二氢叶酸还原酶和谷氨酰胺合成酶双基因筛选扩增系统对外源基因表达的影响

《医学生物化学》试题（含答案）（适用于医学、药学本科及高职高专各专业）(2)一、单选题（共60题，90分）1、白蛋白基因在肝脏表达而在肌肉不表达，这种基因表达的特点属于A、时间特异性B、随机性C、组织特异性D、组成性表达E、时间随机性正确答案： C2、原核生物和真核生物核糖体上共有的rRNA是A、 18S rRNAB、 5S rRNAC、 5.8S rRNAD、 23S rRNAE、 28S rRNA正确答案： B3、下列物质中属于酮体的是A、α-酮戊二酸B、乙酰乙酸C、肌醇D、丙酮酸E、琥珀酰CoA正确答案： B4、tRNA分子上3'-端序列的功能是A、辨认mRNA上的密码子B、剪接修饰作用C、辨认核糖体结合的组分D、提供-OH与氨基酸结合E、提供-OH与糖类结合正确答案： D5、嘧啶环中的两个氮原子分别来自A、谷氨酰胺和氨B、谷氨酰胺和天冬酰胺C、谷氨酰胺和谷氨酸D、谷氨酰胺和氨甲酰磷酸E、天冬氨酸和谷氨酰胺正确答案： E6、可水解动物糖原分支处的键的酶是A、分支酶B、麦芽糖酶C、α-临界糊精酶D、α-葡萄糖苷酶E、脱支酶正确答案： E7、蛋白质生物合成过程的氨基酸活化的专一性取决于A、密码子B、 mRNAC、核蛋白体D、氨基酸-tRNA合成酶E、肽酰转移酶正确答案： D8、不能转变成一碳单位的氨基酸是A、丝氨酸B、谷氨酸C、甘氨酸D、组氨酸E、色氨酸正确答案： B9、5-FU的抗癌作用机制为A、合成错误的DNA，抑制癌细胞生长B、抑制尿嘧啶的合成，从而减少RNA的生物合成C、抑制胞嘧啶的合成，从而抑制DNA的生物合成D、抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶的活性，从而抑制DNA的生物合成E、抑制二氢叶酸还原酶的活性，从而抑制了TMP的合成正确答案： D10、脂酰CoA在肝脏中进行β-氧化的酶促反应顺序为A、脱水、加氢、再脱水、硫解B、脱氢、加水、加氢、硫解C、脱氢、加水、再脱氢、硫解D、加氢、脱水、脱氢、硫解E、脱氢、加水、再脱氢、裂解正确答案： C11、呼吸链成分中，脂溶性含异戊二烯单位的是A、 Fe-SB、黄素蛋白C、 Cytc1D、 CytbE、 CoQ正确答案： E12、从量上说，餐后肝内葡萄糖最主要是进行下列哪一代谢A、糖原合成B、糖酵解C、糖有氧氧化D、磷酸戊糖途径E、变为其他单糖正确答案： A13、糖的无氧氧化中生成乳酸所需的NADH主要来自A、三羧酸循环过程中产生的NADHB、脂酸β-氧化过程中产生的NADHC、糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢产生的NADHD、磷酸戊糖途径产生的NADPH经转氢生成的NADHE、谷氨酸脱氢产生的NADH正确答案： C14、可逆的磷酸化反应主要发生在以下哪组氨基酸残基上A、 Gly，Ser，ValB、 Tyr，Val，GlyC、 Ala，Ile，LeuD、 Phe，Thr，ValE、 Thr，Ser，Tyr正确答案： E15、核酸变性后可发生下列哪种变化A、减色效应B、增色效应C、紫外吸收能力丧失D、溶液粘度增加E、紫外吸收峰波长转移正确答案： B16、关于脂肪酸活化反应,正确的是A、在线粒体内完成B、活化过程消耗1个ATP,1个高能磷酸键C、活化中消耗1个ATP,2个高能磷酸键D、不需要CoASHE、需要肉碱正确答案： C17、核酶的底物是A、DNAB、RNAC、核糖体D、细胞核膜E、核蛋白正确答案： B18、端粒酶的作用是A、防止线性DNA分子末端缩短B、促进线性DNA分子重组C、促进DNA超螺旋构象的松解D、促进细胞染色质的分解E、促进细胞染色体的融合正确答案： A19、关于体内酶促反应特点的叙述,错误的是A、具有高催化效率B、温度对酶促反应速度没有影响C、可大幅度降低反应活化能D、只能催化热力学上允许进行的反应E、具有可调节性正确答案： B20、酶的活性中心是指酶分子A、结合底物并催化底物转变为产物的部位B、几个必需基团C、与调节剂结合的部位D、结构的中心部位E、维持酶构象的重要部位正确答案： A21、关于DNA的半不连续复制，下列说法错误的是A、前导链是连续的合成B、滞后链是不连续的合成C、不连续合成的片段是冈崎片段D、前导链和滞后链合成中各有一半是不连续合成的E、滞后链与复制叉前进方向相反正确答案： D22、辅酶和辅基的主要区别是A、化学本质不同B、免疫学性质不同C、与酶蛋白结合的紧密程度不同D、理化性质不同E、生物学活性不同正确答案： C23、在三羧酸循环中,经底物水平磷酸化生成的高能化合物是A、 ATPB、 GTPC、 UTPD、 CTPE、 ADP正确答案： B24、血浆与血清的主要区别是前者含有A、纤维蛋白原B、 NPNC、γ-球蛋白D、胆红素E、清蛋白正确答案： A25、在核酸中，核苷酸之间的连接键是A、糖苷键B、氢键C、 3'，5'-磷酸二酯键D、 1'，3'-磷酸二酯键E、 2'，5'-磷酸二酯键正确答案： C26、当丙二酰CoA浓度增加时,可抑制A、 HMG CoA合成酶B、乙酰CoA羧化酶C、肉毒碱脂酰转移酶ⅠD、脂酰CoA脱氢酶E、乙酰CoA合成酶正确答案： C27、酮体合成的关键酶是A、脂酰CoA脱氢酶B、肉碱脂酰转移酶ⅠC、乙酰CoA羧化酶D、 HMG-CoA合酶E、 HMG-CoA还原酶正确答案： D28、蛋白质胶体溶液不稳定的因素是A、溶液pH值大于pIB、溶液pH值小于pIC、溶液pH值等于10D、溶液pH值等于pIE、在水溶液中正确答案： D29、下列需要RNA作引物的过程是A、转录B、逆转录C、 RNA复制D、 DNA复制E、翻译正确答案： D30、遗传密码的摆动性是指A、一个遗传密码子可以代表不同的氨基酸B、一个氨基酸可以有几个密码子的现象C、密码子和反密码子可以任意配对D、密码子的第3位碱基与反密码子的第1位碱基可以不严格配对E、密码子的第1位碱基与反密码子的第3位碱基可以不严格配对正确答案： D31、关于G蛋白的叙述，下列哪项是错误的A、又称为鸟苷酸结合蛋白B、由α、β、γ三种亚基构成C、α亚基能与GTP、GDP结合D、β、γ亚基结合松驰E、α亚基具有GTP酶活性正确答案： D32、胰岛素分子A链与B链的交联是靠A、盐键B、疏水键C、二硫键D、氢键E、范德华力正确答案： C33、关于DNA复制的描述,正确的是A、以四种dNMP为原料B、复制不仅需要DNA聚合酶也要引物酶C、子代DNA中,两条链的核苷酸碱基排列顺序完全相同D、复制出的产物(双链DNA)称为冈崎片断E、子链合成的方向是从3′→5′正确答案： B34、解偶联蛋白是氧化磷酸化的A、解偶联剂B、磷酸化抑制剂C、激活剂D、电子传递抑制剂E、氧化剂正确答案： A35、HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)参与下哪种反应A、嘌呤核苷酸从头合成B、嘧啶核苷酸从头合成C、嘌呤核苷酸补救合成D、嘧啶核苷酸补救合成E、嘌呤核苷酸分解代谢正确答案： C36、蛋白质的空间构象稳定主要取决于A、肽链中氨基酸的排列顺序B、α-螺旋和β-折叠C、肽链中的氨基酸侧链D、肽链中的肽键E、肽链中的二硫键位置正确答案： A37、肝脏作为生物转化的主要器官,主要原因是A、肝脏供能充足B、肝脏有丰富的血液供应C、肝细胞中含多种生物转化酶促反应体系D、肝脏营养物质丰富E、肝脏能合成多种血浆蛋白正确答案： C38、下列关于线粒体氧化磷酸化解偶联的叙述,正确的是A、 ADP磷酸化作用加速氧的利用B、 ADP磷酸化作用停止,氧利用也停止C、 ADP磷酸化停止,但氧利用继续D、 ADP磷酸化无变化,但氧利用停止E、以上说法都不对正确答案： C39、体内嘌呤核苷酸的分解代谢终产物是A、 NH3B、β-丙氨酸C、β-氨基异丁酸D、尿素E、尿酸正确答案： E40、脂肪酸合成过程中最重要的中间产物是A、 HMG-CoAB、β-羟丁酸C、乙酰乙酰CoAD、乙酰乙酸E、丙二酸单酰CoA正确答案： E41、真核生物染色体DNA是线性结构，在复制时的特点是A、复制至末端时出现特殊结构B、复制时由唯一的起点开始C、单位长度的复制速度比原核慢D、复制时不需生成引物E、复制时不生成冈崎片段正确答案： A42、胞质中1分子NADH通过α-磷酸甘油穿梭进入线粒体后氧化，可产生多少分子ATPA、 1B、 1.5C、 2D、 2.5E、 3正确答案： B43、当ATP充足时,肌肉中能量的储存形式是A、磷酸肌酸B、 ATPC、 UTPD、 CTPE、 GTP正确答案： A44、在肝脏中，合成甘油三酯的途径是A、甘油一酯途径B、甘油三酯途径C、甘油二酯途径D、 UDP-甘油二酯途径E、 CDP-甘油二酯途径正确答案： C45、下列不会引起肿瘤发生的是A、原癌基因突变B、抑癌基因缺失C、细胞凋亡D、生长因子受体异常E、生长因子变异正确答案： C46、色氨酸和酪氨酸的紫外吸收特性是由于分子中含有A、氢键B、肽键C、疏水键D、次级键E、共轭双键正确答案： E47、下列关于酶的叙述，正确的是A、能改变反应的平衡点B、反应前后质和量发生了改变C、能降低反应的活化能D、对底物都具有绝对特异性E、在体内发挥催化作用时，不受任何调控正确答案： C48、痛风症患者血中含量升高的物质是A、尿酸B、肌酸C、尿素D、胆红素E、 NH3正确答案： A49、成熟红细胞中只保存两条对其生存和功能发挥重要作用的代谢途径,其一是糖酵解及旁路,其二是A、 DNA合成B、 RNA合成C、蛋白质合成D、磷酸戊糖途径E、三羧酸循环正确答案： DA、包括乙酰乙酸、丙酮酸和β-羟丁酸B、是葡萄糖在肝内分解时的中间产物C、是脂肪酸在肝内分解时的中间产物D、是酸性产物，正常血液中不存在E、酮体合成的关键酶是HMG-CoA还原酶正确答案： C51、对稳定蛋白质构象通常不起作用的化学键是A、氢键B、盐键C、酯键D、疏水键E、范德华力正确答案： C52、下列化合物中作为合成IMP和UMP的共同原料是A、天冬酰胺B、磷酸核糖C、甘氨酸D、甲硫氨酸E、一碳单位正确答案： B53、糖原合成中活性葡萄糖的供体是A、葡糖-1-磷酸B、葡糖-6-磷酸C、丙酮酸D、 UDPGE、 CDPG正确答案： D54、肝脏进行生物转化时葡糖醛酸基的供体是A、 UDPGB、 UDPGAC、 ADPGD、 CDPGE、 CDPGA正确答案： BA、需在有引物的基础上进行转录B、只有模板链转录,即为不对称转录C、原料是dNTPD、 RNA聚合酶全酶参与转录的全过程E、转录的终止均需要ρ因子正确答案： B56、核酸的最大紫外光吸收值一般在A、 280nmB、 260nmC、 240nmD、 200nmE、 220nm正确答案： B57、缺乏可导致凝血障碍的维生素是A、维生素AB、维生素EC、维生素CD、维生素KE、维生素D正确答案： D58、以下不属于常见的癌基因家族是A、 src家族B、 ras家族C、 myc家族D、 sis家族E、启动子正确答案： E59、下列物质含量异常可作为痛风诊断指证的是A、嘧啶B、嘌呤C、β-氨基丁酸D、尿酸E、β-丙氨酸正确答案： D60、LDL的功能是A、转运外源性甘油三酯和胆固醇B、转运内源性甘油三酯和胆固醇C、转运内、外源性甘油三酯和胆固醇D、逆向转运胆固醇E、转运内源性胆固醇正确答案： E二、多选题（共5题，10分）1、尿酸是下列哪些化合物分解的终产物A、 AMPB、 IMPC、 UMPD、 TMPE、尿素正确答案： AB2、下列属于呼吸链抑制剂的是A、鱼藤酮B、抗霉素AC、二硝基苯酚D、一氧化碳E、寡霉素正确答案： ABD3、参与呼吸链递氢作用的维生素有A、维生素B1B、维生素B12C、维生素PPD、维生素B2E、维生素E正确答案： CD4、下列对胆固醇合成的描述正确的是A、肝脏是合成胆固醇的主要场所B、磷酸戊糖途径旺盛时，可促进胆固醇的合成C、在胞质和线粒体中合成D、限速酶是HMG CoA合酶E、原料是乙酰CoA 正确答案： ABE5、酶促反应特点有A、高效性B、特异性C、稳定性D、可调节性E、不变性正确答案： ABD。

第22章模拟试题模拟试题（1）一、判断题（正√，误×）1.构成所有蛋白质的氨基酸都是α-氨基酸。

（√）2.羧肽酶A和B联合可以从羧基端开始逐一水解所有肽类物质。

（×）3.根据Anfinsen牛胰核糖核酸酶的实验结果，可以推测牛胰核糖核酸酶的生物合成途径中不存在肽链的断裂和拼接。

（√）4.胶原蛋白的稳定性得益于其三股肽链间形成大量的二硫键。

（×）5.血红蛋白与肌红蛋白都是氧的载体。

（√）6.生物膜上的糖蛋白的糖链部分与蛋白质肽链的β-酰胺基、β-羟基或γ－羟基结合。

（√）7.竞争性抑制剂是指与酶竞争结合底物。

（×）8.具有正协同效应的酶，其Hill系数总等于1。

（×）9.用定点突变的方法获得的酶蛋白突变体失去了催化活性，表明该突变氨基酸是酶的催化基团。

（×）10.所有tRNA具有相似的二级结构。

（√）11.遗传密码在各种生物和各种细胞器中都是通用的。

（×）12.基因表达的最终产物都是蛋白质。

（×）13.真核细胞DNA都集中于细胞核中。

（×）14.三羧酸循环酶系都存在于线粒体基质中。

（√）15.核酸是通过与蛋白质的相互作用执行其遗传信息传递功能的。

（√）16.真核染色体是由DNA、RNA和蛋白质组成的。

（√）17.核苷酸酶具有磷酸二酯酶活性。

（×）18.双链RNA也和DNA一样有Tm，其Tm受RNA中G-C含量影响。

（√）19.胰岛素受体具有丝氨酸激酶活性。

（×）20.缬氨霉素引起细胞死亡的原因是干扰细胞摄取氨基酸。

（×）二、选择题（幻分，1分／翅）1.一项使用Ⅹ-衍射晶体学或NMR测定大量蛋白质结构的计划应属于（B ）新兴学科。

A.基因组学（Genomics） B.蛋白质组学（Proteomics） C.糖组学（Clycomics）D.脂组学（Lipidomics）E.代谢组学（Metabolomics）2.下列功能中（D ）不是各种蛋白质所具有的功能。

DHFR筛选原理DHFR(二氢叶酸还原酶)是一种蛋白质，在细胞内起着重要的调节作用。

由于DHFR在癌细胞中的过表达，它已成为抗癌药物筛选和治疗的重要靶点。

在此过程中，通过筛选化合物抑制DHFR的活性，从而阻断叶酸代谢途径，进而抑制癌细胞增殖。

1.高通量筛选库的构建：在DHFR筛选过程中，通常需要构建一个大规模的化合物库。

这个化合物库通常由成千上万个小分子化合物组成，这些化合物的结构各不相同，有着不同的性质。

2.酶活性检测：在DHFR筛选中，酶活性检测是非常关键的一步。

通过测量DHFR的催化反应速率，可以判断出化合物对DHFR的抑制效果。

常用的酶活性检测方法包括发光法、荧光法和吸收光谱法等。

3.选择性筛选：在DHFR筛选中，有时需要选择对DHFR具有较高选择性的化合物。

这是因为只有对DHFR具有高度选择性的化合物，才能减少其他相关蛋白质的抑制。

4.结构优化：根据初始筛选结果，选择具有较高活性的化合物进行进一步的结构优化。

通过化学修饰的方法，使化合物具有更好的抑制效果和更低的毒副作用。

5.细胞实验证实：通过体外或体内实验验证DHFR抑制剂的抗癌活性。

在体内实验中，将抑制DHFR的药物注射到小鼠或其他模型动物体内，观察其对肿瘤的抑制效果。

总结起来，DHFR筛选原理主要是通过筛选大规模的化合物库，找到对DHFR具有抑制活性的化合物。

通过酶活性检测、选择性筛选和结构优化等步骤，最终确定具有高效抑制DHFR活性的分子。

这些抑制剂可以阻断叶酸代谢途径，从而抑制癌细胞增殖，具有很大的治疗潜力。

两种谷氨酰胺酶的酶学特性研究卢慧茵;王炜;崔春【摘要】以2种常见的谷氨酰胺酶作为研究对象,利用离子选择电极法测定谷氨酰胺酶的水解活性和转肽活性,探究不同pH、温度、盐含量对谷氨酰胺酶的水解活性及转肽活性的影响.研究结果表明:厂家一谷氨酰胺酶催化水解反应的最适pH为7.0,最适温度为50℃,催化转肽反应的最适pH为10.0,最适温度为50℃;厂家二谷氨酰胺酶催化水解反应的最适pH为7.0,最适温度为45℃,催化转肽反应的最适pH为9.0,最适温度为45℃.同时,谷氨酰胺酶表现水解活性时具有较好的耐盐性,但其转肽活性随盐含量的增加而下降.该研究结果可为谷氨酰胺酶的产业化应用提供理论指导.【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2018(043)010【总页数】5页(P1-4,10)【关键词】谷氨酰胺酶;影响因素;水解;转肽;酶活【作者】卢慧茵;王炜;崔春【作者单位】华南理工大学食品科学与工程学院,广州 510641;华南理工大学食品科学与工程学院,广州 510641;华南理工大学食品科学与工程学院,广州 510641【正文语种】中文【中图分类】TS201.25谷氨酰胺酶(EC 3.5.1.2)属于水解酶类，可催化L-谷氨酰胺水解生成L-谷氨酸和氨[1]。

在食品工业特别是酱油酿造工业中，谷氨酰胺酶具有重要的应用价值。

在酱油的酿造过程中，向酱油曲料中添加一定量的谷氨酰胺酶，利用其水解活力，将体系中的谷氨酰胺转化为谷氨酸，有助于提高酱油鲜味，从而得到品质更高的酱油[2]。

此外，谷氨酰胺酶还被应用于米谷蛋白的脱酰胺，脱酰胺后的米谷蛋白各种功能特性如起泡性、溶解性等都有了明显的改善[3]。

谷氨酰胺酶广泛分布于细菌、酵母、真菌等微生物中以及哺乳动物等真核生物中。

目前已有报道多种微生物能产谷氨酰胺酶，如Bacillus circulans[4]，Pseusomonas aeruginosa[5]，Trichodema koningii[6]等细菌菌株，Pichia[7]，Debaryomyces spp.[8]等酵母菌株，Tilachlidium humicola[9]， Verticillium malthousei[10]等真菌菌株。

1阐述操纵子（operon）学说：A、乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、半乳糖苷透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节基因B1 Z ,Y,A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码2该mRNA分子的启动区位于阻遏基因和操纵基因之间，不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达3操纵区是DNA上的一小段序列，是阻遏物的结合位点4遏物与操纵区结合时lacmRNA 的转录起始受到抑制5诱导物与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵子区相结合，从而激发lacmRNA的合成。

就是说诱导物存在时，操纵区没有被阻遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA的转录2、乳糖操纵子的作用机制？/简述乳糖操纵子的结构及其正、负调控机制答：A、乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节基因I。

B、阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。

所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

C、CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。

D、协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调、互相制约。

3、基因调控的水平有哪些？基因调控的意义？答：a、DNA水平的调控。

二氢嘧啶还原酶二氢嘧啶还原酶是一种重要的酶类，在生物体中发挥着关键的作用。

它参与了核苷酸的代谢过程，对于 DNA 合成和修复起着重要的调节作用。

本文将就二氢嘧啶还原酶的结构、功能和应用等方面进行探讨。

一、结构特点二氢嘧啶还原酶是一种多肽酶，由多个氨基酸残基组成。

其结构主要由α螺旋和β折叠构成，通过这种三维空间的结构，使得酶具有高度的活性和特异性。

另外，二氢嘧啶还原酶的结构还包含催化位点和辅助结合位点，这些不仅可以使酶与底物发生相应的作用，还可以促进酶的稳定性和催化效率。

二、功能机理二氢嘧啶还原酶主要参与嘧啶核苷酸的代谢过程，其具体功能机理如下：1. 底物结合：二氢嘧啶还原酶通过底物结合位点与二氢嘧啶等底物相互作用，形成酶底物复合物。

2. 催化反应：酶底物复合物在催化位点发生化学反应，将二氢嘧啶还原为二氢嘧啶核苷酸。

3. 产物释放：催化后的产物通过产物结合位点从酶中释放出来，使酶能够进行下一轮的催化反应。

三、应用领域由于二氢嘧啶还原酶在核苷酸代谢中的重要作用，它在多个领域都有广泛的应用：1. 药物研发：二氢嘧啶还原酶是一些抗肿瘤药物的主要靶点之一，通过研究酶的结构和功能，可以设计出更加高效的抗肿瘤药物。

2. 遗传疾病诊断：二氢嘧啶还原酶的突变与一些遗传疾病相关，通过检测酶的活性和基因突变状态，可以为相关遗传疾病的诊断提供依据。

3. 农业生产：二氢嘧啶还原酶在植物生长和抗病能力中起着重要作用，通过调控酶的表达和功能，可以提高农作物的产量和抗病能力。

综上所述，二氢嘧啶还原酶是一种重要的酶类，它在核苷酸代谢中发挥着关键的调节作用。

通过对酶的结构和功能的研究，我们可以更好地理解二氢嘧啶还原酶的机制，为药物研发、遗传疾病诊断和农业生产等领域提供理论和实践基础。

蛋氨酸亚氨基代砜(methionine sulfoximine, MSX)筛选用的是谷氨酰胺合成酶基因（glutaminesynthetase, GS）系统压力；氨甲喋呤（amethopterin, MTX）筛选用的是二氢叶酸还原酶基因（dihydrofolatereductase, dhfr）系统压力。

1. CHO细胞表达体系常用的CHO细胞系有两种：CHO和CHO(dhfr-)，CHO(dhfr-)是缺失二氢叶酸还原酶的细胞株。

CHO表达系统是目前应用最广泛的真核表达系统之一，与其它表达系统相比，它具有许多优点：准确的转录后修饰功能，表达的糖基化药物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近天然蛋白分子；表达产物胞外分泌，便于分离纯化；具有重组基因的高效扩增和表达能力；贴壁生长，有较高的耐受剪切力和渗透压能力，可进行悬浮培养或在无血清培养基中达到高密度，培养体积能达到1000L以上；CHO细胞属于成纤维细胞，很少分泌内源蛋白，利于外源蛋白的分离纯化。

改造CHO细胞，可更好地表达外源蛋白。

为减少大规模细胞培养过程中凋亡的发生，将bcl-2基因（细胞凋亡抑制基因）导入细胞，bcl-2基因的过量表达能抑制Gln或氧缺乏引起的细胞凋亡，减少细胞特定营养成分的消耗，提高细胞密度和目的蛋白产量。

向CHO细胞中导入p21、p27基因，可使细胞G1期延长（细胞静止），改造后细胞活力正常，营养成分消耗和代谢毒物含量有效降低，从而减少细胞凋亡、死亡，外源蛋白表达量提高，产品成本降低。

2. 载体系统借助真核基因表达调控的理论，可将较强的顺式作用元件集中到一个载体中，使其方便高效地表达外源基因。

目前，已经构建了许多真核表达载体，它们包含适当的顺式作用元件和选择标记。

顺式作用元件主要有启动子—增强子元件、转录剪切和Poly A信号等；CHO细胞表达载体中主要有两类选择标记：非扩增基因和共扩增基因。

2.1启动子和增强子启动子是影响外源基因表达效率的关键因素。