基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒产品说明书

基质金属蛋白酶MMP-2MMP-7荧光底物，140430-53-1
Mca-PLGL-Dpa-AR-amide是一种非常敏感的FRET底物，用于连续测定和原位测定基质金属蛋白酶活性。

Gly-Leu键的裂解将高荧光Mca基团与高效2,4-二硝基苯猝灭剂分离，导致荧光强度增加。

点状金属蛋白酶(MMP-7)和明胶酶(MMP-2)的kcat/Km值分别为1.7·10和6.3·10 M s。

编号: 200242
中文名称: 基质金属蛋白酶MMP-2/MMP-7 FRET substrate
英文同义词: FS-1
CAS号: 140430-53-1
单字母: Mca-PLGL-Dap(Dnp)-AR-NH2
三字母: MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-Dap(Dnp)-Ala-Arg-NH2
氨基酸个数: 7
分子式: C49H68O15N14
平均分子量: 1093.15
精确分子量: 1092.5
等电点(PI): -
pH=7.0时的净电荷数: 1
平均亲水性: -0.275
疏水性值: 0.48
来源: 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。

储存条件: 负80℃至负20℃
标签: 侧链保护基肽基质金属蛋白酶底物癌症研究肽。

Catalog Number EK1M02-48EK1M02-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人基质金属蛋白酶2(MMP-2)浓度。

本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。

1.背景介绍基质金属蛋白酶2(MMP-2)，又名72kDa 的IV 型胶原酶和明胶酶A ，在人类中由MMP2基因编码。

激活MMP-2需要蛋白水解加工。

MMP-2在子宫内膜破裂、调节血管形成和炎症应答中起作用。

MMP-2参与许多事件，如癌症进程、癌细胞浸润、细胞信号转导、新血管形成和淋巴管生成。

MMP2基因突变与Torg-Winchester 综合征、多发性骨溶解、关节炎综合征有关，可能与瘢痕疙瘩有关。

非囊性纤维化支气管扩张中，相比于呼吸道感染铜绿假单胞菌的患者，感染流感嗜血杆菌患者的MMP-2浓度是升高的。

2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。

特异性抗人MMP-2抗体预包被在高亲和力的酶标板上。

酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的MMP-2与固相抗体和检测抗体结合。

洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。

洗涤后，加入显色底物TMB ，避光显色。

颜色反应的深浅与样本中MMP-2的浓度成正比。

加入终止液终止反应，在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。

3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。

2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。

3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。

4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素，并非所有可能的影响因素都已经去除。

Human MMP-2ELISA Kit 检测试剂盒（酶联免疫吸附法）EK1M02-01二、基本信息1.2.未提供的材料设备1)能够检测450nm吸光度的酶标仪，参考波长570nm或630nm2)移液器及枪头、加样槽3)准备试剂用的试管、离心管、量筒等4)蒸馏水或去离子水5)涡旋振荡器、微孔板振荡器3.贮存试剂盒保存于2-8℃，有效期标注于标签上。

人基质金属蛋白酶9/明胶酶B（MMP-9/Gelatinase B）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：1.6ng/ml-100ng/ml最低检测限：0.4ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人MMP-9,且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中MMP-9含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

概述MMP-9基因位于染色体20q11.1~13.1，26~27kbp，具有13个外显子和9个内含子。

哺乳类动物MMP-9mRNA的同源性约为80%。

MMP-9的启动子区内含有活化蛋白（AP）-1、AP-2和刺激蛋白（SP）-1因子结合位点，人的MMP-9启动子区还有核因子（NF）κB、ETS结合位点和转化生长因子（TGF）-β抑制元件。

MMPs主要有3个独特的、保守的结构域构成，包括前肽区（氨基末端区）、催化区和羧基末端区（类血红素结合蛋白酶区）。

MMP-9是明胶酶中的一种，除了有MMPs的原型结构外，MMP-9的催化区还包括3个重复的型纤维连接蛋白结构域，这个结构域与明胶或弹性蛋白有高度的亲和力。

MMP-9包含一个V型的胶原蛋白结构域，这个结构域有高度的糖基化作用，它影响底物的特异性以及有抗衰变的作用。

MMP-9有许多作用底物，如Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型胶原、蛋白聚糖的核心蛋白、明胶、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹性蛋白等，细胞因子及其受体也是MMP-9作用的底物。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗MMP-9抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗MMP-9抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

细胞基质金属蛋白酶2活性荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞基质金属蛋白酶2（MMP2）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过荧光探针MCA供体和DAP/DNP 受体双重标记的多肽底物PLGLAR，在特定抑制剂存在与否的情况下，受到MMP2蛋白酶的水解，解离抑制基团，产生荧光产物，即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。

产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，安全可靠。

技术背景基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。

其功能在于分解细胞外基质成分。

迄今为止发现的MMPs至少有28种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellular matrix）成分，同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissue resorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞浸入转移等。

根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。

体内绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs以无活性的酶原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs 可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。

人基质金属蛋白酶-9（MMP-9）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶9（MMP-9）水平。

用纯化的人基质金属蛋白酶9（MMP-9）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人基质金属蛋白酶9（MMP-9），再与HRP标记的基质金属蛋白酶9（MMP-9）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人基质金属蛋白酶9（MMP-9）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-9（MMP-9）浓度。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

基质金属蛋白酶9降解明胶-概述说明以及解释1.引言1.1 概述基质金属蛋白酶9（MMP-9）是一种重要的酶类蛋白，广泛存在于生物体内，主要参与细胞外基质的降解和重塑过程。

明胶作为一种蛋白质，也是生物体中重要的结构分子，具有许多生理功能和应用价值。

本文将重点探讨基质金属蛋白酶9对明胶的降解作用，分析其降解机制及对生物体的影响，以期为进一步研究细胞外基质降解和生物体内蛋白质代谢提供理论基础。

部分的内容1.2 文章结构本文将首先介绍基质金属蛋白酶9的作用，包括其在生物体内的功能和重要性。

接着，将深入探讨明胶的结构与特性，介绍其在生物体中的角色和应用。

最后，将详细讨论基质金属蛋白酶9对明胶的降解机制，揭示其对生物体的影响及可能的未来研究方向。

通过这些内容的呈现，读者将对基质金属蛋白酶9降解明胶的过程有更加全面的了解，促进相关研究领域的进一步发展。

容1.3 目的目的：本文旨在探讨基质金属蛋白酶9对明胶的降解机制，以揭示其在生物体内的重要性。

通过深入了解基质金属蛋白酶9在明胶降解过程中的作用机制，可以更好地认识明胶的结构与特性，并进一步探讨明胶降解对生物体的影响。

同时，本文还将探讨未来研究方向，为相关领域的研究提供参考与借鉴。

通过本文的研究，有望为深化对基质金属蛋白酶9降解明胶的认识，从而为相关领域的科研工作提供理论支持与实验依据。

2.正文2.1 基质金属蛋白酶9的作用基质金属蛋白酶9，也称为MMP-9，是一种重要的内切酶，在细胞外基质的降解过程中起着关键作用。

它属于金属蛋白酶家族，特别善于降解胶原蛋白，是一种重要的胶原酶。

MMP-9主要通过降解胶原和基质蛋白，促进组织修复和细胞迁移。

在生理情况下，MMP-9的活性受到严格控制，只在组织修复和再生过程中被激活。

然而，在某些疾病状态下，如关节炎、癌症和心血管疾病，MMP-9的过度活化会导致病理进程的发展。

总的来说，基质金属蛋白酶9在细胞外基质降解中起着重要作用，平衡其活性对于维持正常的组织结构和功能至关重要。

基质金属蛋白酶（MMP）明胶酶谱法电泳分析试剂盒产品说明书（中文版）主要用途基质金属蛋白酶（MMP）明胶酶谱法（gelatin-zymography）电泳分析试剂是一种旨在通过明胶聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下，观察并半定量深蓝色背景中的无色清晰的基质金属蛋白酶条带，根据分子量确定特异基质金属蛋白酶及其活性的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种细胞萃取样品（动物、人体、植物、昆虫等）、培养上清悬液、血清和关节滑液或脑脊液等基质金属蛋白酶-2，9，以及13等活性及其抑制剂的检测。

产品即到即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，条带清晰，重复性好。

技术背景基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。

其功能在于分解细胞外基质成分。

迄今为止发现的MMPs至少有28种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellular matrix）成分，同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissue resorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞浸入转移等。

根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11，主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。

体内绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs以无活性的酶原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。

MMP-33）酶联免疫分析（ELISA）人基质金属蛋白酶-3（MMP-试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-3（MMP-3）水平。

用纯化的人基质金属蛋白酶-3（MMP-3）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人基质金属蛋白酶-3（MMP-3），再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人基质金属蛋白酶-3（MMP-3）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-3（MMP-3）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：225μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

SEA102Hu96T基质金属蛋白酶7(MMP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)适用生物：人使用说明书仅供体外研究使用，不用于临床诊断!第12版（2016年05月修订）[预期应用]本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中MMP7含量。

[试剂盒内容]试剂名称数量试剂名称数量96孔板（预包被）196孔板覆膜4标准品2标准品稀释液1×20mL检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mLTMB底物1×9mL终止液1×6mL洗涤液（30×）1×20mL使用说明书1[需自备的设备及试剂]1、450±10nm滤光片的酶标仪（建议仪器使用前提前预热）2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L（或1×）磷酸缓冲盐(PBS)，pH=7.0-7.2[试剂盒的储存及有效期]1、未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。

请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C，其余试剂请置于4o C保存备用。

2、使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，此外，请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝箔袋装好，并拉紧密封铝箔袋，置于-20o C保存。

注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。

产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

[标本的采集与保存]1、血清：将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4o C过夜，然后1,000×g离心20分钟，取上清即可，将上清置于-20o C或-80o C保存，避免反复冻融。

酶谱法检测血清基质金属蛋白酶MMP生物化学与分子生物学引言酶谱法是一种常用的方法，用于测定血清基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinase，简称MMP）的活性。

MMP是一类重要的蛋白酶，参与多种生理和病理过程，包括组织再生、肿瘤转移等。

本文将介绍血清基质金属蛋白酶MMP的生物化学特性以及酶谱法的原理和操作步骤。

血清基质金属蛋白酶MMP的生物化学特性血清基质金属蛋白酶（MMP）是一类富含锌离子的蛋白酶，在生物体内起到调节基质降解的重要作用。

MMP主要由细胞外基质成分和细胞表面的蛋白酶组成，包括胶原酶、明胶酶等。

这些酶在正常生理过程中，如组织再生和修复中，起到调节细胞迁移、基质降解的作用。

然而，在许多疾病的进展中，MMP的活性过高或过低都可能导致病理性结果，如肿瘤的转移和心肌梗塞。

MMP的活性可以通过多种方法进行检测，其中酶谱法是一种常用且灵敏的方法之一。

酶谱法检测血清基质金属蛋白酶MMP的原理酶谱法是一种使用荧光信号来测定酶活性的方法。

在血清基质金属蛋白酶MMP的检测中，常使用一种荧光基质作为底物，这种底物在未被酶降解时会发出弱的荧光信号，但在被酶降解时会发出明显的荧光信号。

利用这种差别，可以通过测量荧光信号的强度来反映MMP的活性。

酶谱法的操作步骤包括以下几个方面：1.实验前准备：清洗试管和工具，准备所需试剂和样品。

2.底物制备：制备稀释的荧光底物，使其浓度适用于实验。

3.样品处理：将待测的血清样品加入试管中，同时添加荧光底物。

4.反应混合：轻轻摇动试管，使样品和底物充分混合，然后放置在恒温器中反应一段时间。

5.测量荧光信号：使用荧光检测仪器来测量样品中荧光信号的强度。

6.数据分析：根据荧光信号的变化来计算MMP的活性，并进行数据统计和分析。

酶谱法是一种常用的方法，用于检测血清基质金属蛋白酶MMP的活性。

通过测量荧光信号的强度，可以间接反映MMP的活性水平。

酶谱法具有操作简单、结果可靠、灵敏度高等优点，在生物化学和分子生物学研究中得到了广泛应用。

胶原蛋白酶2,9检测试剂盒(MMP Zymography assay kit) P1700描述：基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以无活性的酶原形式分泌，活化后能降解细胞外基质的胶原蛋白，又称胶原酶。

胶原酶通过影响细胞外基质参与胚胎发育、形态发生、组织重塑等过程，并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。

血浆和组织中的MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程，其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视1。

本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9活性。

Zymography是一种广为使用的、基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1 nM，高于ELISA方法2，其基本原理和程序是：制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶，含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育，凝胶染色与脱色。

凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮区域，从而能同时指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶谱)及活性。

本试剂盒提供MMP-2、MMP-9特异蛋白底物及酶学反应缓冲液，可检测少至0.1~0.5 µl血液中的MMP-2、MMP-9酶谱及活性，检测灵敏度约为1 nM。

试剂盒可进行50次标准小胶检测，如果小胶加样孔为10~15个，则总计可检测500~750个样品。

参考文献：1.Nagase H and Woessner JF. Matrix Metalloproteinases. J Biol Chem, 1999, 274, 21491-214942.Heussen C, and Dowdle EB. Electrophoretic analysis of plasminogen activators in polyacrylamide gels containing sodiumdodecyl sulfate and copolymerized substrates. Anal. Biochem，1980, 102, 196–202适用: 检测MMP-2、MMP-9酶谱及活性组成与储存(50 assays)：12个月有效1. 2 × SDS-PAGE non-reducing buffer 1.5 ml , −20 ºC 储存2. 10 × Substrate G 50 ml −20 ºC 储存3. 10 × Buffer A 50 ml 4 ºC 储存使用时用蒸馏水稀释4. 10 × Buffer B 50 ml 4 ºC 储存使用时用蒸馏水稀释5. SDS-PAGE凝胶蛋白质考马斯亮蓝染色液(货号P1501) 4 ºC储存操作步骤：1.制备含MMP底物蛋白的SDS-PAGE凝胶：推荐分离胶浓度为8%。

兔基质金属蛋白酶1MMP-1ELISA试剂盒/MMP-1试剂盒指标代测Rabbit matrix metalloproteinases 1 MMP 1 elisa kit/MMP 1 kit index generationKit is divided into two kinds of specifications of 48 t / 96 t, the standard curve of each experiment generally set upseven different concentrations, plus a blank hole, standard curve in all eight holes. Therefore, a 48 t kit can be used to measure up to 40 samples (do not repeat and once finished), a 96 t kit can be used to measure 88 samples at most (do not repeat and once finished). Can be based on the actual sample size and the experiment plan to choose the appropriate product specification.Colorimetric determination of conducted by enzyme standard instrument. Some colleagues might think, since by enzyme standard instrument, so at this time can be everything is all right, actually otherwise, because of the contemporary advanced enzyme standard instrument, there are more functions, improper use, the results will be hard to understand. Such as using the enzyme colorimetric determination after the instrument, there are a lot of negative determine the absorbance of away L value is negative; Or the determination of greatly increase the rate of false positives and so on. This is mainly not correctly understand and use the enzyme caused by the instrument.In addition, before joining the substrate began to color reaction, good is to check the validity of the substrate solution first, the fluid in both of A and B can be add 1 drop of clean empty plate holes or eppendorf tube, observe whether there is A color, if yes, then the substrate was bad. .opd as substrates, match after should be colored, otherwise can't use. TMB as substrate, the whole process of chromogenic reaction without light, the.opd as substrate, the need to avoid light. About the TMB and the.opd chromogenic reaction characteristics and attention points in front of the reference related chapters content. After the completion of the color reaction, adding acid termination reaction,oscillation after blending for the colorimetric determination or judge the results to the naked eye.基质金属蛋白酶1MMP-1原理的简要说明书：MMP-1(基质金属蛋白酶-1)，为MMPs家族，是依赖锌和钙的内肽酶，能够降解细胞外基质的所有成分。

基质金属蛋白酶3说明书
基质金属蛋白酶3（Matrix Metalloproteinase 3）是一种酶类蛋白质，属于基质金属蛋白酶家族。

它也被称为stromelysin-1或者proteoglycanase，是一种能够降解基质组分的酶。

基质金属蛋白酶3是由酶原前体产生的，经过外源酶的切割后活性化。

基质金属蛋白酶3在细胞外基质的重塑中起着重要的作用。

它能够降解胶原、纤维连接蛋白、弹力纤维和其他基质组分。

基质金属蛋白酶3在生理和病理过程中起着重要的调节作用。

它参与了胚胎发育、组织修复、纤维化和肿瘤的发展。

它的活性和表达水平受到多种因素的调节，包括生长因子、细胞因子和细胞外基质中的其他蛋白质。

基质金属蛋白酶3在许多疾病中具有重要的作用。

例如，在关节炎患者中，基质金属蛋白酶3的活性显著增加，导致关节结构的破坏。

此外，它还参与了心脏病、神经系统疾病和某些癌症的发展过程。

基质金属蛋白酶3可以通过多种技术进行检测和测量，包括酶活性测定、免疫组化和基因表达分析。

在使用基质金属蛋白酶3的相关试剂和产品时，必须严格按照产品说明书进行操作。

同时，需要遵循实验室安全规范和操作指南，以确保实验的准确性和安全性。

酪蛋白酶谱MMP（3/10）检测实验实验技术服务方法：基质金属蛋白酶（MMP）酪蛋白酶谱法（casein-zymography）电泳分析试剂是一种旨在通过酪蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下，观察并半定量深蓝色背景中的白色清晰的基质金属蛋白酶条带，根据分子量确定特异基质金属蛋白酶及其活性的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种细胞裂解萃取样品（动物、人体、植物、昆虫等）、培养上清悬液、血清和关节滑液或脑脊液等基质金属蛋白酶－1，3，7 以及12等活性及其抑制剂的检测。

【晶莱生物】实验技术背景：基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。

迄今为止发现的MMPs 至少有28 种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellular matrix）成分，同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissue resorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞浸入转移等。

根据降解的底物不同可将MMPs 分为4 大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13 主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11，主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。

体内绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs 的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs 以无活性的酶原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs 可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。

人基质金属蛋白酶-13（MMP-13）酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围检测范围：： 96T10µg/L -320µg/L使用目的使用目的：：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-13（MMP-13）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-13（MMP-13）水平。

用纯化的人基质金属蛋白酶-13（MMP-13）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入基质金属蛋白酶-13（MMP-13），再与HRP 标记的基质金属蛋白酶-13（MMP-13）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-13（MMP-13）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-13（MMP-13）浓度。

试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品（640µg/L ） 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。