HPLC法同时测定利胆排石片中4种蒽醌类成分的含量探索
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HPLC-荧光法测定4种蒽醌成分在大鼠体内组织分布的研究姜悦;冯芳【摘要】A method was developed for the determination of aloe-emodin, rhein, chrysophanol and physion and the tissue distribution and elimination of these four anthraquinones in rat were studied after oral administration of gardenia and rhubarb decoction.The tissue distribution concentrations at different time points of four anthraquinones were determined by HPLC-FLD method.Tissue samples were extracted with liquid-liquid extraction procedure.Tissue samples were separated on a C18 column (4.6 mm×150 mm, 5 μm), using 0.2%acetic acid and methanol as mobile phase at a flow rate of 1.0 mL · min-1 with gradient elution.The excitation and emission wavelengths were set at 430, 525 nm, respectively.A selective and sensitive HPLC-FLD method was developed for the simultaneous determination of four anthraquinones in rat tissue.%建立大鼠灌胃栀子大黄汤后心脏、肝脏、脾脏、肾脏中芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚的测定方法并考察4种蒽醌在大鼠体内的分布、消除行为。
* 国家药典委员会“2015年国家药品药品抽验行动计划” 第一作者 Tel :(0371)63388295;E-mail :guoqi_123@HPLC 法同时测定利胆排石片中14个成分的含量*郭琪,王海波,李向阳,李海燕,李桂本(河南省食品药品检验所,郑州450000)摘要 目的:建立同时测定利胆排石片中绿原酸、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、汉黄芩素、大黄素、木香烃内酯、去氢木香内酯、大黄酚共14个成分的高效液相色谱法。
方法:采用Phenomenex Luna 5u-C 18色谱柱(4.6 mm ×250 mm ,5 μm ),以0.5%磷酸水溶液(A )-乙腈(B )为流动相,梯度洗脱,流速1 mL ·min -1,柱温30 ℃,检测波长:254 nm 。
结果:各待测组分分离度良好;绿原酸、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、汉黄芩素、大黄素、木香烃内酯、去氢木香内酯、大黄酚14个成分在相应的范围内线性关系良好,相关系数(r )不低于0.999 1, 精密度试验的RSD 均小于2.0%;平均回收率为97.8%~100.7%。
样品中14个测定成分的含量范围分别为0.05~0.25、0.00~4.30、0.28~1.03、1.39~34.45、2.85~5.71、0.32~0.97、0.89~1.43、0.06~0.33、0.05~0.26、0.43~0.95、0.09~0.38、0.04~0.12、0.03~0.14、0.22~0.54 mg ·片-1。
结论:经方法学验证,本方法可用于利胆排石片中绿原酸、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、汉黄芩素、大黄素、木香烃内酯、去氢木香内酯、大黄酚14个成分的含量测定。
关键词:利胆排石片;绿原酸;柚皮苷;橙皮苷;新橙皮苷;黄芩苷;汉黄芩苷;黄芩素;芦荟大黄素;大黄酸;汉黄芩素;大黄素;木香烃内酯;去氢木香内酯;大黄酚;茵陈;枳实;黄芩;大黄;木香;中成药多组分含量测定;高效液相色谱中图分类号:R 917 文献标识码:A 文章编号:0254-1793(2017)04-0631-08doi :10.16155/j.0254-1793.2017.04.11Simultaneous determination of 14 components inLidanpaishi tablets by HPLC *GUO Qi ,WANG Hai-bo ,LI Xiang-yang ,LI Hai-yan ,LI Gui-ben(Henan Provincial Institute of Food and Drug Control ,Zhenzhou 450000,China )Abstract Objective :To develop an HPLC method for simultaneous determination of chlorogenic acid ,naringin ,hesperidin ,neohesperidin ,baicalin ,wogonoside ,baicalein ,aloeemodin ,rhein ,wogonin ,emodin ,costunolide ,dehydrocostus lactone and chrysophanol in Lidanpaishi tablets .Methods :The chromatographic separation was onPhenomenex Luna 5u-C 18 column (4.6 mm ×250 mm ,5 μm )with a mobile phase consisting of 0.5% phosphoric acid solution (A )-acetonitrile (B )in a gradient mode at 30 ℃.The flow rate was 1 mL ·min -1 and the UV detection wavelengthwas set at 254 nm.Results:Excellent chromatographic separation was achieved with good linearity(r≥0.999 1)within the linear range of chlorogenic acid,naringin,hesperidin,neohesperidin,baicalin,wogonoside,baicalein,aloeemodin,rhein,wogonin,emodin,costunolide,dehydrocostus lactone and chrysophanol;RSD of the precision test was less than 2.0%.The average recoveries of the fourteen components were in the range of 97.8%-100.7%.The contents of fourteen components in each tablet sample were 0.05-0.25 mg,0.00-4.30 mg,0.28-1.03 mg,1.39-34.45 mg,2.85-5.71 mg,0.32-0.97 mg,0.89-1.43 mg,0.06-0.33 mg,0.05-0.26 mg,0.43-0.95 mg,0.09-0.38 mg,0.04-0.12 mg,0.03-0.14 mg,and 0.22-0.54 mg,respectively.Conclusion:Proved by method validation,this method could be used to determine chlorogenic acid,naringin,hesperidin,neohesperidin,baicalin,wogonoside,baicalein,aloeemodin,rhein,wogonin,emodin,costunolide,dehydrocostus lactone and chrysophanol in Lidanpaishi tablets.Keywords:Lidanpaishi tablets;chlorogenic acid;naringin;hesperidin;neohesperidin;baicalin;wogonoside;baicalein;aloeemodin;rhein;wogonin;emodin;costunolide;dehydrocostus lactone;chrysophanol;Artemisiae Scopariae Herba;Aurantii Immaturus Fructus;Scutellariae Radix;Rhei Radix et Rhizoma;Aucklandiae Radix;multicomponent analysis of Chinese patent medicine;high performance liquid chromatography利胆排石片自1995年开始收载于历版中国药典一部。
HPLC法测定不同产地大黄中四种蒽醌类化合物含量
李元辉
【期刊名称】《中国现代中药》
【年(卷),期】2005(007)006
【摘要】目的:测定不同产地大黄中的蒽醌类化合物的含量.方法:以Kromasil ODS2-1(5μm,4.6mm×250mm)为色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(92:8:0.4)为流动相,检测波长为254nm.结果:各组分得到良好分离,平均回收率为98.4%~100.6%,RSD 为2.1%~2.8%.测得正品中大黄芦荟大黄素0.28%~0.56%,大黄酸0.32%~
0.84%,大黄素0.16%~0.61%,大黄酚0.44%~1.3%,波叶大黄和圆叶大黄不含芦荟大黄素.
【总页数】2页(P17-18)
【作者】李元辉
【作者单位】广东东方新特药公司,广东,广州,510170
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.HPLC法测定植物大黄提取物中蒽醌类化合物含量 [J], 曾梦;王建明
2.HPLC法测定不同产地决明子中五种蒽醌类化合物 [J], 于超;兰红梅;王宇
3.HPLC测定黄连上清丸中5种大黄蒽醌类化合物的含量 [J], 吴俊珠;周浓;罗碧燕
4.HPLC法测定不同产地大黄中番泻苷A 和番泻苷B的含量 [J], 李勉;丁艳霞;詹传红
5.HPLC法测定不同产地淫羊藿药材中两种黄酮类化合物的含量 [J], 郑秀茜;房城;刘永武;贾博宇
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HPLC法测定清胆胶囊中5种蒽醌衍生物的含量
吴叶;程宁;王智华;洪筱坤
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】1999(000)0S1
【摘要】研究清胆胶囊中5种蒽醌衍生物的定量方法。
样品用HPLC法,反相柱,含0.1%高氯酸的83%甲醇溶液为流动相,UV254nm
为检测波长。
平均回收率以水解前大黄素作指标为99.06%,RS
D=4.4%(n=5),方法简便,结果准确,重复性好,可用于本品
的质量控制
【总页数】3页(P18-20)
【作者】吴叶;程宁;王智华;洪筱坤
【作者单位】上海普陀区药检所!200065;上海复旦张江生物医药有限公司;上海中
医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
【相关文献】
1.HPLC法测定清胆胶囊中白藜芦醇甙,陈皮甙的含量 [J], 吴叶;程宁
2.HPLC法同时测定胆宁片中5种蒽醌类衍生物含量 [J], 张秋蓉;王丽芳;刘文燕
3.HPLC法测定六味安消胶囊中游离蒽醌、总蒽醌和结合蒽醌的含量 [J], 许乾丽;
茅向军;熊慧林
4.HPLC法测定胆立清胶囊中芍药苷的含量 [J], 张鹏;王海红;单晓冰
5.HPLC法同时测定舒胆胶囊中4种蒽醌类成分的含量 [J], 王冬梅;陈丽姑;赵怀清因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高效液相色谱法同时测定降脂灵片中4种蒽醌类成分的含量刘敏;贾海红;刘彦;律涛;樊淑彦【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2015(000)001【摘要】目的:建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定降脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素和大黄素甲醚的含量。
方法采用 HPLC测定降脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素和大黄素甲醚的含量,色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱(0~5 min,40∶60~70∶30;5~10 min,70∶30~80∶20;10~15 min,80∶20~90∶10;15~25 min,90∶10),检测波长286 nm,流速1.0 mL/min,进样量20μL,柱温25℃。
结果在选定的色谱条件下橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚具有良好的分离度和稳定性。
橙黄决明素在16.7~134 ng范围内线性关系良好,样品回收率为98.7%,相对标准偏差值(relative standard deviation,RSD)为0.3%;芦荟大黄素在11.1~89.1 ng范围内线性关系良好,样品回收率为98.5%,RSD为1.0%;大黄素在90.3~722 ng范围内线性关系良好,样品回收率为98.5%,RSD值为0.7%;大黄素甲醚在59.2~473 ng范围内线性关系良好,样品回收率为102.0%,RSD值为0.3%。
结论 HPLC同时测定降脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素和大黄素甲醚的含量,快速、简便、准确、专属性高,可以用于降脂灵片的质量控制。
%Objective To develop a simultaneous analysis method for Aurantio-obtusifolin, Aloeemodin,Emodin and Physcion in Jiangzhiliing tablet by HPLC.MethodsDetermination of the Aurantio-obtusifolin,Aloeemodin,Emodin and Physcion in Jiangzhiliing tablet by HPLC, the four constituents were separated on an Kromasil C18 column (250 mm×4.6 mm,5μm)using a mobile phase consisted of methanol -0.1% phosphoric acid in water at the detection wavelength of 286 nm,gradient elution program (0-5min,40∶60-70∶30;5-10 min,70∶30-80∶20;10-15 min,80∶20-90∶10;15-25 min,90∶10 ),the flow rate was 1.0 mL/min,the injection volume 20μL and the column temperature 25 ℃.Results Aurantio-obtusifolin, Aloeemodin,Emodin and Physcion were separated from imputitieswell.Aurantio-obtusifolin showed a good linear relationship in the range of 16.7-134 ng,the average recovery was 98.7%, and its RSD rate 0.3%;the range of Aloeemodin 11.1-89.1 ng,the average recovery 98.5%,and its RSD rate 1.0%;the range of emodin 90.3-722 ng,the average recovery98.5%,and its RSD rate 0.7%;Physcion in range of 59.2-473 ng,the average recovery 102.0%,and its RSD rate 0.3%.Conclusion The method is rapid,simple,accurate and with good reproducibility and can be used in quality control of Jiangzhiling tablet.【总页数】4页(P52-55)【作者】刘敏;贾海红;刘彦;律涛;樊淑彦【作者单位】河北医科大学药学院药物分析学教研室,河北石家庄 050017;河北医科大学药学院药物分析学教研室,河北石家庄 050017;河北医科大学药学院实验中心,河北石家庄 050017;河北医科大学药学院实验中心,河北石家庄050017;河北医科大学药学院药物分析学教研室,河北石家庄 050017【正文语种】中文【中图分类】R972.6【相关文献】1.高效液相色谱法测定降脂灵片中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量 [J], 罗定强;杨瑞瑞;裴小龙2.高效液相色谱法同时测定复方胆通片中5种蒽醌类成分含量 [J], 金贤武;付彩群;黄道明;黄平;周兴卓3.高效液相色谱法同时测定黄氏响声丸中5种蒽醌类成分含量 [J], 吴娟娟;陈广通4.高效液相色谱法同时测定止嗽化痰丸中5种蒽醌类成分含量 [J], 凌勇;肖幼安;陈广通;王新杨5.高效液相色谱法测定决明子不同清炒品中5种蒽醌类成分的含量 [J], 王宾豪;杨荣平;张小梅;龚桥;励娜因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
医药化工化 工 设 计 通 讯Pharmaceutical and ChemicalChemical Engineering Design Communications·191·第44卷第10期2018年10月大黄作为传统药材和出口商品之一,蒽醌类衍生物为其发挥作用主要活性物质,用于测定蒽醌类成分含量的方法有很多,但在操作上存在差异,导致测定结果存在很大的偏差。
1 实验部分1.1 实验仪器与药品实验仪器主要为紫外分光光度计和电子天平;实验药品包括:1,8-二羟基蒽醌、大黄酚、大黄素、光茎大黄。
1.2 显色剂制备用甲醇将醋酸镁溶解,制备显色剂,即醋酸镁甲醇,浓度为0.6%,将其摇晃均匀后备用。
1.3 标准曲线制备用甲醇将1,8-二羟基蒽醌充分溶解,然后定容到25mL ,制备标准液,1,8-二羟基蒽醌的用量为10.7mg 。
分别取20μL 、40μL 、80μL 、160μL 、200μL 、300μL 和400μL 标准液,将其放置到10mL 容量瓶当中,用显色剂将其定容到刻度,摇晃均匀后对其吸收度进行测定,并用一组显色剂作为空白对照。
测定结果为:浓度为0.855mg/mL 时,吸收度为0.033;浓度为1.711mg/mL 时,吸收度为0.070;浓度为3.423mg/mL 时,吸收度为0.145;浓度为6.847mg/mL 时,吸收度为0.292;浓度为8.561mg/mL 时,吸收度为0.370;浓度为12.841mg/mL 时,吸收度为0.561;浓度为17.121mg/mL 时,吸收度为0.700;浓度为25.682mg/mL 时,吸收度为1.100。
1.4 稳定性考察分别取160μL 和300μL 标准液,将其放置到10mL 容量瓶当中,用显色剂将其定容到10mL 。
然后放到室内灯光条件下,对其吸收度进行测定。
2 大黄蒽醌类成分含量测定方法2.1 蒽醌类成分提取与含量测定2.1.1 游离蒽醌借助热氯仿回流进行直接提取,其提取率较高。
HPLC法同时测定大黄-黄连药材中5种蒽醌类成分的含量及最优配伍研究王有森;王智亮【期刊名称】《中国药房》【年(卷),期】2017(028)034【摘要】目的:建立同时测定大黄-黄连药材中5种蒽醌类成分含量的方法,并优选大黄-黄连药材质量比.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾(48:52,V/V,每100 mL 中加十二烷基硫酸钠0.4 g,磷酸调节pH至4.0),流速为1 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃,进样量为10μL.考察大黄-黄连药材质量比为1:1、1:2、2:1、2:3、3:2时配伍药材中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量.结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚进样量分别在0.652~3.081、0.704~3.422、1.280~6.197、0.633~0.324、1.326~5.954μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r≥0.9997),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6),平均加样回收率为98.92%~100.37%(RSD≤2.26%,n=6).大黄-黄连药材质量比为2:1时,5种蒽醌类成分总量最高.结论:本方法精密度、稳定性、重复性良好,可用于不同配伍比大黄-黄连药材的质量检定;大黄-黄连药材的最佳质量比为2:1.%OBJECTIVE:To establish a method for the simultaneous content determination 5 anthraquinones of rhei radix-copti-dis rhizoma,and optimize its best mass ratio. METHODS:HPLC was performed on the column of Zorbax SB-C18 (250 mm × 4.6 mm,5 μm)with mobile phase of acetonitrile-0.05 mol/Lpotassium dihydrogen phosphate(48:52, V/V,adding sodium dodecyl sulfate 0.4 g per 100 mL,pH value was adjusted to 4.0);detection wavelength was 254 nm;flow rate was 1 mL/min;column tem-perature was 25℃;and injection volume was 10μL. When mass ratio of rhei radix-coptidis rhizoma was 1:1,1:2,2:1,2:3,3:2,the contents of aloeemodin,rhein,emodin,chrysophanol and emodin ether were investigated. RESULTS:The aloe emodin, rhein, emodin, chrysophanol and emodin ether showed good linear relationship with peak area in the range of 0.652-3.081, 0.704-3.422,1.280-6.197,0.633-0.324,1.326-5.954 μg(r≥0.9997);RSDs of precision,stability,reproducibility tests were low-er than 2.0%(n=6);and average recovery was 98.92%-100.37%(RSD≤2.26%,n=6). When mass ratio was 2:1,the total contents of 5 ingredients were the highest. CONCLUSIONS:The method has good precision,stability,reproducibility,and can be used for the quality verification of rhei radix-coptidis rhizoma under different compatibilities. The best mass ratio of rhei radix-copti-dis rhizoma is 2:1.【总页数】4页(P4818-4821)【作者】王有森;王智亮【作者单位】潍坊市人民医院药剂科,山东潍坊 261599;潍坊市人民医院药剂科,山东潍坊 261599【正文语种】中文【中图分类】R943.1【相关文献】1.大黄黄连泻心汤不同配伍浸渍剂中蒽醌类成分变化研究 [J], 邹佳丽;谢智勇;姜晓飞;陈欣霞;姚美村2.HPLC法同时测定苍耳类药材中酚酸及蒽醌类成分的含量 [J], 刘娟秀;罗益远;刘训红;宋建平;侯娅;马阳;华愉教;王胜男3.HPLC法同时测定大黄药材中8个非蒽醌类成分的含量 [J], 陆文瑾; 窦志华; 曹瑞; 倪丽丽; 戴莹4.HPLC法同时测定黄连上清片中大黄素、大黄酚的含量的研究 [J], 王小龙;王琳静;邢海英;周东胜5.RP-HPLC法测定栀子大黄汤中多种成分的含量及其在方剂配伍研究中的应用 [J], 尧爱珉;黄金秋;徐大星;黄雪丽;冯芳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
HPLC同时测定大黄利胆胶囊中5种蒽醌类成分的总含量李锐【期刊名称】《食品与药品》【年(卷),期】2017(019)005【摘要】目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定大黄利胆胶囊中5种蒽醌类成分总含量的方法.方法采用phenomenon luna C18色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸(82:18),检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,柱温为30℃.结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别为1.057~67.67mg/L(r=0.9999),1.117~71.49 mg/L(r=0.9999),1.047~67.02mg/L(r=0.9999),1.089~69.71 mg/L(r=0.9999),0.5968~38.20 mg/L(r=0.9996);平均加样回收率(n=6)分别为98.0%(RSD=1.69%),99.2%(RSD=2.19%),99.4%(RSD=1.89%),98.9%(RSD=0.7 6%),97.8%(RSD=1.26%).结论该方法简便,可行、重现性好,可作为大黄利胆胶囊的质量控制方法.【总页数】4页(P350-353)【作者】李锐【作者单位】海南省药品检验所,海南海口 570216【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC法同时测定黄蒲通窍胶囊中3种蒽醌类成分的总含量 [J], 韩燕全;洪燕;谢道俊;高家荣;汪永忠;夏伦祝2.HPLC法测定胆石通胶囊中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的含量 [J], 何素琴;欧阳吉德;肖琳3.HPLC法测定通腑胶囊中大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚及芦荟大黄素的含量 [J], 樊磊磊4.HPLC法测定附黄胶囊中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素大黄酚及大黄素甲醚的含量 [J], 张松涛5.HPLC法测定复方大黄利胆片中大黄素、大黄酚的含量 [J], 刘善新;马毅;钟方晓;靳光乾因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
谱的影响较小,而超声提取法具有操作简单、方便等优点,结果确认为用超声提取法。
提取时间的考察:精密称取同一批复方巴戟天颗粒,采用超声提取法分别提取10min、30min、60min,按以上方法检测,确定最佳提取时间为1h。
色谱柱的选择:分别考察HypersilBDSC18色谱柱(4 6mm×250mm,5μm)、SinoChromODS BP色谱柱(4 6mm×250mm,5μm)、AcclaimC18色谱柱(4 6mm×250mm,5μm)3种规格的色谱柱,以总色谱峰的数量和分离度为指标,筛选出最佳色谱柱为AcclaimC18色谱柱。
检测波长选择:在相同条件下分别在210nm、246nm、160nm、283nm波长的记录色谱图,比较色谱峰数目,色谱峰峰形和峰强度,以及分离效果等情况,选择最佳检测波长为210nm。
参考文献〔1〕孙克民,王和鸣,王平,等 复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠模型血液流变学和血脂的影响〔J〕 中国中医骨伤科杂志,2011,19(5):1 3〔2〕孙克民,王和鸣,胡娟,等 复方巴戟天合剂对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响〔J〕 福建中医药,2010,41(6):43 45〔3〕孙克民,王和鸣,林久茂 复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠血管内皮生长因子表达的影响〔J〕 中国实验方剂学杂志,2011,17(7):117 120〔4〕李文顺孙克民王和鸣,等 复方巴戟天合剂治疗股骨头缺血性坏死的临床研究〔J〕 中国中医骨伤科杂志,2006,14(2):48 50 〔5〕倪立坚,李颖,王和鸣 复方巴戟天健骨颗粒的质量标准研究〔J〕 海峡药学,2017,29(10):47 50HPLC法同时测定利胆片中6个成分的含量周丽清(福建省食品药品质量检验研究院,福建福州350001)摘要:目的 建立HPLC法同时测定利胆片中绿原酸、芒果苷、芍药苷、黄芩苷、木香烃内酯、去氢木香内酯6个成分的含量。
HPLC法同时测定利胆排石片中4种蒽醌类成分的含量探索
摘要目的探讨高效液相色谱法(HPLC)同时对利胆排石片中4种蒽醌类成分含量测定情况。
方法指定具有丰富经验及专业知识的实验室检验人员完成各批次利胆排石片中4种蒽醌类成分含量检测工作,将所得数据经专业分析后获得结论。
结果各批次利胆排石片中大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚等4种蒽醌类成分含量经HPLC测定后对比,差异无统计学意义(P>0.05)。
结论利胆排石片经HPLC可同时对其4种蒽醌类成分含量进行准确测定,有利于提高药品质量控制效果,保障患者疗效及预后。
关键词利胆排石片;高效液相色谱法;蒽醌类;含量测定
利胆排石片是临床常用的胆囊炎、胆结石治疗药物,属于纯中药制剂。
本文将探讨HPLC同时对利胆排石片中4种蒽醌类成分含量测定情况,为提高利胆排石片质量控制效果提供可靠依据,现将结果报告如下。
1 材料与方法
1. 1 试剂及仪器①试剂:广州白云山和记黄埔中药有限公司提供利胆排石片(批号20140521、20140809、20141217)、中国药品生物制品检定所提供4种蒽醌类成分对照品(大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、大黄酚)、超纯水、色谱纯(甲醇);②仪器:美国惠普公司(Hewlett-Packard Development Company,L.P.,简称HP)提供1100型高效液相色谱仪、美国沃特世公司(Waters)提供紫外检测器及Empower色谱工作站、德国赛多利斯集团(sartorius)提供cp 225D 电子天平,大连依利特分析仪器有限公司提供SinoChron ODS-BP色谱柱(规格5 μm,4.6 mm×200 mm)。
1. 2 方法[1] 指定具有丰富经验及专业知识的实验室检验人员完成各批次利胆排石片中4种蒽醌类成分含量检测工作。
具体操作为:①制备对照品溶液:取对照品精密称量后放置于量瓶中(规格10 ml)并加入1 ml三氯甲烷,震荡溶解并稀释定容后即得对照品储备液,取适量稀释并制成对照品混合溶液,其中大黄素甲醚、大黄酚、大黄素、大黄酸浓度分别为81.30、11
2.0、30
3.0、70.70 μg/ml;②制备供试品溶液:精密称定0.15 g利胆排石片(粉末)并加入25 ml 甲醇定量,给予1 h加热回流处理后自然冷却,称重后利用甲醇补足失去重量,摇晃使之混合均匀后过滤,精密称取5 ml滤液并放置于烧瓶中,将溶剂挥发后加入8%、10 ml盐酸溶液(分析纯)并给予2 min超声处理,之后加入10 ml 三氯甲烷并再次给予1 h加热回流,待自然冷却后放置于分液漏斗中,将容器经三氯甲烷洗涤后洗涤液放入同一分液漏斗,将三氯甲烷层分取并对酸液给予3次三氯甲烷提取(10 ml/次),将提取液混合后减压回收,残渣中加入1 ml 三氯甲烷使之溶解并将其置于量瓶中(规格10 ml),甲醇定容并摇匀,取滤液即得供试品溶液;③含量检测:波长调整为254 nm,色谱柱温度设定为试问,进样量10 μl,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(分析纯)(80∶20,流速1.0 ml/min)回归方程分别为大黄素甲醚Y=5.774×104X-
4.083×103(r=0.9996)、大黄酚
Y=8.145×104X-2.212×104(r=0.9997)、大黄素Y=5.698×104X-8.351×103(r=0.9998)、大黄酸Y=3.515×104X-3.809×103 (r=0.9999)。
记录各批次利胆排石片中4种蒽醌类成分含量检测结果,将所得数据经专业分析后获得结论。
1. 3 统计学方法采用SPSS19.0统计学软件处理数据。
计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,采用t检验;计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。
P <0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
各批次利胆排石片中大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚等4种蒽醌类成分含量经高效液相色谱法测定后对比,差异无统计学意义(P>0.05),提示各批次利胆排石片质量控制效果良好。
见表1。
3 讨论
利胆排石片组成成分包括木香、大黄、茵陈、黄芩、金钱草等十味中药,诸药合用可达消积导滞、破气除胀、清热利湿、和胃利胆之功效,临床主要用于治疗因湿热蕴毒、腑气不通引起的胆胀、胁痛等证(如胆石症、胆囊炎等)[2]。
有研究显示,药物质量将直接影响疾病治疗及预后效果。
近年来由于人们自我保护意识逐渐增强,对药物质量关注度也不断提高,如何有效控制药物质量已成为广大医务工作者共同关心的热点问题。
研究表明,以往利胆排石片质量标准主要涉及黄芩含量测定,不利于全面掌握该药物有效成分及获得满意质量控制效果。
HPLC操作简单、方便快捷,将色谱条件设置合理后出峰时间快且峰形较好,是临床常用的药品含量检测方法[3]。
本文中利用HPLC对利胆排石片中4种蒽醌类成分含量实施同时测定可知,其各批次检测结果对比并无显著差异,提示利胆排石片质量控制效果较为理想。
综上所述,利胆排石片经HPLC可同时对其4种蒽醌类成分含量进行准确测定,有利于提高药品质量控制效果,保障患者疗效及预后,值得今后推广。
参考文献
[1] 张秋蓉,王丽芳,刘文燕. HPLC法同时测定胆宁片中5种蒽醌类衍生物含量.中国药物警戒,2012,9(1):3-6.
[2] 徐冬艳,刘斌. HPLC法测定降脂宁调脂抗氧化有效部位中4种蒽醌类成分的含量.北京中医药大学学报,2010(3):203-206.
[3] 肖晶,杨杰,高尚伟. HPLC法测定保健食品中蒽醌类成分的含量. 中国食品卫生杂志,2010,22(1):27-30.。