杀菌剂联合毒力测定共15页

29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定摘要：在实验室内，采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果，采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。

结果表明，有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力较强（Ec50值相对抑制率计算公式如下：抑菌率=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径-菌饼直径×100%。

1.2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定方法菌液的制备：将番茄青枯病菌在LB斜面上活化，移入50mLLB培养液中，在28℃下振荡（150r/min）培养过夜。

用无菌水将番茄青枯病菌菌液稀释至浓度约为106cFU/mL，备用。

纸碟测定方法参照文献[12-15]：将29种杀菌剂分别制成浓度为1000、100、10、1mg/L，吸取20μL在LB平板中央，每处理重复3皿。

设清水对照。

用上述番茄青枯病菌稀释液（106cFU/mL）喷雾后，28℃培养过夜，调查抑菌圈直径，计算相对抑制率。

应用Excel软件处理系统求出各单剂毒力回归方程、Ec50值及相关系数。

2结果与分析2.1杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力测定采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果。

2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。

结果表明，有3种杀菌剂对番茄青枯病菌有较强的毒力，其Ec50值均小于10mg/L（表3、图2），其中3%中生菌素的毒力最强，Ec50值为3.3742mg/L。

其余26种杀菌剂对番茄青枯病菌不表现毒力。

表33种杀菌剂对番茄青枯病菌的室内毒力测定结果药剂名称毒力回归方程相关系数（r）Ec50（mg/L）3%中生菌素y=7.10x+1.250.96823.374280%代森锰锌y=5.58x+0.830.97565.58872%春雷霉素y=4.11x+1.210.94198.35873结论与讨论番茄具有较高的营养价值，深受广大消费者的喜爱。

七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定方案，为番茄早疫病的防治提供科学依据，制定出切实可行的防治措施。

1 材料与方法1.1材料1.1.1供试菌株番茄早疫病病原菌株采集于豫北地区番茄种植大棚中的病果，经组织分离、纯化获得病原菌［10］。

1.1.2试验药剂50%异菌脲（病可丹）可湿性粉剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%氯溴异氰尿酸（比秀）可湿性粉剂为以色列海法作用保护有限公司生产，80%丙森锌（好锌泰）水分散粒剂为陕西美邦农药有限公司生产，10%苯醚甲环唑（病可丹）水分散粒剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%醚菌酯（信赖）可湿性粉剂为陕西美邦农药有限公司生产，32.8%烷基腈氧基醌（凯银）水分散粒剂、35%腐霉利悬浮剂为宜宾川安高科农药有限责任公司生产。

1.2方法1.2.1杀菌剂单剂毒力测定将7种杀菌剂单剂与PDA培养基充分混匀，配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00mg/L系列浓度的平板。

采用菌丝生长速率法测定，用5mm打孔器在培养6d后的番茄早疫病菌平板上打孔，用镊子取菌丝面向下接种在含药PDA培养基上，每皿1个菌碟，28℃倒置培养，以去离子水作为对照组，每个处理设3次重复，于接种后第3天检查菌丝生长情况并用十字交叉法测量菌落生长直径，通过菌丝生长抑制率值和各药剂浓度对数值间的线性回归性进行分析，求出各菌株EC50并计算相对抑菌率。

抑菌率计算方法为每个菌落使用十字交叉法测量2次，取其平均数作为菌落的大小。

计算7种杀菌剂对菌丝生长的抑制百分率，公式如下：菌落增长直径=菌落测量直径-菌盘直径抑菌率=（对照菌落增长直径-含药培养基上菌落增长直径）/对照增长菌落直径x100%[11]以浓度对数为横坐标（x）,相对抑制率几率值为纵坐标（丫），求出各药剂对供试菌株的毒力回归曲线方程y=a+bx、相关系数r与有效抑制浓度（EC50）。

根据EC50分析比较不同杀菌剂对供试病菌菌丝生长的影响[12]。

中国园艺文摘 2018年第3期5种杀菌剂对桃炭疽病菌的毒力测定胡晓颖，赵 杰（上海市浦东新区农业技术推广中心，上海 201201）摘 要：以桃炭疽病菌为试验菌，采用生长速率法，测定5种杀菌剂对病菌的毒力，结果表明：咪鲜胺锰盐、氟啶胺、多菌灵、苯醚甲环唑和吡唑醚菌酯5种杀菌剂都具有较高的毒力。

咪鲜胺锰盐与氟啶胺的联合毒力测定结果表明：咪鲜胺锰盐和氟啶胺按3∶1和6∶1复配表现为增效作用，咪鲜胺锰盐和氟啶胺按1∶6、1∶3和1∶1复配表现为相加作用。

关键词：杀菌剂；桃炭疽病菌；毒力测定水蜜桃是我国的主要果品之一，也是上海市浦东新区的主要果树，常年种植面积0.2…万余hm2。

桃炭疽病是水蜜桃的主要病害，能侵染桃树枝梢、叶片和果实[1]，在上海市浦东新区以秋季叶片受害最重，造成叶片穿孔或枯焦，严重时导致大量叶片枯死和早落，影响花芽和结果枝充实，从而影响翌年结果产量。

科技工作者在桃树炭疽病菌生物学特性和防治方面开展大量工作[2-5]，但不同地区和寄主存在差异。

本文以当地桃炭疽病菌为试验材料，通过开展杀菌剂的毒力测定，筛选出高效低毒药剂，为防治该病害提供技术参考。

1 材料与方法1.1 供试病菌从浦东新区盛果期桃树病叶上分离获得桃炭疽病菌[Colletotrichum gloeosporioides…(Penz.)…Sacc.]，病菌于PDA培养基上25℃培养5…d后用于毒力测定。

1.2 供试药剂50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂(江苏辉丰农化股份有限公司)、50…g/L氟啶胺悬浮剂(浙江石原金牛农药有限公司)、50%多菌灵悬浮剂（江苏龙灯化学有限公司）、30%吡唑醚菌酯悬浮剂(深圳诺普信农化股份有限公司)、10%苯醚甲环唑水分散粒剂(江苏丰登农药有限公司)。

1.3 试验方法1.3.1 毒力测定方法…采用生长速率法[6]：将以上第一作者简介：胡晓颖(1979-)，女，农艺师；从事作物栽培研究。

通讯作者：赵 杰，硕士，高级农艺师。

11种杀菌剂对白术根腐病病菌的室内毒力测定白术（Atractylodes macrocephala Koidz.）属菊科草本植物，被列为中医四大名贵药材之一，主要以根入药，具有健脾益气、燥湿利水之功效[1]。

近年来，贵州省白术种植面积不断扩大，由于连作，导致白术根腐病发生日趋严重，成为白术生产栽培中主要的病害之一。

白术根腐病主要病原菌为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）[2-4]，引起干腐。

然而，刘英慧等[3]、臧少先等[4]、段明华等[5]报道还包括半裸镰刀菌（F.semitectum）、茄病镰刀菌（F.solani）、燕麦镰刀菌（F.avenaceum）、木贼镰刀菌（F. equiseti）、串珠镰刀菌（F. moniliforme Sheldon）和立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）等病原，常引起根茎腐烂致死苗，重病田块死苗率高达80%以上，严重制约了贵州白术产业的发展。

为了筛选出防治白术根腐病的杀菌剂，本试验在室内选择了几种杀菌剂对F. osysporum进行了毒力测定，为田间防治提供依据。

1 材料方法1.1 供试病原菌白术根腐病标样采自贵州省开阳县，用组织分离法[6]获得病原菌。

在PDA培养基上进行培养，纯化后将试管保存于4 ℃下备用。

经鉴定为尖孢镰刀菌F. oxysporum。

1.2 供试药剂供试药剂共11种，药剂名称、生产厂家及试验浓度详见表1。

1.3 毒力测定利用生长速率法对菌丝生长进行室内毒力测定。

确定药剂试验浓度后并配制供试药剂母液，按照系列稀释的方法将供试药剂加入溶化并冷却至60 ℃左右的PDA培养基中，摇匀后制成不同浓度梯度（表1）的含药平板。

将待测定菌株接种于PDA平板上于28 ℃培养4 d，用打孔器在菌落边缘打块，菌饼直径为5 mm，将这些菌饼转接于有毒培养基中央，带菌丝一面朝下，以加等量无菌水的PDA培养基为空白对照。

每个药剂设6个处理，4次重复，28 ℃恒温培养5 d，待对照的菌落接近长满培养皿，用“十”字交叉法测量各处理菌落直径，取平均值，计算抑制率。

十种杀菌剂对当归根腐病菌的室内毒力测定随着当归栽培技术的不断提高和盆栽种植规模的扩大，当归根腐病菌所引起的根系腐烂病害已成为制约当归产量和品质的主要因素。

为了有效控制当归根腐病菌，研究人员提出了一系列杀菌剂对腐病菌的室内毒力测定方法，以期通过对不同杀菌剂的筛选和配比，达到最佳的防治效果。

本文将重点介绍十种常见的杀菌剂对当归根腐病菌的室内毒力测定实验，以期为当归栽培提供有效的病害防治方法。

实验材料和方法实验材料：1. 当归根腐病菌：采集自感染当归根部的病原菌培养物；2. 十种常见杀菌剂：包括环鲨灵、霉多灵、氯硝柳胺、多菌灵、敌草枯、腐霉灵、红霉素、代森锰锌、硫酰脲、叠氮琥胺；3. 培养基：马铃薯葡萄糖琼脂培养基。

实验方法：1. 菌种孢子的制备：将感染当归根的病原菌培养物涂布在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，培养4-5天后，取下表面的孢子悬液备用；2. 杀菌剂浓度的选择：根据杀菌剂的标准浓度，制备不同浓度的杀菌剂溶液；3. 注意实验中的消毒措施，确保实验的纯净性；4. 实验组设置：取一定浓度的病原孢子悬液，分别与十种杀菌剂溶液混合，装入培养皿，设立空白对照组和对照组；5. 培养条件：在25-28℃、湿度80%-90%的条件下培养7-10天；6. 实验结果的观察和记录：观察培养皿上病原菌的生长情况，记录每种杀菌剂对病原菌的抑制效果。

结果与分析实验结果显示，十种杀菌剂对当归根腐病菌的抑制效果存在差异。

多菌灵和敌草枯的抑菌效果最好，病原菌的生长受到了明显的抑制；硫酰脲也具有一定的抑制效果，病原菌的生长速度较慢；其他杀菌剂对病原菌的抑制效果相对较弱，部分杀菌剂甚至无法有效抑制病原菌的生长。

根据实验结果，可将十种杀菌剂按照其抑制效果和毒力大小分为三个等级：优秀类（多菌灵、敌草枯）、一般类（硫酰脲）、较弱类（其余七种杀菌剂）。

在实际的防治过程中，应该根据病情的轻重程度和杀菌剂的毒力大小，选择合适的杀菌剂进行配比和使用，以期达到最佳的防治效果。

第一单元：农药生物测定与田间药效试验1.杀菌剂生物测定（Bioassay of fungicides）利用病原菌或感菌生物体对杀菌剂的反应，来确定杀菌剂效力（毒力，药效）的农药生物测定。

2.杀菌剂的毒力测定方法（1）基于离体平板培养的毒力测定方法（2）活体测定法（3）组织筛选测定法（1）基于离体平板培养的毒力测定方法①孢子萌发测定法原理：在载玻片或平板上，通过滴加、喷施等方法将药液施于其上，然后滴加一定浓度的孢子悬浮液，经过一定时间培育后在显微镜下观察孢子的萌发率。

一般在低倍镜下，每处理随机检查200个孢子。

毒力越大的药剂，孢子萌发抑制率也越大。

%100⨯=检查孢子数萌发孢子数孢子萌发率%100-⨯=对照萌发率处理萌发率对照萌发率孢子萌发抑制率（1）基于离体平板培养的毒力测定方法②抑菌圈法此法先将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与培养基混匀，待混合物冷却后，在培养基表面利用各种方法（管碟法、滤纸片法、孔碟法）使药液和培养基接触，培养一定时间后，由于药剂的渗透扩散作用，施药部位周围的病原菌被杀死或生长受到抑制，从而产生抑菌圈。

毒力越大的药剂，抑菌圈也越大。

该方法所用药剂需有较好的水溶性。

（1）基于离体平板培养的毒力测定方法③生长速率测定法此法的原理是趁热在培养基中加入药液，混合均匀后冷却，然后在无菌条件下将病原菌接入装有培养基的培养皿中央，经过一定时间培育后观察病原菌菌丝的生长情况。

毒力越大的药剂，菌丝的生长越缓慢。

此法多用于不产孢子或产孢子量少而菌丝较密的真菌。

病原菌生长速率的表示方法有2种：①菌落达到一定大小所需的时间；②单位时间内菌落的直径大小。

该方法的优点是操作简便，适用范围广，重复性好。

但对病原菌要求严格，病菌易于培养，生长较快且边缘整齐，产孢子缓慢；供试药剂遇热不易分解。

（1）基于离体平板培养的毒力测定方法④对峙培养法将天然提取物及病原菌同时放在同一个有培养基的培养皿的两边，经过一定时间培育后观察菌丝生长的情况。