微生物检测原始记录表(无菌检查)

受控编号：
罐头食品商业无菌检测原始记录表
检测项目：商业无菌样品状态：□液态☑固态□完好□已开封□其他：存放条件：□冷藏□冷冻☑室温检测日期：环境条件： 25 ℃ 58 %RH 检测仪器：□电热恒温培养箱☑生化培养箱
检测依据：☑GB/T 4789.26-2013 □其他：
样品处理：（1）取待检样品常温下测定PH值，根据pH值大小和内容物成分判定罐头食品的种类（低酸性或酸性罐头食品）；
（2）根据样品的种类选择合适的温度和时间进行保温处理，每天进行检查，有胖听或泄漏等异常现象出现时，立即剔出作开罐检查；
（3）取上述保温过的全部罐头，冷却到常温后，按无菌操作开罐检查；
（4）对上述样品中感官或pH检查结果异常的，做进一步的涂片染色镜检和接种培养处理。

委托单编号：
检验员：复核人：审核人：
第页，共页
2023年月日执行。

菌落总数、大肠菌群检验原始记录编号：002 品名：取样日期：取样量：一、菌落总数(实验仪器：SP-02型生化培养箱，LX-01型立式压力蒸汽灭菌器)1.检测设备：培养箱：℃，高压蒸汽灭菌锅温度：℃，压强：Mpa ，灭菌时间：min2.检测条件：温度：℃，湿度：%检测方法：GB4789.2-2016用刻度吸管吸取样品液1ml注入9ml无菌生理盐水的试管中混匀，制成1：10的样品均液。

按上述操作，制成10倍系列稀释样品均液。

根据对样品污染状况的估计，选择2-3个稀释度，每个稀释度分别吸取1ml样品稀释均液加入2个平皿内，同时分别吸取1ml无菌生理盐水加入2个无菌平皿做空白对照。

倾注15ml-20ml 46 ℃左右的PCA培养基，静置冷却，倒置于36±1℃的恒温培养箱中培养48h±2h。

二、大肠菌群(实验仪器：SP-02型生化培养箱，LX-01型立式压力蒸汽灭菌器)1.检测设备：培养箱：℃，高压蒸汽灭菌锅温度：℃，压强：Mpa ，灭菌时间：min2.检测条件：温度：℃，湿度：%培养开始：年月日时，培养结束：年月日时，培养时间：h检测方法：GB/T 4789.3-2003用刻度吸管吸取样品液1ml注入9ml无菌生理盐水的试管中混匀，制成1：10的样品均液。

按上述操作，制成10倍系列稀释样品均液。

根据对样品污染状况的估计，选择2-3个稀释度，每个稀释度接种三管。

将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管中，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管，1ml及1ml以下者，用单料乳糖胆盐发酵管，每个稀释度接种三管，置于36±1℃的恒温培养箱中培养24h±2h ，如果所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则将产气的发酵管分别转接种在伊红美蓝琼脂平板上，置于36±1℃的恒温培养箱中培养18h±2h，然后取出观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实试验。

无菌检查方法验证：取本品，分别加灭菌注射用水 1ml 溶解，采用薄膜过滤法依法检查(中国药典 2022 年版二部附录Ⅺ H )，应符合规定。

菌液制备： 10 倍稀释法培养基 营养琼脂培养基营养琼脂培养基营养琼脂培养基硫乙醇酸盐培养基改良马丁培养基改良马丁琼脂斜面 培养基菌悬液制备计数结果菌种 代数 稀释级 菌落数(cfu/ml )枯草芽孢杆菌 4 10-6 61金黄色葡萄球菌 4 10-7 89大肠埃希菌 4 10-6 78生孢梭菌 4 10-6 67白色念珠菌 4 10-7 83黑曲霉菌 4 10-4 401、供试品处理将供试品去掉铝塑盖，外表面用75%酒精全面消毒，然后向每支样品中注 入 1.0ml0.1%的蛋白胨灭菌溶液，备用。

2、检查阳性对照： 将等量的试验菌直接加入到液体硫乙醇酸盐培养基或者改良马丁液 体培养基管中，在相应的温度下培养。

液体硫乙醇酸盐培养基管在 30-35℃下培菌种枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63501 金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003 大肠埃希菌 CMCC(B)44102生孢梭菌 CMCC(B)64941白色念珠菌 CMCC(F)98001黑曲霉菌 CMCC(F)98003菌悬液制备用 0.9% 无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含菌少于 100cfu (菌落行程单 位)的菌悬液加入 5ml0.9%无菌氯化钠溶液，将 孢子洗脱，再同上制成每 ml 含菌 小于 100cfu 的菌悬液养；改良马丁液体培养基管在23-28℃下培养3-5 天。

观察记录。

阴性对照：将灭菌的液体硫乙醇酸盐培养基或者改良马丁液体培养基管直接放在相应的温度下培养。

液体硫乙醇酸盐培养基管在30-35℃下培养；改良马丁液体培养基管在23-28℃下培养3-5 天。

观察记录。

样品 (薄膜过滤法)：每种实验菌取10 支处理好的供试品溶液，将溶液合并后加入制备好的菌悬液1ml，用0.1%的蛋白胨灭菌溶液稀释至100ml，按薄膜过滤法过滤，取出滤膜，将其分为3 等份，分别置于含硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基的容器中，其中一份作为阳性对照用。

微生物检测原始记录菌落总数与大肠菌群检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验依据检验环境温度：湿度：一、菌落总数cfu/ml(g) 培养基名称：培养温度：培养时间：年月日时--- 年月日时稀释倍数空白∕稀释液对照-1 10-2 10-3 10-4原液10平板1平板2平均值检测结果：二、大肠菌群MPN/100ml （g）培养基名称：培养温度：培养时间：年月日时--- 年月日时LST 发酵1ml × 3 0.1ml × 3 0.0 1ml × 3初发酵结果复发酵试验检测结果主检：年月日校核：年月日菌落总数和大肠菌群检测原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验环境温度：湿度：检验依据GB4789.2-2010 GB4789.3-2010一、菌落总数cfu/ml(g) 培养基名称：培养温度：36±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时样品数样1 样2 样3 样4 样5稀释倍数平板 1 平板 2 平板 1 平板 2 平板1 平板2 平板1 平板 2 平板1 平板2原液-110-210-310-410空白对照检验结果二、大肠菌群cfu/ml(g) 培养基名称：培养温度：36±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时样1 样2 样3 样4 样5 样品数平板 1 平板 2 平板 1 平板 2 平板1 平板2 平板1 平板 2 平板1 平板2 稀释倍数原液-110-210-310-410空白对照验证试验检验结果主检：年月日校核：年月日XXXX检测有限公司水质微生物检验原始记录共页第页样品名称样品编号设备名称检验环境温度：湿度：检验依据一、菌落总数cfu/ml(g) 培养温度：36±1℃-1 10-2 10-3 10-4 10-5 稀释倍数原液10平板 1平板 2平均值检测结果：二、总大肠菌群MPN/100ml （g）培养温度：36±1℃培养时间：LST 培养基10ml ×1ml ×0.1ml ×0.01m l×发酵结果验伊红美蓝琼脂平板证试革兰氏染色乳糖复发酵验检测结果三、大肠埃希氏菌MPN/100ml （g）验自总大肠菌群乳糖发酵试样中的阳性管中取一滴转接伊红美蓝琼脂平板证种与EC 培养基中置44.5℃培养24 小时观察试验四、耐热大肠菌群MPN/100ml （g）将总大肠菌群多管发酵法初发酵或产气的管中验培养后的EC-MUG 管在暗处用用无菌金属接种环将试液接种到EC-MUG 管中波长366nm 功率为6W 的紫外光证置44.5℃培养24 小时观察灯照射试验主检：年月日校核：年月日乳酸菌与大肠菌群检测记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称检验环境温度：湿度：检验依据一、乳酸菌cfu/ml(g) 培养温度：36±1℃培养时间：稀释倍数原液10-3 10-4 10-5 10-6 10-7平板1平板2平均值检测结果：二、大肠菌群MPN/100ml （g）培养温度：培养时间：年月日时--- 年月日时LST 发酵1ml × 3 0.1ml × 3 0.0 1ml × 3发酵结果伊红美蓝琼脂平板验证试验革兰氏染色乳糖复发酵检测结果主检：年月日校核：年月日致病菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验环境温度：湿度：致病菌培养温度：培养时间：年月日时 ---年月日时金黄色葡萄球菌25g 样品+225ml7.5% （定性检验）氯化钠肉汤，均质检验依据：将上述培养物，分别划线接种到涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验Baird-Parker 和血平板实验现象检测结果前增菌增菌分离沙门氏菌将上述培养物， 25g样品检验依据：+225mlBPW ，均质分别取 1ml 转接种于 10mlTTB 与 10mlSC 内，进行前增菌再次将上述培养物，分别划线接种于 BS 琼脂平板 XLD 琼脂平板生化试验实验现象检测结果志贺氏菌检验依据：25g 样品+225ml GN 增菌液将上述培养物分别划线接种于HE 平板和 EMB 平板划线接种 TSI, 葡萄糖半固体生化试验实验现象检测结果25g 样品+225ml 生理溶血性链球菌盐水，吸取 5ml 接种于50ml 葡萄糖肉汤曾涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验检验依据：菌，划线接种于血平板实验现象检测结果主检：年月日校核：年月日霉菌和酵母菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验依据检验环境温度：湿度：培养基名称培养温度：28±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时：观察培养培养温度观察时间观察结果第1 天第2 天第3 天第4 天第5 天观察结论：菌落计数：培养温度：28±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时-1 稀释倍数空白∕稀释液对照原液10-210-310-410平板 1平板 2平均值检测结果主检：年月日校核：年月日商业无菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器名称检验环境温度：湿度：仪器编号检验依据1、保温试验：将完整试样一份置于36±1℃培养箱保温十天，每天观察胖听、泄漏现象。

微生物检测原始记录一、目的本文档旨在规定微生物检测的原始记录格式和内容，以确保检测过程和结果的准确性和可追溯性。

二、记录格式1、记录纸张：使用A4纸，横向排列，页边距至少留有2cm。

2、记录标题：在页面顶部居中书写“微生物检测原始记录”。

3、日期和实验室名称：在页面右下角书写检测日期和实验室名称。

4、检测样品信息：在页面中部或适当位置填写样品信息，包括样品名称、编号、来源、处理方式等。

5、检测项目和指标：在页面中部或适当位置列出检测项目和指标，如菌落总数、大肠杆菌、沙门氏菌等。

6、检测方法和仪器：在页面中部或适当位置描述检测所采用的方法和使用的仪器设备。

7、检测结果记录：在页面中部或适当位置详细记录每个检测项目的实验数据，并确保数据准确、清晰、可追溯。

8、结论和建议：在页面底部或适当位置总结检测结果，并给出相应建议或处理意见。

9、检测人员签名：在页面右下角或适当位置由检测人员签名，以示负责。

10、备注：根据需要添加其他相关信息，如样品异常情况说明、引用标准、注意事项等。

三、记录内容1、样品信息：样品名称、编号、来源（如生产批次、产地等）、处理方式（如取样、前处理等）。

2、检测项目和指标：根据实际需要确定检测项目和指标，如菌落总数、大肠杆菌、沙门氏菌等微生物指标，以及可能的化学指标等。

3、检测方法：描述微生物检测所采用的方法，如国标法、第三方检测方法等。

同时应注明所用方法的版本号和发布机构。

4、仪器设备：列出在检测过程中使用的所有仪器设备的名称、型号、编号和使用状态等信息。

5、实验数据记录：详细记录每个检测项目的实验数据，包括观察结果、计数结果、吸光度值等。

数据应准确、清晰、可追溯，并附上必要的图表和曲线图。

6、结论和建议：根据检测结果给出相应的结论和建议，如是否符合标准要求，是否需要进一步处理或跟进等。

7、其他信息：根据需要添加其他相关信息，如样品异常情况说明、引用标准、注意事项等。

8、检测人员签名：由检测人员签名，以示负责。

检测原始记录填写中常见问题及注意事项汇总做好试验记录需要留意以下几点：一、试验记录的书写要求；二、试验记录的内容；三、试验记录留意的问题；四、试验记录的坏习惯。

一、不良记录习惯会带来哪些问题？1．将试验数据记录于纸片试验操作时，由于未携带试验记录本，有时将某些试验现象顺手记录于身边的纸片或其他纸质材料的空白处，本想以后再将其转抄至试验记录本，但由于顺手记录的内容一般欠具体，待需要正式记录时遗忘了其细节甚至关键内容，或小纸片根本就遗失了。

为避开上述现象发生，须养成随身携带试验记录本的习惯，或将试验操作流程打印并贴于操作台，打印时旁边留肯定空间用于填写某些随想或转变的条件，待试验结束时再将其贴到试验记录本上。

2．试验记录不准时有人习惯用脑子记忆当天（甚至几天）的试验过程，待空余时再将其记录于试验记录本，殊不知好记性远不如一只烂笔头，某些事情是瞬间记忆，转身即忘，或仅记住一部分，遗忘或记错的后果可能使某些重要试验现象被遗漏，有时恰巧是胜利与失败的关键数据，导致与胜利失之交臂。

尤其对于某些试验操作过程中临时改动的条件，若未准时记录，即使此次试验胜利，日后也难以重复，由于某些微小变化根本不行能回忆起来。

兹举一例：某学者喜用脑记忆，且习惯于临时转变试验条件，某次对一个长时间未能胜利的试验进行改动，竟然获得胜利，为完善该试验的对比条件，须重复相同试验，但由于未准时记录转变的条件，事后花费半年时间才重复出相同结果，代价之大可想而知。

3．试验数据整理不准时试验数据的准时整理极为重要，否则难以从中发觉试验的某些规律，也难以对后续试验的实施和调整供应正确指导。

试验者常期望在有限时间内尽可能多做一些试验，往往将试验数据简洁整理，甚至不整理，即匆忙进入下一轮试验操作，结果可能导致某些试验错误持续性存在，或重复某些无意义、无价值的试验，或使应当深化的线索不能准时被发觉，或导致长时间都在试验失败的苦痛中挣扎。

所以在试验中，有时快即是慢，慢也可能即是快。

微生物检验原始记录(大肠菌群)检验原始记录编号：报告类别：微生物共页项目：大肠菌群coliforms 检验地点：样品名称：样品编号：样品状态：符合检验要求；其他境条件：实验依据及步骤GB4789.3-2016样品稀释固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225ml生理盐水或磷酸盐缓冲液的无菌均质容器内均质，或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中拍击式均质器拍打，制成为1:10样品匀液。

依次进行10倍递增稀释。

液体样品：以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中混匀，为1:10样品匀液。

样品匀液的ph应在6.5-7.5之间，必要时分别用1mol/lNaOH或1mol/lHcL调节。

取1mL1∶10稀释匀液沿管壁缓缓注入9ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用一支无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制成1:100样品匀液。

按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸量管。

从样品匀液制备到样品接种完毕，全过程不得超过15min。

初发酵试验（9管法）每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤）36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内是否有气泡产生。

产气者进行复发酵试验，未产气则继续培养至48±2h，产期进行复发酵试验。

未产气者为大肠菌群阴性。

复发酵试验（证实试验）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气情况。

数据分析与结果一、菌落计数根据证实为大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告大肠菌群的最可能数。