2.1《植物体细胞杂交的过程》

３、一种抗原侵入机体之后，引起机体免 疫反应产生的抗体只有一种吗？ ４. 简述获得抗体的传统途径？ ５、这种方法获得的抗体有什么缺陷？
？
传统血清抗体的制备
特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏 抗原 刺激 动物体 浆细胞 抗体 抗体不纯
抗原不纯
每个Ｂ淋巴细胞只能分泌一种抗体，由一个Ｂ淋巴细 胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份是单一的。
生 出 细 胞 壁
化
愈 伤 组 织
再 分 化
杂 种 植 株
植物细胞B
成果和未解决的问题
成果：克服不同生物远缘杂交的障碍，出 现自然界没有的新品种。 未解决的问题：未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。
如果将牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶 牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦！ 动物细胞也能融合吗？
诱导方法
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体
思考题
7、你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？ 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞 8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体
二、单克隆抗体
1.抗体是由何种细胞产生的？
提 问
２、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种 抗体吗？
பைடு நூலகம்
一、动物细胞融合
1、动物融合的过程
请同学们阅读课本P52动物融合
1、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
思考题
1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？
酶解法，如纤维素酶或果胶酶
2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？

功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。
紫草 愈伤组织 紫草素
小结
植 物 细 胞 工 程
所采用技术 的理论基础
植物细胞的全能性
通常采用的 技术手段
植物组织培养
植物体细胞杂交
1．你认为两个来自不同植物的体细胞完成 融合，遇到的第一个障碍是什么？ 植物细胞有细胞壁，不易融合
2．有没有一种温和的去壁方法呢？
植物细胞的细胞壁成分是纤维素和果胶， 所以可以用纤维素酶和果胶酶去壁
3．为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞 膜的什么特性有关？
与细胞膜的结构特点——流动性有关
4．如何将杂种细胞培育成杂种植株？
• 08江苏高考：下列关于植物组织培养的 叙述中，错误的是 D • A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养 和调节渗透压 • B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响 愈伤组织的生长和分化 • C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱 分化才能形成愈伤组织 • D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞 经培养获得的愈伤组织基因相同
按照人们的意愿来 改变细胞内的遗传 物质或获得细胞产 品
植物细胞工程
细胞工程与基因工程相比：
前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术 ,后者是分子水平上的生物技术
思考:
细胞 克隆多莉羊技术是 水平上的技术，培育 分子 抗虫棉是 水平上的技术。
利用菊花花瓣微型繁殖培养的菊花
如何把某种植物的一块组织通过 培养得到一株完整植株?
1、不能人工诱导原生质体融合的方法 是（ D ） A、振动 B、电刺激 C、PEG试剂 D、重压 2、植物细胞融合完成的标志的是（ A、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合 C、细胞质发生融合 D、细胞核发生融合
A）
案例一

科学家尝试将番茄和马铃薯进行杂交， 希望培育出地上结番茄，地下长马铃 薯的“超级作物”。但是，两种生物 之间存在着天然的生殖隔离，用传统 的有性杂交的方法很难得到杂种后代。
概念：植物体细胞杂交，是指将不同来源的植 物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并 把杂种细胞培育成新植物体的技术。
植物体细胞杂交的过程 1. 制备原生质体 用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体。
希普：首例胚胎移植成功 1890年
1907年 哈里森:首创动物组织体外培养法
巩固练习
1.下列关于细胞工程概念的叙述，错误的是（ C ）
A.细胞工程主要包括植物细胞工程和动物细胞工程 B.细胞工程是一门综合性的生物工程 C.细胞工程就是在细胞水平上进行的 D.细胞工程应用了多学科的原理和方法
课程导入
化学法：聚乙二醇（PEG）pH8.0～pH8.2（用10%NaHCO3调整），分子量
融合法
小的PEG，融合效应差，又有毒性，分子量过大，
则粘性太大，不易操作。
其优点是融合成本低，勿需特殊设备；融合子产生
的异核率较高；融合过程不受物种限制。其缺点是
融合过程繁琐，PEG可能对细胞有毒害。
植物体细胞杂交的过程 2. 原生质体间的融合 化学法：高Ca2+—高pH融合法
植物体细胞杂交的过程 2. 原生质体间的融合 物理法：离心法
物理方法之一，使用离心机等机器实现细胞之间 的融合。
聚乙二醇（PEG）化学式为：HO(CH2CH2O)nH ，
植物体细胞杂交的过程 分子量大于200小于6000者均可用作细胞融合剂。
2. 原生质体间的融合
PEG经高压灭菌后，与温热的Engle氏液混合。一 般选用分子量为4,000，常用浓度为50%，

3.1.1 根据可见标志选择 主要用于非绿色原生质体与含有叶绿体的 原生质体的融合.(半绿半白) 3.1.2 根据荧光标记选择 将2种原生质体群体分别用不同的荧光染料 标记,然后通过荧光显微镜鉴别异核体. 3.1.3 低密度植板选择 对细胞进行追踪选择.
3.2 突变互补选择
3.2.1 隐性突变互补选择 3.2.2 显性抗性互补选择 3.2.3 隐性突变与野生型互补选择 3.2.4 显-隐性双突变体选择
植物体细胞杂交技术
周口师范学院生命科学系
植物体细胞杂交的意义
有性杂交是植物遗传改良的一种传统手段. 作用空间:主要限于种内的品种之间. 种及种以上分类单位之间的杂交,例如 种间或属间杂交,则常常遭遇有性不亲和性 障碍.
在无性繁殖植物和性不育植物中,如在 马铃薯,甘薯,木薯,甘蔗和香蕉中,更是 难以通过有性杂交进行遗传改良. 因此,建立在原生质体全能性基础上的 体细胞杂交和胞质杂交技术,对于植物的遗 传改良具有重要的意义.
5 体细胞杂种和胞质杂种的鉴定
5.2 细胞学和分子细胞学鉴定 通过确定杂种染色体数和染色体形态
5 体细胞杂种和胞质杂种的鉴定
5.3 生化鉴定 同工酶谱分析法: 将体细胞杂种的同工酶谱与其双亲的酶谱 比较: 杂种植株的酶谱可能是双亲酶谱带的总和 可能只出现双亲的部分酶带 或缺少双亲的某些酶谱而出现新的谱带.
在双亲亲缘关系比较远的杂种细胞中,两 个来源不同的染色体组常常不能完全结合在 一起. 在动物体细胞杂种细胞系中,已知双亲之 一的染色体会逐渐消除,在植物中也看到这 种现象.
3 杂种细胞的选择系统
3.1 根据物理特性选择 3.2 突变互补选择 3.3 根据生长和再生能力的差别选择
3.1 根据物理特性选择
3.3 根据生长和再生能力的差别选择