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文章编号：１６７３ ２９９５（２０２１）０１ ００５１ ０３·综 述·黑蒜保肝作用的研究进展王丽丽１，２，杨 柳３，李善姬１ （１．吉林医药学院公共卫生学院，吉林吉林 １３２０１３；２．延边大学医学院，吉林延吉 １３３００２；３．中国人民解放军９５９０５部队，辽宁锦州 １２１０１８）摘 要：黑蒜是生大蒜在一定温度和湿度下发酵制得的，其营养成分及含量发生变化。
黑蒜中多酚和黄酮类含量提高，蛋白质、还原糖和氨基酸含量是大蒜的２倍，微量元素和Ｂ族维生素含量也显著增多。
本文综述了黑蒜通过抗炎、抗氧化、降血脂和保护肝细胞等功效起到保护肝脏的作用，为黑蒜的开发提供参考。
关 键 词：黑蒜；保肝作用中图分类号：Ｒ２８４ 文献标志码：Ａ 大蒜作为烹饪和传统药物对人体健康十分有益，包括抗氧化、抗炎、抗癌、抗菌、降低血压、调节血脂等［１］。
然而，在咀嚼或压碎时大蒜中的大蒜素会降解为有刺激性气味的硫化物［２］，使得多数人不易接受，而发酵黑蒜解决了这一问题。
黑蒜是由新鲜大蒜在一定温度和湿度条件下发酵一段时间得到的新兴产品。
通过非酶褐变反应，蒜瓣变黑，形似果脯，软糯甜香，同时产生了新的化学物质。
大蒜素转变为水溶性化合物，有效去除了刺激性气味［３］。
研究表明，黑蒜提取物具有抗氧化、抗炎、抗过敏、抗糖尿病、降低胆固醇和血脂、抗癌等作用［６］。
可以通过抗炎和抗氧化、降低血脂以保护肝脏细胞，起到保护肝脏和修复肝脏损伤的作用。
１ 降血脂作用随着生活水平的提高，高脂血症发病率逐年上升，发病年龄显著下降，极易诱发心血管疾病、肝脏疾病和和各类并发症，严重影响人类生活质量［７］。
另外已有研究提出高脂血症患者的肝脏功能降低，脂蛋白代谢异常，不利于晚期慢性肾病的治疗和恢复［８］，且高脂血症可影响骨髓间充质干细胞的归巢效率，抑制骨再生［９］。
高脂血症人群血清或血浆中的总胆固醇（ｓｅｒｕｍｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＴＣ）和／或甘油三酯（ｔｒｉ ｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＴＧ）超过正常上限，低密度脂蛋白（ｌｏｗｄｅｎ ｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＬＤＬ Ｃ）水平升高，同时高密度脂蛋白（ｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＨＤＬ Ｃ）水平下降［７］。
Modern Practical Medicine,July2012,Vol.24,No.7・740・扶正消瘤汤抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导凋亡的实验研究刘帆【摘要】目的探讨扶正消瘤汤对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导凋亡的作用。
方法MTT法测定扶正消瘤汤对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖的影响；Elisa法测定肿瘤坏死因子（TNF-g/ml、50生成均有明显的促进作用，对SMMC-7721细胞凋亡具有明显的促进作用，并随浓度和时间（24～72h）的增加凋亡率增加，活细胞减少；扶正消瘤汤高剂量组对SMMC-7721细胞bax表达有明显上调作用，浓度越大上调越明显。
扶正消瘤汤高、低剂量组对SMMC-7721细胞bcl-2表达有明显下调作用，其中高剂量组与模型组差异有统计学意义（生成有关，并且与抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、调控bax、bcl-2表达有关。
【关键词】扶正消瘤汤；细胞凋亡；肿瘤坏死因子；bax；bcl-2doi:10.3969/j.issn.1671-0800.2012.07.009【中图分类号】R285.5；R735.7【文献标志码】A【文章编号】1671-0800(2012)07-0740-03Experimental research of Fuzheng xiaoliu decoction on inhibiting proliferation and inducting apoptosis of humanhepatoma SMMC-7721cells【Abstract】Objective To investigate the effect of Fuzheng xiaoliu decoction on inhibiting proliferation and inductingapoptosis of human hepatoma SMMC-7721cells.Methods The influence of Fuzheng xiaoliu decoction on the pro-liferation of human hepatoma SMMC-7721cells was determined by MTT assay.TNF-g/ml and50(TNF-现代实用医学2012年7月第24卷第7期・741・1.1细胞人肝癌细胞SMMC-7721购自北京协和医学院细胞资源中心。
姜黄素对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用薛妍;夏天;赵建斌;吴少华;张仲海;王宗仁【期刊名称】《第四军医大学学报》【年(卷),期】2000(021)005【摘要】目的研究姜黄素对人肝癌细胞SMMC-7721生长的影响. 方法应用MTT 方法、流式细胞术及透射电镜超微结构观察来分析姜黄素对SMMC-7721细胞生长的作用及细胞周期和形态学改变. 结果姜黄素明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721细胞的生长,半数生长抑制剂量(IC50)为5.4 mg.L-1. 流式细胞术证实,姜黄素能将肿瘤细胞聚集在S期. 透射电镜超微结构观察发现姜黄素可使肿瘤细胞超微结构改变. 结论姜黄素通过改变SMMC-7721细胞的周期分布和超微结构来抑制其生长.【总页数】3页(P84-86)【作者】薛妍;夏天;赵建斌;吴少华;张仲海;王宗仁【作者单位】第四军医大学西京医院中医科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院中医科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院中医科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院中医科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院中医科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院中医科,陕西,西安,710033【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.姜黄素对SMMC-7721人肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响 [J], 赵毅辉;李德俊;王顺金2.α-干扰素和COX-2抑制剂对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的抑制作用研究 [J], 邱晓昕;洪源;周琨妍;盛新仪;唐波;王小红;朱海珍;刘景诗;左朝晖3.姜黄素通过MAPK信号通路诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡 [J], 李会宣;杨虹;张红兵;高健4.核桃楸皮提取物对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用及对细胞周期的影响 [J], 梁启超;刘爽;张朝立5.姜黄素通过内质网应激信号通路诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用及对细胞活性影响分析 [J], 李岩岩;陆淼炯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大蒜素的抗肿瘤作用及其机制研究进展蒋淑婉;李云【摘要】Garlicin is a sulfur compound, which is biotransformed fromalliin( relatively stable )-the precursor of garlicin-when catalyzed by allinase. The pharmacological effects of garlicin include anti-inflammatory, anti-hyperlipidemia, reducing blood pressure, improving the body resistance and preventing from the occurrence of cancer, and the anti-tumor effect. Garlicin can achieve anti-tumor effect through many ways, and here is to make a a review on the research progress of garlicin anti-tumor mechanisms.%大蒜素是多种含硫化合物的复合体,蒜氨酸是大蒜素的前体物质,且其性质较稳定,大蒜素是由蒜氨酸被大蒜里的蒜酶催化产生.大蒜素具有杀菌消炎、降血脂、降血压和提高机体抵抗力等多种药理作用,不仅可以预防癌症的发生,还具有抗肿瘤的作用.大蒜素可以通过多种途径达到抗肿瘤的作用,该文对大蒜素的抗肿瘤机制研究进展予以综述.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2013(019)008【总页数】3页(P1420-1422)【关键词】大蒜素;肿瘤;机制【作者】蒋淑婉;李云【作者单位】哈尔滨医科大学基础学院病理学教研室,哈尔滨,150081【正文语种】中文【中图分类】R979.1大蒜素是大蒜中存在的一种含硫化合物的特有成分，大蒜素是多种含硫化合物的复合体。
肝癌的晚期治疗肝癌的主要治疗手段有：手术切除、手术经血管的治疗和经手术的局部治疗、介入治疗、放射治疗、化学药物治疗、中医药治疗等。
中医药治疗是中晚期病人的主要治疗方法，对这些病人提高生活质量、延长生存时间是治疗的主要目标。
肝癌的治疗原则：肝癌的治疗目的有三，即根治、延长生存期与减轻痛苦。
为达此目的治疗原则有三，即早期治疗、综合治疗与积极治疗。
(1)早期治疗早期有效地治疗是肝癌治疗提高疗效最主要的方面。
有两个时期临床上颇为主要。
一是癌结节增大到直径5CM最好是3CM以前。
因小肝癌与大肝癌相比单个结节较多，有包膜者较多。
从生物学的角度，肝癌的生物学特性侵袭性也较好;二是门静脉主干癌栓出现前。
在门静脉癌栓出现前经手术切除后常有根治希望;而在门静脉癌栓出现后，同样手术切除获得根治的可能性极微，大多只能延长生存期。
(2)综合治疗原发性肝癌属多因素多阶段发展的癌症。
故理论上没有特效的药物或特效的治疗方法，因此综合治疗乃必由之路。
他包括不同的方法的联合与序贯应用及同一治疗方法的不同治疗剂的联合与序贯应用。
近年各种肿瘤局部治疗的兴起，为创造各种不同的综合治疗模式提供了条件。
在各种综合治疗模式中含有序贯手术切除的综合治疗具有特殊的重要性。
因为这种模式有可能导致肝癌的根治。
(3)积极治疗积极治疗具有两重含义，一乃积极的治疗态度、二乃反复多次的治疗。
以手术为例包括复发肿瘤切除以及不能切除肝癌的缩小后切除;以放射治疗为例，一次治疗多难获得好的疗效而反复多次则可能获得较好的效果小肝癌肿瘤内乙醇注射也一样一次注射难以彻底，多次则有治愈可能。
治疗方法的及其选择肝癌的治疗方法有：(1)外科手术治疗：包括小肝癌切除，大肝癌切除，对复发时再切除。
对不可能切除肝癌的缩小后切除以及肝移植。
(2)局部治疗:包括：经导管肝动脉内化疗栓塞(TACE)经皮乙醇瘤内注射(PEI)肝癌冰冻、微波、射频等。
由于肝癌早期发现早期治疗的进步，使肝癌局部治疗在肝癌治疗的地位与进一步上升的趋势。
上皮间质转化在原发性肝癌侵袭、转移中的作用胡彦建;韩明子;胡彦华【摘要】上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞在特定的情况下向间质细胞转分化的现象.在原发性肝细胞癌的侵袭、转移中存在这一现象.因此,本文除介绍EMT及其诱导调控因素之外,还对它在原发性肝癌侵袭、转移中的作用进行综述.【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2014(023)001【总页数】4页(P117-120)【关键词】原发性肝细胞癌;上皮间质转化;侵袭;转移【作者】胡彦建;韩明子;胡彦华【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科,黑龙江,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科,黑龙江,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学附属第二医院普外科,黑龙江,哈尔滨,150086【正文语种】中文【中图分类】R735.7原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是全球常见恶性肿瘤之一，全球每年的肝癌新发病例数为74.8万，死亡例数为69.6 万[1-2]，在所有癌症导致的死亡中肝癌居于第3位[3]。
HCC症状不明显，早期诊断率较低，5年生存率＜5%，确诊时多数已发展为中晚期，发生远处扩散转移[4]。
因此，研究HCC侵袭转移的发生机制，对改善肝癌患者预后、延长患者生存期，具有重要的意义。
近来，已有相当多的证据表明，上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是肝癌侵袭、转移的关键[5]，其在肝癌的侵袭、转移过程中发挥着极其重要的作用。
1 EMT及其诱导调控因素简述1.1 EMT简述 EMT是指上皮细胞在特定的生理和病理情况下向间质细胞转化的现象，在此过程中上皮细胞失去细胞极性、丢失细胞间紧密连接和黏附连接，获得了浸润性和游走迁移能力，变成了具有间质细胞功能和特性的细胞。
大蒜素诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的形态观察作者：刘英芹,姚海涛,王秀岩,张晓波,孙广臣来源：《中外医学研究》2011年第23期【摘要】目的观察大蒜素对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制和诱导凋亡的作用。
方法用形态观察、MTT和TUNEL检测等方法检测大蒜素对SMMC-7721细胞的生长抑制和诱导凋亡情况。
结果大蒜素作用后SMMC-7721呈现出了明显的凋亡形态，凋亡小体集中出现后又迅速消失。
凋亡指数由上升至【关键词】大蒜素；细胞凋亡；肝癌大蒜(allium sativum)为百合科多年生草本植物大蒜的鳞茎，大蒜素(allicin)是从大蒜中提取的挥发性油状物，是二烯丙基三硫化物、二烯丙基二硫化物以及甲基烯丙基二硫化物等的混合物。
中医药学认为大蒜有行滞气，暖脾胃，解毒杀虫之功效。
近来研究表明，大蒜还具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤和提高免疫功能等多方面的作用。
流行病学调查显示，大蒜产区和长期食用大蒜的人群，其癌症发生率偏低［1］,因此有关于大蒜防癌、抗癌作用的研究日益受到关注。
本实验采用形态学观察、MTT等方法，进行了大蒜素对体外培养的肝癌细胞的诱导凋亡作用的研究。
1材料与方法细胞培育细胞株：SMMC-7721肝癌细胞购自武汉冷藏中心；培养液：RPMI 1640培养基(GIBCO，USA)；新生牛血清：购自杭州四季青生物工程公司；胰蛋白酶：胰酶，；CO2培养箱：IT-41，Japan；倒置相差显微镜：Olympus，Japan。
药品大蒜素注射液：上海禾丰制药厂；四甲基偶氮唑盐(MTT)：SIGMA公司。
用PBS配成5 mg/ml，除菌、分装后，4 ℃避光保存。
96孔培养板：SIGMA公司；TUNEL检测试剂盒：华美生物公司。
检测将浓度为5×104 个/ml的细胞接种于96孔细胞培育板中，每孔加100 μl，待细胞处于对数生长期时加大蒜素。
实验组细胞加100 μl含大蒜素浓度依次为、25、50、100、200 μg/ml的完全培养基，阴性对照组加100 μl完全培养基，空白对照组只有100 μl完全培养基，不含细胞，每浓度时间组设4复孔。
继续培育2、24 h后，加入MTT溶液（5 mg/ml）20 μl,37 ℃继续孵育4 h。
终止时小心吸弃孔内培育上清液，每孔加入150 μl DMSO(二甲基亚砜)震荡10 min，使结晶物充分溶解，酶联免疫检测仪上测定各孔OD值。
计算存活率：存活率(%)=(OD实验/OD对照)×100%。
形态学(1)相差显微镜观察活体。
在进行MTT检查的过程中，于加药——加入MTT 的时间段内，随机观察并照相记录用药组和对照组细胞的形态变化。
(2)台盼蓝染色。
对处于对数生长期的细胞以大蒜素(终浓度为30 μg/ml)作用4 h后，取细胞悬液于一小试管中，再加入台盼蓝染液，吹打均匀，染色1 min，取染色后的细胞悬液滴入计数板，倒置显微镜下计数200个细胞中坏死细胞及凋亡细胞百分数。
(3)HE染色。
待细胞爬片长满至80%以后加入大蒜素使终浓度为30 μg/ml。
4 h后，取出盖玻片，甲醇固定后，常规HE 染色。
片段化检测经典盐析法［5］提取DNA，琼脂糖凝胶电泳，EB染色，紫外灯下观察。
凋亡细胞末端原位标记)待盖玻片上的细胞长至80%，向培养皿中加入大蒜素使终浓度为30 μg/ml作用4 h后取出，以的PBS(pH值洗长有细胞的载玻片后按试剂盒说明书操作。
随机选择10个高倍视野（400倍），计算凋亡指数(AI)。
计算公式：AI=阳性细胞数÷细胞总数×100%。
2结果检测 2 h组的细胞存活率与对照组均无显著差异；24 h组的细胞存活率中，低浓度组与对照组比较无显著差异，中高浓度（25 μg/ml以上）组与对照组比较有显著性差异(P通讯作者：孙广臣表1各浓度细胞存活率比较大蒜素浓度（μg/ml）2 h24 hOD值存活率(%)OD值存活率(%)形态学观察显微镜下，细胞形态的改变与药物浓度相关，药物浓度越高，凋亡形态越明显。
对照组细胞为多角形，呈铺展状，体积大(图1A)；浓度为25 μg/ml(图1B)和50 μg/ml 实验组(图1C)的细胞变小，由伸展的多角形皱缩为圆形。
细胞质内空泡增多，细胞膜上有外凸的小泡结构；浓度为100 μg/ml实验组除有上述变化以外，还可见大量凋亡小体、细胞碎片及皱缩后膜破裂的细胞(图1D)，这表明大浓度的大蒜素对细胞膜有破坏作用。
图1相差显微镜活体观察(400倍) A空白对照组。
细胞呈伸展状（梭形或多角形），空泡少。
少量的圆形细胞（箭头所示）为自然凋亡细胞或尚未贴壁细胞。
B低粘度大蒜素(25 μg/ml)作用2 h。
细胞开始皱缩，直至变圆，细胞内空泡增多。
个别细胞膜上有凸起小泡。
C中浓度大蒜素(50 μg/ml)作用2 h。
与图B细胞相比，细胞皱缩明显，变圆细胞的比例增加，而且大量细胞的膜上有凸起的泡状结构。
D高浓度大蒜素(100 μg/ml)作用2 h，大量凋亡小体出现在相差显微镜活体观察过程还偶然发现了一种凋亡形态的“暂态特征”，关于该特征的描述尚未见报道。
该特征为凋亡小体在某一时段集中出现，而后又在10~20 min内大量消失。
本试验中各浓度实验组中（25 μg/m以上），均曾见该暂态特征的出现，但出现的时间点不定，一般在加药后1~3 h，该现象难于捕捉。
此后凋亡小体鲜见，细胞皱缩、起泡等特征的情况不变。
台盼蓝染色及HE染色的结果详见图2和图3。
图2台盼蓝染色(30 μg/ml大蒜素作用4 h，400倍)坏死细胞呈蓝色，凋亡细胞为无色带多个凸起小泡的结构或呈不规则形状（箭头），正常细胞为无色圆球形图3HE染色(30 μg/ml大蒜素作用4 h，400倍)细胞核皱缩为弯月形电泳未见梯形条带。
阳性凋亡细胞表现为细胞核呈棕褐色。
部分细胞质可能因为核DNA碎片的逸出呈阳性着色。
结果：空白对照组细胞：凋亡指数；大蒜素用药组(30 μg/ml大蒜素作用4 h)细胞凋亡指数为。
实验组与对照组比较，经χ2检验，差异有统计学意义(P3讨论细胞凋亡的检测方法主要有形态学观察、生化方法、流式细胞术、TUNEL法等。
其中形态学观察，被认为是最可靠的［2］。
形态学观察是通过染色质的凝聚、凋亡小体等特征形态的出现来确定凋亡，但形态学观察一般只用作定性指标，并仅限于凋亡形态最明显的时候。
生化方面，通过特征性的DNA Ladder检测凋亡最常见，但许多研究发现形态学上得以确认的凋亡现象并不都伴有DNA Ladder。
因此认为DNA梯形图只能在一些特定类型细胞和特殊情况下出现，它并不能作为凋亡的标志。
流式细胞术可定量地测定凋亡细胞的多项指标，不足在于难以检出部分早期凋亡细胞，即DNA已出现断裂，但尚未出现DNA 片断的大量丢失的细胞［6］。
TUNEL法可以检测到早期凋亡细胞，可在组织原位同时显示凋亡细胞的形态和分布，还可以定量。
但由于坏死细胞亦有DNA 裂点存在而形成假阳性，因此用TUNEL法检测应设对照组。
可见，只有将多种检测手段联合使用才能得出较为可靠的结果。
本实验主要应用形态学方法进行凋亡检测，其中相差显微镜下的活体细胞观察的结果尤其令人信服。
活体观察表明，作用迅速是大蒜素明显特征。
加药后2 h左右，细胞就陆续呈现皱缩、起泡等凋亡形态，且形态变化程度与大蒜素浓度相关，是文献所见抗肿瘤药物中作用最快的。
凋亡小体的大量出现表明了大蒜素强的诱导凋亡作用。
但是凋亡小体集中出现后又大量消失的这一“暂态特征”似乎又表明了大蒜素的诱导作用的不稳定性。
“暂态特征”的出现也许与大蒜素的挥发性相关。
台盘蓝染色结果与活体观察接近，但HE染色及TUNEL的图片中少见凋亡小体。
MTT实验表明，大蒜素对SMMC-7721细胞作用2 h，没有显著抑制作用，24 h后，中高浓度的大蒜素对细胞有显著的抑制作用。
这与形态学结果不一致：活体观察表明，大蒜素作用2 h，中高浓度组的细胞就呈现出了典型的凋亡形态，但在MTT实验结果中没有反映。
这说明，MTT检测凋亡还不够理想。
原因可能是凋亡早期细胞，线粒体中的琥珀酸脱氢酶仍有活性。
有文献报道，高浓度大蒜素（100 μg/ml）作用2 h即可显著抑制卵巢癌细胞株H08910的生长［3］，本实验中各浓度大蒜素作用2 h均无抑制作用。
这说明不同的细胞株对大蒜素的反应不同。
有报道称60 μg/ml大蒜素作用于肝癌细胞BEL-7402，3 h后流式细胞仪测得凋亡率为［4］。
本实验的TUNEL表明，浓度为30 μg/ml的大蒜素作用4 h后，凋亡率为，但根据活体观察及台盘蓝染色实验，在凋亡小体大量出现的时段，所观察到的凋亡细胞比率远高于此。
虽然形态学的观察结果，不是定量凋亡率的可靠指标，但作者仍认为实际的凋亡率应高于。
其中，爬片法收集细胞应该是造成两者之间存在差异的原因之一：晚期凋亡的细胞贴壁能力小，容易在玻片处理过程中脱落而造成漏检。
另外，大蒜素的挥发性也可能是TUNEL的凋亡率低于形态观察的凋亡率的一个原因。
参考文献［1］Lan H,LYY.Allitridi induces apoptosis by affecting Bcl-2 expression and caspase-3 activity in human gastric cancer cells.Acta Pharmacol Sin, 2004,25(2):219-［2］赵利红,崔利德,李陈莉,等.细胞凋亡的检测方法.河北医药,2005,27(10):783-［3］俞超芹,蔡在龙,颜永碧,等.大蒜素对卵巢癌细胞株HO8910生长的抑制作用.安徽中医学院学报,2001,20(6):34-［4］邵红莲,辛华,翟玉梅,等.大蒜素诱导人肝癌BEL-7402 细胞凋亡.解剖学报，2001,32(3):290-［5］范海荣,夏永静,孙福成,等.四种全血基因组DNA 提取方法的比较.中国动脉硬化杂志,2002,10(6):535-［6］矫毓娟,刘江红,许贤豪.细胞凋亡的检测方法(综述).中国神经免疫学和神经病学杂志,2004,11(1):53-。
