红白细胞计数实验报告

《实验诊断学》实验报告

实验一红细胞、白细胞计数

实验原理

一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数。用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞，混匀后充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的白细胞数。根据稀释倍数和计数的容积，换算求得每升血液中的红细胞数量以及白细胞数量。

实验内容与步骤

实验材料：

显微镜、微量吸管、毛细吸管、改良Neubauer计数板、盖玻片、小试管、RBC稀释液、WBC 稀释液、正常人的全血、纱布

实验步骤：

1、红细胞计数准备：

加稀释液，用微量吸管吸取RBC稀释液蒸馏水2.0 ml加到小试管内。

取血，毛细吸管取血10 μl。

用纱布擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2-3次，立即混匀。

2、白细胞计数准备：

WBC稀释液:

冰醋酸3.0 mL（破坏红细胞）

蒸馏水97.0 mL

亚甲蓝（染色）

小试管加WBC稀释液0.38 mL。

采血，微量吸管取血20 μL。

擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2-3次，立即混匀。

充池、观察：

将计数板及盖玻片檫净，将盖玻片覆盖在计数板上。

用滴管吸取混均的红细胞悬液充入上方计数室，静置3-5 min，高倍镜下计数；白细胞悬液充入下方计数室，静置2-3 min，低倍镜下计数。

观察计数，红细胞，高倍镜下计数中央大方格内四角的4个中方格和正中的1个中方格的红细胞，压线细胞的计数按照数上不数下，数左不数右的原则。计数时按照弓形的计数方式，以免漏数或多数。

用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。

实验结果

1、红细胞计数实验结果：

5个中方格内RBC的计数／个=24+27+32+22+25

根据计算公式：

RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×106

＝5个中方格内RBC数/100×1012

推算得出RBC：1.3×1012／L

正常人群的红细胞计数参考区间：

人群红细胞计数（×1012／L）

成年男性 4.3～5.8

成年女性 3.8～5.1

新生儿 6.0～7.0

结论：实验结果和参考区间比较得出，实验结果所得的红细胞计数偏低

2,、白细胞计数实验结果：

4个大方格内WBC数／个=11+7+9+7

根据计算公式：

WBC/L＝4个大方格内WBC数／4×10×20×106

=4个大方格内WBC数／20×109

推算得出WBC：1.7×109／L

正常人群的白细胞计数参考区间：

人群白细胞计数（×109／L）

成年人 3.9～9.5

新生儿15.0～20.0

6个月至2岁11.0～12.0

结论：比较得出白细胞计数偏低

讨论

注意事项：

吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血。

取血量须准确，动作要迅速，防止血液凝固。

血液加入稀释液后，应立即混匀。充液前，红、白细胞复液要充分摇匀，细胞悬液注入计数池内要求分布均匀，不可有多余液体外溢，亦不可有气泡。

压线细胞应数上不数下，数左不数右。

讨论：

取量不准：取血量少于实验标准血量、所取稀释液量超过实验添加的量，导致悬液浓度降低计数偏差过大：计数时漏数

细胞破坏较多：混均时用力不当，导致细胞损伤较多