各种带标签地质粒

  • 格式:doc
  • 大小:362.50 KB
  • 文档页数:17

产品简介:产品编号产品名称产品包装产品价格D2632 pCMV-C-Flag1μg 798.00元pCMV-C-Flag是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。

含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Flag标签的序列,因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。

质粒为卡那霉素抗性。

转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

pCMV-C-Flag质粒的主要信息如下:Feature Nucleotide PositionCMV promoter 1–602T3 promoter and T3 primer binding site 620–639multiple cloning site 680-740c-Flag tag 741-764T7 promoter and T7 primer binding site 817–838SV40 polyA signal 850–1233f1 origin of ss-DNA replication 1371–1677bla promoter 1702–1826SV40 promoter 1846–2184neomycin/kanamycin resistance ORF 2219–3010HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3011–3469pUC origin 3598–4265pCMV-C-Flag质粒的图谱如下:pCMV-C-Flag的多克隆位点的详细图谱如下:XmaI PstISacI Small BamHI HindIII651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCTCTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGAFlag EcoRI EcoRV SacI BglII XhoI XbaI D Y K D701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA GATTACAAGGCGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT CTAATGTTCCtagD D D K ApaI751 ATGACGACGA TAAGTAAGGG CCCGGTACCT TAATTAATTA AGGTACCAGGTACTGCTGCT ATTCATTCCC GGGCCATGGA ATTAATTAAT TCCATGGTCCpCMV-C-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Flag)包括:Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp IBsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 IBstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse INru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap ISca I Spe IpCMV-C-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Flag once)包括:Nde I CA`TA,TG 241 SnaB I TAC|GTA 347 Nhe I G`CTAG,C 598 Sac I G,AGCT`C 656 Sac II CC,GC`GG 663 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664Not I GC`GGCC,GC 669 PspA I C`CCGG,G 681 Xma I C`CCGG,G 681 Srf I GCCC|GGGC 683 Sma I CCC|GGG 683 BamH I G`GATC,C 688 Hind III A`AGCT,T 694Pst I C,TGCA`G 704 EcoR I G`AATT,C 706 EcoR V GAT|ATC 714 Sal I G`TCGA,C 718 Acc I GT`MK,AC 719 Bgl II A`GATC,T 724 PaeR7 I C`TCGA,G 730 Xho I C`TCGA,G 730 Xba I T`CTAG,A 736 Bsp120 I G`GGCC,C 769 Apa I G,GGCC`C 773 Pvu I CG,AT`CG 851 Bcl I T`GATC,A 1005 Mun I C`AATT,G 1098 Hpa I GTT|AAC 1111 Mlu I A`CGCG,T 1234 Dra III CAC,NNN`GTG 1464Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2123BseR I GAGGAG 16/14 2166Stu I AGG|CCT 2169 Cla I AT`CG,AT 2188 Kas I G`GCGC,C 2347 Nar I GG`CG,CC 2348 Ehe I GGC|GCC 2349 Bbe I G,GCGC`C 2351 Msc I TGG|CCA 2430 Tth111 I GACN`N,NGTC 2466BsrD I GCAATG, 8 2581 Bsp1286 I G,DGCH`C 2651Rsr II CG`GWC,CG 2864 BsiC I TT`CG,AA 3030 BstB I TT`CG,AA 3030 Bsa I GGTCTC 7/11 3337 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3677ApaL I G`TGCA,C 3952pCMV-C-Flag质粒中推荐使用的测序引物序列如下:T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′T7 primer(817-838): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′pCMV-C-Flag的全序列信息:D2632 pCMV-C-Flag-seq.txt产品简介:产品编号产品名称产品包装产品价格D2672 pCMV-C-Myc1μg 798.00元pCMV-C-Myc是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。

含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。

质粒为卡那霉素抗性。

转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

pCMV-C-Myc质粒的主要信息如下:Feature Nucleotide PositionCMV promoter 1–602T3 promoter and T3 primer binding site 620–639multiple cloning site 680-740c-Myc tag 741-770T7 promoter and T7 primer binding site 823–844SV40 polyA signal 856–1239f1 origin of ss-DNA replication 1377–1683bla promoter 1708–1832SV40 promoter 1852–2190neomycin/kanamycin resistance ORF 2225–3016HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal 3017–3475pUC origin 3604–4271pCMV-C-Myc质粒的图谱如下:pCMV-C-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:XmaI PstISacI SmaI BamHI HindIII651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCTCTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGAMyc EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI E Q K L701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA GAGCAGAAACCGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT CTCGTCTTTGtagI S E E D L ApaI751 TCATCTCTGA AGAGGATCTG TAAGGGCCCG GTACCTTAAT TAATTAAGGTAGTAGAGACT TCTCCTAGAC ATTCCCGGGC CATGGAATTA ATTAATTCCApCMV-C-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Myc)包括:Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp IBsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 IBstE II Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru IPflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca ISpe I Spl IpCMV-C-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Myc once)包括:Nde I CA`TA,TG 241 SnaB I TAC|GTA 347 Nhe I G`CTAG,C 598 Sac I G,AGCT`C 656 Sac II CC,GC`GG 663 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664Not I GC`GGCC,GC 669 PspA I C`CCGG,G 681 Xma I C`CCGG,G 681 Srf I GCCC|GGGC 683 Sma I CCC|GGG 683 BamH I G`GATC,C 688 Hind III A`AGCT,T 694Pst I C,TGCA`G 704 EcoR I G`AATT,C 706 EcoR V GAT|ATC 714 Sal I G`TCGA,C 718 Acc I GT`MK,AC 719 Bgl II A`GATC,T 724 PaeR7 I C`TCGA,G 730 Xho I C`TCGA,G 730 Xba I T`CTAG,A 736 Ear I CTCTTC 7/10 755 Bsp120 I G`GGCC,C 775 Apa I G,GGCC`C 779 Pvu I CG,AT`CG 857 Bcl I T`GATC,A 1011 Mun I C`AATT,G 1104 Hpa I GTT|AAC 1117 Mlu I A`CGCG,T 1240 Dra III CAC,NNN`GTG 1470Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2129BseR I GAGGAG 16/14 2172Stu I AGG|CCT 2175 Cla I AT`CG,AT 2194 Kas I G`GCGC,C 2353 Nar I GG`CG,CC 2354 Ehe I GGC|GCC 2355 Bbe I G,GCGC`C 2357 Msc I TGG|CCA 2436 Tth111 I GACN`N,NGTC 2472BsrD I GCAATG, 8 2587 Bsp1286 I G,DGCH`C 2657Rsr II CG`GWC,CG 2870 BsiC I TT`CG,AA 3036 BstB I TT`CG,AA 3036 Bsa I GGTCTC 7/11 3343 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3683ApaL I G`TGCA,C 3958pCMV-C-Myc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′T7 primer(823-844): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′pCMV-C-Myc的全序列信息:D2672 pCMV-C-Myc-seq.txt产品编号产品名称产品包装产品价格D2722 pCMV-N-Flag1μg 798.00元pCMV-N-Flag是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。