HPLC法测定清开灵胶囊中栀子苷的含量

·药品质量及检验·UPLC快速测定清开灵注射液中栀子苷的含量汤丹1周小琴2李锦坤2梁洁雯2（1.广东药科大学中药学院广州510006；2.广州白云山明兴制药有限公司广州510250）摘要：目的：建立UPLC快速测定清开灵注射液中栀子苷含量的方法。

方法：采用Waters ACQUITY UPLC R BEH Shield RP18色谱柱（2.1mm×100mm，1.7μm），乙腈-水（10∶90）溶液为流动相，检测波长238nm。

结果：栀子苷在6.112~152.80μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9999），仪器精密度、稳定性、重复性试验中RSD均小于3%，平均加样回收率为100.29%，RSD均小于2%。

结论：该方法简便、快速、准确、重复性好，可为高效检测清开灵注射液中栀子苷含量提供依据。

关键词：清开灵注射液栀子苷UPLC快速分析中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号：1672-8351（2019）02-0001-02Rapid Determination of Geniposide in Qingkailing Injection By Ultra Performance Liquid ChromatographyTang Dan1Zhou Xiaoqin2Li Jinkun2Liang Jiewen2（1.School of Traditional Chinese Medicine,Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou510006,China；2.Guangzhou BaiyunShanMingXing Pharmaceutical Co.,Ltd.,Guangzhou510250,China）Abstract：Objective：To establish a rapid method for simultaneous determination of geniposide and crocin-1in Gardeniae Fructus. Methods：Waters ACQUITY UPLC R BEH Shield RP18（2.1mm×100mm，1.7μm）was used with the acetonitrile water（10:90）solution as the mobile phase.Detection wavelength was238nm.Results：The calibration curves of geniposide was in good linearity among the ranges of6.112~152.80μg/mL.For the precision test,stability test,repeatability test,the RSD was less than3%.The average recoveries were 100.29%,and all the RSD were less than2%.Conclusion：The developed method is simple,rapid,accurate and can be used for the detection of Geniposide in Qingkailing injection.Key words:Qingkailing injection Geniposide UPLC Rapid quantitative analysis清开灵注射液由胆酸、猪去氧胆酸、水牛角（粉）、黄芩苷、珍珠母、栀子、板蓝根、金银花组成[1]，中国药典一部采用高效液相色谱法（HPLC）测定栀子苷等指标成分的含量，生产企业产品批次较多，为节省企业检验时间，本文以栀子苷为例探索超高效液相色谱法（UPLC）测定指标成分含量，为制定高效可行的内控标准提供依据。

ＨＰＬＣ法测定不同产地栀子中栀子苷含量摘要:目的:测定不同产地栀子中栀子苷的含量。

方法:采用外标法,大连依利特ODS(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(15∶85),流速为1.0mL/min,柱温25℃,检测波长为238nm。

结果:测得7产地的10批栀子中栀子苷含量最高为7.06%,最低为2.89%。

结论:不同产地栀子中栀子苷含量由于土壤等各种因素的影响,差异较为明显。

关键词:栀子;栀子苷;高效液相色谱法栀子为茜草科植物栀子(Gardenia jasminoides Ellis)的干燥成熟果实,为临床常用中药,其性寒味苦,无毒,入心、肝、肺、三焦经,具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒之功效。

栀子药理研究表明其具有抗炎、镇静、镇痛、保肝利胆、抗凝血等作用[1],环烯醚萜类化合物和二萜色素类化合物是栀子的主要成分,也是其主要生物活性物质。

栀子苷是栀子的主要活性成分,具有抗炎、解热、利胆等作用;水提取物有利胆、降压、抗菌消炎作用;醇提取物有解热、镇静作用。

本文建立了HPLC测定栀子中栀子苷含量的方法[2],对7产地的10批栀子中栀子苷含量进行了测定,为中药栀子的质量评价提供科学依据。

1 仪器与试药美国Agillent 1100高效液相色谱仪,二级阵列检测器,1100色谱工作站。

栀子苷(Geniposide)对照品(批号110749-200309)购自中国药品生物制品检定所。

乙腈和甲醇均为色谱纯,水为纯化水。

药材及中试饮片样品购自不同产地,其中江西泰和、江西秀谷、浙江淳安各2批,江西永丰、湖南浏阳、浙江苍南、福建贯岭各1批。

经广东食品药品职业学院中药标本馆鉴定为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。

2 方法与结果2.1 色谱条件大连依利特ODS(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱。

流动相:乙腈-水(15∶85),流速为1.0mL/min,柱温25℃,检测波长为238nm,进样量10μL。

高效液相色谱法测定栀子药材中栀子苷的含量实验目的和要求1.掌握高效液相色谱法的基本原理及操作步骤；2.熟悉高效液相色谱法在中草药有效成分测定中的应用。

实验原理高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱，在柱内各组分被分离后,依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。

所用的仪器为高效液相色谱仪。

色谱柱的填充剂和流动相的组分应按待测组分的性质而定，常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶，后者以十八烷基键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用。

除另有规定外，柱温为室温，检测器有紫外检测器，二极管阵列检测器，示差折光检测器等。

影响色谱分离效率有两大主要因素，其一为热力学因素, 如不同组分容量因子(K’)，其二是动力学因素, 如色谱峰的展宽。

反映这些物理过程的指标是保留时间和理论塔板数(N)。

其中K’=t R-t o / t o ；n = 5.54(t R / W1/2)2密切注视和努力解决这两个因素引起的矛盾，组分间的分离就成功了，分离的表现指标是分离度“R”。

R = 2 (t2 - t1) / (W b1+W b2)实验条件1.仪器：高效液相色谱仪，超声波清洗器，Zorbax C18柱（4.6×250mm）。

2.试剂：栀子苷对照品，乙睛，甲醇，水。

实验内容1.色谱条件：色谱柱：Zorbax C18柱（4.6×250mm）；流动相：乙睛—水（15:85）；检测波长：238nm，流速：1mL/min。

2.对照品溶液的制备和标准曲线的绘制：精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，摇匀后，分别取该液1，2，3，4，5mL，置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀后，分别进样20μl，按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数。

HPLC法测定江西栀子中栀子苷含量研究廖夫生;侯永春【摘要】用HPLC法测定了江西栀子中栀子苷的含量。

色谱柱：Kromasil C18柱（250 mm×416 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（15∶85）流速：1.0 mL.min-1;检测波线性长：238 nm;柱温：30℃。

结果：栀子苷进样浓度在6.4～32.0μg.mL-1范围内线性关系良好,线性方程为Y=29.802X＋3.75（r=0.9996）,平均回收率为为98.3%。

江西不同产地的栀子中栀子苷含量范围在2.9%～3.8%,高于2010版药典规定。

%The determination of jasminoidin in Gardenia jasminoides Ellis from Jiangxi was studied by HPLC.The conditions were Kromasil C18 analyticalcolumn（250 mm×416 mm,5 μm）,mobile phase consisted of acetonitrile-water（15：85）at a flow rate of 1.0 mL·min,detection wavelength was 238 nm and the column temperature was 30 ℃.The method had good liear relationship in the ranges of 6.4～32.0 μg·mL-1 for jasminoidin（r=0.9996）.The average recoveries were 98.3%.The assay of jasminoidin in Gardenia jasminoides Ellis from Jiangxi were 2.9%～3.8%.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2011(039)022【总页数】3页(P68-69,72)【关键词】高效液相色谱;栀子苷【作者】廖夫生;侯永春【作者单位】江西中医学院药学院,江西南昌330006;江西中医学院药学院,江西南昌330006【正文语种】中文【中图分类】O151.21栀子(Garadenia jasminoides)见于《神农本经》，是茜草科的一种常绿灌木，主产于热带和亚热带地区，我国注意分布在江西、浙江、湖南等地。

高效液相色谱法测定栀子药材中栀子苷的含量实验目的和要求1.掌握高效液相色谱法的基本原理及操作步骤；2.熟悉高效液相色谱法在中草药有效成分测定中的应用。

实验原理高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱，在柱内各组分被分离后,依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。

所用的仪器为高效液相色谱仪。

色谱柱的填充剂和流动相的组分应按待测组分的性质而定，常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶，后者以十八烷基键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用。

除另有规定外，柱温为室温，检测器有紫外检测器，二极管阵列检测器，示差折光检测器等。

影响色谱分离效率有两大主要因素，其一为热力学因素, 如不同组分容量因子(K’)，其二是动力学因素, 如色谱峰的展宽。

反映这些物理过程的指标是保留时间和理论塔板数(N)。

其中K’=t R-t o / t o ；n = 5.54(t R / W1/2)2密切注视和努力解决这两个因素引起的矛盾，组分间的分离就成功了，分离的表现指标是分离度“R”。

R = 2 (t2 - t1) / (W b1+W b2)实验条件1.仪器：高效液相色谱仪，超声波清洗器，Zorbax C18柱（4.6×250mm）。

2.试剂：栀子苷对照品，乙睛，甲醇，水。

实验内容1.色谱条件：色谱柱：Zorbax C18柱（4.6×250mm）；流动相：乙睛—水（15:85）；检测波长：238nm，流速：1mL/min。

2.对照品溶液的制备和标准曲线的绘制：精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，摇匀后，分别取该液1，2，3，4，5mL，置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀后，分别进样20μl，按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数。