农产品快速检测技术W3106-4 腐竹中二氧化硫的快速检测-微教材

一、二氧化硫快速检测（一）二氧化硫快速检测箱1、取代表性样品用剪刀剪碎。

2、称取2克于样品杯中，加入20毫升水，浸泡10分钟，可用吸管轻轻搅拌。

3、在比色皿中加入1.6毫升蒸馏水（约1/3高度），用吸管吸2小管样品处理液（约0.4毫升）加入。

4、依次加入3滴检测液A和3滴检测液B（注意顺序）。

5、稍振荡，放置8分钟，与色卡对比，直接判断样品二氧化硫含量。

（二）二氧化硫快速检测仪1、取20克左右样品剪碎混匀。

2、称取1克于玻璃烧杯中，加入19毫升蒸馏水，超声（35瓦功率）10分钟。

3、吸取样品处理液1毫升到比色皿中，加入1.5毫升蒸馏水。

4、加入3滴检测液A，混匀，放入仪器调零。

5、取出，加入3滴检测液B,摇匀。

6、静置5分钟（精确到秒），振荡混匀，放入仪器相应通道中检测。

适用范围：啤酒≤10mg/kg;酸菜罐头、竹笋罐头、蘑菇、表面处理的鲜水果、复合调味料、果蔬汁、果酒、葡萄酒≤50mg/kg;水果干类、粉丝、粉条、饼干、可可制品、糖果、盐渍蔬菜、食糖≤100mg/kg;干制蔬菜、黄花菜、腐竹、油皮、淀粉糖≤200mg/kg;蜜饯、果脯≤350mg/kg;二、吊白块快速检测（一）吊白块快速检测箱1、取代表性的待测样品5克于样品杯中，再加入20毫升蒸馏水，振荡，浸泡10分钟。

2、用一次性吸管吸取1管（约250微升）浸泡液到多孔条中。

3、滴加3滴检测液A和3滴检测液B,振荡混匀。

4、1-2分钟后再加入1滴检测液C，放置1分钟，观察颜色变化，进行结果判断。

（二）吊白块快速检测仪1、取20克左右待测样品剪碎混合。

2、用天平称取2克于烧杯中，加18毫升蒸馏水或纯净水。

3、加3滴检测液A，沸水浴加热5分钟，放入冷水中冷却，再置于超声波中超声10分钟。

（若样品浑浊建议用滤纸过滤后取滤液。

）4、取1.2毫升样品处理液到比色皿中，加入6滴检测液A和3滴检测液B，混匀后马上放入仪器相应的通道中调零。

5、取出，放置3分钟后加入3滴检测液C，混匀。

《农产品/食品快速检测技术》课程-微教材边学边练任务：分光光度法（酶抑制率法）快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留样品：小青菜或西葫芦参考标准：中华人民共和国国家标准《GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测》1、列出你完成此任务的思路要点：物品准备，设备调试，检测操作。

2、列出物品准备清单设备：食品安全现场快速检测仪、金属浴（可用水浴锅替代）和天平试剂：农残缓冲液、胆碱酯酶液、显色剂、底物，其中缓冲液、显色剂和底物都需要提前配制。

农残缓冲液配制，从试剂盒中取出一袋缓冲液，全部倒入烧杯中，加入蒸馏水，搅拌溶解，转入容量瓶，定容至500mL，转移入试剂瓶中备用。

显色剂配制，从试剂盒中取出一瓶显色剂，加入25mL缓冲液，振摇溶解，备用。

底物配制，从试剂盒中取出一瓶底物，加入12mL蒸馏水，振摇溶解，备用。

其它物品：样品瓶、菜板、剪刀、镊子、试管架、记号笔等。

3、完成设备调试要点：水浴锅或金属浴温度调至37℃。

打开食品安全快速检测仪，进入农药残留检测方法模块。

4、完成对照溶液测试要点：先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。

加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3min的吸光度变化值∆A0。

5、完成样品溶液测试要点：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液，振荡1 min～2min，倒出提取液，静置3 min～5min，待用。

于试管中加入.5mL样品提取液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。

加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3min的吸光度变化值∆A t。

《农产品/食品快速检测技术》课程-微教材知识讲解1、己烯雌酚的应用及残留己烯雌酚(Diethylstilbestrol，DES) 是一种人工合成的雌性激素，其效用明显，价格便宜。

己烯雌酚在促进动物蛋白质的合成代谢、提高动物日增重和减少脂肪等方面效果明显，因此一直被作为一种动物生长促进剂用于猪、牛、羊、鸡等畜禽饲料中。

20 世纪70 年代末，国际癌症研究机构( IARC) 研究发现，DES 是一种致癌物质，会对人体健康产生严重危害，甚至可诱发人体产生癌变。

从细胞生物学角度分析，己烯雌酚对生物体的破坏作用具体表现为：改变DNA 的合成时间；增加或诱导姊妹染色单体的交换；抑制依赖于GTP 的微管蛋白自组装，通过与微管蛋白的特异结合，阻止微管和纺锤体的形成，从而阻碍有丝分裂过程中染色体的分离，引起细胞形变；抑制细胞增殖，诱导产生非整倍体和多倍体。

作为一种饲料添加剂，DES 能够在动物源性食品如：肝脏、肌肉、蛋、奶中残留，并通过食物链引发动物和人的癌变，起少儿的发育早熟以及男性女性化。

己烯雌酚对人类和环境的危害是显而易见的，由于使用DES 带来的经济利益显著，因此违法滥用DES 的现象仍然存在。

因此，1979年开始包括我国在内的世界各国开始严格控制DES作为治疗药物使用。

并禁止使用己烯雌酚作为动物饲料添加剂（农牧发[2001]24号）。

欧盟从1986年禁止用于食品动物并限制进口其他国家用过该药的食品动物。

2015年2月6日中华人民共和国农业部发布《2015年度动物性产品中兽药残留监控计划》（农医发[2015]5号），对己烯雌酚在动物性食品中要求零检出。

2、竞争酶联免疫吸附技术的原理1971 年瑞典的Engvall 等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体吸附抗原/抗体，建立了酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked Immunosrbent Assay，简称ELISA），后来人们改用板式反应孔进行ELISA，大大地提高了实验通量。

腐竹中二氧化硫残留量的测定腐竹是一种食用菌，在生产过程中，可能会含有二氧化硫残留。

二氧化硫是一种有害物质，如果摄入过多可能会对人体造成危害。

因此，在检测腐竹中二氧化硫残留量时，应采用专业的测定方法。

常用的测定腐竹中二氧化硫残留量的方法有两种：一种是使用高效液相色谱法(HPLC)，另一种是使用硫蒸气还原法。

高效液相色谱法(HPLC)是一种常用的分析技术，它可以快速准确地测定腐竹中二氧化硫的残留量。

测定步骤如下：
1.准备样品：将腐竹样品研磨成粉末，然后用溶液浸泡，使二氧化硫溶于溶液中。

2.进行分析：将溶液通过高效液相色谱仪进行分析，根据色谱图可以得到二氧化硫的含量。

硫蒸气还原法是另一种常用的测定腐竹中二氧化硫残留量的方法。

测定步骤如下：
3.准备样品：将腐竹样品研磨成粉末，然后在无氧环境下用硫酸进行氧化，使二氧化硫放出。

4.进行分析：将二氧化硫放入硫蒸气还原仪中进行分析，根据硫蒸气的浓度可以得到二氧化硫的含量。

这两种方法都可以用来测定腐竹中二氧化硫残留量，但是需要注意，这些方法都需要专业的仪器和技术人员才能进行操作，不能自行进行测定。

二氧化硫的快速检测-(二氧化硫速测试剂盒与速测管使用说明) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1方法注解二氧化硫的快速检测（二氧化硫速测试剂盒与速测管使用说明）?方法一、试剂盒快速滴定法方法编号：CDC-2022 1检测意义：二氧化硫残留量是亚硫酸盐在食品中存在的计量形式，亚硫酸盐主要包括亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、低亚硫酸钠（又名保险粉)、焦亚硫酸钠、焦亚硫酸钾和硫磺燃烧生成的二氧化硫等。

这些物质于食品中解离成具有强还原性的亚硫酸，起到漂白、脱色、防腐和抗氧化作用。

但用量过大会导致胃肠道反应，影响钙磷吸收，免疫力低下，尤其是加入到不允许加入的食品中时，其潜在的危害性就更大。

2适用范围：本方法适用于食品中二氧化硫的快速检测。

3方法原理：样品中的二氧化硫以游离和结合型存在，加入氢氧化钾使之破坏其结合状态，并使之固定。

加入硫酸又使二氧化硫游离，然后用碘标准溶液滴定。

到达终点时，过量的碘即与指示剂作用生成蓝色复合物。

根据碘标准溶液的消耗量计算出二氧化硫的含量。

4样品处理无色水溶性固体样品（如白砂糖、冰糖、果糖等）：准确称取2.0g样品，置入具塞三角瓶中，加入10～20mL蒸馏水或纯净水，加入5滴1号碱性试液，盖塞振摇溶解后待测。

水不溶性固体样品（如粉丝、竹笋、干果、干菜、蘑菇罐头等）：取适量样品研磨或捣碎，准确称取2.0g样品，置入具塞三角瓶中，加入蒸馏水或纯净水，加入10滴1号碱性试液，盖塞后振摇2分钟或用超声波提取器提取30秒，如果样品粘性较大（葡萄干等），应溶解成絮状形成，必要时采用玻璃棒助溶，将溶液用滤纸过滤，或静置后用刻度吸管直接吸取得到澄清溶液，放入另一个三角瓶中待测（此时的样品取样量M=2×10/50 =0.4g）。

5测定：在待测液的三角瓶中加入3滴2号试液（酸液），如果样品在处理时未从中分取一部分溶液测定，在待测液的三角瓶中加入5滴2号试液（保证测定是在酸性溶液中进行）；盖塞轻轻摇动50次，加入3～5滴3号试液（指示液），将棕色瓶中的4号试液倒入到备用空滴瓶中，用此滴瓶对三角瓶中的溶液进行直立式滴定，每滴一滴试液后都要摇动几下，滴至出现蓝紫色并30秒不褪色为止，记录4号试液消耗的滴数。

《农产品快速检测技术》课程-微测试一、单选题1、GB 2760－20011《食品添加剂使用标准》规定，腐竹中亚硫酸盐类漂白剂的最大使用量以二氧化硫残留量计，不得超过（）mg/kg。

A．100B．200C．300D．400参考答案：B难度：低2、FAO和WHO联合食品添加剂专家委员会对二氧化硫类物质作为食品添加剂的危险性评估为：二氧化硫的日容许摄入量(ADI)为（）mg/kg 体重。

A. 0-0.5B. 0-0.7C. 0-0.9D. 0-1.2参考答案：B难度：低3、亚硫酸盐能消耗食品组织中的氧，抑制（）微生物的活性，并抑制微生物活动所需酶的活性，从而达到食物防腐的目的。

A. 厌氧B. 好氧C. 兼性厌氧D. 兼性好氧参考答案：B难度：中二、多选题1、在食品的生产加工过程中，经常加入（）等，使食品褪色和免于褐变，改善外观品质，延长保质期。

A．三氧化硫B．二氧化硫C．亚硫酸盐D．硫酸盐参考答案：B；C难度：中三、判断题1、在食品加工过程中，利用二氧化硫和亚硫酸盐类的氧化性，能有效地抑制食品加工过程中的非酶褐变。

参考答案：T难度：中2、在水果、蔬菜等新鲜植物性食物中，亚硫酸盐由于可以抑制多酚氧化酶的活性，防止苹果、马铃薯、蘑菇等的褐变，因此干制食品时常用于控制果蔬的褐变。

参考答案：T难度：低四、填空题1、二氧化硫及亚硫酸盐易与食品中的糖、蛋白质、色素、酶、维生素、醛、酮等发生作用，并以的二氧化硫残留在食品中。

参考答案：游离型和结合型难度：中2、我国《食品添加剂使用卫生标准》对二氧化硫类物质在各类食品中的使用范围、使用量及做出了明确的规定。

参考答案：允许最大残留量难度：中五、简答题1、简述二氧化硫现场快速检测试剂盒的检测原理和特点。

参考答案：二氧化硫现场快速检测试剂盒的检测原理是食品中的二氧化硫与显色剂反应生成有色化合物，采用目视比色分析方法，直接在二氧化硫快速检测色阶卡上读出食品中二氧化硫的含量。

该仪器具有操作简单、使用方便、可随身携带、即时现场检测、检测速度快(10~15 min)、样品和试剂用量少、无污染等优点，具有广阔的应用前景。

《农产品/食品质量安全检测技术》课程-微教材微课编号W2207 微课名称金黄色葡萄球菌检测意义及快速检测原理所属模块生物安全快速检测子模块微生物快速检测关键词金葡菌；检测意义；快速检测原理是否通用√通用农产品食品是否重点建设是√否微课类型讲授型微课形式访谈式教学设计模式角色扮演法教学目标能列举金黄色葡萄球菌的特点, 包括形状、大小、特殊结构、生活环境及抵抗力能说出金黄色葡萄球菌的检测意义能说出金黄色葡萄球菌快速检测原理教学内容知识点技能点1.金黄色葡萄球菌的特点2.金黄色葡萄球菌的检测意义3.金黄色葡萄球菌快速检测原理3、金黄色葡萄球菌快速检测原理知识讲解1.金黄色葡萄球菌的特点金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌, 属于葡萄球菌属, 是革兰氏阳性菌的代表, 可引起局部化脓感染, 也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等, 甚至败血症、脓毒症等全身感染。

典型的金黄色葡萄球菌为球形, 直径0.8μm左右, 显微镜下排列成葡萄串状, 无芽孢、无鞭毛, 大多数无荚膜。

金黄色葡萄球菌营养要求不高, 在普通培养基上生长良好, 需氧或兼性厌氧, 最适生长温度37℃, 最适生长pH 7.4。

金黄色葡萄球菌可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖, 产酸不产气。

金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性, 可在10%-15%NaCl肉汤中生长；耐热性强, 加热70℃1h, 80℃30min不被杀死；耐低温, 在冷冻食品中不易死亡；耐高渗, 在含有50%-66%蔗糖或15%以上食盐食品中才可被抑制。

金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力, 对磺胺类药物敏感性低, 但对青霉素、红霉素等高度敏感。

2.金黄色葡萄球菌的检测意义金黄色葡萄球菌广泛分布于自然界, 如空气、土壤、水等。

因此, 食品受到污染的机会很多。

美国疾病控制中心报告, 由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位, 仅次于大肠杆菌。

金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题, 由于金黄葡萄球菌能产生肠毒素, 故一旦污染食品, 在合适的环境下, 该菌可大量繁殖, 并产生肠毒素, 一旦食用了被该菌污染的食物后极易引起食物中毒, 会出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等急性胃肠炎症状, 严重的会导致死亡。

农产品与食品质量检测技术教学资源库
《农产品/食品快速检测技术》课程-微拓展
1、课外阅读
[1] 尹洁,朱军莉,励建荣. 食品中二氧化硫的来源与检测方法[J]. 食品科技,2009,34(11): 292-296.
[2] 王丽丽,纪淑娟,李顺. 食品中二氧化硫及亚硫酸盐的作用与检测方法[J].食品与药品, 2007,9( 02) : 64-66.
[3] 张静,马占玲,汪莹,李宁宁,陈思,励建荣. 食品中亚硫酸盐的毒性和检测方法综述[J]. 食品安全质量检测学报, 2015, 6(08):3212-3215.
2、常见问题
Q1：二氧化硫及其盐类的残留超标主要是人为过量添加导致，那如何理解食品中二氧化硫的内源性生成。

A1：研究发现，人为未添加任何亚硫酸盐等添加剂的情况下，某些食品在发酵过程中也会产生亚硫酸盐。

在植物体的生长过程中，大气中的二氧化硫会通过植物体的叶面气孔进入植物体内，其他土壤或水中的结合态的二氧化硫也会通过植物的吸收作用进入到植物体内。

进入植物体的二氧化硫，很容易和植物体内的醛酮类化合物特别是糖类化合物等发生反应生成结合态的亚硫酸，所以植物体内都有一定含量的游离态的和结合态的二氧化硫。

动物在生长过程中，由于进食植物，体内也会积累一定量的二氧化硫。

所以动物食品和植物食品都含有一定量的天然来源的二氧化硫。

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《农产品/食品快速检测技术》课程-微测试一、单选题1、（）具有很好的漂白、抗氧化和防腐等作用，还能掩盖发霉的蜜饯半成品、银耳和虾仁等霉斑。

A．二氧化碳B．二氧化硫C．硫化氢D．二氧化氮参考答案：B难度：中2、下列物质中属于食品添加剂的是（）。

A. 甲醛B. 硼砂C. 二氧化硫D. 吊白块参考答案：C难度：低3、葡萄酒在发酵过程中有充二氧化硫或用溶有二氧化硫的水来做（）。

A. 漂白剂B. 防腐剂C. 抗氧化剂D. 增色剂参考答案：B难度：中二、多选题1、食品中二氧化硫的来源主要有（）。

A．食品外源性生成B．食品添加剂外源性添加C．食品添加剂内源性添加D．食品内源性生成参考答案：B；D难度：中三、判断题1、二氧化硫及其衍生物对人体的各种系统、器官、组织都会产生不利的影响。

参考答案：T难度：中2、人体长期摄入二氧化硫及亚硫酸盐等会破坏维生素B1，影响生长发育，易患多发性神经炎，出现骨髓萎缩等症状，从而产生慢性毒性。

参考答案：T难度：低四、填空题1、硫磺在燃烧时可产生二氧化硫气体，能起的作用，使食品表面颜色显得白亮、鲜艳。

参考答案：漂白、保鲜食品难度：中2、常用的二氧化硫添加剂有、亚硫酸氢钠、低亚硫酸钠和焦亚硫酸钠等。

参考答案：亚硫酸钠难度：中五、简答题1、二氧化硫对人体的危害主要有哪些？参考答案：人体长期摄入二氧化硫及亚硫酸盐等会破坏维生素B1，影响生长发育，易患多发性神经炎，出现骨髓萎缩等症状，从而产生慢性毒性；长期食用硫磺熏蒸的食品，会造成肠道功能紊乱，从而引发剧烈腹泻、头痛，损害肝脏，影响人体营养吸收，严重危害人体的消化系统健康。

亚硫酸盐还会引发支气管痉挛，食用过量可能会造成呼吸困难、呕吐、腹泻等症状，气喘患者食入过量，易产生过敏，会引发哮喘，“亚硫酸盐还是杀伤力巨大的致癌物质”(央视每周质量报告) 。

此类漂白剂还具有掩盖发霉的蜜饯半成品、银耳等食品的霉斑的作用，因此经过此方法处理过的产品还可能以次充好，对消费者身体健康更加不利。