革兰氏染色

革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。

细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在肯定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。

为观看便利，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。

阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。

有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及全部的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有许多差别，染色反应不一样。

现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特别的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。

另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料许多，因此不易脱去，阴性菌则相反。

所以染色时的条件要严格掌握。

例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。

此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不全都，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。

所以脱色时间，脱色方法也应严格掌握。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，详细操作方法是：１）涂片固定。

２）草酸铵结晶紫染1分钟。

３）自来水冲洗。

４）加碘液掩盖涂面染1分钟。

５）水洗，用吸水纸吸去水分。

６）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。

７）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。

干燥，镜检。

染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。

下面是革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性杆菌。

革兰氏染色法的原理革兰氏染色法是一种最常用的细菌染色方法之一，它是由丹麦细菌学家克里斯汀·格拉姆（Christian Gram）于1884年发明的。

这种染色方法可以将细菌分为两类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

革兰氏染色法的原理是利用细菌细胞壁的化学成分差异，通过染色剂的作用，使得革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在显微镜下呈现不同的颜色。

在进行革兰氏染色法时，首先需要将待检测的细菌样本涂抹在玻片上，然后经过热固定，使细菌固定在玻片上。

接着，将碘液滴在细菌上，碘液可以使细菌细胞壁中的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都呈现出蓝紫色。

然后用酒精洗涤，革兰氏阳性菌由于细胞壁的特殊结构，可以保持蓝紫色，而革兰氏阴性菌则会被酒精冲淡。

最后再用碘液染色，使革兰氏阴性菌也呈现出蓝紫色，而革兰氏阳性菌则不受影响。

革兰氏染色法的原理主要是利用了细菌细胞壁的化学成分差异。

革兰氏阳性菌的细胞壁主要由大量的肽聚糖和穿链肽构成，而革兰氏阴性菌的细胞壁则含有较多的脂多糖。

由于革兰氏阳性菌的细胞壁结构较为复杂，具有较强的染色剂保持能力，因此在进行革兰氏染色时能够保持紫色，而革兰氏阴性菌的细胞壁结构相对简单，染色剂容易被洗去，因此在后续的酒精洗涤中会失去染色。

革兰氏染色法的原理虽然简单，但却具有重要的临床意义。

通过革兰氏染色法，医生可以快速准确地鉴别出细菌的类型，有助于选择合适的抗生素进行治疗。

此外，革兰氏染色法也是微生物学实验室中常用的一种方法，可以帮助科研人员进行对细菌的鉴别和分类。

总之，革兰氏染色法的原理是基于细菌细胞壁的化学成分差异，通过染色剂的作用，将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

这种染色方法不仅在临床诊断中有重要意义，也在微生物学研究中发挥着重要作用。

通过了解革兰氏染色法的原理，我们可以更好地理解其在医学和科研领域的应用，为细菌研究和临床诊断提供更多的帮助。

革兰氏染色反应的名词解释革兰氏染色反应是一种常用于微生物学领域的染色方法，以丹宁紫和碘石蓝为染色剂，通过染色后菌体在显微镜下的染色效果来区分细菌是否为革兰氏阳性或革兰氏阴性。

这种染色方法是革兰氏在1884年提出并命名的，至今仍然被广泛应用于微生物学实验室中。

革兰氏染色反应的原理是基于细菌细胞壁的化学成分和结构差异。

细菌细胞壁是由多糖和多肽组成的，其中革兰氏阳性菌的细胞壁中有较多的多肽，使得其在染色时更易吸附染色剂，因此显微镜下呈现紫色。

而革兰氏阴性菌的细胞壁则含有较少的多肽，使得其无法吸附染色剂，因此在显微镜下呈现蓝色。

革兰氏染色反应的步骤分为染色、去色和固定三个主要过程。

首先，将细菌涂样液滴于玻片上，加入丹宁紫染色剂，使其静置片刻，让染料充分渗透进入菌细胞。

然后用碘酒固定片刻，使染料与菌细胞结合更牢固。

接下来，用酒精溶液去除未结合的染色剂，这一步骤过程称为去色。

最后，用碱性洗涤溶液冲洗片材，使细菌表面电荷逆转，革兰氏阳性菌的细胞壁会保持紫色，而革兰氏阴性菌的细胞壁则会改为蓝色。

革兰氏染色反应的结果观察通常在光学显微镜下进行。

革兰氏阳性菌的细胞壁较厚且染色持久，形成紫色的菌体；而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，染色较为不均匀，形成蓝色的菌体。

这对于鉴定和分类细菌非常重要。

此外，有些细菌在染色反应中表现为变异，即有时呈现为革兰氏阳性，有时呈现为革兰氏阴性，需要注意这种变异性的存在。

革兰氏染色反应在微生物学实验室中得到广泛应用。

通过观察细菌的革兰氏染色结果，可以初步判断其形态、结构、生理特性等，并为后续的进一步鉴定和分类提供重要依据。

在临床实验室中，革兰氏染色反应也被用于呼吸道、尿液等样品中的病原菌鉴定，帮助医院进行合理的抗生素治疗。

尽管革兰氏染色反应相对简单，但其在微生物学领域的应用十分广泛且重要。

它为研究细菌的结构、生理特性和分类学提供了重要的实验手段。

虽然现代的分子生物学技术快速发展，革兰氏染色反应在某种程度上渐渐被其他先进的方法所取代，但在基础研究和临床实验室中，革兰氏染色反应仍然是不可或缺的。

简述革兰氏染色方法革兰氏染色方法是一种常用的细菌染色方法，它能够将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。

本文将从原理、步骤、应用以及优缺点等方面进行简述。

一、原理革兰氏染色方法是根据细菌细胞壁的化学组成差异而设计的。

细菌细胞壁是由多层薄而紧密的多糖和脂蛋白组成的，其中革兰氏阳性菌的细胞壁含有大量的胞内酶和胞外酶，而革兰氏阴性菌的细胞壁则较薄，胞内酶和胞外酶含量较少。

二、步骤1. 准备细菌涂片：将待染菌液滴于玻璃片上，用铅笔或曲别针将菌液均匀地涂开，然后用火焰烘烤片面，使其固定。

2. 染色：将涂片放在染色架上，先用蔗糖水浸润片面，然后滴加革兰氏紫液，静置1分钟。

3. 洗涤：用自来水冲洗片面，直到洗涤液无色透明为止。

4. 酒精分解：滴加碘酒，静置1分钟，使细菌细胞壁与染色剂形成络合物。

5. 洗涤：用95%乙醇冲洗片面，直到洗涤液无色透明为止。

6. 染色：滴加伊红，静置1分钟，使细菌细胞壁和胞质染成红色。

7. 洗涤：用自来水冲洗片面，直到洗涤液无色透明为止。

8. 干燥：将片面用吹风机吹干，然后用显微镜观察。

三、应用革兰氏染色方法广泛应用于细菌学和临床微生物学领域。

通过革兰氏染色，可以快速区分细菌的类型，对于细菌感染的诊断和治疗具有重要意义。

革兰氏阳性菌常见于致病菌中，如葡萄球菌、链球菌等；而革兰氏阴性菌常见于肠道菌群中，如大肠杆菌、沙门氏菌等。

四、优缺点1. 优点：革兰氏染色方法操作简单、快速，可以在短时间内对细菌进行初步分类。

此外，染色结果直观明确，易于观察和分析。

2. 缺点：革兰氏染色方法对于某些细菌可能存在染色困难或染色效果不明显的情况，这可能会导致结果的不准确。

另外，染色后的细菌仅能观察细胞形态和分布情况，无法提供更详细的细胞结构信息。

总结：革兰氏染色方法是一种简单、快速的细菌染色方法，通过染色结果可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。

该方法在细菌学和临床微生物学中有着广泛的应用，对于细菌感染的诊断和治疗具有重要意义。

革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。

细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。

为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。

阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。

有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。

可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。

现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。

另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。

所以染色时的条件要严格控制。

例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。

此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。

所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。

革兰氏染色原理：G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。

呈紫色。

Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：１）涂片固定。

革兰氏染色求助编辑革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram 创立。

未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。

染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。

革兰氏染色属复染法。

目录编辑本段解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

染色的差异主要是由于阴性与阳性细菌细胞壁的差异所应起的。

①革兰氏阳性细菌的细胞壁G＋细菌细胞壁具有较厚（20-80nm）而致密的肽聚糖层，多达20层，占细胞壁成分的60%～90%，它同细胞膜的外层紧密相连（图2-9）。

有的G ＋细菌细胞壁中含有磷壁酸（teichoic-acid），也称胞壁质（murein），它是甘油和核糖醇的聚合物，磷壁酸通常以糖或氨基酸的酯而存在。

由于磷壁酸带负电荷，它在细胞表面能调节阳离子浓度。

磷壁酸与细胞生长有关，细胞生长中有自溶素（autolysins）酶类起作用，磷壁酸对自溶素有调节功能，阻止胞壁过度降解和壁溶。

如果细胞壁的肽聚糖层被消溶，G＋细胞成为原生质体（protoplasts），细胞壁不复存在，而只存留细胞膜。

除链球菌外，大多数G＋细菌细胞壁中含极少蛋白质。

②革兰氏阴性细菌的细胞壁 G—细菌细胞壁比G＋细菌细胞壁薄（15～20nm）而结构较复杂，分外膜（outer membrane）和肽聚糖层（2～3nm）（图2-10）。

在细胞壁和细胞质膜之间有一个明显的空间，称为壁膜间隙（periplasmic space）。

外膜 G—细菌细胞壁外膜的基本成分是脂多糖（lipopolysaccharide,LPS），它同细胞质膜相同之处也是双层类脂，但除磷脂外还含有多糖和蛋白质。

LPS的多糖部分包括核心多糖和O-特异多糖。

O-特异多糖由重复分支的碳水化合物分子组成，含有已糖（葡萄糖、半乳糖和鼠李糖）和二脱氧已糖。

革兰氏染色名词解释革兰氏染色（Gram staining）是一种常用的细菌鉴定和分类方法，由丹麦细菌学家克里斯蒂安·格拉默（Christian Gram）于1884年首次提出，并被广泛应用于临床微生物学和实验室研究中。

革兰氏染色的原理是通过对细菌细胞壁的染色特性进行区分。

细菌的细胞壁在结构上分为两种类型：革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

革兰氏阳性菌具有厚实的胞壁，其细胞壁主要由多聚肽和多糖组成，对革兰氏染色染料结构相对稳定。

而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，含有一个内膜和一个较薄的胞壁，对革兰氏染色染料结构不稳定，容易被清洗脱色。

革兰氏染色方法通常由紫晶染液（crystal violet)、碘液（iodine）、酒精脱色液（ethyl alcohol）和洗净液（wash buffer）组成。

以下是革兰氏染色的步骤：1. 取一块无菌玻璃片，用手套或钳子夹住，然后在玻璃片上滴加一滴样本（可以是细菌培养物或分离纯培养的菌液），将细菌均匀涂抹于玻璃片上形成细菌涂片。

2. 将预先烘干的细菌涂片放置在静止的温和热环境中，使菌液完全固定在玻璃片上。

3. 将预热的紫晶染液倒在细菌涂片上，让染液覆盖整个细菌涂片，静置片上1分钟。

4. 倒掉多余的紫晶染液，用洗净液将染液冲干净。

5. 加一倍稀释的碘液在细菌涂片上，静置片上1分钟。

6. 倒掉多余的碘液，用洗净液将碘液冲洗干净。

7. 用酒精脱色液滴在细菌涂片上，进行制片人定时（通常为15-30秒），直到底色变得非常浅。

8. 倒掉酒精脱色液，用洗净液将细菌涂片冲干净。

9. 加入红粉溶液，让染料覆盖细菌涂片，静置片上1分钟。

10. 倒掉多余的红粉溶液，用洗净液将细菌涂片洗净，待片子晾干。

观察结果时，革兰氏阳性菌会呈现出紫色或蓝色，因为其细胞壁能够保留紫晶染料和碘复合物的结晶。

而革兰氏阴性菌则会呈现出红色或粉红色，因为其细胞壁无法保留紫晶染料和碘复合物的结晶，在酒精脱色过程中已经被去除。

革兰氏染色原理
革兰氏染色原理是一种常用的细菌染色方法，它基于细菌细胞壁的物理和化学特性差异。

该方法常用于区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

革兰氏染色的步骤分为四个关键步骤：染色、定色、脱色和透明化。

在染色步骤中，细菌样本首先要通过加热固定，使其黏附在玻璃片上。

然后，将菌液涂抹在玻璃片上，加入革兰染色剂――结晶紫，革兰染色剂能渗透细菌细胞并将细胞壁着色成紫色。

接下来，在定色步骤中，用碘化钠溶液加强细菌细胞壁与革兰染色剂的结合，形成革兰染色复合物。

然后，通过脱色步骤，使用酒精或酸性酒精溶液去除细菌细胞色素。

革兰氏阳性菌的细菌细胞壁较厚，不易被脱色，保持紫色染色；而革兰氏阴性菌的细菌细胞壁较薄，容易被脱色，颜色会被去除。

最后，通过透明化步骤，使用洗净剂（一般为醇类溶液）进行清洁和透明化处理，去除残留的染色剂和背景杂质。

经过革兰氏染色处理后，革兰氏阳性菌呈紫色，而革兰氏阴性菌则呈粉红色。

通过革兰氏染色，可以快速、简便地判断细菌菌株的革兰氏染色特性，便于对细菌进行初步分类和鉴定。

这在微生物学和临床诊断中都有重要应用。