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石斛多糖药理活性研究概述【摘要】本文旨在对石斛多糖的药理活性进行综述。
在介绍了研究背景和研究意义。
接着在详细阐述了石斛多糖的提取与分离、化学成分、生物活性、药物开发应用以及与健康保健品的关联。
在总结了石斛多糖的药理活性研究成果，并展望了未来的研究方向。
通过本文的阐述，可以更全面地了解石斛多糖在药物领域的潜力和应用前景，为相关研究提供参考依据。
【关键词】石斛多糖、药理活性、药物开发、生物活性、健康保健品、提取与分离、化学成分、研究背景、研究意义、未来研究方向1. 引言1.1 研究背景石斛多糖是一种重要的药用多糖，已经引起了广泛的关注和研究。
石斛（Dendrobium）是一类兰科植物，被传统中医药认为具有滋阴清热、润肺止咳等功效。
石斛中的多糖是一类重要的活性成分，被认为具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等多种药理活性。
随着现代科技的发展，石斛多糖的药理活性逐渐被揭示出来，吸引了越来越多研究者的关注。
石斛多糖不仅具有显著的药理活性，还具有较好的生物安全性和生物利用度，被认为具有很高的研究和开发潜力。
目前对于石斛多糖的药理活性研究还存在着许多未知的领域，如其具体的作用机制、与传统药用的关联等仍有待深入研究。
对石斛多糖的药理活性进行系统的研究和探索，有助于发现其更多的生物功能和药用价值，为开发新型药物和健康保健品提供参考和指导。
1.2 研究意义石斛是一种常见的中草药，被广泛用于药物和保健品的制备。
石斛多糖作为石斛的重要组分，对人体具有多种药理活性。
对石斛多糖的药理活性进行研究具有重要的意义。
研究石斛多糖的药理活性可以为优化中草药配方提供科学依据，提高中草药制剂的疗效。
石斛多糖可能具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用，对一些疾病具有预防和治疗的潜力。
石斛多糖还可能成为新药物的候选化合物，有望为药物开发领域带来新的突破。
深入研究石斛多糖的药理活性，对推动中草药现代化、促进健康产业发展具有重要意义。
2. 正文2.1 石斛多糖的提取与分离石斛多糖是一种重要的药用多糖，在中药材中被广泛应用。
石斛属植物化学成分和药理作用的研究进展一、本文概述石斛属（Dendrobium）植物，作为一种重要的中药材，具有悠久的药用历史。
近年来，随着现代科学技术的发展，对石斛属植物化学成分和药理作用的研究不断深入，揭示了其丰富的生物活性及药用潜力。
本文旨在综述石斛属植物的主要化学成分，包括多糖、生物碱、黄酮类化合物等，以及这些成分在抗肿瘤、抗氧化、抗炎等方面的药理作用研究进展。
通过梳理和分析相关文献，以期为石斛属植物的深入研究和临床应用提供参考。
二、石斛属植物的化学成分石斛属植物是一类具有丰富化学成分的中药材，其主要包括多糖、生物碱、黄酮类化合物等多种化学成分。
这些成分的存在不仅赋予了石斛属植物独特的药理活性，也为其在中医药领域的应用提供了物质基础。
多糖是石斛属植物中含量较高的一类化学成分。
多糖具有良好的免疫调节作用，可以提高机体免疫力，对抗病毒、细菌等外来病原体。
多糖还具有抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性，对维持人体健康具有重要意义。
生物碱是石斛属植物中的另一类重要化学成分。
生物碱具有广泛的生物活性，如抗炎、抗菌、抗病毒等。
同时，一些生物碱还具有明显的抗肿瘤作用，对多种肿瘤细胞具有抑制作用。
黄酮类化合物也是石斛属植物中的重要化学成分之一。
黄酮类化合物具有良好的抗氧化作用，可以清除自由基，保护细胞免受氧化损伤。
同时，黄酮类化合物还具有抗炎、抗过敏等多种生物活性，对维持人体健康具有重要作用。
除了以上三类化学成分外，石斛属植物中还含有其他多种化学成分，如酚酸类、甾醇类、挥发油等。
这些成分的存在也为石斛属植物的药理作用提供了物质基础。
石斛属植物中含有多种化学成分，这些成分的存在不仅为其独特的药理作用提供了物质基础，也为石斛属植物在中医药领域的应用提供了广阔的前景。
未来，随着对石斛属植物化学成分和药理作用的深入研究，相信会有更多的应用被发掘出来。
三、石斛属植物的药理作用石斛属植物，作为传统中药材，具有广泛的应用价值和深远的药理作用研究前景。
铁皮石斛含量检测及其茎、叶、花多糖和黄酮类成分抗氧化活性
研究
目的:对铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)多部位进行不同化学成分含量测定以及其茎、叶、花多糖和黄酮类成分体外抗氧化活性研究,为其资源的充分开发利用提供理论依据。
方法:利用苯酚-硫酸法检测多糖含
量,DNS法检测还原性糖含量,硝酸铝比色法检测黄酮含量;通过比较三氯乙酸法、Sevag法、胰蛋白酶法和胰蛋白酶-Sevag法的实验结果选择最优的除铁皮石斛多糖蛋白方法;采取PMP柱前衍生化法检测铁皮石斛多糖的单糖组成;利用DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子清除率以及总还原能力的测定进行体外抗氧化活性研究。
结果:不同的生长龄、不同采收期、以及不同产地铁皮石斛不同部位(茎、叶)之间有效成分含量具有显著的差异;多糖为铁皮石斛中含量最多的化学成分,2
年生茎中含量最丰富,1年生叶中还原性糖含量最高;铁皮石斛叶中黄酮类成分
高于茎;胰蛋白酶-Sevag法(酶解60 min,萃取4次)为铁皮石斛多糖除蛋白最优选择;产地、光照条件与采收时间对铁皮石斛茎与叶中的单糖组成均有影响,茎中单糖主要为甘露糖与葡萄糖,叶中单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖;铁皮石斛不同部位提取的多糖和黄酮在不同的体外抗氧化体系中,均表
现出了不同的抗氧化活性,其中黄酮类成分的抗氧化活性远远高于多糖类。
结论:铁皮石斛茎与叶中化学成分丰富,并且其茎、叶、花具有较高抗氧化活性,实验结果为更好地开发利用铁皮石斛资源提供了理论依据。
石斛多糖药理活性研究概述【摘要】石斛多糖是一种具有丰富药理活性的天然产物，其具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。
本文首先介绍了石斛多糖的提取方法和化学成分分析，然后详细总结了其在药理活性研究和药理作用机制方面的最新进展。
研究表明，石斛多糖在抗炎、抗氧化、抗肿瘤等方面具有显著作用，并且有潜在的临床应用前景。
结论部分指出，石斛多糖具有广泛的药理活性，为它在药物开发和临床治疗中的应用提供了可靠的理论基础。
石斛多糖的研究对于拓展药物研究领域，推动中药现代化进程具有积极意义。
【关键词】石斛多糖提取方法, 石斛多糖化学成分分析, 石斛多糖药理活性研究, 石斛多糖药理作用机制, 石斛多糖临床应用, 药理活性, 应用前景1. 引言1.1 研究背景石斛多糖是一种来源于中药石斛的活性成分，已经引起了广泛的研究兴趣。
石斛，又名林兰，是一种常见的中草药，具有滋阴润燥、养颜美容等功效。
石斛多糖是在石斛中提取得到的一种多糖类化合物，具有多种生物活性，被认为具有很高的药用价值。
随着现代科技的发展，越来越多的研究表明石斛多糖具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抗炎等多种药理活性，因此备受关注。
研究背景部分将对石斛多糖的研究历史和现状进行概述，介绍相关研究成果，并阐明研究的动机和目的。
石斛多糖的提取、化学成分分析、药理活性研究、作用机制以及临床应用等方面的研究将有助于更全面地了解石斛多糖的药理作用及潜在应用前景。
对石斛多糖的系统研究有助于推动其临床应用，为广大患者带来全新的治疗选择。
1.2 研究意义研究石斛多糖的药理活性具有重要的意义。
石斛多糖具有多种药理活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等作用。
这些药理活性对于预防和治疗多种疾病具有重要的作用。
石斛多糖的抗氧化活性可以帮助减少自由基对人体组织的损伤，有助于预防心血管疾病、癌症等疾病的发生。
石斛多糖的抗炎作用可以减轻炎症反应引起的疼痛和不适，具有显著的止痛效果。
石斛多糖还具有抗肿瘤的作用，可以抑制肿瘤细胞的增殖和扩散，有望成为肿瘤治疗的新途径。
叠鞘石斛多糖抗氧化作用研究薛倩倩;尹显梅;尹鸿翔;龙飞【摘要】为观察不同浓度叠鞘石斛多糖提取液的抗氧化活性,采用超声提取法提取叠鞘石斛中的多糖;采用分光光度法测定叠鞘石斛多糖对DPPH自由基、羟基自由的清除率以及对Fe2+螯合率的影响,再观察其对脂质过氧化的抑制作用.结果表明,叠鞘石斛多糖对DPPH自由基、羟基自由基具有较好的清除率,对Fe2也具有很好的螫合率,对脂质过氧化有明显的抑制作用.叠鞘石斛多糖具有较强的抗氧化能力.【期刊名称】《科学技术与工程》【年(卷),期】2015(015)012【总页数】4页(P153-156)【关键词】叠鞘石斛;多糖;抗氧化【作者】薛倩倩;尹显梅;尹鸿翔;龙飞【作者单位】成都中医药大学,成都610000;成都中医药大学,成都610000;成都中医药大学,成都610000;成都中医药大学,成都610000【正文语种】中文【中图分类】R285.5叠鞘石斛为兰科石斛属植物叠鞘石斛Dendrobium denneanum Kerr. 的新鲜或干燥茎，味甘，微寒，归胃、肾经，具有益胃生津、滋阴清热的功效。
用于阴伤津亏，口干烦渴，病后虚热等证。
主要分布于四川、云南、贵州等地[1]，叠鞘石斛化学成分主要有多糖、联苄类、倍半萜、香豆素、甾体等，其中多糖为主要成分[2]。
多糖具有增强机体免疫力、降血糖、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化等作用[3]。
本实验通过对叠鞘石斛多糖抗氧化作用的研究，为其作为天然抗氧化剂和功能性食品添加剂的开发提供理论基础，为进一步合理利用叠鞘石斛资源提供实验依据。
1.1 实验材料、仪器1.1.1 材料叠鞘石斛，采集于四川夹江县华头镇，经成都中医药大学尹鸿翔副教授鉴定，为叠鞘石斛的茎。
1.1.2 主要仪器FW—200高速粉碎机，北京中兴伟业仪器有限公司；DZF—6021真空干燥箱，上海一恒科技有限公司；SB2200—T超声波清洗机，上海必能信超声有限公司；UV—2450紫外可见分光光度计，日本岛津株式会社；BP—211D电子分析天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；HHS—4S恒温水浴锅，上海南阳仪器有限公司。
接收日期：2020-11-12 接受日期：2020-12-16 基金项目：厦门市科技计划项目(3502Z20162011) *通信作者。
E-mail:******************铁皮石斛化学成分及其抗氧化活性研究耿文慧1,2，卢绍基1，明艳林1,2*(1.厦门塔斯曼生物工程有限公司，福建 厦门 361000；2.福建省亚热带植物研究所 / 福建省亚热带植物生理生化重点实验室，福建 厦门 361006)摘 要：采用硫酸-苯酚法、AlCl 3比色法、酸性染料比色法测定铁皮石斛(Dendrobium officinale )花、叶、茎中多糖、黄酮、生物碱含量，通过DPPH 和ABTS 清除实验评价铁皮石斛花、叶、茎的水提物和乙醇提取物的体外抗氧化活性。
结果表明，铁皮石斛不同部位的多糖含量茎>花>叶，黄酮含量花>叶>茎，生物碱在各个部位分布均较少。
其中茎的多糖含量可达23.92%，花中黄酮含量可达1.847%。
抗氧化能力评价表明，铁皮石斛花水提物、茎醇提物、花醇提物的DPPH 自由基清除能力相对较好，半效应浓度(EC 50)分别为410.4 μg·mL -1、454.1 μg·mL -1、573.2 μg·mL -1；铁皮石斛茎醇提物、花醇提物、花水提物ABTS 自由基清除能力相对较好，半效应浓度(EC 50)分别为61.1 μg·mL -1、62.2 μg·mL -1、103.0 μg·mL -1。
铁皮石斛花的提取物抗氧化活性整体优于叶和茎，醇提物抗氧化能力优于水提物。
关键词：铁皮石斛；多糖；黄酮；抗氧化活性Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2020.06.005中图分类号：R282.71 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2020)06-0438-05The Chemical Constituents and Antioxidant Activities of DendrobiumofficinaleGENG Wen-hui 1,2, LU Shao-ji 1, MING Yan-lin 1,2*(1.Xiamen Tasman Bio-Tech Co. Ltd., Xiamen 361000, Fujian China; 2.Fujian Institute of Subtropical Botany / Fujian Key Laboratory ofPhysiology and Biochemistry for Subtropical Plant, Xiamen 361006, Fujian China)Abstract: Sulfuric acid phenol method, AlCl 3 method and acid dye colorimetry were used to determine the contents of polysaccharides, flavonoids and alkaloids in flowers, leaves and stems of Dendrobium officinale . DPPH and ABTS clearance test were used to evaluate the antioxidant activities in vitro of water extracts and ethanol extracts from flowers, leaves and stems of D. officinale . The results showed that the content of polysaccharide: stem>flower>leaf, flavonoid content: flower>leaf>stem. Alkaloids were less distributed in all parts. The content of flavonoids in flower was 1.847%, the content of polysaccharide in stem was 23.92%. The DPPH radical scavenging capacity was as follows: flower water extract, stem alcohol extract, flower alcohol extract, the half effect concentration (EC 50) were 410.4 μg·mL -1, 454.1 μg·mL -1, 573.2 μg·mL -1, respectively. The ABTS radical scavenging ability was as follows: flower alcohol extract, flower alcohol extract, flower water extract, the half effect concentration (EC 50) were 61.1 μg·mL -1, 62.2 μg·mL -1, 103.0 μg·mL -1, respectively. The antioxidant activity of D. officinale flower was better than that of leaves and stems, and the antioxidant capacity of ethanol extract was better than that of water extract.Key words: Dendrobium officinale ; polysaccharide; flavones; antioxidant activities2020,49(6): 438～442.Subtropical Plant Science第6期耿文慧等：铁皮石斛化学成分及其抗氧化活性研究 ﹒439﹒铁皮石斛(Dendrobium officinale)为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)植物，主要分布在我国西南、华南及华东地区，是我国药用石斛的主要品种之一[1]。
八种石斛多糖抗氧化、抗衰老活性的比较研究石斛属（Dendrobium）是兰科中的第二大属,在我国分布有80余种,是我国传统的名贵中药材,其药用价值为人们所共知。
近年来,石斛作为赏食两用的花卉,应用范围更为广泛,越来越受到人们的青睐,尤其以石斛为主要原料的保健品、化妆品市场则逐步升温。
石斛的主要生物活性成分为多糖和石斛碱,由于石斛属植物种类较多,多糖成分复杂,导致其相关生物活性研究进展缓慢,石斛属不同种之间所含多糖的生物活性差异研究少有报道。
本论文以石斛属8个不同种——铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）、金钗石斛（Dendrobium nobile）、鼓槌石斛（Dendrobium chrysotoxum Lindl.）、细茎石斛（Dendrobium moniliforme（L.）Sw.）、束花石斛（Dendrobium chrysanthum Wall.ex Lindl）、美花石斛（Dendrobium loddigesii Rolfe）、球花石斛（Dendrobium thyrsiflorum Rchb.）及兜唇石斛（Dendrobium cucullatum R.Br.ex Lindl）为主要研究对象,系统研究了各种类所含石斛多糖的体外抗氧化活性及其对秀丽线虫的抗衰老作用。
主要内容及结果如下:1.石斛中多糖含量测定及分子量分布研究。
以春季八种石斛为材料,比较了它们的含水量及多糖含量的差异。
八种石斛材料含水量在58.69%<sup>9</sup>1.59%之间且差异显著,不同石斛之间多糖的含量差异较大,干重含量大小依次为铁皮石斛（43.83%）>美花石斛（36.47%）>束花石斛（31.8%）>金钗石斛（30.58%）>兜唇石斛（21.97%）>鼓槌石斛（19.66%）>细茎石斛（19.21%）>球花石斛（15.93%）。
石斛多糖药理活性研究概述石斛多糖是一种从中药材石斛（Dendrobium）中提取得到的多糖类物质，具有多种药理活性。
本文将概述石斛多糖的药理活性研究。
石斛多糖具有抗氧化活性，研究表明，石斛多糖能够清除体内的自由基，减少氧化应激对细胞的损伤。
石斛多糖还能够提高抗氧化酶的活性，增强细胞的抗氧化能力，从而保护细胞免受氧化损伤。
石斛多糖还能够抑制炎症反应，减少炎症相关因子的产生，从而降低炎症对细胞的损伤。
石斛多糖还具有免疫调节活性，研究表明，石斛多糖能够增强机体的免疫力，促进免疫细胞的活化和增殖。
石斛多糖还能够调节免疫因子的产生，增强免疫细胞对抗外界病原体的能力。
石斛多糖还能够增加机体对疫苗的免疫效果，提高疫苗的免疫保护率。
石斛多糖还具有抗肿瘤活性，研究表明，石斛多糖能够抑制肿瘤细胞的生长和增殖，诱导肿瘤细胞的凋亡。
石斛多糖还能够降低肿瘤细胞的侵袭和转移能力，抑制肿瘤的血管生成。
石斛多糖还能够增强化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用，提高化疗的疗效。
石斛多糖还具有降血糖活性，研究表明，石斛多糖能够降低血糖和胰岛素水平，在一定程度上改善胰岛细胞的功能。
石斛多糖还能够抑制糖化终产物的形成，减少糖尿病并发症的发生。
石斛多糖还能够改善胰岛素抵抗，提高胰岛素的敏感性。
石斛多糖具有多种药理活性，包括抗氧化、免疫调节、抗肿瘤和降血糖活性等。
目前对于石斛多糖的药理活性研究仍存在一些问题，例如研究方法不一致、实验设计不严谨等。
未来需要更深入的研究来进一步验证石斛多糖的药理活性，并探索其作用机制，以进一步开发和应用石斛多糖的药物。
金钗石斛化学成分的研究1. 前言金钗石斛（Dendrobium officinale）是一种传统中药材，广泛分布于中国的亚热带地区，主要分布在福建、广东、广西、贵州等省份，在药用价值、研究价值方面备受关注。
金钗石斛具有多种药用功效，如滋阴清热、提神醒脑、润肠通便等，被广泛应用于中药配方中。
本文将介绍金钗石斛的化学成分研究及其在医药领域中的应用研究。
2. 化学成分2.1 多糖多糖是金钗石斛中主要的化学成分之一，研究表明，不同产地的金钗石斛多糖含量和组成有所差异，其主要成分为葡萄糖和木糖等单糖。
多糖具有多种生物活性，如抗氧化、抗菌、免疫调节、促进修复等，具有很大的应用前景。
2.2 生物碱金钗石斛中的生物碱种类繁多，已经分离出了多种不同的生物碱成分，如苯丙胺类、吲哚类、芳香族氮杂环化合物等。
其中，苯丙胺类和吲哚类生物碱含量较高，其生物活性与金钗石斛的药用功效密切相关。
2.3 多酚类化合物金钗石斛中的多酚类化合物主要包括黄酮类、儿茶素类等，其中儿茶素类占据较大的比例，具有很强的抗氧化活性。
研究人员在金钗石斛中还发现了一些新型的多酚类化合物，这些化合物具有多种生物活性，是金钗石斛中的重要研究方向之一。
3. 应用研究3.1 药物治疗金钗石斛在传统中药中被广泛应用于各类疾病的治疗，如心血管疾病、胃肠道疾病、肝脏疾病等。
研究发现，金钗石斛中的多糖、生物碱、多酚类化合物等活性成分具有抗氧化、抗炎、抗肝损伤等功效，可用于心脑血管疾病、胃肠道炎症、肝损伤等疾病的治疗。
3.2 食品保健金钗石斛在食品保健领域也有广泛的应用，研究表明其活性成分具有提高免疫力、调节血糖、促进代谢等功效。
目前，已经有多家生产商将金钗石斛作为食品添加剂，广泛应用于保健食品、功能饮料等产品中。
4. 结论金钗石斛是一种具有广泛药用价值的传统中药材，其含有多种活性成分，如多糖、生物碱、多酚类化合物等。
研究表明，金钗石斛具有多种生物活性，可用于心脑血管疾病、胃肠道炎症、肝损伤等疾病的治疗，同时也可用于食品保健领域的开发和生产。
铁皮石斛多糖的体外抗氧研究进展摘要：铁皮石斛是我国历代本草记载的一类名贵中草药，其中含有多糖几年来被广泛研究。
本文综述近几年来国内学者对铁皮石斛多糖的研究，按照体外抗氧化和体内抗氧化研究进行分类，以期为铁皮石斛相关产品的开发提供理论基础。
关键词：铁皮石斛多糖抗氧化Key words:Dendrobium officinale; polysaccharide; antioxidant自由基(free radical)是一类含有未配对电子的基团、分子或原子，主要包括超氧阴离子、羟自由基等，是人体内的代谢产物。
在正常情况下，处于动态平衡，且浓度很低。
当这一平衡被打破，就会对机体造成损害、引发一系列疾病，目前已发现有100余种此类疾病[1]。
多糖(polysaccharide)是一类存在于植物、动物和微生物中的主要的天然活性物质，具有调节机体免疫力[2]、抗肿瘤[3]、抗氧化[4]等广泛的药理作用，且不同来源多糖表现出不同的生物学活性。
迄今为止，人们已成功地从百种植物中提取了多糖，并广泛用于医药和保健食品中的研究和开发中，植物多糖研究得比较深入的是稻草、麦秸多糖，竹多糖，刺五加多糖等[5]。
抗氧化是多糖的重要应用领域之一，与其他外源性抗氧化剂相比，抗氧化多糖具有低毒、安全和来源广等特点[6-8]。
药用石斛是我国历代本草记载的一类名贵中草药，含有石斛多糖、生物碱等多种活性成分，具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等多种功效[9]。
现代药理研究表明它还具有提高机体免疫力、抗肿瘤和防治白内障等功能[10]。
药用石斛的种类很多，我国约有30多种，主要分布于西南、华南、台湾等热带、亚热带和秦岭以南各区。
化学成分分析发现，药用石斛所含的化学成分类型多样，各类成分的化学结构又各不相同，药理作用也存在较大差异[10]。
本文综述近几年来国内学者对铁皮石斛多糖的研究，按照体外抗氧化和体内抗氧化研究进行分类，以期为铁皮石斛相关产品的开发提供理论基础。
目录1、综述 (2)1.1 铁皮石斛简介 (2)1.2 铁皮石斛国内外研究的进展 (3)1.3 铁皮石斛的育种与繁殖 (4)1.4 本文研究的意义 (5)2、铁皮石斛的水分测定及其多糖的提取 (5)2.1水分的测定 (5)2.2多糖的提取 (6)3、铁皮石斛乙酸乙酯萃取多酚物质抗氧化性的研究 (6)3．1 铁皮石斛乙酸乙酯萃取母液及浓度梯度的配制 (6)3.2 实验测定原理及方法 (8)3.2.1 铁皮石斛乙酸乙酯萃取物清除DPPH自由基的测定 (8)3.2.2 铁皮石斛乙酸乙酯萃取物清除羟基自由基（.OH）的测定 (8)-）的测定3.2.3 铁皮石斛乙酸乙酯萃取物清除超氧阴离子自由基（·O2 (9)3.2.4 铁皮石斛乙酸乙酯萃取物还原能力的测定 (10)4、结果与讨论 (10)4.1 对DPPH自由基的清除能力 (10)4.2 对羟基自由基（.OH）的清除能力 (11)-）的清除能力 (12)4.3 对超氧阴离子自由基（·O24.3 还原能力的测定 (13)5、结论 (13)参考文献： (14)铁皮石斛的多糖提取及其多酚物质的抗氧化性研究专业：环境科学学号：200911201066 姓名：许永佳指导老师：苏小建内容摘要：石斛多达五十余种，是市场上常见的名贵中草药和保健品。
研究表明，植物的多糖及多酚含量很大程度决定了它的功效。
本次实验，我们主要用铁皮石斛为主原料，选取水提醇沉法来提取它的多糖并测其含量。
然后用极性较大的乙酸乙酯来萃取获得多酚物质，通过其对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用以及其还原能力的测定，探讨铁皮石斛多酚物质的抗氧化活性，并与人工合成抗氧化剂BHT对自由基清除能力及还原能力进行比较。
实验结果表明：石斛的多糖含量为4.73%，它的多酚物质具有很强的抗氧化性，优于合成物BHT。
关键词：铁皮石斛；多糖；抗氧化性；自由基； BHT1、综述1.1 铁皮石斛简介铁皮石斛[D-officinale]，俗称吊兰,是兰科石斛属植物。
茎，直立，圆柱形，节间披有白色的膜质鞘；叶，纸质，长圆状披针形，尖端钝并钩转，基部有抱茎的鞘；花，白色，生于老茎上部节间，唇瓣菱形，喉部有一紫红色的斑块。
铁皮石斛为名贵草药，药名为黑节草，拥有滋阴润肺、养胃生津、明目清热、增强免疫力、医治失音沙哑、抗衰老等功效。
野生铁皮石斛生于海拔100——3000米之间的山地半阴湿岩石、树皮上，喜温暖湿润气候和半阴湿的环境，不耐寒。
铁皮石斛的鲜茎可直接食用，可炖汤，可泡茶，可浸酒[1]，通常加工成制成药品或饮料，如铁皮枫斗、铁皮石斛功能性饮料等。
近年来以其为原料生产的高级保健品远销欧美和东南亚沿海发达地区。
早在1400多年前的《神农本草经》和400多年前的《本草纲目》等古典中药书籍中，就将铁皮石斛列为药材中的上品。
《道藏》则称：“铁皮石斛、天山雪莲、三两人参、百二十年首乌、花甲之茯苓、肉苁蓉、深山灵芝、海底珍珠、冬虫夏草为九大仙草”。
由于铁皮石斛的生长环境特殊及其自身繁殖慢等原因，野生铁皮石斛资源稀缺。
目前铁皮石斛主要生长于在中国安徽西南部（大别山）、浙江东部（鄞县、天台、仙居）、福建西部（宁化）、广西西北部（天峨）、四川、云南东南部（石屏、文山、麻栗坡、西畴）。
1.2 铁皮石斛国内外研究的进展通过对有关铁皮石斛的文献资料进行统计（图一），我们可以清楚的发现：2004年基本是铁皮石斛研究的拐点，在1995—2003这9年中，文献较少，年平均产量为23篇左右；但是在2004—2012这9年中，文献资料竟达到了2051篇之多，年平均产量为228篇左右，后9年的平均产量是前9年的平均产量的近10倍。
另外， 1995年前关于铁皮石斛的文献资料是非常少的，基本可以忽略不图一铁皮石斛文献年增长趋势图表1 铁皮石斛的研究内容研究内容1989—1993篇（%）1994—1998篇（%）1999—2003篇（%）2004—2009篇（%）共计组织培养5（62.5%）5（50%）11（30.6%）80（40.2%）101（39.9%）人工种植0 0 9（25%）26（13.1%）35（13.8%）种源鉴定2（25%）0 5（13.9%）28（14.1%）35（13.8%）化学成分0 2（20%）1（2.8%）26（13.1%）29（11.5%）内生菌1（12.5%）0 6（16.7%）20（10.1%）27（10.7%）药理作用0 3（30%）4（11.1%）16（8%）23（9.1%）综述0 0 0 3（1.5%）3（1.2%）共计8（3.2%）10（4%）36（14.2%）199（78.7%）253（100%）由表1我们可以知道：对于铁皮石斛的研究大多在它的种植方面，并且这方面效果明显（因为铁皮石斛在种源鉴定方面的论文增长明显）。
此外，在化学成分方面的研究[2—3]为后面相当一段时间内的大趋势，这个在未来是研究的重点。
我们再和图一进行比较，2004年是研究铁皮石斛的大拐点，从这以后的研究基本直线增长。
我国对铁皮石斛的研究基本在它的药理、药性及保健功效方面。
但是，由于近年来科技突飞猛进，我们对铁皮石斛的研究开始涉及到化学、生物等各个方面。
例如：铁皮石斛生物碱提取纯化研究[4]、铁皮石斛种质资源研究中的DNA条形码初探[5]等。
对于铁皮石斛，它已经超出一般意义上的药物和保健品。
它的化学成分正一步一步被人们所熟知，我们提取它的主要成分用于各个研究领域。
1.3 铁皮石斛的育种与繁殖铁皮石斛现在属于频临灭绝的物种，我们首要的还是要研究它的育种与繁殖问题。
如今，在这方面的研究我们是成果颇丰的，铁皮石斛已经基本转为人工种植了。
我们主要以种子为实验体来进行组织培养，包括种子萌发、原球茎增殖、原球茎分化、生根与壮苗四个步骤。
叶秀麟等[6]取用2——6个月种龄的种子进行组织培养实验后发现，种龄越长，萌发率越高。
当把六个月的种子接入改良后的培养基中培养，萌发率可以达到90%。
曾宋君等[7—8]用相似的方法亦得到基本一致的结论。
除种子作为植物体外，以铁皮石斛的茎尖、茎段、幼叶种胚苗、幼根为外植体，均可培养出组培苗[9]。
大致过程为：茎尖、茎段→诱导形成不定芽→不定芽增殖→不定芽分化→生根壮苗、形成完整试管苗。
目前浙江、安徽、广西等地都有铁皮石斛的种植基地，他们的品种也是各不相同。
如今的铁皮石斛在全球拥有大概1500多种杂交种，很多品种在抗虫害等方面都有优良性能。
我国较为出名的有“仙斛1号”、“中科3号”、“惠农1号”、“惠农2号”等品种。
1.4 本文研究的意义：多糖具有广泛的生物活性和功能，功能性多糖一般为天然产物提取，多糖的含量直接关系到药物的药性，并且植物多糖的含量和其含水量实密不可分的，于是我们测定了铁皮石斛的含水量并提取测定了其多糖含量。
英国学者Harman1956年创立自由基衰老学说以后，自由基生命科学的研究便日益深入。
自由基（Free radical）攻击生命大分子造成组织细胞损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要起因。
自由基是机体的—）、羟基自有效防御系统，生物体内常见的自由基有：超氧阴离子自由基（·O2由基（·OH）、烷氧基自由基（RO·）等[10]。
摄入抗氧化性物质可有效抵消自由基氧化对人体的损害，但是，目前人们常用的抗氧化剂主要是通过人工合成的，如BHT、叔丁基羟基茴香醚（BHA）等。
人工合成的抗氧化剂会对机体产生一定毒性和致癌作用[11]，而一些天然植物含有黄酮类、酸酚等多酚类抗氧化成分。
于是，我们对铁皮石斛的抗氧化性作了研究。
2、铁皮石斛的水分测定及其多糖的提取2.1水分的测定取三只烘干的烧杯，编号。
将样品切段后放入烧杯，称量其质量，放入1050C 的烘箱中。
等四个小时后取出烧杯冷却称量，再放入烘箱中30min后再取出称量。
表2 铁皮石斛含水量的测定1号样2号样3号样放样品烧杯质量（g）46.166 55.602 37.319第一次冷却称量（g）42.603 50.907 33.290第二次冷却称量（g）42.599 50.907 33.288 含水量（%）71.94% 81.54% 76.91%平均含水量（%）76.80%2.2多糖的提取多糖的提取[12]首先要根据多糖的存在形式及提取部位，决定在提取之前是否做预处理。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类，在提取前，应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理，目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
我们这里选用溶剂提取法——水提醇沉法。
水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。
多糖为极性大分子化合物，根据相似相溶的原理，提取时我们选用极性强的水、醇为溶剂。
利用植物中大多数成分如生物碱盐、有机酸类、氨基酸、多糖等易溶于水和醇的特性，用水提取，并将其提取液浓缩，加入适当的乙醇反复数次沉降，除去其不溶物质。
由于多糖不溶于乙醇，我们加入80%的乙醇，使多糖从提取液中沉淀出来。
虽说该法提取比较耗时，提取率也不高，但是该法不需要特殊设备，非常适合实验室采用。
实验过程大致如下：选材称量→切段→榨汁→乙醇回流提取（3—5次）→粗纤维与多糖细浆分离（过80目和50目筛子）→旋转蒸馏→回收→多糖浸膏。
铁皮石斛样为403.161g，得到的浸膏为19.088g，多糖的获得率为4.73%。
3、铁皮石斛乙酸乙酯萃取多酚物质抗氧化性的研究3．1 铁皮石斛乙酸乙酯萃取母液及浓度梯度的配制称取铁皮石斛乙酸乙酯提取物0.5 g，溶于95%乙醇溶液，并用乙醇定容至100 mL容量瓶,取10个10 mL容量瓶，分别配制成0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL、1.4mg/mL、1.6mg/mL、1.8mg/mL、2.0 mg/mL 浓度梯度的乙醇样液。
主要试剂的配制DPPH溶液（0.008 mg/ml ）：称取DPPH粉末0.002 g，用乙醇定容于250 mL 棕色容量瓶中，避光保存，现配现用。
pH=7.4磷酸缓冲溶液：称取磷酸二氢钠0.7800 g，蒸馏水定容于25 mL 容量瓶中；称取磷酸氢二钠7.1628 g，用蒸馏水定容于100 mL容量瓶中；分别从中移取19 mL和81 mL于100 mL容量瓶中。
H2O2（0.01%）：移取30%的过氧化氢0.25 mL，用蒸馏水定容至25 mL容量瓶中。
用水再稀释30倍。
邻二氮菲（0.75 mmol/L）：称取邻二氮菲粉末0.0149 g，用乙醇定容至100 mL容量瓶中。
硫酸亚铁氨（0.75 mmol/L）：称取硫酸亚铁氨0.0294 g, 用蒸馏水定容于100 mL容量瓶中。
