含铁血黄素染色

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含铁血黄素染色
含铁血黄素是属于一种血红蛋白血源性的色素,由于其颗粒大小不一,形状各异,呈金黄色或黄棕色,并含有铁,因此,称其为含铁血黄素。

在正常情况下,可以在骨髓肝和脾组织中见到少量的色素,如因某些原因而见到大量的色素,则属于病理现象。

当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在细胞内溶酶体酶的作用下,红细胞中的血红蛋白被分解为含铁血黄素和不含铁的橙色血质。

因为一般认为含铁血黄素是由氢氧化铁和铁蛋白所组成的复合物,用Perls法可以将其显示出来。

一、Perls亚铁氰化钾法。

(1)切片脱蜡至水,
(2)去离子水洗或玻璃蒸馏水洗,
(3)浸染切片10-20min,
(4)玻璃蒸馏水洗,
(5)核固红染核10-15min,
(6)流水冲洗10-15min,
(7)脱水,透明,中性树脂封固。

结果:含铁血黄素为蓝色,细胞核红色。

注意事项:
(1)含铁血黄素在酸性的溶液中会被溶解掉,因此,要证实含铁血黄素是否存在,组织固定最好选择中性缓冲福尔马林固定液。

(2)组织内的铁可以分为三价铁盐和二价铁盐,但以三价铁盐为主,Perls法显示的是三价铁离子。

(3)在操作过程中,一切都必须按组织化学的要求来进行。

(4)如需鉴别二价铁,可用改良的腾氏蓝法。

染液的配制:
(1)2%亚铁氰化钾水溶液,
(2)2%盐酸水溶液。

临用前,取(1)、(2)液各一半混合后,即可进行染色,染完后,染液应当抛弃,如要继续
染色必须重新配新液
反应方程式:4Fe3++3K4Fe(CN)6→Fe4[Fe(CN)6]3+12K+即切片中的高价铁与亚铁氰化钾作用后生成亚铁氰化铁,(普鲁士蓝反应)
临床应用:
当切片出现了黄棕色的色素时,为了鉴别其属于何种色素。

可用显示含铁血黄素的方法,当遇到下述情况时,如长期的肺淤血和出血,陈旧的出血灶,肝硬化时慢性脾郁血。

硬化性血管瘤,动脉瘤性骨囊肿等,更应当首选显示含铁血黄素的方法,来进行确定,以利于对疾病的诊断。

注意事项:
1 . Perls溶液一定要现配,不能久用;
2 . 使用分析纯级试剂,因粗制的试剂中含有铁质;
3 . 器皿应洁净,切片洗涤应用蒸馏水,以防止出现假阳性结果。