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丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR-荧光探针法）说明书【产品名称】通用名称：丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR–荧光探针法）【包装规格】 48人份/盒【预期用途】本试剂盒用于体外定量测定血清样本中的丙型肝炎病毒（HCV）核酸（RNA），适用于需要进行HCV感染检测的患者和接受抗病毒治疗的丙型肝炎患者。
本试剂盒可以检测HCV 1~6型临床常见型别，主要通过对丙型肝炎患者血液中HCV RNA含量及变化情况的监测，用于评估抗病毒治疗的应答和治疗效果。
该检测不得作为患者病情评价的唯一指标，必须结合临床表现和其他实验室检测指标对患者病情进行综合评价。
本试剂盒不得用于HCV的血源筛查。
【检验原理】本试剂盒在PCR扩增管内用含磁珠的裂解液提取血清样本中HCV RNA，并在同一管中进行扩增，HCV RNA在逆转录酶作用下反转录成HCV cDNA，然后在DNA聚合酶的作用下，应用TaqMan探针技术扩增HCV cDNA并进行实时荧光定量检测。
本试剂盒校准品和质控品为含有丙型肝炎病毒的临床血清样本（已灭活）。
本试剂盒通过检测内标来监测样本中是否有PCR抑制物，避免假阴性。
【主要组成成分】丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR–荧光探针法）序号产品组成主要成分规格与装量RLB 核酸提取试剂HCV裂解液（含磁珠）氢氧化钠、氯化钾、Tris碱、构象磁珠7.5ml×1瓶RWB HCV漂洗液氯化钾、乙酸钠25.0ml×1瓶1 PCR扩增试剂HCV RT-PCR 反应液引物、探针、脱氧核糖核苷三磷酸、镁离子0.95ml×2管2 HCV酶混合液M-MLV逆转录酶、DNA聚合酶100μl×1管3校准品HCV校准品①（1.0～3.0）×106IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管4 HCV校准品②（1.0～3.0）×105IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管5 HCV校准品③（1.0～3.0）×104IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管6 HCV校准品④（1.0～3.0）×103IU/ml 定值HCV阳性血清样本（已灭活）0.35 ml×1管7质控品HCV强阳性质控品（0.5～5.0）×104IU/ml HCV阳性混合血清样本（已灭活）0.35 ml×1管8 HCV弱阳性质控品（100～700）IU/ml HCV阳性混合血清样本（已灭活）0.35 ml×1管9 HCV 阴性质控品HCV阴性混合血清样本（已灭活）0.35 ml×1管10 内标HCV内标内标核酸模板60μl×1管备注：a.校准品①～④的参数和强阳、弱阳性质控品的定值存在批间差异（均在以上范围内）。
丙型肝炎病毒核酸定量测定试剂盒（PCR-荧光法）说明书【产品名称】通用名：丙型肝炎病毒核酸定量测定试剂盒（PCR-荧光法）英文名：PCR-Fluorescence Detection Kit for Hepatitis C Virus RNA汉语拼音：Bingxing Ganyan Bingdu Hesuan Dingliang Ceding Shijihe （PCR -Yingguang fa）【包装规格】 32人份/盒【预期用途】本试剂盒用于丙型肝炎的辅助诊断及疗程监控。
【原理和应用】本试剂盒利用一对丙型肝炎病毒（HCV）的特异性引物，一条特异性荧光探针，采用逆转录酶、耐热DNA聚合酶（Taq酶）、四种单体核苷酸（dNTPs）等成分，并应用RT-PCR 技术实现对HCV RNA保守基因的扩增，同时通过外标的方法实现对血清或血浆中的丙型肝炎病毒进行定量检测。
本试剂盒可作为丙型肝炎的辅助诊断及疗程监控。
【试剂盒组成】*【储存条件及有效期】裂解液为黄色液体，保存于4℃；其他试剂目测为透明液体，保存于-20℃，不宜反复冻融，使用前应在室温下完全融化，并充分振荡混匀后稍事离心；所有试剂应避光保存；有效期十二个月。
【自备物品】1. 自备试剂（分析纯）氯仿、异丙醇（-20℃预冷）、75%乙醇（用不含Rnase和Dnase的水配制，-20℃预冷）2. 自备仪器高速台式冷冻离心机、移液枪、一次性耗材（无酶吸头、离心管、手套、帽子等）、专用工作服、工作鞋、办公用品等。
【适用仪器】PE-5700，PE-7000，PE-7300，PE-7700，Icycler定量荧光PCR仪【样本要求】1. 样本种类：血清或血浆血清以新鲜采集分离为好，采血6小时内必须分离、收集血清，并将血清转移至一次性使用无RNA酶的无菌微量离心管中。
血浆不能用肝素作抗凝剂。
2. 样本储存：待测样本在2-8℃保存不应超过24hr，-20℃保存不应超过三个月，-70℃以下可长期保存。
人类免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1P24)ELISA检测试剂盒简介人类免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV1P24)ELISA检测试剂盒说明书检测原理试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被免疫缺陷病毒1型p24抗体的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUT OFF值相比较，从而判定标本中人类免疫缺陷病毒1型p24抗原（HIV1 P24）的存在与否。
样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的最佳检测效果。
严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称 96孔配置 48孔配置备注微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条无阴性对照 0.5mL 0.5mL 无阳性对照 0.5mL 0.5mL 无检测抗原HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释样本稀释液 6mL 3mL 无底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液 6mL 3mL 无封板膜 2张 2张无说明书 1份 1份无自封袋 1个 1个无试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
2020版药典变化全汇总一部中药收载2711种，其中新增117种、修订452种。
新增了药材：裸花紫珠。
新增制剂：116个，具体清单如下：二部化学药收载2712种，其中新增117种、修订2387种。
在药品安全性控制方面，要求进一步完善杂质和有关物质的分析方法，推广先进检测技术的应用，重点强化了对有毒有害杂质（特别是基因毒性杂质）的控制，加强了对药品安全性相关控制项目和限度标准的研究制定。
在药品有效性控制方面，要求将药品质量和疗效一致性评价的成果体现在相关制剂的质量标准提高中，进一步完善了常规固体制剂溶出及释放度检测方法，且在整体质量控制方面进一步借鉴国际要求。
2020年版药典二部新增品种（117个），与一部新增品种居然一样！未收载品种（8个），名称变化的品种（5个）。
具体清单如下：未收载品种（8个）本版药典（二部）未收载2015年版药典（二部）中的品种名单：•鱼肝油••重组人生长激素••注射用重组人生长激素••重组人胰岛素••重组人胰岛素注射液••精蛋白重组人胰岛素注射液••盐酸吡硫醇注射液••注射用盐酸吡硫醇•新增品种（117个）本版药典(二部)新增品种名单：1.注射用门冬氨酸鸟氨酸2.马来酸氟伏沙明3.马来酸氟伏沙明片4.扎来普隆5.乌苯美司片6.丙戊酸钠缓释片（I）7.丙泊酚乳状注射液（曾用名：丙泊酚注射液）8.丙酸氟替卡松9.左卡尼汀10.左甲状腺素钠11.左甲状腺素钠片12.右佐匹克隆13.右佐匹克隆片14.卡培他滨15.卡培他滨片16.甲钴胺片17.甲钴胺注射液18.甲磺酸多沙唑嗪19.甲磺酸多沙唑嗪片20.甲磺酸多沙唑嗪胶囊21.甲磺酸瑞波西汀22.甲磺酸瑞波西汀片23.甲磺酸瑞波西汀胶囊24.兰索拉唑肠溶胶囊25.矛头蝮蛇血凝酶（曾用名：蛇毒血凝酶、血凝酶）26.注射用矛头蝮蛇血凝酶（曾用名：注射用蛇毒血凝酶、注射用血凝酶）27.地红霉素肠溶片28.地红霉素肠溶胶囊29.西尼地平胶囊30.西吡氯铵31.西吡氯铵含漱液32.西咪替丁注射液33.西洛他唑片34.托拉塞米35.托拉塞米片36.托拉塞米胶囊37.注射用托拉塞米38.吗替麦考酚酯分散片39.伏格列波糖40.伏格列波糖片41.伏格列波糖胶囊42.米氮平43.米氮平片44.那他霉素45.那他霉素滴眼液46.坎地沙坦酯片47.克霉唑阴道膨胀栓[曾用名：克霉唑栓（指含膨胀棉条的克霉唑栓)]48.更昔洛韦胶囊49.来曲唑50.来曲唑片51.吲哚美辛片52.佐米曲普坦分散片53.阿托伐他汀钙54.阿利沙坦酯55.阿利沙坦酯片56.阿那曲唑片57.苯磺酸左氨氯地平58.苯磺酸左氨氯地平片59.拉西地平60.拉西地平片61.依巴斯汀62.依巴斯汀片63.草酸艾司西酞普兰64.草酸艾司西酞普兰片65.枸橼酸坦度螺酮66.枸橼酸坦度螺酮胶囊67.抗凝血用枸橼酸钠溶液[曾用名：(1)输血用枸橼酸钠注射液（适应症为仅用于单采原料血浆的体外抗凝血）K2)枸橼酸钠抗凝剂]68.枸橡酸钾颗粒69.氟尿苷（曾用名：氟脲苷）70.复方氨基酸（15)双肽(2)注射液71.美司钠72.美司钠注射液73.盐酸乙哌立松74.盐酸乙哌立松片75.盐酸左布比卡因76.盐酸左布比卡因注射液77.盐酸托烷司琼片78.盐酸托烷司琼胶囊79.盐酸曲普利啶80.盐酸伊达比星81.注射用盐酸伊达比星82.盐酸奈福泮胶囊83.盐酸度洛西汀84.盐酸度洛西汀肠溶片85.盐酸度洛西汀肠溶胶囊86.盐酸羟甲唑啉87.盐酸羟甲唑啉喷雾剂88.盐酸羟甲唑啉喷鼻液89.盐酸羟苄唑90.盐酸羟苄唑滴眼液（曾用名：羟苄唑滴眼液）91.盐酸奥布卡因92.盐酸奥布卡因滴眼液93.氨糖美辛肠溶片94.氨糖美辛肠溶胶囊95.脂肪乳注射液（C14~24)(曾用名：脂肪乳注射液）96.酒石酸溴莫尼定97.酒石酸溴莫尼定滴眼液98.酚磺乙胺99.注射用酚磺乙胺100.铝碳酸镁101.铝碳酸镁咀嚼片102.葡萄糖酸钙氯化钠注射液103.硝酸益康唑阴道膨胀栓[曾用名：硝酸益康唑栓（指含膨胀棉条的硝酸益康唑栓)]104.氯沙坦钾105.氯沙坦钾片106.氯沙坦钾胶囊107.酮咯酸氨丁三醇108.酮咯酸氨丁三醇注射液109.腺苷110.腺苷注射液[曾用名：腺苷注射液(供诊断用）]111.去氨加压素片（曾用名：醋酸去氨加压素片）112.注射用去氨加压素（曾用名：注射用醋酸去氨加压素）113.磷酸氟达拉滨114.注射用磷酸氟达拉滨115.磷酸腺嘌呤（曾用名：维生素b4)116.磷酸腺嘌呤片（曾用名：维生B4片）117.碘帕醇注射液三部生物制品收载153种，其中新增20种、修订126种；新增生物制品通则2个、总论4个。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法）【药品名称】通用名：人类免疫缺陷病毒抗体诊断剂盒（胶体金法） 商品名：无英文名：Human Immunodeficiency Virus antibodies Diagnostic Kit 汉语拼音：REN LEI MIAN YI QUE XIAN BING DU KANG TI ZHEN DUAN SHI JI HE【使用目的】用于检测人血清或者血浆中的HIV(1+2)抗体 【试验原理】本试剂盒应用双抗原夹心胶体金免疫层析法检测血清/血浆中的HIV(1+2)抗体。
将通过基因工程技术制备的针对不同结合位点的两组HIV 重组抗原gp41、gp36分别用于标记和包被。
用纯化的兔抗gp41、gp36抗体作为质控线。
当样本通过层析作用在试纸条上迁移时，样本中如果含有HIV-1或HIV-2抗体，则在检测线区域将生成Ag-Ab-Ag-AU 复合物从而形成一条明显的红色线条。
无论样本中是否含有HIV 抗体，在质控线区域都将生成Ab-Ag-AU 复合物，从而形成另一条明显的红色线条。
【主要组成成分】 1）50人份/盒 1. 检测试纸条50个2. 说明书 1份 2）1人份/盒试剂条，稀释液，采血针，采血管，消毒棉球，说明书各一份。
【适用仪器】不需要任何仪器。
【标本要求】血清/血浆 【试验方法】1、试剂盒如从冰箱中取出后应平衡到室温后再从铝塑袋中取出检测卡，水平放置；2、向圆形加样孔中滴加待检样本；3、样本用量为50微升；4、在30分钟内读取椭圆形观察窗内结果 【对试验结果的解释】【该试验方法的局限性】本品仅适用于HIV （1+2）抗体的体外检测。
【产品性能指标】质控线区域的红色条带必须出现否则实验不成立。
【注意事项】 1、 全部检测工作必须符合生物安全守则规定，严格防止交叉感染。
2、 操作时须戴手套，穿工作衣，严格执行消毒隔离制度。
3、 使用前请检查本产品是否在有效期内，以及铝塑袋的密封状况； 4、 样本使用量多于200微升有可能导致溢出、流速缓慢、高背景、假阳性等结果；5、 如果样本过于粘稠有可能导致质控线暗淡甚至缺失；6、试纸条如从寒冷环境（冰箱）中取出后应平衡到室温后再使用；7、请使用新鲜的检测样本； 8、无论检测结果如何必须按照HIV 阳性污染物处理检测卡。
乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒样本要求1.适用标本类型：血清或血浆2.标本采集1）血清：用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升，注入无菌的干燥玻璃管，室温放置30—60min，血标本可自发完全凝集析出血清，或直接使用水平离心机，1500 rpm离心5分钟，吸取上层血清，转移至1.5ml灭菌离心管2）血浆：用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升，注入含EDTA-2K或枸橼酸钠的玻璃管，立即颠倒玻璃管混合5—10次，使抗凝剂和静脉血充分混匀，5—10分钟后即可分离血浆，转移至1.5 ml灭菌离心管3.标本保存与运送：所采集的标本可立即用于测试，也可以保存在—20℃待测，保存期为6个月，标本运送采用0℃冰壶。
检验方法1.DNA提取（样品制备区）将待测样本、阳性定量参考品、阴性质控品、HBV 强阳性质控品、HBV临界阳性质控品进行同步处理。
1）取200μl样品，加入450μlDNA提取液I和4μl的内标溶液，用振荡器剧烈混匀15秒，瞬时离心数秒。
100℃恒温处理10±1分钟2）12000rpm离心5分钟，备用2. PCR试剂准备（试剂准备区）直接使用HBV-PCR反应管3.加样（样品制备区）往上述HBV反应管中用带滤芯吸嘴分别加入待测样本、阴性质控品、HBV 强阳性质控品、HBV临界阳性质控品和阳性定量参考品的上清液各20μl。
盖紧管盖，8000rpm离心数秒后转移至扩增检测区。
4.PCR扩增（扩增和产物分析区）5.结果分析反应结束后自动保存结果，根据分析后的图像调节baseline值得Start值、End值以及Threshold值，点击Analysis自动获取分析结果，在Repoet界面查看结果，记录未知样本数值（C）6.质量控制(1)阴性质控品：FAM通道无对数增长期或Ct值等于30，VIC检测通道扩增曲线为明显对数增长期(2)HBV阳性质控品：FAM通道有明显的对数增长期且Ct值小于30(3)HBV阳性定量参考品：FAM通道有明显的对数增长期，呈典型S形曲线。
人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒（胶体金法）
生产厂家：美艾利尔（上海）医疗器械销售有限公司
储存条件：1℃-30℃保存
操作步骤
1.从原包装铝箔袋中取出检测板，放于水平、干燥的平面上
2.滴加10μl待检血清/血浆标本或20μl全血标本于样品孔（S）内
3.随后滴加4滴（约120μl）试验用稀释液垂直加到样品孔（S）内
4.当检测开始时，检测板中央可看到紫色液体流过结果窗口，
5.在10—20分钟内判读结果，在加入稀释液后，10分钟后读取结果不要超过
20分钟
结果判读
1.阳性结果：（1）出现质控线C和测试线1，表示HIV—1阳性结果
（2）出现质控线C和测试线2，表示HIV—2阳性结果
（3）出现质控线C、测试线1和测试线2，表示HIV—1和HIV —2阳性结果
2.阴性结果：仅质控线（C）出现一条紫色条带
3.无效结果：结果窗口没有质控线C
注意事项
1.本试剂仅用于体外诊断
2.在处理样本时不能吸烟、吃食物
3.在处理样本时应戴防护手套，事后充分清洗双手
4.避免标本出现喷洒或形成气溶胶
5.使用合适的消毒剂彻底清洁溢出物
6.使用后的试剂和样本等废弃物应按国家相关规定妥善处理
7.请不要混合和交换不同的待检样本
8.抗凝剂如：肝素、EDTA、柠檬酸钠不会影响实验结果
9.使用溶血标本、含类风湿因子的样本和高血脂、黄疸样本可能导致减弱实验
结果的显示。
丙肝检测单试剂阳性献血者的分析摘要：目的：分析丙肝检测单试剂阳性献血者不合格率，了解丙肝试剂使用情况，探究丙肝ELISA检测灰区设置的必要性以及单试剂阳性献血者回归问题。
方法：选择2017年1月~2019年12月期间我站无偿献血标本，用两种丙肝ELISA检测，阴性标本再次进行核算检测，单试剂阳性的标本实施核酸检测和丙肝确认实验。
结果：2种抗-HCV ELISA试剂不相符合率高达52.52%（125/238），但2种试剂无统计学差异；125份单试剂阳性的标本中有5份（4.0%）确认试验为阳性。
结论：丙肝ELISA检测灰区设置有必要性，但设置的范围有待于进一步的探讨；抗-HCV ELIS A检测单试剂阳性标本假阳性高，我们应根据本站的实际情况，制定反应性献血者屏蔽和回归的方案，既最大限度地保证血液安全，同时减少不必要的血液资源浪费。
关键词：丙肝检测；单试剂阳性；血液分析；确证试验引言丙型病毒性肝炎，系丙型肝炎病毒感染所引起的疾病，临床表现与感染途径和乙型肝炎相似，除了性传播和母婴传播外，主要是经血源性传播，如输血、血透析、静脉注射毒品、移植等。
经初步调查，输血后非甲非乙型肝炎患者血清丙肝抗体（抗HCV）阳性率高达80%以上，已成为大多数输血后肝炎的原因。
所以严格筛查献血者，保证血液安全是血站的职责。
1材料与方法1.1样本来源2017年1月-2019年12月我站无偿献血者，体检合格后采血，同时留取2管5±1ml样本，其中1管用EDTA-K2抗凝的真空采血管，用于ELIＳA检测；1管用无菌、无DNA酶、无RNA酶、带分离胶的EDTA-K2抗凝BD真空采血管，用于核酸检测。
采集样本共计131179份，所有样本在2~8℃保存，1600g离心20min，48h内完成ELISA和NAT检测。
1.2试剂与仪器1.2.1 ELISA试验丙型肝炎病毒ELISA检测为检测丙肝抗体，使用厦门新创和北京万泰试剂，试剂都具有国家合格的批检定证书，在规定的效期内使用；使用在校验期内的澳斯邦STAR全自动加样仪和FAME全自动酶免仪仪器完成检测。
乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒（1+2型）核酸检测试剂盒（PCR-荧光法）操作规程1.目的规范核酸检测试验操作，确保检测结果的准确性。
2.原理2.1 汇集：吸取8份（或以下）样品到指定的汇集管。
2.2提取：病毒核酸提取的方法为磁珠法。
试剂盒提供之内对照(IC)为不具感染性的假病毒，在进行样品核酸提取前加入样品中，监控提取、扩增和分析的全过程。
标本经裂解液处理后会将病毒外鞘膜破坏，蛋白质变形，使病毒裂解释放出病毒基因组核酸。
加入表面包被有二氧化硅的磁珠颗粒，在高盐环境下带负电荷的核酸吸附到带正电荷的的磁珠颗粒表面。
洗液可以洗去未结合的物质，如变性的蛋白、细胞碎片、PCR抑制物等并降低盐浓度。
纯化的病毒在特定的环境下从磁珠颗粒表面洗脱下来成为扩增的模板。
2.3扩增：采用PCR扩增TaqMan荧光探针标定技术同时对HBV（DNA）、HCV（RNA）、HIV（RNA）进行检测。
在反转录酶的作用下HCVRNA、HIVRNA反转录成cDNA，再与HBVDNA一同通过TaqDNA聚合酶的作用扩增病毒核酸的保守区域，TaqDNA聚合酶5`—3`外切酶活性切割反应系统中带荧光标记的TaqMan探针，随着PCR的进行，荧光信号不断积累。
通过PCR仪的检测血液标本达到和超过荧光阈值的信号给出样品的阴阳性结果。
选择性PCR扩增：采用UNG-dUTP抗污染系统。
在PCR扩增系统中采用UTP代替TTP，产生大量U-DNA片段。
UNG酶特异识别U-DNA片段中含UTP的位点并进行切割，U-DNA被降解后不能作为再次扩增的模板，系统选择性的扩增天然的核酸分子，从而防止了PCR扩增产物的污染。
2.4 质量控制原理为监控实验进行，保证实验结果的准确，在每次检测过程依靠阳性、阴性质控品以及内标进行监测。
2.4.1阴性质控品监控系统性假阳性，如果阴性质控品检测结果为阳性，说明实验存在假阳性的风险，因此实验中的阳性结果需复查。
2.4.2低浓度阳性质控品监控系统假阴性，如果低浓度阳性质控品检测结果为阴性，说明实验存在假阴性或灵敏度下降的风险，因此实验中的阴性结果均需复测。
2.4.3内对照分为DNA内对照和RNA内对照，是每个反应管中的阳性质控，用于监控单个反应管中DNA与RNA的假阴性风险，如果标本检测结果为阴性，其DNA内对照与RNA内对照结果必须为阳性，否则提示该标本的扩增受到抑制，该阴性检测结果有假阴性风险，需要复测。
3.适用范围适用于核酸实验室采用核酸技术进行的HBV、HCV、HIV三项单管混样检测。
4.职责4.1 授权的检验人员负责试验操作、结果判读，作好相关记录，对检测结果的真实性和有效性负责。
4.2 授权的监督人员负责监督该规程执行。
5.原始样品系统血浆6.材料与设备6.1 消耗品6.1.1乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒（1+2型）核酸检测试剂盒（PCR-荧光法），苏州华益美生物科技有限公司；6.1.2 96孔深孔板6.1.3 1.5ml离心管（手工实验用）和2mlAxgen离心管（用于配置PCR反应液）；6.1.4 5ml汇集管；6.1.5 96孔扩增板或八连管；6.1.6 带滤芯并经灭菌处理的Tip头；6.1.7 自封袋；6.1.8 磁棒套管；6.1.9留样板和封膜6.2 设备6.2.1 HAMILTON STAR全自动样品处理系统；6.2.2 MeDiPro SuperPure System-32核酸萃取仪；6.2.3 ABI7500荧光定量PCR仪；7.检测环境7.1 符合二级生物安全实验室条件。
工作环境要求空气流通、照明充足；室内环境整洁、干净并配有消毒设备。
7.2 实验室温度：20-30℃；湿度40-60%。
8.程序步骤8.1 试剂准备区操作8.1.1消耗品的准备和深孔板反应盘的预分装8.1.1.1常规实验清点当日试验所需的消耗品，移送标本制备区，并做好记录。
8.1.1.2手工实验8.1.1.2.1预分装洗涤液A、洗涤液B、洗脱液，需充分混匀，使用移液器分配至反应盘L-28.1.1.2.2 可于前一工作日预分装4.2ml核酸萃取液到5ml管；8.1.2反应液的配制8.1.2.1常规操作8.1.2.1.1从-20℃冰箱取出试剂的反应液A、反应液B、反转录酶、RNA保护剂、Taq酶；室温溶解、平衡（反应液的配制时间应控制在15—20分钟，则平衡时间大约10分钟），于震荡器上充分混匀。
8.1.2.1.3 更换无粉手套；标记2ml离心管（配制量、使用日期），按照下表配制反应液（反应液量为n（标本数量/8）+4（NC、PC、室内阳性质控品、阴性质控品各一孔）+2人份（富余量）。
8.1.2.1.4 于震荡器上充分混匀，手动高速（5000转）离心约20秒以消除气泡。
8.1.2.1.5将配制好的反应液送交标本制备区，也可短时（5min之内）存于4℃冰箱。
8.1.2.2手工操作8.1.2.2.1同8.1.2.1.1至8.1.2.1.4。
8.1.2.2.2乳胶手套外戴上薄膜手套，取用扩增板或八连管于托盘上。
8.1.2.2.3 将配制好的反应液按照H`-A`固定方向依次分配，每孔20μl（吸头垂直加样，避免碰壁），分配数量为n（标本数量）+4（NC、PC、室内阳性质控品、阴性质控品各一孔）。
8.1.2.2.4目测每孔是否足量、超量。
8.1.2.2.5分配好的扩增板或八连管放入自封袋中，于袋上标记，通过传递窗送交标本制备区，也可短时（5min之内）存于4℃冰箱。
8.2 标本制备区操作8.2.1标本准备：8.2.1.1 将标本按顺序转移到32孔样品架,条码面向右侧，使用STAR将标本管献血码扫描入“**/NAT_TEST_RECORD”中；剔除酶免、ALT检测反应性标本。
8.2.1.2在生物安全柜中逐个去除标本管管盖。
8.2.2按照《核酸实验室血液检测标识的管理程序》粘贴汇集管、深孔板、留样板所需条码。
8.2.3 常规试验8.2.3.1【HAMILTON –MSS系统准备流程】1.保证仪器正常通电，要求使用不间断电源(UPS)2.检查废弃吸头收集框是否套有一次性垃圾袋（每次实验后立即清理并更换新的垃圾袋）3.启动HAMILTON工作站模块及对应电脑电源，注：应先开电脑，后开机器4.启动MeDiPro SuperPure System-32工作站模块电源，开启模块紫外灯自动照射10分钟8.2.3.2【HAMILTON–MSS系统实验流程】1.装载加样尖到HAMILTON工作站模块加样尖区域。
2.装载96孔反应盘到HAMILTON工作站模块反应盘区域。
3.装载PCR扩增反应盘到HAMILTON工作站模块反应盘区域。
4.装载试剂槽到HAMILTON工作站模块试剂区域。
5.取出核酸萃取液、载体RNA和内标，平衡至室温，并充分混匀。
按下表所列方注：n=待测样本数6.取出核酸萃取液/载体RNA/内标混合液、洗涤液A、洗涤液B、洗脱液和磁珠悬液，充分混匀，分别加入对应的试剂槽。
7.运行试剂分装程序，将核酸提取试剂分装入96孔反应盘中。
试剂分布见下表。
8.插入标本载架、汇集管载架到HAMILTON工作站模块对应区域。
9.运行标本汇集程序，完成标本汇集。
10.取掉标本管载架，整理标本并2~8℃暂存。
11.运行核酸提取程序，进行汇集标本的裂解，然后分装入96孔反应盘中，具体分装见下表。
目测反应盘（深孔板），检查分配的试剂是否达量；硅胶盖（经75%酒精浸洗，紫外线灯照射）封反应盘L-1，封板膜封反应盘L-2，并压实。
12.96孔反应盘移入MeDiPro SuperPure System-32核酸提取模块中。
13.执行下表所示的MeDiPro SuperPure System-32核酸提取程序，进行核酸提取。
MeDiPro SuperPure System-32 核酸提取程序注：程序第一次暂停时移出反应盘L-1，换上反应盘L-2，按「RUN」继续执行程序，完成核酸提取。
将反应盘L-1底部固定上金属条（固定于反应盘第6和第12列处）后置于MeDiPro SuperPure System-32机器上（使用前经紫外线灯照射20min），调用并执行程序“Lysis-4200”。
待机器第一次鸣叫时（暂停），取下反应盘L-1；将反应盘L-2固定上金属条后置于机器上，按“自动运行”让程序继续执行。
待机器再次鸣叫，程序结束（使用后紫外线灯照射20min）。
取下反应盘b卸取金属条，反应盘b的第6或第12列孔内的洗脱液即为PCR扩增反应用核酸模板。
将反应盘L-2置于STAR指定位置。
14.完成核酸提取的96孔反应盘回HAMILTON模块中。
15.取出扩增反应液A、扩增反应液B、逆转录酶、RNA保护剂和Taq酶，配制PCR 扩增试剂，充分混匀，放置于2ML离心管中，从试剂准备区转移到标准制备区，加入对应试剂槽。
16.运行PCR扩增试剂分装程序，将PCR扩增试剂和提取好的核酸模板分装到PCR反应盘中。
目测扩增板液体分配是否足量，封膜是否与扩增板粘贴紧密，无气泡。
如采用八连管，应保证八连管盖盖紧，并置于载架上传递。
17.PCR反应盘或八连管通过传递窗运转到ABI7500扩增仪，进行核酸扩增荧光检测。
8.2.3.3【HAMILTON –MSS工作站系统关闭流程】1.实验结束后，关闭HAMILTON –MSS工作站系统运行程序窗口, 关闭模块电源，2.注：应先关闭机器电源，后关闭电脑3.取下剩余加样尖盒,留作下次使用。
4.取下废弃吸头收集框的垃圾袋扎好，转移至扩增去医疗垃圾暂存处，需高压灭菌后丢弃。
5.标本架放入75%的乙醇中浸泡30分钟后取出晾干备用。
6.清洁垃圾袋上方的吸头挡板用酒精充分擦拭表面，晾干后备用。
7.先后用微湿清洁布擦拭，再用含75%酒精棉纱擦拭工作台面。
8.打开MeDiPro SuperPure System-32工作站模块紫外灯自动照射10分钟。
9.打开实验区域固定紫外灯，照射60min。
10.实验区域进行1小时或1小时以上的通风。
8.2.4 手工试验8.2.4.1 试剂准备（试剂准备区）1.预分装洗涤液A、洗涤液B、洗脱液，需充分混匀，使用移液器分配至反应盘L-2（试剂准备区）2将lysis置于室温平衡30min。
（样本制备区）3确保室内温度在25℃左右。
4将样本、IC、Ploy(A)RNA于室温溶解。
（样本制备区）8.2.4.2 样本处理（标本制备区）1.汇集操作：准备汇集所需要的适当数量的1.5ml管依次粘贴汇集条码或标记POOL编号，并置于试管架上。
用移液器（20-200μl）依次吸取标本血浆150μl 加入到对应的汇集管中，8份标本汇集为1个汇集管（pooling）；如标本数不足8份，则用平衡液将液体补齐至1.2ml。
