紫外可见分光光度法实验
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可编辑修改精选全文完整版实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量一、实验目的1.学会使用紫外-可见分光光度计,掌握标准对比法。
2.掌握标准对照法曲线的绘制和含量的计算。
二、实验原理在碱性条件下,苯甲酸形成苯甲酸盐,对紫外光有选择性吸收,其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。
可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。
三、实验器材试药:0.01mol/L、0.1mol/L氢氧化钠、苯甲酸仪器:量瓶、烧杯、紫外-可见分光光度计四、实验步骤1、苯甲酸标准储备液的制备精确称取苯甲酸100mg,用0.1mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解后,再用蒸馏水稀释1000ml。
此溶液1ml含0.1mg苯甲酸。
2、苯甲酸吸收曲线的测量吸取苯甲酸贮备液4.00ml,放入50ml容量瓶中,用0.1mol/L氢氧化钠溶液定容,摇匀。
此溶液1ml含8μg苯甲酸。
测量条件光源:氢灯;参比液:0.01mol/L氢氧化钠;测量波长范围:210~240nm。
3、标准曲线的制备取标准储备液适量,置于50mL容量瓶中,加0.01mol/L氢氧化钠稀释,分别得到浓度为4、8、12、16、20、24μg.L-1的溶液,取各溶液于“2项”曲线中的最大吸收波长处测吸收度A,得回归方程和相关系数R2。
4、标准对比法测定样品液苯甲酸的含量取10.00ml样品液,放入50ml容量瓶中,用0.01mol/L氢氧化钠定容,摇匀。
在上述曲线中找出最大吸收波长,以此作定量分析的入射光。
以0.01mol/L 氢氧化钠溶液为参比。
在完全相同的条件下测出标准苯甲酸溶液和稀释好的样品液的吸光度值。
5、按“3项”所得回归方程计算样品液中苯甲酸的浓度。
五、数据处理1)样品液中苯甲酸含量试样溶液的吸光度为,从标准曲线上可查得c= mg/ml。
六、思考题1、如果试液测得的吸光度不在标准曲线范围之内怎么办?2、从实验测出的吸光度求苯甲酸含量的根据是什么?如何求得?。
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法,可用于测定无机和有机物质的浓度。
在本实验中,我们将利用紫外可见分光光度法测定苯酚的含量。
下面是实验步骤。
实验原理苯酚在紫外和可见光区都有吸收峰,根据它的吸收峰特征可以测定其含量。
在本实验中,我们将利用苯酚在240 nm处的吸收峰进行测定。
实验仪器、试剂以及玻璃仪器仪器:紫外可见分光光度计试剂:苯酚、甲醇玻璃仪器:比色皿、移液管、醇灯、玻璃棒、烧杯等。
实验步骤步骤1:制备苯酚样品溶液将1 g的苯酚粉末称到50 mL的烧杯中,加入约30 mL甲醇并混合均匀,然后用甲醇稀释到50 mL。
最后用玻璃棒搅拌至完全溶解。
步骤2:制备苯酚标准曲线将制备好的苯酚样品溶液定容到50 mL,在紫外可见分光光度计中,设置检测波长为240 nm,然后将苯酚标准溶液分别放入比色皿中,取0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL苯酚标准溶液,然后用甲醇稀释成10 mL。
最后,利用紫外可见分光光度计测量各个标准溶液的吸光度。
步骤3:测定未知样品将待测样品取5 mL,加甲醇稀释成50 mL,然后放到紫外可见分光光度计中测量样品的吸光度。
根据标准曲线可以计算出样品中苯酚的含量。
注意事项1.制备苯酚样品溶液的时候,要充分混合均匀,防止苯酚沉淀。
2.操作过程中,不可碰触紫外光管等易损部件。
3.实验前,应进行紫外可见分光光度计的预热操作,以保证测试准确性。
实验结果及分析根据实验测定的吸光度可以绘制出苯酚标准曲线,通过计算未知样品的吸光度,即可求出其苯酚含量。
对测量的结果进行分析,可以了解到此方法的准确性和可行性。
总结本实验介绍了紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤。
通过本实验的学习,不仅能够掌握该分析方法的原理、仪器和操作要点,还能够提高实验技巧,从而为今后的实验研究奠定基础。
课程实验者名称页数()专业年级、班同组者姓名级别姓名实验日期年月日一、实验目的:1.了解朗伯-比尔定律的应用,掌握邻二氮菲法测定铁的原理;2.了解TU1901分光光度计的构造;3.掌握TU1901分光光度计的正确使用;4.学会吸收曲线的绘制和样品的测定原理。
二、实验原理邻菲啰啉是测定微量铁的较好试剂。
在pH=2~9 的条件下,邻菲啰啉与Fe2+生成稳定的橙红色配合物,其lgK形=21.3,摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104,其反应式如下:本方法的选择性很高,相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-,20倍Cr3+、Mn2+、V(V)、PO43-,5倍Co2+、Cu2+等均不干扰测定。
显色前首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+。
4 Fe3+ + 2NH2OH = 4 Fe2+ + N2O + H2O + 4H+三、仪器及试剂1. TU1901紫外可见分光光度计2、铁标准溶液:含铁0.01mg/mL。
3、0.1%邻菲罗啉水溶液;4、1%盐酸羟胺水溶液;5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液(pH4.6):四、实验步骤课程实验者名称页数()专业年级、班同组者姓名级别姓名实验日期年月日1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择吸取0.0mL和6.0mL 铁标准溶液分别注入两个50 mL容量瓶中,依次加入5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液,2.5ml盐酸羟胺溶液,5ml邻菲罗啉溶液,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
用1cm 比色皿,以试剂空白为参比,在440~560nm之间,每隔0.5nm测吸光度。
然后以波长为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制吸收曲线,找出最大吸收波长。
2、标准曲线的绘制分别吸取铁的标准溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于6只50ml容量瓶中,依次分别加入5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液,2.5ml盐酸羟胺溶液,5ml邻菲罗啉溶液,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,放置10分钟,在其最大吸收波长下,用1cm比色皿,以试剂溶液为空白,测定各溶液的吸光度,以铁含量(mg/50ml)为横坐标,溶液相应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
一、实验目的1. 掌握紫外-可见分光光度法的基本原理及操作步骤。
2. 学习如何通过紫外-可见分光光度法对样品进行定量分析。
3. 了解不同样品在紫外-可见光区域的吸收特性。
二、实验原理紫外-可见分光光度法是一种基于物质对紫外-可见光的吸收特性进行定性和定量分析的方法。
该方法利用物质分子中的价电子在电子能级间跃迁时产生的紫外-可见光区的分子吸收光谱。
当一定波长的光通过被分析的物质时,测得不同波长下的吸光度或透光率,以吸光度(A)为纵坐标,波长(λ)为横坐标作图,可获得物质的吸收光谱曲线。
朗伯-比尔定律(Lambert-Beer Law)是紫外-可见分光光度法定量分析的基础,其数学表达式为:A = εcl,其中A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,c为溶液浓度,l为光程。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:紫外-可见分光光度计、容量瓶、移液管、锥形瓶、洗耳球、滴定管等。
2. 试剂:标准溶液、待测溶液、乙醇、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制(1)准确移取一系列已知浓度的标准溶液于容量瓶中,加入适量的乙醇,定容至刻度。
(2)将标准溶液置于紫外-可见分光光度计中,在特定波长下测量吸光度。
(3)以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
2. 待测样品的测定(1)准确移取一定体积的待测样品于容量瓶中,加入适量的乙醇,定容至刻度。
(2)将待测样品置于紫外-可见分光光度计中,在特定波长下测量吸光度。
(3)根据标准曲线,计算待测样品的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制绘制标准曲线,得到线性回归方程:A = 0.123c + 0.0056,相关系数R² = 0.998。
2. 待测样品测定待测样品的浓度为1.56×10⁻³ mol/L。
六、实验讨论1. 实验过程中,应严格控制光程,确保测量结果的准确性。
2. 在绘制标准曲线时,应选择合适的波长,确保待测样品在此波长下有明显的吸收峰。
3. 实验过程中,应确保试剂的纯度,避免杂质对实验结果的影响。
紫外-可见分光光度法测定1. 引言1.1 引言紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学方法,通常用于测定物质的浓度或测定物质的吸光度。
该方法利用紫外-可见光谱仪测量样品对紫外和可见光的吸收情况,从而推断样品中所含物质的浓度或结构。
在化学分析实验中,紫外-可见分光光度法具有灵敏度高、准确性高和简便易行的优点,因此被广泛应用于药物分析、环境监测、食品检测等领域。
本实验旨在通过该方法测定样品中目标物质的浓度,并探讨影响测定结果的因素。
通过对仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素的详细讨论,我们将深入了解紫外-可见分光光度法的原理和应用,并为今后在相关领域的研究提供参考和借鉴。
希望本实验能够为我们提供更多关于分光光度法的实际操作经验,提升我们的实验技能和分析能力。
1.2 背景介绍紫外-可见分光光度法是一种广泛应用于化学分析领域的分析方法,通过测定物质在紫外-可见光区域的吸收特性,从而确定物质的浓度或者进行定性分析。
紫外-可见分光光度法具有操作简单、灵敏度高、选择性强的特点,被广泛应用于环境监测、食品安全检测、药品质量控制等领域。
随着科学技术的不断发展,紫外-可见分光光度法在实验室分析中扮演着越来越重要的角色。
通过测定物质在特定波长范围内的光吸收情况,我们可以获得关于物质性质的重要信息,如浓度、溶解度、稳定性等。
掌握紫外-可见分光光度法的原理和操作方法,对于提高实验准确性和效率具有重要意义。
在本文中,我们将介绍紫外-可见分光光度法的仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素,希望能够为读者提供一份系统全面的紫外-可见分光光度法测定指南。
通过总结和展望,我们也希望能够进一步探讨该方法在化学分析领域的应用前景。
1.3 研究目的紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学技术,可以用于测定物质的吸光度,从而推断物质的浓度。
本实验的研究目的主要分为以下几点:1. 研究紫外-可见分光光度法在测定物质浓度方面的应用。
紫外可见分光光度法实验报告一、实验目的1、掌握紫外可见分光光度计的基本原理和操作方法。
2、学习利用紫外可见分光光度法进行物质的定性和定量分析。
3、了解分光光度法在化学分析中的应用。
二、实验原理紫外可见分光光度法是基于物质对紫外光和可见光的吸收特性而建立的一种分析方法。
当一束单色光通过含有吸光物质的溶液时,部分光被溶液吸收,使得透过溶液的光强度减弱。
吸光度(A)与溶液中吸光物质的浓度(c)和液层厚度(b)之间的关系遵循朗伯比尔定律:A =εbc,其中ε 为吸光系数,是物质的特性常数。
不同物质在不同波长下具有不同的吸光度,因此可以通过测定物质在不同波长下的吸光度来进行定性分析;而在特定波长下,物质的吸光度与浓度成正比,通过测量吸光度可以进行定量分析。
三、实验仪器与试剂1、仪器紫外可见分光光度计容量瓶(100 mL、50 mL)移液管(1 mL、5 mL、10 mL)比色皿2、试剂标准物质(如:邻二氮菲、铁离子标准溶液等)待测样品溶液盐酸、氢氧化钠等试剂四、实验步骤1、仪器准备打开紫外可见分光光度计,预热 20 30 分钟,使其稳定。
选择合适的波长范围和测量模式。
2、标准溶液的配制准确配制一系列不同浓度的标准溶液。
例如,配制铁离子标准溶液时,用移液管分别移取一定体积的铁离子储备液于容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
3、绘制标准曲线以蒸馏水为参比,在选定的波长下,分别测量各标准溶液的吸光度。
以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
4、样品溶液的测定准确移取适量的待测样品溶液于比色皿中,在相同条件下测量其吸光度。
5、数据处理与结果计算根据样品溶液的吸光度,在标准曲线上查出对应的浓度,或者通过回归方程计算样品溶液的浓度。
五、实验数据与处理1、标准溶液浓度与吸光度数据记录|标准溶液浓度(mg/L)|吸光度(A)||||| 10 | 010 || 20 | 021 || 30 | 032 || 40 | 043 || 50 | 055 |2、绘制标准曲线以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
紫外可见分光光度法分析药物的实验流程下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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实验一可见-紫外分光光度计检查一、实验目的1、了解紫外-可见分光光度法对溶剂的要求;2、熟悉可见-紫外分光光度计杂散光的检测方法;3、掌握可见-紫外分光光度计吸收度准确度的测定方法;4、掌握不同检测波长下分光光度计对光源和比色皿的要求。
二、实验原理1、对溶剂的要求含有杂原子的有机溶剂通常均有具有很强的末端吸收。
因此,当作溶剂使用时,它们的使用范围均不能小于截止使用波长。
如:甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。
另外,当溶剂不纯时,也可能增加干扰吸收。
因此,在测定供试品前,应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求。
2、杂散光由于仪器元件表面对光的反射和散射,单色光中含有一定的杂散光。
杂散光可影响摩尔吸收系数与吸光度间的直线关系。
3、吸收度准确度检测朗伯比尔定律:A=lg1/T=ECLA:吸光度T:透过率E:吸收系数,表示方法为E1%1cm,其物理意义为溶液的浓度为1%(g/mL)液层厚度为1cm时的吸光度系数。
C:溶液浓度(g/100mL)L:液层厚度三、实验仪器UV755B型可见-紫外分光光度计。
四、实验方法1、溶剂检查将溶剂置1cm石英吸收池中,以空气为空白,测定其吸光度。
溶剂和吸收池的吸光度,在220-240nm范围内不得超过0.40。
在241-250nm范围内不得超过0.20,在251-300nm范围内不得超过0.10,在300nm以上时不得超过0.05。
2、杂散光检查按表1-2所列试剂和浓度配制成水溶液,置1cm石英吸收池中,在规定的波长处测定透光率,应符合表1-2中规定。
3、吸收度准确度检测取在120℃干燥至恒重的重铬酸钾(基准)约60mg,精密称重,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000mL,在规定的波长处测定并计算其吸收系数应符合表1-3中规定。
五、数据记录表1-1:溶剂检查结果记录220-240 241-250 251-300 >300波长/nm220 230 235 241 245 250 260 275 300 350 500 800 吸光度标准<0.40 <0.20 <0.10 <0.05吸光度测量表1-2:杂散光检查结果记录试剂浓度/%(g/mL) 测定的波长/nm 透光率(T)/%NaI 1.00 220 <0.8实际测量值NaNO2 5.00 340 <0.8实际测量值表1-3:吸收度准确度检测结果波长/nm 235 257 313 350吸收系数(E1%1cm)的规定值124.5 144.0 48.6 106.6吸收系数(E1%1cm)的许可范围123.0-126.0 142.8-146.2 47.0-50.3 105.5-108.5 吸光度(A)吸收系数(E1%1cm)的测量值六、实验结果与分析1、本次实验所用仪器各项检查结果是否符合要求?如不符合要求,请分析有哪些可能原因。