不低于标示量。
3.3.4 化学检查3.3.4.1 pH值应为5.5~7.2（附录V A）3.3.4.2 铝含量应为0.35~0.62 mg/ml（附录VⅡF）。
3.3.5 体外相对效力测定应不低于0.5（附录X A）。
3.3.6 无菌检查依法检查（附录XⅡ A），应符合规定。
3.3.7 异常毒性检查依法检查（附录XⅡ F），应符合规定。
3.3.8 细菌内毒素检查应小于5 EU/ml（附录XⅡ E 凝胶限量试验）。
4 保存、运输及有效期于2~8℃避光保存和运输。
自生产之日起，有效期为36个月。
5 说明书。
