骨髓细胞形态学
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骨髓细胞形态学检查标准操作程序
1.检验目的
借以了解造血功能,常用以确诊、协助诊断、鉴别诊断血液病和其他疾病。
2.检验原理
通过对骨髓细胞涂片进行瑞氏-姬姆萨染色后,计算一定数量的细胞,观察其骨髓与血液中各种细胞数量和质量的变化,借以了解造血功能。 通过血细胞化学染色是在观察形态基础上进一步了解细胞化学成分,对血细胞各种生化成分及代谢产物作定性、定位和定量的观察。
3.标本
新鲜外周血、骨髓
4.试剂
瑞氏-姬姆萨A液
瑞氏-姬姆萨B液
5.环境与安全
5.1环境要求
环境温度要求:18~30℃(最佳温度:25℃)。
环境相对湿度要求:20% ~ 70%。
操作台应放置在通风良好、灰尘少的地方,尽量平稳坚固,避免晃动,仪器附近无强电磁干扰、无剧烈震动、无腐蚀性气体。
5.2人员安全
工作中所有与病人的样本接触或有潜在性接触可能的样本都视为污染物。在操作时有必要穿戴保护性的工作服、外套和手套。
在处理废弃样本时不可触摸废弃物,一定戴手套和穿工作服以避免直接接触。如果操作人员不小心接触血液、试剂、废弃物,皮肤或衣物上沾到了样本、试剂及废液,用大量清水冲洗并适当考虑必要的医疗措施。
6.操作步骤
6.1骨髓取材
6.1.1骨髓穿刺部位:一般取胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等部位。两岁以内小儿主张用胫骨穿刺。穿刺部位不同,取材可能有明显差异。如再生障碍性贫血的患者进行不同部位骨穿,可发现不同的细胞增生程度,以胸骨穿刺最好,棘突次之,髂骨最差。故必要时应多
部位取材,以便能全面地了解骨髓情况。
6.1.2吸骨髓液:一般不超过0.2ml,否则易于稀释。
6.1.3骨髓取材满意的几项指标:抽吸骨髓时,患者有特殊酸痛感,骨髓液中应含有骨髓小粒。显微镜下观察涂片,可发现骨髓特有细胞,如巨细胞、浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞、幼稚红细胞、幼稚粒细胞。
6.2涂片检查
6.2.1涂片制备:要求涂片均匀,有头、体、尾三部分,血膜面积约1.5cm*3cm,厚度以透过血膜可看清字迹为限。选择骨髓小粒部分制作涂片,骨髓液量不宜过多。此外,因为骨髓液中纤维蛋白含量高,凝固较快,所以涂片过程要快。骨髓不可用草酸盐抗凝,否则会使血细胞核变形,核染色质致密,胞浆空泡形成,出现草酸盐结晶。
检验医学与临床2009年2月第6卷第3期LabMed(、fin.February2009,V01.6,No.3
骨髓细胞形态学教学的体会
郑维威,马雅静,程江(石河子大学医学院第一附属医院检验科,新疆石河子832008)
【关键词】骨髓;细胞形态学;教学体会
中图分类号:R551.3文献标志码:B文章编号:1672—9455(2009)03一0227—02
《临床血液学检验》是医学检验专业的主干课程之一,其学
时量多,内容繁杂,细胞形态学教学占有很大的比例,学生们普
遍感到难以理解和记忆。细胞形态是一个较为抽象的内容,理论知识枯燥乏味,实践中却又变化多端、难以辨认.一直是教学
中的重点和难点。随着科技的不断进步和检验仪器自动化的广泛使用,各项参数在很短的时间内就可以出结果,然而在l临
床上通过显微镜检查了解血细胞的量变和质变,仍是诊断造血
系统疾病惟一直观、准确、可靠的指标。也是仪器无法替代的经典方法。因此,如何搞好骨髓形态学教学,对培养一个合格的
检验人员来说非常重要。笔者结合自身实际,探索出几条切实
可行的方法,提高了教学质量,给同行们做个参考。
1加强理论课形态学教学。形成感官认识
本院医学检验专业招收的是五年制统招本科学生。本科
教育一直艇笔者教学的重中之重,它不仪强调“以能力为中
心”,一切服务于临床,同时在掌握一定理论知识的基础上,还
需要培养学生的实践能力、创新精神和综合素质,以增强学生
对岗位的适应能力和就业的竞争能力,为其更好地适应临床检
验工作及继续深造打下坚实的基础。笔者根据这一指导思想,
密切联系临床,充分利用各种教学资源,给学生介绍了临床上
最为常见的血液病种,并自己动手拍摄了典型的形态学图片。
同时充分利用丰富的网络资源和技术,下载了较为清晰、典型的形态学图片,增强了学生形态学的感官认识,为实验教学打
下良好的基础。
2充分利用多媒体教学资源。巩固理论知识
奉院的《临床血液学检验》全部采用多媒体幻灯教学,在教学过程中.笔者对细胞形态学进行介绍的同时,特别强调了其复杂性和多样性。同种病例不同患者或同一患者不同次涂片
正常骨髓细胞学特点小概粒细胞系统:
原粒:体:大小ф:10~18μm;约2~3倍RBC
形状:圆或椭圆
浆:1。少;天蓝色;无颗粒;为Ι型原粒
2.少;天蓝色;极少数细小嗜天青颗粒;为Ц型原粒
核:1。形状:圆或椭圆
2.染色质均匀细致;核膜下见紫红色颗粒;淡蓝色核仁2~5个。
早幼粒:体:大小ф:12~20μm;约3~4倍RBC
形状:圆或椭圆
浆:1。色泽:天蓝到浅蓝之间;
2.浆内见大小不一,分布不均匀的紫红色嗜天青颗粒;(个别情况下出现嗜酸嗜碱特异性颗粒)
核:1。形状:圆或椭圆
2.染色质粗(较原粒粗);核仁可见或见不清
中幼粒:体:大小ф:10~18μm;约2~3倍RBC
形状:圆
浆:1。色泽:浅蓝(较早);淡红(较晚)
2.浆内见颗粒:1)。小且密,淡紫色,嗜中性粒
2).大 桔红色,嗜酸性
3).大且不规则,深紫红色:嗜碱性
核:1。形状:椭圆形或一侧核扁平;位于细胞一侧
2.染色质密集,紫红色。
3.核仁消失,核膜明显。
晚幼粒:体:大小ф:10~16μm;约2倍RBC
浆:1。色泽:粉红色;量多;见大量特异性颗粒;
核:1。形状:凹陷呈肾形
2.染色质密集,呈粗条块状。
杆状核:体:大小ф:10~13μm;约1.5倍RBC
骨髓细胞形态学检查标准操作程序
1.检验目的
骨髓细胞形态学检查主要用于观察骨髓涂片中细胞形态、数量等方面的变化,借以了解骨髓造血功能状况。骨髓象检查对多数血液病及其他一些疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判断具有重要意义。
2.检测原理(包括结果计算)
瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成。伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。亚甲蓝(美蓝)为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐,即氯化美蓝,有色部分为阳离子。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)。将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染料。
瑞氏染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质、原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。
3.性能特征
无。
4.标本要求 (包括病人准备、容器、样本类型等)
4.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史。凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎症或有畸形,晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。
4.2 标本类型:骨髓。
4.3标本容器:洁净载玻片。
4.4 标本存放:
4.4.1未检测标本的存放:放于细胞室未检测标本架上。
4.4.2已检测标本的存放:骨髓存片柜,保存10年以上。
4.5 标本运输:室温条件下运输。
4.6 标本拒收标准:参照《采集手册》。
5.仪器和试剂
5.1试剂:
5.1.1 瑞姬氏染色液:
瑞氏染料0.5g、姬氏染料0.5g,加入500ml甲醇中,混匀溶解后备用。