生物化学检验常用分析技术共34页文档
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生物化学分析方法(整理版)1. 简介生物化学分析方法是一种用于研究生物体内化学成分和生物代谢过程的科学技术。
通过分析生物体内的分子、细胞和组织的化学成分和反应,可以深入了解生物体的功能和代谢状态。
本文将介绍几种常用的生物化学分析方法。
2. 分光光度法分光光度法是一种通过测量样品溶液吸光度的方法来确定物质浓度的技术。
它利用样品对特定波长的光的吸收特性来分析样品中的物质含量。
该方法广泛应用于生物化学领域,可用于测定蛋白质、核酸和酶的浓度。
3. 色谱法色谱法是一种用于将混合物中的组分分离和鉴定的方法。
它基于不同组分在固定吸附剂或移动相中的分配行为而实现分离。
在生物化学分析中,常用的色谱法包括气相色谱法和液相色谱法。
这些方法可以用于分离和测定脂质、氨基酸和维生素等生物化学分子。
4. 质谱法质谱法是一种通过测量物质的质量谱图来确定其化学成分和结构的方法。
它将样品转化为气体相或溶液相,并通过离子化和分离来分析样品中的组分。
质谱法在生物化学分析中广泛应用于鉴定和定量蛋白质、代谢产物和药物等分子。
5. 核磁共振法核磁共振法是一种通过测量核自旋对外加磁场的响应来分析样品的方法。
它利用核自旋在外加磁场中的共振吸收特性来确定样品中的化学成分和结构。
核磁共振法可以用于鉴定分子的结构、研究分子间的相互作用,并在生物化学分析中应用于蛋白质和核酸的结构研究。
6. 微量分析法微量分析法是一种用于测定生物样品中微量物质含量的方法。
它包括原子吸收光谱法、荧光光谱法和电化学分析法等。
这些方法具有高灵敏度和高选择性,可用于测定生物体内微量元素、代谢产物和药物等的含量。
7. 结论生物化学分析方法在生物研究和临床诊断中具有重要意义。
通过合理选择合适的分析方法,可以准确测定生物样品中的化学成分和结构,提供有价值的信息用于研究和应用。
以上介绍的几种常用的生物化学分析方法只是其中的一部分,随着科学技术的发展,将会有更多更先进的方法应用于生物化学分析领域。
第五章 常用生物化学检验技术临床生化检验常用的分析技术有光谱分析技术、电化学分析技术、电泳分析技术、层析和离心分析技术及自动化分析技术。
其中光谱分析技术是最基本和最常用的技术,它具有灵敏、准确、快速、简便、选择性好等特点而被广泛应用。
第一节 光谱分析技术光谱技术是根据物质吸收或发射辐射能而建立起来的一类分析方法,因不同分子的原子团和原子,其发射光谱和吸收光谱不同,而相同的物质在一定条件下,其发射光谱和吸收光谱的强度与该物质的含量成正比关系。
因此可对物质进行定性和定量分析,此类技术称为光谱技术。
是一种最常用的生化检验测定技术,它主要包括吸收光谱(可见紫外、红外原子吸收光谱法)、发射光谱(荧光法、火焰发射光谱法)和散射光谱(比浊法)。
光是一种高速传播的电磁辐射,具有波、粒二象性,光的波长(λ)的常用单位纳米(nm ),可见光波长400~760nm ,<400nm 称为紫外光,>760nm 称为红外光,波长愈短,能量愈大。
可见,紫外吸收光谱是由于多原子分子的价电子在电磁辐射的作用下,由基态跃迁到激发态,这种因物质分子对辐射的选择性吸收而得到的光谱称为吸收光谱。
处于高能态的分子(激发态分子)是不稳定的,当返回基态时,便发射出相应的光谱,称为发射光谱。
可见,紫外吸收光谱用于定量分析的依据是光的吸收定律,即Lambert-Beer 是律,它是吸收光谱法的基本定律。
一、分光光度法的基本原理(一)吸光度与透光度当光线通过均匀、透明的溶液时,一部分光被散射,一部分光被吸收,另一部分光透过溶液。
设入射光强度为Io ,透射光强度为It ,It 与Io 之比称为透光度(T ),即IoIt =T )透光度(T 常用百分数表示(T%),也称为百分透光度。
透光度的负对数称为吸光度(A ),又称为消光度(E ),光密度(OD ),即It Io lg =IoIt lg -=T lg -=A 吸光度与透光度的换算:T lg -100lg =T1lg=T lg -=A 如透光度=10%时 A = lg100-lg10 = 2-1 = 1透光度=20%时A = lg100-lg20 = 2-1.3 = 0.7(二)Lambert-Beer 定律1. Lambert 定律 当一束强度为Io 的单色光透过某种吸光溶液后,由于溶液吸收了一部分光,则透过的光线为It 。