荧光显微成像技术与应用共16页

光学显微成像技术在生物医药领域的应用随着生物医药领域的不断发展，越来越多的疾病需要从细胞层面进行研究和治疗。

在这个过程中，成像技术起到了重要的作用。

光学显微成像技术是一种非侵入性的成像技术，可以在生物样本的活体条件下进行。

本文将介绍光学显微成像技术在生物医药领域的应用及其发展趋势。

一、荧光成像技术荧光成像技术是通过活体样本内标记的荧光染料，将荧光信号转换成可视化图像的技术。

荧光成像技术可以用于细胞、组织、器官和整个生物体的研究。

其中，基于扩增出的荧光蛋白基因（GFP）和注射标记的荧光染料的技术最为常用。

在生物医药领域，荧光成像技术主要用于活细胞分子动力学和蛋白质互作的研究。

例如，荧光成像技术可以用于实时监测细胞分化、细胞凋亡和细胞移动等过程。

此外，荧光成像技术还可用于碳水化合物代谢通路和细胞信号通路、肿瘤细胞分裂等生物过程的研究。

二、切片显微成像技术切片显微成像技术是一种高分辨率的成像技术，可用于在细胞和组织层面上研究医疗、生物化学、生理学和病理学过程。

在成像期间，光束被聚焦在样本表面，然后通过样品的深度切片收集数据。

此外，它还可以用于从单个细胞到整个生物器官的研究，例如神经元的二元配对、心脏细胞收缩过程和器官发生等。

切片显微成像技术在生物医药领域中的应用有很多。

例如，利用该技术可以研究神经元、活体细胞和组织中的变化、神经元网络中的结构和功能等。

在肿瘤研究方面，切片显微镜成像技术可用于研究癌细胞的生长、扩散及其影响周围细胞的方式。

三、吸收成像技术吸收成像技术通过利用样品对不同波长的光的吸收来成像，这种成像技术主要是基于医学影像技术的回声成像和X射线成像。

在生物医药领域，其主要应用于深层组织和类脑组织成像。

吸收成像技术的应用十分广泛。

例如，可以用于测量生物组织中的氧气饱和度、血流量、血管完整性和生物组织的电磁阻抗等。

此外，吸收成像技术还可以用于实时监测生物体内的血管和血流动态，帮助临床医生实现早期诊断和治疗。

荧光显微技术
荧光显微技术
荧光显微技术是一种利用荧光染料标记生物分子并通过显微镜观察的技术。

它在生物学、医学、材料科学等领域有着广泛的应用，如细胞成像、蛋白质定位、基因表达分析等。

一、荧光染料的选择
荧光染料是荧光显微技术中最重要的组成部分，其选择应根据样品特性和实验需求进行。

常见的荧光染料包括偶氮染料、羰基化合物、环氧化合物等。

二、标记方法
1.直接标记法：将荧光染料直接与待检测分子结合，适用于小分子或表面易于修饰的大分子。

2.间接标记法：先将抗体或亲和素与待检测分子结合，再使用带有荧光标记的二级抗体或亲和素进行检测。

3.生物素-亲和素标记法：待检测分子上带有生物素，使用带有荧光标记的亲和素进行检测。

三、显微镜成像
1.激发波长：不同荧光染料的最大激发波长不同，应选择与荧光染料相匹配的激发波长。

2.荧光滤镜：使用适当的荧光滤镜可以增强信号和降低背景噪音。

3.成像方式：常见的成像方式包括单色成像、双色成像、多色成像等，可以根据实验需求选择合适的方式。

四、应用
1.细胞成像：通过荧光显微技术可以观察细胞内各种分子的分布和动态变化，如蛋白质、核酸、小分子等。

2.蛋白质定位：通过标记蛋白质上的特定结构域或标签，可以观察其在细胞内的定位和转运情况。

3.基因表达分析：利用荧光素染料标记基因表达产物，可以观察不同组织或条件下基因表达水平的差异。

4.材料科学研究：荧光显微技术也被广泛应用于材料科学领域，如纳米粒子形貌分析、材料表面性质研究等。

总之，荧光显微技术是一种非常重要的生物学研究工具，其应用范围广泛，未来还有着更广阔的发展前景。

显微荧光成像技术生命科学是一个充满活力的领域，包括生物学、医学、农学、生态学等诸多分支。

显微镜是生命科学研究中不可或缺的工具之一，而显微荧光成像技术则是显微镜技术的重要分支之一。

本文将围绕显微荧光成像技术展开阐述。

一、显微荧光成像技术的基本原理显微荧光成像技术是利用荧光分子在吸收一定波长的光后，能够发出较长波长（即红外、红光、黄光）的光的特性，来探测并分析样品中各种微观结构与分子的分布情况和相互作用。

从理论上讲，这些分子在不受到荧光激发的情况下是不会发光的。

因此，要实现荧光成像需要通过激发、显微观测、成像三个步骤来完成。

激发环节是荧光成像技术的起点。

荧光分子必须要由波长与其吸收光谱相吻合的光子作用下，才能在其内部发生电子的跃迁，发出荧光信号。

一般而言，荧光分子的激发波长与发射波长是不同的。

由此，通过双光子荧光激发技术，可以用一种比传统荧光显微镜的短波长更长的激发波长来对样品进行激发，使荧光分子针对测量目的进行有选择性的激发，大大减少光伤害，同时增加激光的渗透深度，解决深部显微成像的问题。

显微观察环节是荧光成像技术的重点。

显微荧光成像技术基于荧光分子的发射特性，即它们可以在可见光谱的较长波长区域发射出光，这种现象可以被显微镜观察到。

在显微荧光成像系统中，将样品置于显微镜下，并通过荧光染料激发样品，然后通过适当的荧光滤波器对荧光发射信号进行过滤，最后将信号捕获并显示在荧光显微镜上。

成像环节是荧光成像技术的末端。

荧光显微成像系统可以将荧光信号反射到图像传感器（如CCD）上，捕获图像数据，使用显微荧光成像图像处理软件对获得的图像数据进行分析和处理，处理结果可以被投影或与其他数据交互的形式展现。

二、显微荧光成像技术的应用显微荧光成像技术应用广泛，包括生命科学、药学、医学、农业、食品工业、生态学等领域。

一些具体的应用如下：1、生命科学领域显微荧光成像技术广泛应用于生命科学领域，它可以被用来研究生物体在不同行为状态下的荧光响应，如酶活性、细胞间相互作用、细胞家族、组织结构、线粒体功能等，进一步揭示生物体的结构、功能和相互作用等相关生物学问题。

宽场-共振能量转移-全内反射荧光的显微技术及其应用张少华;曹福元;胡茂琼;王建枝【期刊名称】《微循环学杂志》【年(卷),期】2005(015)002【摘要】1590年世界上第一台光学显微镜诞生，在随后的几百年间，显微科学取得迅猛发展。

人们逐渐地改进了成像质量，而且各种新的光学显微镜也应运而生。

生命科学中大量的事实表明细胞的动力学特征是起源于单个蛋白质分子的聚合和相互作用，对它的研究变得尤为重要。

但是传统的光学显微镜由于受到光瞳远场衍射效应的影响，存在分辨极限。

光学显微镜空间分辨极限约250nm。

【总页数】3页(P67-69)【作者】张少华;曹福元;胡茂琼;王建枝【作者单位】华中科技大学同济医学院病理生理学系,武汉,430030;华中科技大学同济医学院病理生理学系,武汉,430030;湖北省黄石理工学院医学院;华中科技大学同济医学院病理生理学系,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】Q6-33【相关文献】1.碳点-荧光素荧光共振能量转移体系在阿司匹林测定中的研究与应用 [J], 金文英;廖秀芬;陶慧林;赵颖;刘绍州;梁永敏2.碳点-荧光桃红荧光共振能量转移体系在铜离子检测中的应用研究 [J], 陶慧林;孙超;廖秀芬;徐铭泽;王海洋;易忠胜;覃宏伟3.胶束溶液中钙黄绿素-荧光桃红间荧光共振能量转移的研究及应用 [J], 陶慧林;朱仕毅;寿红娟;黎舒怀4.荧光共振能量转移-荧光寿命显微成像(FRET-FLIM)技术在生命科学研究中的应用进展 [J], 罗淋淋;牛敬敬;莫蓓莘;林丹樱;刘琳5.基于动态散斑照明的宽场荧光显微技术理论研究 [J], 尹君;王少飞;张俊杰;谢佳谌;陈宏宇;贾源;胡徐锦;于凌尧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

荧光染色技术在生物成像中的应用随着生物学领域的不断发展，生物成像技术也越来越成为研究生命科学的重要方法。

在这些生物成像技术中，荧光染色技术无疑是其中最为重要的一种技术。

荧光染色技术是通过将某种特定的分子或细胞结构标记成荧光，然后在适当的条件下进行显微镜成像，从而实现对生物样本的观察和研究。

荧光染色技术优点如下：1. 荧光染色技术具有高灵敏度和高分辨率，使得科学家能够观察到极小的生物结构和分子，并且可以在活细胞中进行观察。

2. 荧光染色技术对样品的破坏性小，不影响后续实验的开展。

3. 荧光染色技术的染色方法比较简单易行，同时也可以进行多种不同的染色。

在生物成像中，荧光染色技术的具体应用有很多，下面这些是其中的一些例子：1. 显微镜技术中的荧光染色技术在显微镜技术中，荧光染色技术常常被用来标记靶向特定蛋白质或细胞结构的分子探针，从而实现对细胞过程和分子机制的观察和研究。

例如，多个研究中都曾利用螢光標記來觀察蛋白質的表現、分佈和互動，這讓研究人員能夠更加深入地了解細胞內部的分子機制。

2. 荧光分子成像技术荧光分子成像技术是一种具有高灵敏度的非侵入性成像技术。

它能够利用荧光染色技术对肿瘤、心血管系统和神经系统等的生物组织进行成像，并为体内分子运动、聚集和交换的观察和研究提供了手段。

例如，利用荧光染色技术制备了磁性纳米颗粒，并成功用于细胞成像和癌症光动力治疗。

3. 荧光显微术技术荧光显微术是一种通过标记荧光物质对生物组织进行显微镜成像的技术，目前被广泛应用于生物学、医学和材料科学领域。

该技术利用荧光染色技术对特定目标标记进行成像，常用于研究生物体内的各种细胞、组织和器官结构，并为疾病的诊断和治疗提供了新的方法。

例如，荧光染色技术在神经移植中的应用，可以监测移植细胞的生命活动状态和分布位置，为治疗神经系统疾病提供了有力的工具。

总结一下，荧光染色技术作为一种重要的生物成像方式，在各种生物领域中具有广泛的应用前景。

荧光显微镜的用途
荧光显微镜是一种能够发射和感测荧光光的显微镜，它的用途广泛。

以下是一些主要的用途：
1. 细胞和组织显微分析：荧光显微镜能够标记特定的细胞结构、蛋白质、核酸和其他分子，使其在显微镜下可见。

这对于观察细胞和组织的结构和功能非常有用，例如研究细胞分裂、细胞信号传导和细胞死亡等过程。

2. 生物医学研究：荧光显微镜广泛应用于生物医学研究领域，如药物发现、癌症研究和神经科学。

通过使用特定的荧光染料或标记物，研究人员能够观察和测量细胞和分子的活动，从而了解疾病的发生和发展机制，并开发新的治疗方法。

3. 生物工程和遗传学：荧光显微镜可以用于研究基因表达、蛋白质合成和代谢通路。

通过标记特定的基因或蛋白质，研究人员可以确定其在细胞和组织中的位置和表达水平，从而了解生物体的功能和调控机制。

4. 材料科学和纳米技术：荧光显微镜可以用于研究纳米材料和纳米器件。

通过标记纳米粒子或分子，研究人员可以观察和分析其在材料中的分布和行为，从而优化材料的性能和应用。

总的来说，荧光显微镜是一种非常有用的工具，可以帮助研究人员观察和探究微观世界中的细胞和分子结构、功能和相互作用。

它在生命科学、材料科学和纳米技术等领域起着重要作用。

显微荧光光谱成像技术及应用理论说明以及概述1. 引言1.1 概述显微荧光光谱成像技术是一种非常重要的高分辨率光学成像技术，它可以同时获得样品的形态信息和荧光光谱信息。

通过将样品置于激发光源下，并利用样品中荧光分子特异性的发射特征，显微荧光光谱成像技术能够提供关于样品组成、结构和功能的详细信息。

这一技术在生物医学研究、材料科学与环境监测等领域都具有广泛应用前景。

1.2 文章结构本文主要分为五个部分来介绍显微荧光光谱成像技术及其应用。

首先，在引言部分进行概述，简要介绍该技术的背景和意义。

接着，在第二部分我们将详细介绍显微荧光光谱成像技术的原理，包括激发与发射过程以及影响信号质量的因素。

然后，在第三部分中我们将探讨该技术在生物医学研究、材料科学与环境监测领域中的实际应用案例。

接下来，在第四部分我们将讨论该技术的发展趋势以及面临的挑战，包括技术改进与创新、实验条件优化和数据解释方法等方面。

最后，在第五部分中对全文进行总结，并展望显微荧光光谱成像技术的未来。

1.3 目的本文的目的是全面介绍显微荧光光谱成像技术及其应用领域，并探讨其发展趋势和挑战。

通过深入了解这一技术，我们能够更好地应用它来研究样品的结构与功能，促进生物医学研究、材料科学和环境监测等领域的进步。

同时，通过探讨其发展趋势和挑战，我们可以为未来相关研究提供参考，并促进该技术在更广泛领域中的应用与创新。

2. 显微荧光光谱成像技术：2.1 原理介绍：显微荧光光谱成像技术是一种利用物质在受激发光下发射特定波长的荧光信号进行图像获取和分析的方法。

其原理基于样品中的荧光染料或标记物能够吸收外界激发光源的能量并发射出不同波长的特定荧光信号。

通过选择适当的激发波长和检测窗口，可以获取具有空间信息的多色荧光图像，从而实现对样品内部结构和组成的高分辨率成像。

2.2 仪器设备和操作流程：显微荧光光谱成像技术通常需要配备一台荧光显微镜、高性能探测器以及相关软件来进行数据处理与分析。

荧光显影成像技术荧光显影成像技术是一种利用特定荧光探针标记靶标分子，并利用荧光显影技术对荧光信号进行探测、记录和分析的生物分子检测方法。

该技术被广泛应用于分子生物学、细胞生物学、蛋白质化学和医学诊断等领域，成为生命科学研究中不可或缺的工具。

本文将全面介绍荧光显影成像技术的原理、应用、优缺点以及未来发展方向，以及该技术的最新进展。

一、荧光显影成像技术的原理荧光显影成像技术利用荧光分子在激发光作用下发射荧光信号的特性，通过特定试剂对荧光标记的生物分子进行专一性的探测。

该技术包括荧光标记、荧光显影和荧光成像三个步骤，具体原理如下：1.荧光标记荧光标记是对目标生物分子的化学修饰，包括直接化学修饰和间接荧光蛋白标记。

直接化学修饰包括荧光染料、荧光标记化合物和反应性荧光标记分子等，其中最常见的是荧光染料。

间接荧光蛋白标记则是通过重组蛋白技术将荧光蛋白序列与目标蛋白序列融合，形成融合蛋白。

2.荧光显影荧光显影是指在荧光标记的生物分子与荧光染料或荧光蛋白配体相结合后，通过特定的化学反应使其发生荧光信号的释放和增强。

荧光标记的生物分子与荧光染料或荧光蛋白形成复合物后，通过荧光显影剂引起荧光染料或荧光蛋白的荧光增强，使荧光信号更明显。

荧光显影剂包括荧光基团酯、异硫氰酸酯和进一步响应型荧光分子等。

3.荧光成像荧光成像是指通过荧光显微镜或成像仪等设备对荧光显影后的荧光标记进行成像和记录。

荧光成像设备包括荧光显微镜、融合蛋白成像、荧光光学成像和多光子荧光显微镜等。

通过荧光成像技术可以实现对荧光标记的靶标分子的实时监测、定位和定量分析。

二、荧光显影成像技术的应用荧光显影成像技术具有诸多应用，可用于检测细胞、分子和组织等样品，具有高灵敏度和高特异性等优点。

1.分子生物学中的应用在分子生物学中，荧光显影技术可以用于DNA和RNA分子的检测、定量和定位研究。

荧光末端标记技术可以用于同源重组、合成混合DNA和荧光原位杂交等技术。

荧光共振能量转移（FRET）技术可以用于研究DNA/RNA复合物的组装和氨基酸残基的相互作用等。

活细胞成像的方法与应用研究细胞是构成生命的基本单位，对于了解细胞内部的结构和功能非常重要。

活细胞成像技术的出现，为我们研究细胞提供了前所未有的机会。

本文将介绍活细胞成像的方法和应用研究。

一、荧光显微镜成像荧光显微镜成像是活细胞成像技术中最常用的方法。

这种方法的原理是将荧光染料或荧光蛋白标记到细胞内的特定分子上，然后观察它们在细胞内的行为。

由于荧光显微镜成像技术可以在较短的时间内获得高分辨率的图像，因此这种方法非常适合对细胞内分子的运动和相互作用进行研究。

此外，荧光显微镜成像技术还可以用来研究细胞内的钙信号、细胞凋亡等过程。

二、光片显微镜成像光片显微镜成像是利用光片显微镜对细胞进行成像的一种技术。

这种方法的原理是将细胞培养在光片上，然后在显微镜下观察细胞的行为。

由于可以观察到细胞在原始环境中的行为，因此光片显微镜成像技术非常适合对细胞自然的生理过程进行研究。

此外，光片显微镜成像技术还可以用来研究细胞的化学、物理环境对细胞行为的影响。

三、基因编辑技术基因编辑技术是最近出现的一种活细胞成像技术。

这种技术的原理是利用基因编辑工具（如CRISPR-Cas9）对细胞进行基因改造，使细胞表达荧光蛋白或表面标记分子。

通过这种方法，我们可以让细胞在原始环境中的行为得到精细的控制，并且可以对细胞内特定分子的行为进行研究。

四、应用研究活细胞成像技术已经广泛应用于细胞生物学、生物医学等领域。

在细胞生物学中，这种技术可以用来研究细胞分裂、细胞凋亡、钙信号、细胞内分子的相互作用和运动等过程。

在生物医学中，活细胞成像技术可以用来研究疾病的发生机制、筛选新药等。

总之，活细胞成像技术是近年来发展最快的生命科学技术之一，它为我们对细胞的结构和功能进行研究提供了新的途径。

在不断改进技术的同时，也需要加强对该技术在生物医学等领域的应用研究，以更好地服务于人类健康。

荧光显微镜成像技术的发展与应用荧光显微镜是一种重要的显微镜工具，它可以对活体细胞进行三维成像和追踪。

近几十年来，荧光显微镜成像技术在生物医学、医学诊断和药物研发中得到了广泛的应用。

本文将着重介绍荧光显微镜成像技术的发展历程和应用。

一、荧光显微镜成像技术的起源及发展荧光是强烈的荧光染料在受紫外线或其他激发源作用下所发出的光。

20世纪初，荧光染料被广泛应用于生物学领域。

1938年，G. Palade等人发现电镜下的胰岛细胞有个叫做“小颗粒”的结构。

1952年，Codon和夏斯曼成功地在已知DNA的组织中，用荧光化合物探针—烟酸腺嘌呤二核苷酸（NAD）标记了DNA。

1952年，Singer等人第一次使用荧光标记技术探究细胞膜的结构。

1953年，Zinsser等人使用荧光比色法检测结核杆菌。

这些荧光化合物和技术的不断发展，奠定了荧光成像技术的基础。

荧光显微镜的发明也是荧光成像技术发展的关键。

1949年，Zernike发明了相差显微术（DIC），极大地提高了光学显微镜的分辨率。

然而，由于生物组织自身存在一定的吸收和散射，平面成像存在局限性。

因此，人们开始开发三维成像技术。

1951年，Osterberg发明了普通荧光显微镜。

1970年，Davidovits发明了荧光光谱成像显微镜（FSIM），它可以对样品进行多种激发波长的荧光光谱成像。

1983年，Webb发明了双光子激发荧光显微镜（TPF），并获得了Nobel奖。

目前，由于光学与计算机领域的不断发展，荧光显微镜成像技术也在不断地更新换代。

二、荧光显微镜成像技术的应用领域荧光显微镜成像技术可以对生物样品进行多种成像方式，例如二维、三维、时间序列等多种成像。

它可以实时地观测活体细胞、动物和细菌等微观生物系统的特定结构和生理功能。

因此，荧光成像技术在生物医学、医学诊断和药物研发中得到了广泛的应用。

（一）生物医学中的应用荧光显微镜成像技术在生物医学中的应用主要包括：1.生物大分子的研究：荧光标记可以对分子发生的变化进行实时追踪和记录，因此荧光显微镜成像技术被广泛应用于蛋白质、细胞膜、DNA和RNA结构的研究。

光学显微镜的荧光成像与荧光定量分析荧光显微镜技术作为现代生物成像的重要手段，已经广泛应用于生物学、医学、化学等多个领域。

荧光显微镜技术不仅能够提供细胞和组织的形态信息，而且能够通过荧光定量分析，得到生物分子和细胞功能的精确数据。

一、荧光显微镜的成像原理荧光显微镜是利用荧光物质对特定波长光的吸收和发射特性，来观察和分析样品的一种显微镜。

其基本原理是：样品中的荧光物质在受到激发光（如紫外光或蓝光）的作用下，会吸收光能并跃迁到激发态；激发态的荧光物质经过一定时间后，会释放出光能并返回基态，这个过程称为荧光发射。

荧光显微镜通常由光源、激发光滤光片、物镜、荧光物质、发射光滤光片和检测器等组成。

光源发出的光通过激发光滤光片后，只允许特定波长的光透过，照射到样品上的荧光物质；荧光物质吸收光能后，发射出特定波长的光，通过发射光滤光片后，只允许特定波长的光透过，最后由检测器（如光电倍增管或电荷耦合器件（CCD））接收，并转换为电信号，经过放大和处理后，就可以在屏幕上看到荧光图像。

二、荧光定量分析荧光定量分析是利用荧光物质的荧光强度与样品中分析物浓度之间的关系，来定量分析样品中某种物质的含量。

荧光强度与分析物浓度之间的关系通常呈线性关系，通过标准曲线的制备，可以确定样品中分析物的浓度。

荧光定量分析的步骤通常包括：1.制备标准溶液：已知浓度的标准溶液，用于制备标准曲线。

2.样品处理：将样品中的分析物提取、纯化，并添加适量的荧光标记物。

3.荧光显微镜成像：使用荧光显微镜，在适当的激发光和发射光滤光片下，获取样品的荧光图像。

4.数据处理：通过测定样品的荧光强度，结合标准曲线，计算样品中分析物的浓度。

三、荧光成像与荧光定量分析的应用荧光显微镜技术在生物医学研究中有着广泛的应用，如细胞膜的研究、细胞骨架的研究、细胞信号转导的研究、蛋白质相互作用的研究、细胞周期调控的研究等。

通过荧光定量分析，可以精确测量样品中某种蛋白质的含量、某种药物的浓度等，为生物学和医学研究提供有力的数据支持。

光片荧光显微成像技术摘要：光片荧光显微成像技术因其独特的优点，受到广泛关注。

从光片荧光显微镜基础入手，介绍成像原理、发展历史、研究现状及应用展望。

关键词：显微成像，荧光成像；光片照明引言显微成像技术是现代生物医学研究的重要技术手段之一，显微荧光成像技术因其特异性标记及高灵敏度高对比度的成像，而受到广泛地应用。

光片荧光显微镜一种特殊的荧光显微镜，其显著提高了传统荧光显微镜的三维成像速度，降低了光漂白以及光毒性，使得科学家们能够长时间地观察生理状况下组织细胞的生命活动，对生命科学的研究具有重要意义。

1.光片显微镜的历史显微镜是一种古老的光学仪器，历经几百年发展，形成了多个分支，广泛地应用生命科学的各个领。

荧光显微镜是利用物质荧光特性进行观察的光学显微镜，具有检出能力高、能进行多重着色观察的特点，广泛地应用于生物医学领域。

长期以来，传统荧光显微镜受限于阿贝衍射极限，分辨率都不能突破200nm；其次，激发光的光漂白及光毒性无法实现样本的长时间观察；再者，常用于活细胞研究的共聚焦荧光显微镜的成像速度太慢；无法满足生物医学研究快速成像、高分辨的要求。

薄片光的概念最早是在1903年提出的，然而直到1993年Voie才用薄片光的原理开发了正交面荧光光学切片显微镜)，样品由薄片光扫瞄成像。

二十一世纪以来，光片照明显微镜发展非常迅速，由于采用面探测的成像方式，光片照明系统能够快速获得高分辨率的三位层析结构成像，和共聚焦相比，对整体标本的光毒性小，光漂白低，适合长时称活体成像。

2004年Stelzer发明了选择薄片光显微镜,SPIM可以三维高分辩率高穿透深度成像。

2008年Stelzer改进了SPIM，改进版的SPIM可以对斑马鱼胚胎进行24小时成像并追逐胚胎发育过程中的细胞位移和分裂。

2014年，光片荧光显微镜被Nature Mehtods列入十大新技术之列，深刻改变了生物医学观察方式。

2.成像原理及结构光片荧光显微成像技术，LSFM或者selective plane叫umination microscopy，SPIM）通过对光片激荧光的宽场成像，该技术综合了成像速度和空间分辨率的优势，极小的光损伤和光漂白，广泛应用于生物样品的长时间动态活体多维成像。