凝血四项检测分析前标本采集处理及影响因素

凝血检验的影响因素和注意事项凝血测定主要用于凝血酶原时间（PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间（APTT)、纤维蛋白原（Fib）及各种凝血因子，用于凝血、出血及血栓疾病的诊断。

标本采集：(1）在进行标本收集之前，病人需保持良好的心理，预防副作用的发生，如情绪波动、过度锻炼以及精神压力过大等，这些都可能导致血液中的红细胞计数降低；(2）在采血时，应该尽量轻柔，以防止细胞破裂，导致凝血系统激活。

(3）使用一次性的塑料容器或者容器，能够有效地阻止血小板和凝血因子过度活跃，并且在进针时应该保持一次性成功，第1支注射器取实验用血，从而防止血液与抗凝药物发生混合，提高凝血检验的准确度。

(4）在进行采血操作时，要求一次性完成，以避免出现溶血现象。

(5）血液离心必须按照离心标准进行，即3000转/分，离心（10-15）分钟。

标本的存储以及运输：(1）采集的样本应该尽快放入专用的容器中，避免放置过久，导致pH值升高，从而影响APTT和PT的持续时间。

(2）建议在采集样本后2h以内进行样品提取，如果当前无法提取样品，应该把样品放入专用的容器中。

为了确保样品的质量，冷冻在-20℃的冰箱内，将需要存放较长时间的标本冰冻存于-80℃的冰箱内,冰冻的血浆融化时不能静置于室温中融化,应放置37℃水中轻轻摇动,使其迅速融化。

（3）样品还应该在18-24℃之间尽快送检,因为过高的温度可以破坏血小板和活化因子,从而导致PT和APTT测试的结果变差。

为了确保凝血因子Ⅴ和Ⅰ的稳定,应将其置于4℃及更低的环境中进行保存,而且,保存条件不同,凝血因子的活性也将受到影响。

全血标本若在冰箱中储存4小时，会对正常受检者的凝血检查结果产生影响，但其他受检者不会受到影响。

标本凝固：采集枸檬酸钠抗凝标本后，处理期间，凝血功能会被激活，因为凝血因子提前发生活化反应，凝固时间会缩短。

离心标本后，凝块存在于红细胞层内，也可存在于血浆中。

凝血激活的标本若只生成颜色很淡的纤维蛋白凝块，可能只会在标本冻融后方会显现。

影响凝血检验的六大因素所谓的凝血检验，是检查人们的凝血功能是否异常，包括凝血酶时间、凝血酶原时间、各纤维蛋白原与各种凝血因子等。

但该反应特殊性和一般酶类检测不同，某个因素激活起动因子，就会引起相关连锁反应，致使检测结果不准确。

因此，做凝血检验时要掌握影响其的六大因素，以提升检验准确性。

一、标本的采集(1)叮嘱患者做凝血检验前保持平静、空腹，勿出现神经紧张、剧烈运动、情绪激动等不良现象，若做凝血检验的患者刚刚剧烈运动或者情绪过于激动，则需稍作休息，过一度时间再采集血液样本，以免增加血小板数量、纤溶活性、凝血活性。

(2)为患者采集血液样本时，止血带勿扎太长时间或者太紧，因为捆扎时间过久会使组织纤溶酶源激活剂、因子Ⅷ活化与释放。

而捆扎太紧，会让血液注入过于用力，易造成血细胞破碎，进而激活凝血系统。

(3)根据分析测试方式选择装有合适添加剂的真空血液收集管。

于此同时，要保持首次穿刺成功，避免反复穿刺，而增加患者不适感，甚至还会引起严重溶血问题。

且保持血液样本干净，勿混入组织液，以免其影响凝血检查结果。

二、选择合适的凝血试剂根据凝血试剂的规格与标准，分析各凝血试剂的有效性、使用性，使用比较广泛的凝血试剂是0.109mol/L浓度柠檬酸钠，其对因子Ⅷ、因子Ⅴ的活化可起到有效的阻止。

凝血试剂与血液需根据1:9比例进行抗凝，待红细胞比容在25%以下或者55%以上时，需根据相关公式（例如：抗凝量(ml)=0.00185×劝学里(ml)×[100-红细胞比容(%)]）计算抗凝剂使用量，且注意不宜使用不在保质期内的枸橼酸盐溶液，以免引起APTT、PT试验结果降低。

对于不能马上使用的试剂，需将其放入冰箱内妥善冷藏保存，以延长试剂存储时间。

三、血液样本的储存与运输(1)根据检验项目、采血量选择合适的真空采血管，例如做血常规检验用紫色头的采血管、测定凝血时间用浅蓝色盖子的采血管，并根据患者情况选择合适内径的采血针，例如采血困难者、婴幼儿、同时进行静脉输液治疗的病人，需选择蝶翼采血双向针，以提升采样成功率。

血凝四项实验结果异常影响因素一、PT/APTT 时间延长影响因素A、标本采集:1、浊度法测定终点的自动化血凝仪,有溶血和较明显的黄疸及脂血的样本。

2、抗凝剂与血液比例不是1:9 。

3、抗凝剂配制错误,如枸橼酸钠含2 个结晶水仍按3.8%配制。

4、血细胞比容>55 %,抗凝剂仍用1 :9 ,引起抗凝剂比例过高。

5、标本陈旧,超过2 小时,甚至更长。

6、标本运输未加盖,致使CO2 ↑ PH ↑ 。

7、口服抗凝剂或凝血因子异常。

8、质控标本失效。

9、采血时,血浆与抗凝剂混合时振摇过于剧烈,使凝血因子破坏(轻轻混匀即可)。

10、血浆分离应2500g,10 分种。

B、复溶液:1、未用公司试剂盒同批号配制的复溶液。

2、用蒸馏水取代公司的复溶液。

3、复溶稳定时间不够。

C、操作:1、血浆与试剂比例不对(按照试剂说明书或仪器厂家的使用说明书)。

2、标本、试剂未经预温至37 ℃。

3、APTT 试剂与标本孵育小于3 分钟。

4、APTT混悬液加前未混匀。

5、试验测试温度不在37±0.5 ℃的范围。

D、试剂本身:1、APTT(鞣花酸)被冷冻(低于0 ℃)贮存或运输。

2、试剂贮存、运输温度过高,未注意冷藏运输。

3、试剂超过有效期。

4、购入了冒牌试剂。

5、质控品过期。

二、PT/APTT时间缩短影响因素A、标本采集:1、病人为高凝状态或血栓性疾病。

2、血细胞比容<25%,抗凝剂含量不够。

3、抗凝剂自配,配制错误,如对5个结晶水的枸橼酸钠仍按3.2%配制(应按3.8%配制)。

4、抗凝剂存放时间长:长霉、变质。

5、血浆于2-8 ℃运输,存放(冷凝集效应),或标本在室温中存放时间过长(超过2小时,甚至更长)。

6、血浆分离时,离心机转速不够,血浆内有较多血小板。

B、复溶液及材料:1、未用公司试剂盒内同批号配制的复溶液。

2、用蒸馏水取代公司的复溶液。

3、比色皿或试验器材污染。

C、试剂本身:1、鞣花酸和白陶土搞错,如原先用白陶土,后改用了鞣花酸,用白陶土正常值来衡量鞣花酸。

凝血标本检测处理建议凝血检测在临床上主要用于评估止血功能和出血风险，为医疗人员提供诊断依据和治疗建议。

为确保凝血标本检测的准确性，以下是关于凝血标本采集、处理、检测和解读的详细建议。

一、凝血标本的采集方法1. 采血前，患者应避免剧烈运动，并保持安静状态至少15分钟。

2. 采血时，应使用无菌技术，确保一次性采血针和试管在使用前均已消毒。

3. 推荐使用肘部静脉或颈外静脉进行采血，避免在输液侧肢体采血。

4. 采血量应充足，确保能够完成凝血因子的激活和检测。

二、抗凝剂的选择1. 常用抗凝剂为0.109mol/L枸橼酸钠，其与血液的比例应为1：9。

2. 使用前应检查抗凝剂是否出现变质、浑浊或过期。

三、凝血标本的保存1. 采集后的标本应立即送至实验室，避免长时间放置。

2. 若无法及时送检，应将标本置于2-8℃冷藏，但不超过4小时。

3. 避免阳光直射和反复冻融。

四、凝血标本的运输方式1. 使用封闭、防漏的容器运输标本。

2. 确保容器在运输过程中保持稳定，避免剧烈震动或颠簸。

3. 尽量缩短运输时间，以确保凝血因子的活性。

五、及时送检1. 采集后的标本应尽快送至实验室进行检测，以确保凝血因子的活性。

2. 若出现特殊情况，应及时通知实验室，以便采取相应措施。

六、凝血标本的分离1. 到达实验室后，应尽快将标本离心分离，以避免凝血因子活性的损失。

2. 离心时应保持适当的温度和时间，以确保结果的准确性。

七、凝血检测方法1. 根据实验室条件和临床需求，选择合适的凝血检测方法。

2. 确保检测仪器和试剂的质量和稳定性，定期进行校准和维护。

3. 在检测过程中，遵循标准化操作程序，确保结果的准确性和可重复性。

八、凝血结果的解读1. 结合患者的病史、临床表现和其他实验室检查结果综合分析凝血结果。

2. 注意排除影响凝血功能的各种因素，如药物、疾病状态等。

3. 对于异常结果，应及时与临床医生沟通，以便进一步评估和治疗。

九、其他注意事项1. 避免标本污染：采血时要注意清洁，防止采血管和注射器中残留的纤维蛋白、血渍或其他物质影响检测结果。

分析前因素对凝血四项测定结果的影响分析目的分析影响凝血四项测定结果的前因素。

方法选取该院2013年6月—2014年5月不合格采血标本206份，与其重抽后合格标本，检测凝血四项指标；采集送检合格标本26份即刻、4°C放置8 h、室温下放置8 h再检测。

结果采血量不足组的PT、APTT、TT显著高于重抽合格标本组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；FIB显著低于重抽合格标本组，差异有统计学意义（P＜0.05）；采血量过多组的PT、APTT、TT显著高于重抽合格标本组，差异有统计学意义（P＜0.05）；FIB显著低于重抽合格标本组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

溶血组的TT显著高于重抽合格标本组，差异有统计学意义（P＜0.05）；PT、APTT显著低于重抽合格标本组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组的FIB差异无统计学意义（P>0.05）；室温环境下即刻PT、APTT显著低于8 h后指标，差异有统计学意义（P＜0.05）；而即刻、8 h后TT、FIB指标差异无统计学意义（P＜0.05）；4°C 下即刻PT、APTT、TT、FIB指标与8 h后比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

结论凝血四项检测结果分析前质量控制是确保实验室检查结果准确性的前提。

[Abstract] Objective Analysis of factors affecting four before the determination results of blood coagulation. Methods 206 copies of unqualified blood specimens in our hospital from June 2013 to May 2014 were selected，With the qualified samples，detection coagulation four indicators；26 inspection qualified samples immediately，4 ° C placed 8 h，placed to 8 h at room temperature. Results TT，APTT，PT of Insufficient blood group were significantly higher than that of resampling qualified samples group，the difference was statistically significant （P＜0.05）；While the FIB was significantly lower than that of resampling qualified specimens，the difference was statistically significant （P＜0.05）；TT，APTT，PT of much blood volume group were significantly higher than that of resampling qualified samples group，the difference was statistically significant （P＜0.05）；While the FIB was significantly lower than that of resampling qualified specimens，the difference was statistically significant （P＜0.05）；TT of Hemolytic group was significantly higher than that of resampling qualified samples group，the difference was statistically significant （P＜0.05）；APTT，PT were significantly lower than those of re sampling qualified samples group，the difference was statistically significant （P＜0.05）；FIB had no statistically significant difference between the two groups （P>0.05）；room temperature environment of immediate PT，APTT was significantly lower than that of 8h index，the difference was statistically significant （P＜0.05）；and immediately after 8h，TT，FIB index had no statistical difference （P＜0.05）；4°C immediate PT，APTT，FIB，TT index and 8h after comparison，he difference has no statistically significant（P>0.05）.Conclusion Pre analysis quality control of the results of four items of blood coagulation detection is the premise to ensure the accuracy of laboratory results.[Key words] Quality control；Pre analysis；Coagulation four indices人体的止血功能极其重要，当人意外受伤流血时，止血功能可以快速凝固血液，使伤口止血[1]。

影响凝血四项检测的因素由于许多凝血因子是具有生物活性的蛋白,常温下易失活,而凝、止血又一个当复杂的病理过程,凝血四项检查在临床上对于出血性疾病的诊断、鉴别、病情观察治疗检测预后判断和术前检查具有重要的作用。

影响此实验的因素具有特殊性,而实验结果的准确性是临床应用的前提。

因此,为保证检测结果的准确,现将影响因素总结如下。

1样本因素①样本采集超过或不带划线部分;②未使用规定的抗凝剂(枸橼酸钠与血1:9)抗凝剂的比例及用量不准确;③血样有凝块、溶血、黄疸、脂血;④血样本混匀不当,剧烈混匀产生气泡;⑤使用塑料试管来收集血样;⑥采血器或储血管不洁,或受到污染;⑦患者服用抗凝药物。

2检验人员因素①对血样本离心时间和相对离心力选择不当;②未规定时间内对样本进行检测;③试剂复溶及预温时间不当;④试剂复溶时,稀释倍数不准;⑤实验人员对仪器操作方法不准确。

以上实验人员因素是引起实验结果不准确的重要来源。

3试剂因素①试剂复溶时,稀释倍数不准或未使用I级试剂和厂家规定是稀释液;②试剂已被污染;③所用试剂超过了复溶后的稳定期。

不同厂家试剂的稳定性不同,尤其是凝血酶原时间检测,国际敏感指数(INI)的试剂影响较大。

以上试剂因素是影响检测结果的重要因素,未开启的试剂及干瓶复溶剂要严格按照使用说明书进行,确保试剂等符合测定要求。

冰冻保存的试剂不能反复冻溶,反复冻溶会使试剂中的因子失活而影响测定。

4仪器因素主要是仪器的校正、保养和维护不当导致实验结果的不准,因此定时测试和校正仪器的性能,特别是对光源灯要定期检查、校正,避免因光源灯光学性能衰退对检测的影响,同时保持机械和光学附件的清洁。

以上影响凝血四项检测的主要影响因素。

因此为保证凝血四项检测结果的有效、稳定性及准确性,除克服上述因素外,各实验室还应用各自的方法,对一部分健康人进行检测,建立自己实验室的参考值,做好室内质控,同时提高检验人员的业务素质,要求检验人员对仪器的原理、性能、注意事项及影响因素等方面的知识全面全面了解掌握,进一步保证检测结果准确性、可靠性。

急诊凝血四项分析前的影响因素及质量控制作者：王志伟来源：《中外医学研究》2015年第02期【摘要】目的：分析急诊凝血四项分析前的影响因素及质量控制。

方法：选取2012年7月-2014年7月笔者所在医院急诊收治入院的511例患者，对其静脉采血后进行凝血四项的测定，找出误差结果重复采血并进行复查。

结果：共有91份（17.8%）血样出现误差，其中27份（29.7%）血量与抗凝剂比例有误，其复查结果与原结果比较，PT、APTT、TT均明显减小，FIB明显增大，差异均有统计学意义（P0.05）；45份（49.5%）血样未混匀。

结论：从血样采集、储存、送检、患者用药等多方面进行分析前质量控制，能提高凝血四项检验的质量，充分发挥凝血检测的诊断作用。

【关键词】凝血四项；分析前标本；影响因素；质量控制中图分类号 R446.11 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2015）2-0043-03The Influencing Factors and Quality Control of Emergency Four Items of Blood Coagulation Before Analysis/WANG Zhi-wei.//Chinese and Foreign Medical Research，2015，13（2）：43-45【Abstract】 Objective：To analyze the influencing factors and quality control of emergency four items of blood coagulation before analysis.Method：511 patients admitted to emergency department in our hospital from July 2012 to July 2014 were selected，the four items of blood coagulation were measured after venous blood collection，found the error results for repeated blood sampling and reviewed.Result：A total of 91 samples（17.8%） of blood appeared error，in which 27 samples（29.7%） of blood with anticoagulant ratio appeared error，compared with the original results，the PT，APTT，TT in the results of review reduced significantly，the FIB increased significantly，the differences were statistically significant（P0.05）；and 45 samples（49.5%） of blood without mixing.Conclusion：The implementation of quality control before analysis from the blood collection，storage，inspection，medication and other aspects can improve the test quality of the four items of blood coagulation and give full play to the role of blood coagulation detection diagnosis.【Key words】 Four items of blood coagulation； Sample before analysis； Influencing factors； Quality controlFirst-auth or’s address：Zhengzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 450000，Chinadoi：10.14033/ki.cfmr.2015.02.021凝血四项，即凝血酶原时间（PT）、部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB），是主要用于血栓及口服抗凝药物患者的检查，也是术前必查项目和急诊常用的检查项目[1]。

影响凝血检验的因素和注意事项摘要：目的：为了探讨凝血检验工作中对检验结果的影响因素以及注意事项，并提出一些建议，以提高检验结果的质量。

方法：从具体工作中对检验人员的素质、标本的采集存储与运输、试剂的选择以及药物的影响等方面进行调查、统计分析，找出了对凝血检验影响因素及注意事项。

结果：以上各方面对检验结果都不同程度的产生影响，任何一个环节都不可忽视。

关键词：凝血试验; 影响因素; 注意事项凝血实验主要用于凝血酶原时间测定、凝血酶时间测定、活化部分凝血活酶时间测定、纤维蛋白原测定以及各种凝血因子的测定。

主要用于出血、凝血以及血栓性疾病的诊断。

它对临床疾病的诊断和指导作用有着非常重要的意义，目前，各医院已广泛开展，其结果的准确性、精密度显得尤为重要。

笔者通过测试，总结了影响凝血检验的因素，主要包括以下几个方面，应引起医务人员的高度重视，报道如下。

1 标本的采集1.1 标本采集前要叮嘱病人处于空腹和平静状态，剧烈运动会引起血浆成分的变化，使血小板增多、血凝和纤溶系统活性的增强。

1.2 标本的采集量要准确，过多或过少都会影响检验结果的准确性。

1.3 静脉采血时压脉带压迫时间不能太长，压力大束缚时间过长都要影响局部血液的浓缩和内皮细胞释放t-pa，后者可引起纤溶活性增强。

1.4 应尽可能避免在输液过程中采血，即使必须采血，也不要在同侧肢体上采血，而应在对侧肢体上采血，只有这样才能获得比较真实的分析结果。

1.5 采血时应一针见血，切忌反复穿刺，避免溶血，因血小板受刺激而发生聚集，将组织液抽到注射器中或将气泡混入，使结果偏低1.6血液离心必须按照离心标准3000转/分，离心（10-15）分钟进行。

2 标本的存储和运输2.1 在标本采集后，必须马上颠倒混匀（5-10）次，要求动作轻柔，避免产生血凝块，最好尽快分离血浆。

在2小时内完成试验，否则会影响检验的准确性。

如不能及时测试的标本，应置4℃的冰箱中保存，最好不超过4小时，如在4小时内仍不能测试的标本，血浆样品应放在-20℃以下冰冻最好不超过2周，-70℃以下最好不超过6个月，冰冻后的血浆应放在37℃水中轻轻摇动，使其快速融化。