2020年(生物科技行业)第二章细胞生物学实验技术

（生物科技行业）第二章细胞生物学实验技术第二章细胞生物学研究方法第一节显微技术显微镜是观察细胞的主要工具。

根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。

前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。

—、光学显微镜（一）、普通光学显微镜普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；③机械装置，用于固定材料和观察方便（图2-1）。

图2-1尼康E-600显微镜显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数，还与显微镜的分辨力（resolution）有关，分辨力是指显微镜（或人的眼睛距目标25cm处）能分辨物体最小间隔的能力，分辨力的大小决定于光的波长和镜口率以及介质的折射率，用公式表示为：R=0.61λ/N．A．N．A．＝ｎsinα/2式中：n=介质折射率；α=镜口角（标本对物镜镜口的张角），N.A.=镜口率（numericaperture）。

镜口角总是要小于180?，所以sina/2的最大值必然小于1。

表2-1及中介质的折射率制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78，所用介质的折射率越接近玻璃的越好。

对于干燥物镜来说，介质为空气，镜口率一般为0.05~0.95；油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。

普通光线的波长为400~700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于0.2μm，人眼的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X。

（二）、荧光显微镜图2-2尼康E800荧光DIC显微镜细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜（图2-2，3，4）就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

图2-3落射式照明原理荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别：1.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上（图2-3）；2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；3.有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人目。

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师：xxx所在学校：xxx中学目的要求：1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具：新鲜叶片（如菠菜、槐树、蚕豆的叶片），显微镜，双面刀片（两片、并在一起、一侧用胶布粘牢）、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。

方法步骤方法与步骤要点注意事项（一）练习徒手切片，制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。

2右手捏紧并排的两片刀片，沿着图中虚线的方向，迅速切割。

3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。

要多切几次（每切一次，刀片要蘸一下水）。

4用毛笔蘸出较薄的一片，制成临时切片。

叶片下面要垫上小块木板，以防损坏桌面。

刀片要捏紧，切割速度要快，注意安全。

为了便于观察，载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片，选择切得较薄的一片用来观察。

（二）观察叶片的结构1．用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。

2．观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。

仔细观察上、下表皮细胞的`区别（三）观察叶片的下表皮1．用镊子撕下一小块叶片的下表皮，制成临时装片。

2．用显微镜进行观察，下表皮细胞的形态是什么样子的，下表皮上有没有气孔？撕取下表皮时，一定要薄，否则影响观察效果。

注意观察气孔的结构。

（四）画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞，这一对保卫细胞要详细画，周围的细胞只需勾出轮廓。

画图时，要真实、实事求是。

讨论与交流1．保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义？2．从结构上看，叶片有哪些方面是适于接受阳光的？细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。

2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。

二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。

细胞生物学实验技术细胞生物学实验技术是现代生命科学研究中的关键环节，它为研究人员提供了深入了解细胞结构、功能和相互作用的途径。

本文将重点介绍一些常见的细胞生物学实验技术，包括细胞培养、染色技术、分离技术和显微镜观察等。

一、细胞培养技术细胞培养是一项基础性技术，它可以将细胞从体内取出并在适当的培养基中进行增殖和维持。

细胞培养的首要任务是提供适当的培养基，其中含有必需的营养物质、生长因子和适当的温度、湿度和气体条件。

细胞培养技术广泛应用于细胞生物学实验、组织工程、药物研发等领域。

二、染色技术染色技术是细胞生物学实验中常用的方法之一，它使研究者能够对细胞内各种结构和分子进行可视化观察。

常用的染色方法包括荧光染色、酶标染色和核酸染色等。

荧光染色利用荧光标记的抗体或染料，可使特定的细胞结构或分子在显微镜下发出荧光信号，从而观察其位置和表达水平。

酶标染色则通过酶与底物的反应，使细胞或组织显示出颜色等信号。

核酸染色则利用特定染料与细胞核酸结合，以观察DNA或RNA的分布情况。

三、分离技术分离技术在细胞生物学实验中具有重要作用，它可以将不同类型的细胞或细胞组分进行分离和纯化。

常用的分离技术包括细胞离心、流式细胞术和免疫磁珠分离等。

细胞离心是通过离心机将混合细胞悬液分离成上清液和沉淀，从而获得纯化的特定类型细胞。

流式细胞术则通过流式细胞仪测量细胞的大小、形态和表面标记物，从而实现对细胞的高通量分离和分析。

免疫磁珠分离则利用特定抗体结合在磁珠表面，以实现对需要纯化的细胞或细胞组分的选择性捕获。

四、显微镜观察显微镜观察是细胞生物学实验的重要手段，它使研究者能够观察到细胞内不同的结构和过程。

传统光学显微镜可实现对细胞形态和部分细胞器的观察，但其分辨率有限。

近年来，随着超分辨显微镜技术的发展，研究者们能够突破传统光学显微镜的分辨率极限，实现对亚细胞结构和分子过程的观察。

总结细胞生物学实验技术在现代生命科学研究中发挥着至关重要的作用。

细胞生物学实验技术细胞生物学作为生物学的一个重要分支，研究的是生命最基本的单元——细胞。

在现代科研和医学领域中，细胞生物学实验技术扮演着至关重要的角色。

本文将介绍几种常见的细胞生物学实验技术，以及它们在科学研究和实践中的应用。

一、细胞培养技术细胞培养技术是细胞生物学研究的基础，也是许多实验的起点。

通过细胞培养技术，科研人员可以将细胞在体外进行培养，以便进行各种实验。

细胞培养技术的关键是培养基的配制和培养条件的控制，包括温度、湿度、CO2浓度等。

现代细胞培养技术已经非常成熟，可以培养多种细胞系，广泛应用于细胞生物学研究、药物筛选和临床诊断等领域。

二、细胞转染技术细胞转染技术是将外源DNA、RNA或蛋白等物质导入到细胞内的技术。

通过细胞转染技术，科研人员可以研究基因的功能、蛋白的表达以及疾病的发生机制。

常见的细胞转染方法包括化学法、电穿孔法、基因枪法等。

细胞转染技术在基因工程、基因治疗和干细胞研究等领域有着广泛的应用。

三、细胞分选技术细胞分选技术是将不同类型的细胞或不同状态的细胞进行分离和分选的技术。

通过细胞分选技术，科研人员可以获得纯化的细胞群，用于后续的实验和分析。

常见的细胞分选方法包括流式细胞术、磁性珠法、荧光显微镜法等。

细胞分选技术在免疫学、干细胞研究和癌症诊断等领域有着重要的应用。

四、细胞成像技术细胞成像技术是利用显微镜等设备对细胞进行观察和成像的技术。

通过细胞成像技术，科研人员可以了解细胞的结构、功能以及动态变化。

现代的细胞成像技术包括荧光显微镜、共聚焦显微镜、原子力显微镜等。

细胞成像技术在细胞生物学、神经科学和药物研究等领域有着广泛的应用。

五、细胞分子生物学技术细胞分子生物学技术是研究细胞内分子基因组的技术。

通过细胞分子生物学技术，科研人员可以研究细胞的DNA、RNA、蛋白等分子水平的信息。

常见的细胞分子生物学技术包括PCR扩增、基因克隆、蛋白质组学等。

细胞分子生物学技术在基因表达调控、基因组编辑和疾病诊断等方面有着重要的应用。

（生物科技行业）武汉大学考研真题细胞生物学武汉大学生命科学学院考研真题2001年细胞生物学壹。

名词解释2.5*101.apoptosisbody2.receptormediatedendocytosismina4.nucleasehype rsensitivesite5.gapjunction6.Hayflicklimitation7.Kinetochore8.molecularchaperones9.leaderpeptide10.dedifferentiation二。

简答题5*81.冰冻断裂术将溶酶体膜撕裂出PS，ES，PF，EF四个面，请绘壹简图标明。

2.医生对心脏已经停止跳动的病人采取电击抢救，请说明其心肌细胞是如何同步启搏的。

3.为什么凋亡细胞的核DNA电泳图谱呈梯状分布带。

而病理坏死细胞却呈弥散状连续分布？4.将某动物细胞的体细胞核移植到另壹去核的体细胞之中，然后其余实验步骤完全按照动物克隆的方式，问能否培育出壹头克隆动物来？为什么？5.切取病毒感染马铃薯植株的顶芽进行组织培养，这是大量繁育无毒苗的成功技术。

试述其去除病毒的原因。

6.有人认为既然已经有放大几十万倍的电镜，能够不用光镜了，请反驳这种观点的错误。

7.出生6个月之内的婴儿可由母乳获得抗病的抗体，试述这些抗体是如何由母亲血液转移到婴儿血液中的。

8.1999年报道，我国科学家成功实现将离体的B型血液改造成O型，请解释其原理。

三。

问答题（前俩题10，最后壹题15）1.概述Cyclin和CDK在细胞周期调控的工作机制及其在各期引起的下游事件。

2.试述在细胞质中合成的线粒体内膜蛋白及叶绿体类囊体膜蛋白是如何运送到位和装配的。

3.综述细胞外被中糖蛋白在细胞内合成，组装和运输的全过程及其对于细胞的主要生理功能。

2002年细胞生物学以下内容需要回复才能见到壹。

名词解释2.5*101.nucleosome2.contactinhibition3.T elomerase4.exocytosis5.gapjunction6.Kinetochore7.heterochromatin8.channelprotein9.dyneinarm10.molecularswitches二。

细胞生物学实验报告（3篇）细胞生物学实验报告（精选3篇）细胞生物学实验报告篇1一、实验目的：1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。

2.了解细胞凋亡的生物学意义3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法二、实验原理：1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。

中间产物蓝色联苯胺是不稳定的，无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。

2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。

它是一个主动的、高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。

3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。

三、实验步骤：细胞中过氧化物酶的显示1、在载片上滴一滴PBS缓冲液；2、取骨髓细胞：用断颈法处死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剥出后肢股骨，剪开股骨一端，用牙签尖的一端插入剪开的小孔中，抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上；3、涂片：用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开，室温晾干；4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸铜液，以盖满涂片为宜，处理30秒-1分钟。

5、倾去硫酸铜液，直接滴入联苯胺混合液反应6分钟（以盖满涂片为宜）6、清水冲洗，番红复染2min。

7、镜检：清水冲洗，室温晾干，先低倍镜下观察，后换高倍镜下观察（油镜100_）细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min4、PBS缓冲液洗2次5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液7、普通光学显微镜下观察。

吖啶橙染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。

细胞生物学实验方法与技术1.细胞培养：细胞培养是细胞生物学研究中最基本的实验技术之一、它通过将细胞放入培养基中，在特定的环境条件下进行体外培养。

通过细胞培养，可以获得大量的细胞进行进一步的实验研究。

2.免疫荧光染色：免疫荧光染色是一种常用的细胞实验方法，通过此方法可以检测特定蛋白质或分子在细胞中的分布和定位。

该技术利用特异性的抗体与目标分子结合，并用荧光染料标记抗体，从而利用荧光显微镜观察染色结果。

3. 免疫印迹法（Western Blot）：免疫印迹法是一种用于检测特定蛋白质的定量和分析的方法。

该方法通过将细胞或组织中的蛋白质经过电泳分离，并转移到膜上，然后用特异性的抗体与目标蛋白质结合，最后通过酵素反应或荧光信号检测目标蛋白质的存在和表达水平。

4.转染技术：转染技术是将外源的DNA或RNA导入到目标细胞中的一种常用方法。

常见的转染技术包括植入病毒载体、使用质粒转染剂、电穿孔和化学转染等。

通过转染技术，可以实现基因过表达、基因沉默等实验研究。

5.索引技术：索引技术是一种分析和比较细胞中基因表达的实验方法。

通过索引技术，可以快速筛选出在不同生理状态下表达差异显著的基因，并进一步研究这些基因的功能和调控机制。

常见的索引技术包括差异显著性分析、基因芯片、RNA测序等。

6.荧光显微镜技术：荧光显微镜技术是一种使用荧光染料观察细胞结构和功能的方法。

荧光显微镜可以通过选择不同的染料和光源，实现对细胞核、细胞器等结构的观察。

此外，还可以利用特定的荧光探针，实现对细胞内的信号分子、离子和代谢产物的监测。

7.流式细胞术：流式细胞术是一种通过检测细胞的光学和物理特性，实现对单个细胞的定量分析和分选的方法。

该技术可以实现细胞表面标记物的检测、细胞周期分析、细胞凋亡检测等。

特别是流式细胞术结合细胞分类仪，可以实现高通量的细胞分析。

综上所述，细胞生物学实验方法与技术为研究细胞的结构、功能和特性提供了重要的工具。

随着科技的不断发展，细胞生物学实验方法与技术也在不断更新与创新，为我们更好地理解细胞的生命活动提供了强大的支持。

细胞生物学技术与实验方法细胞生物学技术与实验方法是研究和应用于细胞的科学技术和实验方法的总称。

通过这些技术和方法，科研人员可以深入了解细胞的结构、功能和代谢，揭示细胞的生理、病理过程以及相关疾病的机制，更好地应用于生物医学研究和药物开发领域。

本文将重点介绍一些常用的细胞生物学技术和实验方法，并进行简单的介绍和说明。

1. 细胞培养技术细胞培养技术是在人工环境中保持和繁殖细胞的方法。

细胞培养是细胞生物学研究的基础，可以通过建立细胞系来进行体外实验。

细胞培养技术的主要步骤包括细胞分离、细胞培养基的配制、细胞培养器的选择和细胞培养条件的控制等。

2. 蛋白质分离与纯化技术蛋白质是细胞中最重要的功能分子之一，从细胞中提取和纯化蛋白质对于研究蛋白质的结构、功能和相互作用至关重要。

蛋白质分离与纯化技术可以通过离心、电泳、层析、电泳转印等方法来分离和纯化目标蛋白质。

3. 免疫学技术免疫学技术是研究细胞和分子免疫学的重要手段。

包括酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫组化、流式细胞术、免疫沉淀等技术。

通过这些技术，可以检测和分析细胞表面标记物、细胞因子的表达和分泌以及分析免疫相关的细胞相互作用等。

4. 分子生物学技术分子生物学技术是研究细胞和生命分子水平的重要工具。

包括基因克隆、DNA测序、聚合酶链反应（PCR）、蛋白质组学技术、基因组学技术等。

这些技术可以用来研究细胞的基因表达、转录调控、基因突变和DNA修复等。

5. 显微镜技术显微镜技术可以观察和研究细胞的结构和功能。

常见的显微镜技术包括光学显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜等。

通过显微镜技术，可以观察细胞的形态、亚细胞器的位置和运动，以及研究细胞内各种细胞器和分子的分布和相互作用。

总结：细胞生物学技术与实验方法在现代生物医学研究中起到了至关重要的作用。

通过这些技术和方法，科研人员可以研究和探索细胞的微观世界，深入了解细胞的结构、功能和代谢过程。

这些技术不仅可以增加我们对人体健康和疾病的认识，还为新药研发提供了重要的参考和依据。