负染色法负染色法negativestaining的染色处理过程主要并非针对菌

负染色操作步骤-概述说明以及解释1. 引言概述部分的内容可以按如下方式编写：1.1 概述负染色是一种常用的细胞和组织样品处理技术，它常被应用于生物学和医学研究中，用于观察细胞和组织内部的结构和特征。

相比于传统的正染色方法，负染色操作具有一些独特的优势和特点。

在负染色过程中，样本被浸泡在一种特定的染料溶液中，这种染料溶液往往是一种与样品的成分不相溶的物质。

负染色的关键在于利用染料的物理和化学性质，使其与样品发生作用，从而使样品的细节和特征得以显示。

负染色的操作步骤相对简单，但需要一定的技巧和经验。

本文将详细介绍负染色的操作步骤要点，旨在帮助读者快速掌握负染色技术并正确应用于实验中。

负染色的具体步骤将在接下来的章节中进行介绍，主要包括：样品制备、染料选择、染色操作、观察和分析等环节。

通过正确的操作步骤，可以获得清晰、可靠的负染色结果，从而进一步推进相关研究领域的发展。

总之，负染色作为一种常用的细胞和组织样品处理技术，具有独特的优势和特点。

本文将深入介绍负染色的操作步骤要点，希望能够为读者提供一份实用的参考，帮助其在实验中正确应用负染色技术。

文章结构部分的内容应该是关于整篇文章的组织结构和章节安排的介绍。

可以按照以下方式编写：文章结构：本文将按照以下结构进行叙述：1. 引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的2. 正文2.1 负染色操作步骤要点12.2 负染色操作步骤要点23. 结论3.1 总结3.2 展望在引言部分，我们将简要说明本文的主题和目的，以及为什么负染色操作步骤的了解对于某些特定应用领域的重要性。

接下来的正文部分将分为两个要点，分别介绍负染色操作的具体步骤，包括所需材料、实验条件等重要信息。

通过对每个步骤要点的详细描述，读者将能够理解负染色操作的基本原理和实施方法。

最后，在结论部分，我们将对整篇文章进行总结，回顾负染色操作的关键步骤和要点，并展望未来在该领域的进一步研究和应用方向。

通过以上的文章结构安排，读者将能够清晰地了解整篇文章的内容组织和章节间的逻辑关系，从而更好地理解和掌握负染色操作步骤的相关知识。

海南大学生物工程学院2021年《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（40分，每题5分）1. 通常情况下，体外培养的成纤维细胞的增殖能力与供体年龄有关。

（）答案：正确解析：如从胎儿肺得到的成纤维细胞可在体外条件下传代50次，而从成人肺得到的成纤维细胞只能传代20次。

2. 对绝大多数细胞而言，在特定阶段90以上基因具有转录活性，少部分基因没有活性。

（）答案：错误解析：对绝大多数蛋白质而言，在特定阶段仅10以下基因具有转录活性，90以上基因没有转录活性。

3. 蛋白糖基化时由糖基转移酶将糖基直接转移到肽链上。

（）答案：错误解析：蛋白质糖基化是一个复杂的过程，在糖基化的过程中先形成寡糖链直链的前体，再经间隔的过程形成成熟的糖蛋白。

4. 引起细胞转型的RNA肿瘤病毒其复制过程与DNA病毒及RNA病毒基本一致，没有根本的区别。

（）答案：错误解析：引起细胞转型的RNA肿瘤病毒其复制过程与DNA病毒及RNA病毒有根本不同。

当病毒进入细胞，壳体裂解与释放RNA后，首先以病毒RNA分子为模板，在反转录酶的催化作用下所，反转录出病毒的DNA分子，这种病毒DNA能与宿主蛋白质染色体的DNA链整合，又以整合在细胞DNA上的病毒DNA为模板，转录新的病毒RNA与病毒mRNA，后者与核糖体结合，翻译出各种病毒蛋白，其中包括病毒的结构蛋白与导致宿主转型的蛋白。

5. 网格蛋白有被小泡与溶酶体融合，其包被最后在溶酶体被水解。

（）答案：错误解析：网格蛋白有被小泡在出芽后，网格蛋白包被脱落，并不进入溶酶体。

6. 经冷冻蚀刻技术处理后的样品，在电子显微镜下所观察到的图像是样品本身所形成的。

（）答案：错误解析：在进行碳喷镀后，样品本身被消化液稀释，电镜所的是剩下的碳膜及其构成图形的金属颗粒，所得到的图像并非有样品本身直接形成。

负染色技术负染色又称阴性染色，是相对于普通染色（称正染色）而言的。

负染色首先由Hall在1955年提出。

Hall在病毒研究中用磷鸭酸染色后，发现图像的背景很暗，而病毒象一个亮晶的”空洞”被清楚地显示出来。

在超薄切片的染色中，染色后的样品电子密度因染色而被加强，在图像中呈现黑色。

而背景因未被染色而呈光亮，这种染色称为正染色。

而负染色则相反，由于染液中某些电子密度高的物质（如重金属盐等）”包埋”低电子密度的样品，结果在图像中背景是照暗的，而样品像”透明”地光亮。

两者之间的反差正好相反，故称为负染色。

对于负染色的机制目前还不十分了解。

对颗粒状的生物材料的研究而言，负染色技术与超薄切片方法相比具有分辨率高（可达15A）,简单快速等优点。

因此，在生物学研究中得到越来越广泛的应用。

它可以显示生物大分子、细菌、病毒、分离的细胞器以及蛋白质晶体等样品的形状、结构、人小以及表面结构的特征。

尤其在病毒学中，负染色技术成为不可取代的实验技术。

［编辑］负染色液的制备用作负染色的负染色剂应具有：较强的电子散射能力以产生足够的图像反差；熔点高，在电子束的轰击下不会升华；溶解度大，不易析出沉淀；在电镜下不呈现出可观察到的结构；分子小，容易滲入不规则表面的凹陷处；与样品不起化学反应等。

目前最常用的负染液是磷钩酸、磷钩酸钾和磷餌酸钠（分别简称为PTA、KPT、NaPT）o此外醋酸铀、甲酸铀、硅鹄酸、铝酸钱等也常作负染色剂用。

它们的配制方法如下：磷钩酸、磷鹄酸钠、磷钩酸钾溶液通常用双蒸水或磷酸缓冲液配制成1%〜3%的溶液，使用时应用1 mol / L氢氧化钠溶液将负染色液的pH值调至6.4〜7.0或实验所需的值。

醋酸铀：通常使用双蒸水配制成0.2%〜0.5%水溶液（pH4.5）o醋酸铀染色液应是新鲜的，最好使用前配制。

醋酸铀溶解需15〜30分钟，在黑暗中能稳定几小时，使用前用1 mol / L的氢氧化钠溶液将pH值调至4.5。

甲酸铀：用双蒸水配制成0.5%〜1%水溶液，pH值为3.5,使用时用lmol/L的氢氧化钠溶液将pH 值调至4.5〜5.2。

海南大学生物工程学院2021年《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（40分，每题5分）1. 细胞中所有的微丝均为动态结构。

（）答案：错误解析：体内有些微丝并不是动态的微观结构，而是永久性的结构中，如肌肉中的细丝及肠上皮细胞微绒毛中的卢戈韦。

2. 各种正常细胞的体积大小不同，但它们细胞核的大小通常差距不大。

（）答案：正确解析：3. 在细胞水平上进行的任何遗传操作，通过细胞培养和植株再生，最终可以将细胞的遗传修饰变成植物的遗传修饰，从而改变整个植物的遗传特性。

（）答案：错误解析：植物细胞具有细胞全能性。

4. 细胞周期蛋白及其磷酸化状态两者决定一个Cdk蛋白是否具有酶活性。

（）答案：正确解析：5. 水是细胞的主要成分，并且多以结合水的形式存在于细胞中。

（）答案：错误解析：细胞中的水分多以游离态存在。

6. 激素受体都具有酪氨酸受体结构域。

（）答案：错误解析：激素受体都具有各自激素的特异结构域。

7. 从细胞生物学的角度看，肿瘤发生的原因是细胞分裂过快。

（）答案：错误解析：是分裂失控，即细胞周期失去控制。

8. 当有动作电位刺激时，轴突的膜电位瞬时变得负值增加。

（）答案：错误解析：动作电位将引发去极化发生去极化（即负值减低向正值转化），并发生电位反转。

2、名词解释（40分，每题5分）1. 微管踏车行为答案：微管踏车行为是指微管组装后处于动态平衡的一种现象。

微管装配动态数学模型认为，微管两端具有GTP帽，微管将继续装配，反之，具GDP帽则解聚。

通常微管持有β微管蛋白的正极（＋）端组装较快，而持有α微管蛋白的负极（－）端组装较慢。

在一定条件下，微管一端出现装配延期使微管延长，而另一端则去喷涂而使微管缩短，但总体仍然继续保持原长，这种现象称为踏车行为或踏车现象。

微生物考研名词解释汇总【20XX年】1.纯培养物（pure culture）：由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单细胞生长、繁殖所形成。

【2章微生物的纯培养和显微技术】2.负染色（negative staining）：染料使背景颜色加深而样品没有着色的染色法。

【2章微生物的纯培养和显微技术】（2013、2007）3.糖被(glycocalyx)：指包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质。

糖被有数种：1.形态固定、层次厚的为荚膜。

2.形态固定、层次薄的为微荚膜。

3.形态不固定、结构松散的为粘液层。

4.包裹在细胞群体上有一定形态的糖被称为菌胶团。

糖被的主要功能是保护菌体免受干旱损伤或宿主免疫活性细胞的吞噬。

荚膜的功能：1、保护作用2、贮藏养料3、保护屏障4、表面附着5、信息识别6、堆积代谢物【3章微生物细胞的结构域功能】4.PHB（poly-β-hydroxybutyrate，聚β-羟丁酸）:PHR是存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的碳源类贮藏物。

具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压的作用。

是细菌独有的可作为医用材料。

【3章微生物细胞的结构域功能】5.原养型微生物（prototroph）：与自然发生的同种其他个体一样，具有相同营养需求的微生物。

【4章微生物的营养】6.基因转位（group translocation）：物质通过载体帮助，在一个较复杂的运输系统的作用下进行的跨膜主动运输，被运输物质在该过程中化学性质发生改变。

【4章微生物的营养】（2013、2011、2009）7.对数生长期(logarithmic phase)：微生物经过延滞期后，以最大的速度进行生长和分裂至微生物数量呈对数增加的时期。

在对数生长期微生物各成分按比例有规律增加，微生物呈平衡生长。

（也称指数生长期或指数期。

）【6章微生物的生长繁殖及其控制】（2013、2010）8.同步培养（synchronous culture）：使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞的培养方法称为同步培养。

负染技术的原理及应用1. 负染技术的概述负染技术是一种常见的电子显微镜样品制备方法，常用于观察细胞、病毒等生物样品。

本文将介绍负染技术的原理及其在生物学研究中的应用。

2. 负染技术的原理负染技术的原理是通过在样品表面形成一层电子密度较低的负像物质，使样品的外部形态更加清晰可见。

具体原理如下： - 样品制备：首先，将生物样品固定在网格上。

通常使用的是碳薄膜覆盖的铜网格，以提供一个稳定的基质。

- 造影剂制备：在负染处理过程中，通常会使用重金属盐溶液作为负像物质制备造影剂。

例如，铂酸、铂盐以及高碘酸等均可作为造影剂。

- 负染处理：将造影剂溶液直接滴在网格上的样品上。

通过吸附作用，造影剂会在样品表面和孔隙中形成一层薄膜。

过程中可以控制溶液的浓度和滴液时间，以调节造影剂的染色效果。

- 负染样品观察：通过电子显微镜观察样品。

电子束透过样品时，造影剂层会散射电子束，使得样品表面更加清晰可见。

3. 负染技术的应用负染技术在生物学研究中有广泛的应用，具体应用如下：3.1 细胞形态观察负染技术可以帮助科学家观察细胞的形态及内部结构。

通过负染处理，细胞的形态会更加清晰可见，有助于研究细胞的结构与功能之间的关系。

3.2 病毒研究病毒是一种非常微小的生物实体，通过负染技术可以更好地观察病毒的结构和形态，深入了解其病理特性及感染机制，为疾病防治提供理论依据。

3.3 蛋白质复合物分析负染技术可以用于观察蛋白质复合物的形态和结构，帮助科学家深入了解蛋白质相互作用的机制以及生物过程中的功能调控。

3.4 高分辨率显微镜技术发展负染技术对电子显微镜技术的发展也起到了推动作用。

通过负染技术，结合高分辨率显微镜技术，可以实现对生物样品的更大深度的观察，为科学家提供更多关于生物结构和功能的详细信息。

4. 结论负染技术是一种在电子显微镜观察生物样品中常用的方法。

通过形成负像物质的层来增强样品的对比度，负染技术使得样品的外部形态更加清晰可见。

负染色技术负染色又称阴性染色，是相对于普通染色(称正染色)而言的。

负染色首先由Hall在1955年提出。

Hall在病毒研究中用磷钨酸染色后，发现图像的背景很暗，而病毒象一个亮晶的"空洞"被清楚地显示出来。

在超薄切片的染色中，染色后的样品电子密度因染色而被加强，在图像中呈现黑色。

而背景因未被染色而呈光亮，这种染色称为正染色。

而负染色则相反，由于染液中某些电子密度高的物质(如重金属盐等)"包埋"低电子密度的样品，结果在图像中背景是黑暗的，而样品像"透明"地光亮。

两者之间的反差正好相反，故称为负染色。

对于负染色的机制目前还不十分了解。

对颗粒状的生物材料的研究而言，负染色技术与超薄切片方法相比具有分辨率高(可达15Å)，简单快速等优点。

因此，在生物学研究中得到越来越广泛的应用。

它可以显示生物大分子、细菌、病毒、分离的细胞器以及蛋白质晶体等样品的形状、结构、大小以及表面结构的特征。

尤其在病毒学中，负染色技术成为不可取代的实验技术。

[编辑]负染色液的制备用作负染色的负染色剂应具有：较强的电子散射能力以产生足够的图像反差；熔点高，在电子束的轰击下不会升华；溶解度大，不易析出沉淀；在电镜下不呈现出可观察到的结构；分子小，容易渗入不规则表面的凹陷处；与样品不起化学反应等。

目前最常用的负染液是磷钨酸、磷钨酸钾和磷钨酸钠(分别简称为PTA、KPT、NaPT)。

此外醋酸铀、甲酸铀、硅钨酸、钼酸铵等也常作负染色剂用。

它们的配制方法如下：磷钨酸、磷钨酸钠、磷钨酸钾溶液通常用双蒸水或磷酸缓冲液配制成1％～3％的溶液，使用时应用1 mol／L氢氧化钠溶液将负染色液的pH值调至6.4～7.0或实验所需的值。

醋酸铀：通常使用双蒸水配制成0.2％～0.5％水溶液(pH4.5)。

醋酸铀染色液应是新鲜的，最好使用前配制。

醋酸铀溶解需15～30分钟，在黑暗中能稳定几小时，使用前用1mol／L的氢氧化钠溶液将pH值调至4.5。

海南大学生物工程学院2021年《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（35分，每题5分）1. 核糖体存在于一切细胞内。

（）答案：错误解析：极个别剖面分化的分化细胞内没有核糖体，如哺乳动物完备的红细胞等。

2. 在泛素化途径降解蛋白质过程中，泛素随靶蛋白一同被蛋白酶体降解。

（）答案：错误解析：泛素并不被降解，它可以循环利用。

3. 细胞内新合成的多肽链如果带有信号序列，它就被运送到细胞外成为分泌蛋白；如果不带有信号肽，就留在细胞内。

（）答案：错误解析：蛋白分选的信号分选接收端序列多种多样，所决定的蛋白质的最终去向不一，如含N端信号肽的多肽将分泌至细胞外，而含有核定位信号的蛋白将进入细胞核。

4. 亚显微结构即超微结构。

（）答案：正确解析：亚显微结构又称超微结构。

指在普通光学观察下显微镜不能辨别清楚的细胞内各种微细结构。

5. Na＋K＋泵只存在真核生物的细胞质膜而不存在于囊泡膜。

（）答案：错误解析：极少存在动物的细胞质膜，而不存在于其他基质。

6. ras是一个癌基因。

（）答案：错误解析：ras是一个原癌基因，如果带有其始终处于活化状态的突变，才会变成癌基因。

7. 温度敏感突变体是研究细胞周期控制蛋白的有用突变体。

（）答案：正确解析：该前提条件实验利用了所谓的条件突变体。

条件突变体所产生的蛋白质在某一温度下是稳定的、有功能的，但在其他温度市场条件下，则变得不稳定且失去功能。

细胞可以先在突变蛋白正常工作的温度下，然后转换到功能丧失的温度下培养。

2、名词解释（40分，每题5分）1. 基粒答案：轴突基粒是指位于鞭毛和纤毛根部，类似于动物细胞中的中心体，呈圆柱状的微管性结构，平均大小为0.2～0.5μm。

其壁由9组微管三联体构成，包括完全微管与不完全微管。

1.自生说（spontaneous generation）:一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然的发生的。

2.路易斯·巴斯德（Louis Pasteur，1822—1895）：法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做了卓越的贡献，成为了微生物学的奠基人。

（1）.用曲颈试验彻底否定了“自然发生说”，建立了病原学说。

（2）.证实了发酵由微生物引起的。

（3）首次制成狂犬疫苗，证实其免疫学说。

（4）发明了巴氏消毒法。

3.罗伯特·柯赫（Robert Koch，1843—1910）：德国人，著名细菌学家，对病原细菌的研究做出了突出贡献。

（1）证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌。

（2）分离培养了结核病的病原菌。

（3）提出了某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则—柯赫氏定律。

（4）创造的细菌染色的方法。

4.SARS (Severe Acute Respiratory Syndrome)：严重急性呼吸道综合症，即我国称为的非典型肺炎，也简称非典。

5.微生物（microorganism）：因为太小，一般用肉眼看不清楚的生物。

这些微小生物包括，无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒，具原核细胞结构的真细菌、古细菌，以及具真核细胞结构的真菌、单细胞藻类、原生生物等。

也有少数成员是肉眼可见的。

6.纯培养物（pure culture）：仅有单一一种微生物繁殖得到的培养物。

7.培养基（culture medium）：由人工配置的，供微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。

8.无菌技术（aseptic technique）：在分离转接及培养微生物时，防止其被环境中微生物污染或其自身污染环境的技术。

9.富集培养（enrichment culture）：利用不同微生物间生命活动特点的不同，指定特定的环境条件，使劲适应于该环境条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，从自然界中分离到特定的微生物。

负染色技术的名词解释负染色技术是一种在生物学和医学领域广泛使用的实验技术，它被用于观察细胞和组织内的结构和分子。

负染色的基本原理是使用有颜色的染料或金属离子来染色背景，从而使细胞或组织的结构或分子在显微镜下呈现出无色或反相的效果。

这项技术的发展可以追溯到19世纪末，当时科学家们开始利用高分辨率的光学显微镜来观察细胞的微观结构。

然而，细胞和组织通常是透明的或有颜色的，这使得它们难以观察和分析。

为了解决这个问题，负染色技术应运而生。

负染色技术的一个关键组成部分是负染剂。

常用的负染剂包括印染剂、金属离子和聚合物。

这些染剂通常具有高度亲和性，可以与细胞或组织中的某些分子结合或附着，使其显示出颜色。

通过选择适当的染剂和实验条件，可以实现准确和清晰的负染色效果。

负染色技术有许多应用。

在细胞生物学领域，它被广泛用于观察细胞的核形态、细胞器和细胞分裂过程。

通过对这些结构的负染色观察，研究人员可以深入了解细胞的功能和组成。

在医学诊断领域，负染色技术可以用于检测病原体、癌细胞和其他病态组织。

负染色还被用于研究纳米颗粒和材料科学领域的微观结构。

除了在光学显微镜下的应用，负染色技术还可以与电子显微镜和超分辨显微镜等高级显微技术结合使用。

通过使用高分辨率的显微镜，研究人员可以获取足够精细的图像，以观察细胞和组织中更微小的细节。

负染色技术虽然在科学研究中发挥着重要作用，但它也存在一些局限性和挑战。

首先，负染剂的选择非常重要，不同的染剂适用于不同的细胞和组织类型。

其次，负染色需要仔细控制实验条件，包括染色时间、染剂浓度和温度等，以获得清晰可见的结果。

此外，负染色仅提供细胞的形态信息，对于细胞内部的功能和动态过程了解有限。

尽管负染色技术还存在一些挑战，但随着科技的不断进步，它仍然是观察和研究细胞和组织结构的重要工具之一。

未来，随着新的负染剂的发展和显微技术的改进，负染色技术在生物学和医学领域的应用将会得到进一步拓展，为我们揭示更多关于生命的奥秘。

第21卷　第3期大学化学2006年6月磷脂囊泡的研究与应用王绍清　黄建滨(北京大学化学与分子工程学院　北京100871) 摘要　从脂质体的发现历史开始,对脂质体的形貌和结构等各个方面的研究成果和方法,以及脂质体的制备、物理性质、应用等进行综合性介绍。

脂质体(li pos o me)是由磷脂分子在水相中通过疏水作用形成的双分子膜包围而成的密闭球形囊泡(vesicle)。

自从20世纪60年代中期脂质体被Bangha m等发现以来[1],引起了研究者的广泛兴趣,主要集中在研究脂质体的物质特性,如原料组成,磷脂的碳氢链和胆固醇等对脂质体结构和性质的影响等[2]。

1972年,生物膜Singer2N icols on流动镶嵌模型[3]的提出为研究者揭示了一个潜在的脂质体研究领域———生物膜模型。

无论是生物学中对细胞的培养和生长以及细胞分裂规律进行的探讨,还是生物化学中对细胞内部所发生的各种进程化学反应机理的研究和分析,都是在细胞这个同时发生着无数生化进程的复杂研究平台上进行的,各种进程之间避免不了互相干扰和影响。

脂质体的发现,尤其是它与细胞之间相似性的证实,为真正实现把细胞中所发生的各种物理化学或生化反应进程分离开来进行独立研究提供了一个研究平台,为更多生命规律的发现和对生命现象的更深认识创造了条件。

例如,对细胞膜中控制各种离子进出细胞的各种膜蛋白进行的深入结构解析和机理研究,就是以脂质体膜为基础进行的[4]。

细胞是生命的基本单元。

细胞的自我复制功能保证了物种的延续,是生物成长的基础。

实现脂质体自发分裂和自我复制[5]对于人工细胞的制备是不可缺少的研究步骤。

在医药学研究上,因为它的生物亲和性,脂质体被用作治疗癌症、白血病、病毒性肝炎和艾滋病等疑难病症的药物输送系统的首选药物载体[6,7]。

所以,可以说脂质体的研究是与21世纪人类的健康息息相关的。

对于生物学、医学和化学研究工作者而言,了解脂质体的历史,学习它的制备方法,掌握它的特性,熟悉与它相关的热门研究方向,都具有重要的意义。

1．纯培养物(pureculture)由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单细胞生长、繁殖所形成。

2．培养基(culturemedium)供微生物生长、繁殖的营养基质，根据其中固化剂含量的不同可分为固体、半固体、液体3种。

3．无菌技术(aseptic technique) 在分离、转接及培养纯种微生物时，防止其被环境中微生物污染或其自身污染环境的技术。

4．菌落(colony) 单个微生物细胞在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到——定程度形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。

5．菌苔(lawn)固体培养基表面众多菌落连成一片时所形成的微生物生长群体。

6．平皿(Petri dish)由玻璃或透明塑料制成的圆形皿底和皿盖组成，皿盖可覆盖于皿底之上，防止空气中微生物的污染。

其英文名称是为纪念其发明者Richard Petri。

7．培养平板(culture plate)常简称为平板，指固体培养基倒人无菌平皿，冷却凝固后所形成的培养基平面。

8．稀释倒平板法(pour plate method) 将待分离的材料稀释后与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后制成可能含菌的培养平板，保温培养后分离得到的微生物菌落生长在固体培养基表面和里面。

优点：细胞分离效果好，方便常用缺点：将含菌材料加到还烫的培养基中易造成某些热敏菌的死亡，也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中缺乏氧气而影响生长9．涂布平板法(spread plate method) 在培养平板表面均匀涂布经过稀释的微生物悬液后，保温培养，在固体培养基表面得到生长分离的微生物菌落。

缺点：有时会涂布不均匀10．平板划线法(streakplatemethod) 用接种环在培养平板表面划线接种微生物，使微生物细胞数量随着划线次数的增加而减少，并逐步分开。

保温培养后，在固体培养基表面得到生长分离的微生物菌落。

缺点：无法进行计数11．稀释摇管法(dilutionshakeculturemethod) 将待分离的材料稀释后与已熔化并冷却至50~C左右的琼脂培养基混合，摇匀后用石蜡封盖，保温培养后分离得到的微生物菌落生长在琼脂柱中间。

第二章微生物的纯培养和显微镜技术一、要点提示1．由于微生物个体微小，在绝大多数情况下对微生物的研究、利用都是使用其群体，称为培养物。

由于一般情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果，因此从混杂的天然微生物群中分离获得某特定的微生物纯培养，是研究和利用微生物的最重要的环节之一。

采用稀释涂布或平板划线技术在琼脂平板上得到微生物的单菌落是最常用的纯种分离手段，而在分离、转接及培养微生物纯培养时防止被其他微生物污染的无菌操作技术是进行微生物学研究的基础，并广泛地被其他学科和生产实际所利用。

2．通过分离纯化得到的微生物纯培养物，必须通过各种保藏技术使其在一定时间内不死亡、不会因发生变异而丢失重要的生物学性状、不会被其他微生物污染或因自身泄漏而污染环境，否则就无法真正保证微生物研究和应用工作的顺利进行。

传代培养、冷冻真空干燥保藏、低温冰箱保藏及液氮保藏是通常使用的微生物菌种保藏技术。

3．微生物个体微小，通常必须通过显微镜才能观察到其个体形态，而进行显微观察时，分辨率和反差是决定显微观察效果的两个最重要的因素。

它们与显微镜的特性有关，也取决于样品的制备与观察技术。

无论是光学显微镜还是电子显微镜，其设备和技术发展迅速，应用面越来越广泛和深入。

4．在显微镜下微生物的大小与形态千差万别，丰富多彩，是区分不同微生物和对其进行分类、鉴定的重要依据之一。

二、重点、难点剖析1．无菌技术是最基本的微生物学实验操作技术，其核心是无菌概念的建立，以及正确而严格地按实验教材和实验课的要求，掌握在各种情况下的具体应用原则和操作规范。

2．分离获得某特定的微生物纯培养，是研究和利用微生物的基础。

获得纯培养的方法有固体培养基分离、液体培养基分离和单细胞挑取3大类(表2-1)，其中用固体培养基获得单独的微生物菌落是最常用、最基本的方法。

此外还有活细胞或活体分离法，如噬菌体和动植物病毒纯培养的分离等。

3．保证所用菌种性状的稳定是微生物学工作最重要的基本要求，否则生产或科研都无法正常进行。