钾测定试剂盒(丙酮酸激酶法)产品技术要求meigaoyi

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC3310规格：50T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体45mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂35mL×1瓶，-20℃避光保存；临用前加入35mL试剂一溶解。

可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融。

试剂三：液体45μL×1支，4℃避光保存；临用前加入蒸馏水按体积比1：120稀释，现用现配；试剂四：液体155μL×1支，4℃避光保存；临用前加入蒸馏水按体积比7：250稀释，现用现配；试剂五：粉剂×1瓶，-20℃避光保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解；可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融。

产品说明：PEPCK（EC 4.1.1.32）广泛存在于动物、开花植物、藻类、部分真菌和细菌中。

该酶催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的第一限速酶。

，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性。

试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

钾测定试剂盒（丙酮酸激酶法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中钾的含量。

1.1 规格具体产品规格见下表:1.2 组成成分试剂1：Tris-HCl缓冲液 100mmol/L pH=8.2 穴合剂 12mmol/LPEP 3mmol/LADP 4mmol/La-酮戊二酸 1.2mmol/LNADH 0.35mmol/LGLDH 1500U/LPK 1200U/L试剂2：LDH 6500U/L2.1 外观2.1.1 外包装完整无破损；2.1.2 试剂1：无色澄清透明液体；2.1.3 试剂2：无色澄清透明液体。

2.2 净含量净含量不低于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在波长340nm、37℃条件下，试剂空白吸光度不小于1.0。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率在波长340nm、37℃条件下，试剂空白吸光度变化率不大于0.200。

2.4 线性2.4.1 线性范围[2.50，7.00]mmol/L，相关系数r≥0.9900。

2.4.2 线性偏差[2.50，7.00]mmol/L线性范围内，相对偏差不超过±10%。

2.5 分析灵敏度检测浓度为5.70mmol/L的样本时，吸光度变化率不小于0.05。

2.6 重复性测试高、低浓度质控品（分为正常范围和病理范围），重复测试10次，CV≤5%。

2.7 批间差用三个不同批号的试剂测试同一样本，重复测试3次，相对极差 R≤10%。

2.8 准确度测定360018标准物质水平2，测定结果应不超过标示值的±15%。

2.9 稳定性原包装试剂2～8℃避光储存，有效期12个月。

效期后1个月内产品应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6和2.8的要求。

酶标仪干试剂法测定钾离子的探讨目前临床上对血清钾测定的主要方法是离子选择电极法和酶法。

酶标仪ＩＳＥ法测定钾离子的影响因素很多，或多或少影响钾离子的测定结果。

近年报道的酶法测定钾离子，评价甚好。

手工比色测定操作繁琐，效率较低。

为此，现对蛋白水解酶法进行试剂配方的改良，采用酶标板比浊法测定钾离子，并对该方法进行初步评价，报道如下。

资料与方法１．仪器与器材ＭＲ－全自动酶标仪，吸光度测定范围为０．０００～２．５００。

全自动生化分析仪ＶＩＴＲＯ２５０及其钾试剂干片（美国强生公司）。

２．试剂测定试剂盒进行配制。

试剂Ｒ１与试剂Ｒ２为公司提供，测定比例为１０．０ｍＬＲ１中加入２．０ｍＬＲ２。

同时在Ｒ１、Ｒ２试剂组合中加入赋形剂（如甘露醇、聚乙二醇、木糖醇等）组成改良试剂，测定试剂为１０．０ｍＬＲ１、２．０ｍＬＲ２、赋形剂。

３．方法１）酶标板的预处理：将首次使用的酶标板用浓盐酸浸泡过夜，去离子水冲洗后再用超声清洗，最后用去离子水反复漂洗，干燥备用。

２）干试剂酶标板的制备：酶标板每孔加入３００μＬ测定试剂，置于低温冰箱过夜，将预冻好的试剂放入冻干机中抽干。

将干燥好试剂的酶标板用塑胶密封。

３）标准品制备：通过全自动生化分析仪ＶＩＴＲＯ２５０进行检测，自行配置的钾离子标准液浓度分别为２．４、３．２、４．４、５．１、６．２、８．４ｍｍｏｌ／Ｌ，并绘制标准曲线。

４）检测方法：用可调定量加液器加入２．０ｍＬ去离子水于试管内。

血清按常规电解质采集离心后得到，用微量定量加样器吸取被测血清１００μＬ加入上述试管中，混匀静置３ｍｉｎ。

取干燥好试剂的酶标板一块，从上述溶液中吸取试剂３００μＬ到板孔内。

设置空白孔和标准孔，空白孔加入３００μＬ空白试剂，标准孔加入３００μＬ不同浓度的标准品。

振荡混匀，将酶标板放入全自动酶标仪中，用６３０ｎｍ检测，打印检测报告。

５）重复试验：分别对２．６、３．２、３．７、４．６、４．７、５．９ｍｍｏｌ／Ｌ６种浓度的钾离子标本进行批内检测（每批测定６次）。

钾测定试剂盒（四苯硼钠法）
适用范围：本试剂盒用于定量检测人体血清样本中钾离子的含量。

1.1 产品型号：SA-5000
试剂1：15ml×1；试剂2：45ml×1。

试剂1：50ml×1；试剂2：160ml×1。

2.1 外观：均为澄清溶液，外包装完整。

2.2 净含量：不少于标示值。

2.3 试剂1pH：8.00±0.10。

2.4 分析灵敏度：浓度为2mmol/L时,吸光度变化△A≥0.15ABS。

2.5 线性区间
2.5.1线性相关系数：[1，8]mmol/L范围内，线性相关系数r≥ 0.990。

2.5.2线性偏差：[1，4] mmol/L时，绝对偏差不超过±0.4mmol/L；（4, 8] mmol/L时，相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度
2.6.1重复性：变异系数（CV）≤10%。

2.6.2批间差：相对极差≤10%。

2.7 准确度：测定国家标准物质，相对偏差不超过±10%。

2.8 稳定性：试剂盒在2℃～25℃贮存，有效期为12个月。

保存至有效期末进行测定，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

丙酮酸激酶（PK ）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0545规格：100T/96S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体20 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶-20℃保存试剂三液体20μL ×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前在试剂二瓶中加入17mL 试剂一和1mL 蒸馏水充分溶解，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴5分钟，现配现用；2、试剂三：液体置于试剂瓶内EP 管中。

临用前根据用量按照试剂三:蒸馏水为17:1000的体积比例充分混匀，冰上放置备用，现用现配。

产品说明：PK （EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP 的关键酶之一，因此测定PK 活性具有重要意义。

PK 催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP 生成ATP 和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH 和丙酮酸生成乳酸和NAD +，在340nm 下测定NADH 下降速率，即可反映PK 活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV 板）、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）提取液体积（mL ）为500-1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或者200W ，超声3s ，间隔10s ，重复30次）；8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。

医疗器械产品技术要求编号：
钾（K）测定试剂盒（酶法）
2.性能指标
2.1试剂盒性能指标
2.1.1外观
试剂盒各组分应齐全、完整、无液体渗漏；液体试剂应为澄清透明、无絮状物、无肉眼可见颗粒及沉淀的液体；包装标签应清晰，准确、牢固。

2.1.2装量
液体试剂的装量应不小于标示量。

2.1.3试剂空白
2.1.
3.1试剂空白吸光度
试剂2（R2）加入后在温度37℃、波长340nm条件下立即测定，试剂空白吸光度应≥1.0000（比色杯光径1.0cm）。

2.1.
3.2试剂空白吸光度变化率
试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.200/min（比色杯光径1.0cm）2.1.4线性区间
在2.5mmol/L～7.0mmol/L区间内，相关系数r应≥0.9900。

2.1.5准确度
以国家标准品(360018)为检测样本，测定结果与标示值的相对偏差应在±8%范围内。

2.1.6分析灵敏度
测定钾离子浓度为6mmol/L的样品时，其吸光度变化率（△A/min）应≥0.05。

2.1.7精密度
2.1.7.1批内精密度
批内CV%应≤5%。

2.1.7.2批间精密度
相对偏差（R）应≤10%。

2.2校准品性能指标
2.2.1性状
校准品应为无色液体。

2.2.2装量
校准品装量应不少于标示值。

2.2.3正确度
使用校准物校准后测量国家标准品(360018)，量值传递的正确度应符合｜En｜≤1。

2.2.4均匀性
a）瓶内均匀性：CV≤10%；
b）瓶间均匀性：CV≤10%。

钾测定试剂盒(丙酮酸激酶法)适用范围：该产品用于体外定量测定人血清中钾离子（K）浓度的体外定量测定。

1.1规格规格1（试剂1：15mL；试剂2：5mL)；规格2（试剂1：30mL；试剂2：10mL)；规格3（试剂1：60mL；试剂2：20mL）；规格4（试剂1：60mL×2；试剂2：20mL×2)；规格5（试剂1：60mL×3；试剂2：20mL×3) 。

1.2组成试剂盒组成见表1表1 钾测定试剂盒组成2.1外观试剂盒外观应整洁，液体无漏液，文字符号标识清晰；试剂1和试剂2为无色透明液体，无沉淀和絮状物。

2.2装量每瓶不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在A340nm处测定试剂空白吸光度A≥1.0。

空白吸光度变化率（△A/min）≤0.2。

2.4分析灵敏度测定4 mmol/L样品，吸光度变化率(△A/min)≥0.01。

2.5线性范围2.5.1在[2.5, 7] mmol/L内，相关系数R≥0.990。

2.6 重复性重复测试（4±0.8）mmol/L和（6.3±1.4）mmol/L的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5.0%。

2.7批间差测定（4±0.8）mmol/L和（6.3±1.4）mmol/L的样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。

2.8准确度测定国家标准物质相对偏差不超过±15%。

2.9效期稳定性试剂（所有组份）有效期为12个月到效期后一个月内进行检测，测定结果应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8项要求。

丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC1070规格:50T/48S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体36mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1支，﹣20℃保存。

试剂四：粉剂×1支，﹣20℃保存。

混合试剂：临用前配制，将试剂三和试剂四用适量试剂二溶解后再全部转移到试剂二中备用。

试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存。

产品说明：PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。

PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340nm有吸收峰，而NAD+没有；通过测定340nm光吸收下降速率，来计算PDC 活性。

试验中所需的仪器和试剂：台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：1、细胞或微生物样品的制备：先收集细胞或微生物样品到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。

10000rpm，4℃离心20min，取上清，置冰上待测。

2、组织样品：称取约0.1g组织，加入1mL提取液，冰上充分研磨。

16000g4℃离心20min，取上清，置冰上待测。

3、血清（浆）样品：直接检测。

二、测定步骤：1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2、试剂一37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴提前预热30min。

3、操作表：试剂名称（μL）测定管空白管试剂一700700试剂五100100混合试剂100100样本100-蒸馏水-100迅速混匀后于340nm比色，记录10s和70s的吸光值，测定管的记为A1和A2，空白管的记为A3和A4，计算ΔA=（A1-A2）-（A3-A4）。

丙酮酸测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中丙酮酸（PYR）的含量，临床主要用于糖尿病引起的酮症酸中毒的辅助诊断。

1.1包装规格包装规格见表1表1 包装规格1.2主要组成成分主要组成成分见表2。

表2 主要组成成分注：不同批号的校准品、质控品赋值有差异，具体赋值详见靶值单。

2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。

2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。

2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≥0.5000。

2.4 准确度回收试验：在临床样本中加入一定体积的校准品溶液，进行测定，回收率在90%～110%之间。

2.5 分析灵敏度样品浓度为200 µmol/L时，其吸光度变化在0.0400～0.1200之间。

2.6 线性区间在[30，1000]µmol/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[30，150]µmol/L区间内绝对偏差应不超过±15µm ol/L，在(150，1000]µmol/L区间内相对偏差应不超过±10%。

2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。

2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。

2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。

在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。

2.9 校准品溯源性按GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供所有产品校准的来源、赋值过程以及测量不确定度，试剂盒校准品溯源至Sigma公司。

血清钾离子的丙酮酸激酶法测定概述1. 本文旨在探讨血清钾离子的丙酮酸激酶法测定方法及其临床应用意义。

高钾血症是一种常见的临床情况，及时准确地测定血清钾离子水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。

而丙酮酸激酶法是目前用于测定血清钾离子的一种常见方法。

测定原理2. 丙酮酸激酶法是一种酶动力学测定法，其基本原理是利用丙酮酸激酶催化反应将丙酮酸和辅酶A反应生成乙醛和丙酮酸，同时转移ADP 磷酸根生成ATP。

而在此反应过程中，ADP的浓度与生成的乙醛分子数量成正比，因此可以通过检测ADP的浓度来间接测定血清钾离子的水平。

实验操作3. 取血清标本并离心制备样品；加入适量的丙酮酸激酶、辅酶A、ATP和谷氨酸钾盐，混合后在37摄氏度恒温下进行反应；通过添加一种特定的酶来将生成的乙醛转化成乙酸，然后测定反应前后ADP的浓度变化，从而得出血清钾离子的水平。

临床应用4. 丙酮酸激酶法测定血清钾离子水平在临床应用中具有重要意义。

血清钾离子水平的异常变化可以反映出机体内部的一些疾病情况，比如肾脏疾病、糖尿病、心脏病等。

血清钾离子水平的测定可以指导临床药物治疗，及时调整药物剂量，避免药物不良反应的发生。

丙酮酸激酶法测定血清钾离子水平在临床中具有非常重要的意义。

优缺点5. 丙酮酸激酶法作为一种常用的血清钾离子测定方法，具有诸多优点。

此法操作简便，结果准确可靠，且不受血清中其它物质影响；此法对常见的医用药物没有干扰作用，具有很高的特异性。

然而，此法也存在一些缺点，比如对实验条件要求较高，需要较为精确的实验操作和配制试剂，且操作流程较为繁琐。

总结6. 丙酮酸激酶法测定血清钾离子的水平是一种简单、可靠的方法，具有重要的临床意义。

在临床诊断和治疗中，准确测定血清钾离子水平对于指导治疗具有重要的意义。

然而，我们也需要进一步了解此方法的优缺点，并在实际操作中严格按照操作步骤进行，以保证测定结果的准确性和可靠性。

希望本文对读者了解血清钾离子的丙酮酸激酶法测定方法有所帮助。