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AxyPrep-96血基因组DNA试剂盒本试剂盒采用特殊的细胞裂解和蛋白去除液（包括蛋白酶K裂解）从抗凝全血中得到基因组DNA。
适用于从冻全血、血浆、血清、骨髓、其他体液、淋巴细胞、培养细胞、病毒和线粒体中提取DNA。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性说明书，耗材：96孔深孔板（1.6 ml），96圆孔板，96孔DNA制备板，96圆孔硅胶片，BF-400膜。
Proteinase K：冻干的蛋白酶K可室温贮存6个月，长时间保存请置于4℃；溶解后，在2-8℃可贮存2个月，长时间保存请勿置于室温中。
Buffer PK：蛋白酶K溶解液，室温密闭贮存。
Buffer BL：细胞裂解液，室温密闭贮存。
Buffer W1B concentrate：洗涤液。
使用前，根据瓶上数量加入乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。
可用100%乙醇或95%乙醇。
Buffer W2 concentrate：去盐液。
使用前，根据瓶上数量加入乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。
可用100%乙醇或95%乙醇。
10×Buffer W2（12×96试剂盒）：用于配制Buffer W2。
Eluent B：7.5 mM Tris-HCl，pH 8.5，0.3 mM EDTA，室温密闭贮存。
二、注意事项Buffer BL和Buffer W1B含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水和生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备1. 第一次使用时，在Buffer W2 concentrate和Buffer W1B concentrate中按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
2. Buffer W2（12×96试剂盒）配制：在提供的500 ml空瓶中加入15 ml 10×Buffer W2，135 ml去离子水和350 ml乙醇，可用100%无水乙醇或95%乙醇。
质粒DNA 小量提取试剂盒一、产品简介采用SDS碱裂解法，结合硅胶膜选择性吸附DNA的方法，适合1-4ml细菌培养物中提取多至20 μg质粒DNA。
纯化的质粒DNA适合用于酶切、PCR、测序、转化和转染等分子生物学实验。
二、试剂盒组成和储存组成内容DK301-01 (50次) DK301-02 (200次)RNase A1＊30 μl 120 μlBuffer BL 15 ml 60 mlBuffer P1 15 ml 60 mlBuffer P2 15 ml 60 mlBuffer P3 20 ml 90 mlBuffer WA§19 ml 75 mlBuffer WB§16 ml 65 mlDNA吸附柱-B 50套200套1.5 ml离心管50个200个TE※15 ml 30 ml说明书1份1份＊RNase A1: 50 mg/ml, -20℃长期保存；第一次使用前将RNase A1全部加入Buffer P1中，于4℃保存。
§Buffer WA和Buffer WB，使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇或者95%乙醇，混合均匀。
※TE：10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.0(25°C)。
除RNase A1和Buffer P1(已加入RNase A1)外，其他组成成分于室温储存。
三、注意事项1.Buffer P3和Buffer WA含刺激性化合物，避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛，立即使用大量水或生理盐水冲洗沾染处，必要时寻求医疗咨询。
2. 使用后应及时盖紧试剂瓶盖子，以免影响下次使用效果。
3. 操作步骤A2和B2，充分悬浮细菌，无可见的块状菌团，不然会影响裂解效果。
4. 操作步骤A3和B3，缓慢翻转离心管，以免机械力打断基因组DNA而导致最后纯化的质粒DNA中有基因组DNA污染，同时避免打断质粒DNA，保持其完整性。
摇菌选取合适容量的EP管，加入LB培养基，菌种和抗生素。
其中LB培养基与抗生素的体积比为1000:1，如20ml培养基需加入20 μl 抗生素。
菌落可以是固体培养基上挑下的，也可以是冻存的菌液，一般加200微升。
不同菌种，所加抗生素种类不同，例如Cul4A与CRBN 菌是抗氨苄西林（Amp），GFP菌是抗卡那霉素（KA）。
加好后，EP管盖子微开（防止摇出厌氧菌），置于恒温振荡培养箱中(incubator shaker)中，振荡12~16小时。
提取质粒摇菌完成后，从菌液中抽提质粒。
提取质粒即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。
实验中使用Axyprep质粒DNA小盒试剂盒进行提取，该试剂盒是采用改进的SDS碱裂解法，以及DNA制备膜选择性地吸附DNA 的原理达到快速纯化DNA质粒的目的。
具体操作步骤为：1.取1-4 ml在LB培养基中培养过夜的菌液（若使用丰富培养基，菌液体积应减半或更少），12,000×g，离心1 min，弃尽上清。
2. 加入250 μl Buffer S1 使细菌沉淀悬浮，悬浮需均匀，不应留有小的菌块。
（应确保已将试剂盒中提供的RNaseA全部加入BufferS1中，并于4℃冰箱保存3.加入250 μl Buffer S2，温和并充分地上下翻转4-6次混合均匀使菌体充分裂解，直至形成透亮的溶液。
4.计时5 min后，打开EP管盖子，应有拉丝状液体。
5.立即加入350 μl Buffer S3，温和并充分地上下翻转混合6-8次，12,000×g离心10 min。
6.吸取步骤5中的离心上清并转移到制备管（置于2 ml离心管（试剂盒内提供）中），12,000×g离心1 min，弃滤液。
7.将制备管置回离心管，加500 μl Buffer W1，12,000×g离心1 min，弃滤液。
8.将制备管置回离心管，加700 μl Buffer W2，12,000×g离心1 min，弃滤液；以同样的方法9.再用700 μl Buffer W2洗涤一次。
AxyPrep 动植物基因组DNA小量试剂盒本试剂盒采用独特的裂解和相分离技术，结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的方法达到纯化基因组DNA的目的。
每次制备可获得多至20 μg的基因组DNA。
用于PCR、Southern印迹分析、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性说明书，耗材：DNA制备管、小量滤器、2 ml 离心管、1.5 ml 离心管。
RNase A：50 mg/ml，室温保存。
Buffer G-A：裂解液，室温密闭贮存。
Buffer G-B：蛋白去除液，室温密闭贮存。
Buffer DV-A：Buffer DV的制备液，请参照实验准备Buffer DV的配制方法配制，室温密闭贮存。
Buffer DV：相分离液，室温密闭贮存。
Buffer BV：DNA结合液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。
使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。
可用100%乙醇或95%乙醇。
Eluent：2.5 mM Tris-HCl，pH 8.5，室温密闭贮存。
二、注意事项Buffer G-A、Buffer G-B、Buffer BV和Buffer W1含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备1. 第一次使用时，在Buffer W2 concentrate中按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇并混合均匀。
2. 制备Buffer DV：取2 ml Buffer DV-A，125 ml异丙醇，75 ml异丁醇，加入提供的250 ml试剂瓶中，混合均匀。
3. 4℃预冷Buffer DV。
4. 准备65℃水浴。
5. 使用前检查Buffer G-A和Buffer G-B是否有沉淀析出，若出现沉淀，请于65℃水浴加热至沉淀完全溶解后再使用。
质粒小提（AxyPrep质粒DNA小量试剂盒）本试剂盒采用改进的SDS碱裂解法，结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的方法达到快速纯化质粒DNA的目的。
适合从1-4ml细菌培养物中提取多至20ug高纯度的质粒DNA，用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性Rnase A:50mg/ml,室温可贮存6个月，长期贮存于-20℃。
Buffer S1：细菌悬浮液。
加入Rnase A后，混合均匀，4℃贮存。
Buffer S2：细菌裂解液（含SDS/NaOH），室温密闭贮存。
Buffer S3：中和液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。
使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）。
混合均匀，室温密闭贮存。
Eluent：洗涤液，室温密闭贮存。
二、注意事项Buffer S2、Buffer S3和Buffer W1含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备1、第一次使用前，Rnase A全部加入Buffer S1中，4℃贮存。
2、准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。
3、第一次使用前，Buffer W2 concentrate 中加入指定体积的无水乙醇。
4、使用前，检查Buffer S2是否出现沉淀，应于37℃温浴加热溶解并冷却至室温后再使用。
四、操作步骤1、取1-4ml在LB培养基中培养过夜的菌液（若使用丰富培养基，菌液体积应减半或更少），12000*g离心1min，弃尽上清。
2、加250ul Buffer S1悬浮细菌沉淀，悬浮需均匀，不应留有小的菌块。
*确认Buffer S1中已加入Rnase A3、加250ul Buffer S2，温和并充分的上下翻转4-6次混合均匀使菌体充分裂解，直至形成透亮的溶液。
武汉群骏生物科技有限公司报价常用分子试剂产品名称产品品牌产品货号规格Axyprep质粒小量制备试剂盒Axyprep AP-MN-P-5050T Axyprep PCR清洁试剂盒Axyprep AP-PCR-5050T AxyprepDNA 凝胶回收试剂盒Axyprep AP-DNA-5050T DNA 提取试剂盒RNA 提取试剂盒胰岛素（牛）Sigma Sigma I550010mg胰岛素（牛）Sigma Sigma I550025mg曲拉通X-100Amresco Amresco 0694100ml曲拉通X-100Amresco Amresco 0694500ml甘油Amresco Amresco 0854100ml甘油Amresco Amresco 0854500ml Code：KOD-Plus-Neo toyobo KOD-401S20T(20U) Code：KFX-201S toyobo KFX-201S20T(20U)Code：KFX-101T toyobo KFX-101T50T(50U)Code：QPS-101T toyobo QPS-101T1MLCode：KNB-101T toyobo KNB-101T各50ml*1瓶Code：NKB-401toyobo NKB-401各5ml*1瓶染色剂胭脂红1390-65-4Sigma C10225g酸性品红3244-88-0 Alfa B22222 5g吖啶橙Amresco 03605g碱性品红569-61-9Amresco BE4105g刚果红Amresco Amresco C06155g考马斯亮蓝 G－250Amresco Amresco 06155g结晶紫/甲紫548-62-9Amresco 052825g甲基绿Sigma M88845g甲基橙547-58-0Alfa A176045g蛋白质感受态细胞国产多种限制性酶及修饰酶进口/国产多种胎牛血清四季青100ml胎牛血清GIBCO GIBCO 16000044500ml原装牛血清白蛋白Sigma Sigma A7638250mg 牛血清白蛋白（全组分）Amresco Amresco 090325g牛血清白蛋白(组份五）Amresco Amresco A033210g卵清蛋白Sigma Sigma A5253100g缓冲剂培养基琼脂粉Japan Japan500g 琼脂粉Amresco Amresco AJ637500g 牛肉膏国产China500g 酪蛋白（干酪素）Sigma Sigma C5890100g 胆固醇国产china 最高级别25g 脂多糖Sigma Sigma L2880 10mg酶和辅酶乙酰辅酶 A Sigma Sigma A20565mg 乙酰辅酶 A Roche Roche 101018930015mg脱氧核糖核酸酶I Labest Labest100mg 崩溃酶85186-71-6 Sigma D9515500mg 抑肽酶Amresco Amresco E4295mg 溶菌酶Amresco Amresco 06635g 辅酶 A（COA）sigma sigma C428210mg成本价报价备注1501501507015530902895225改善循环后半部分的扩增停滞现象，延伸时间算（30sec./kb）300史上最牛的PCR酶！高成功率，高效450高成功率PCR酶，轻松扩增粗样品，475解决可测定区域，特异性等烦恼。
质粒DNA小量试剂盒性能检验流程1.抽检方式从每批次生产的成品中抽取1‰样品进行检验，如该批次生产的产品少于1000盒，抽取一盒作外观组成及性能检验。
2.检验要求2.1 试剂试剂种类，规格，数量与说明书相符。
2.2 塑料耗材塑料耗材种类，规格，数量与说明书相符。
2.3 使用性能要求2.3.1 对于从同一种样品提取的DNA，以标准试剂盒作为对照，两者回收DNA的质量差别≤±10％。
2.3.2 对于从同一种样品提取的DNA，以※Qiagen试剂盒作为对照，两者DNA的得率差别≤±10％。
2.3.3 纯度要求：纯化后的DNA的A260／280的比值应处于1.80±0.15，电泳条带清晰无拖尾。
2.3.4 纯化后的DNA测序成功率达到80％以上,测序峰形清晰的长度大于500 个碱基。
※Qiagen试剂盒：QIAprep Spin Mini Kit.3.试验方法：3.1 至少取送检的三次产品，对照的标准的试剂盒三次产品作检测。
3.2 按※说明书操作步骤操作，分别用检验试剂盒与对照的标准试剂盒提取DNA，最后用60 ul洗脱液洗脱DNA。
3.3 测OD从检验试剂盒与对照的标准试剂盒提取的DNA中分别取出部分测OD，计算DNA的得率和A260／280，并进行比较分析。
结果要求符合2.3.1、2.3.2及2.3.3。
3.4 酶切根据所测得的OD，分别从检验试剂盒与对照的标准试剂盒提取的DNA中取出1 ug，加入ECOR I 1 ul、10×H2 ul以及去离子水定容到20 ul体系，37O C酶切1h。
3.5 电泳3.5.1 制作1.0％琼脂糖凝。
A．称取1.0g琼脂糖凝胶，倒入250ml的三角烧瓶中，加入100 ml的1×TAE电泳缓冲液，混匀后置于微波炉中“组合烧烤”2档加热1分钟30秒。
B．将三角烧瓶取出，轻轻摇晃三角烧瓶使溶液混匀，再置于微波炉中“组合烧烤”2档加热30秒。
AxyPrep质粒DNA小量试剂盒
本试剂盒采用改进的SDS碱裂解法，结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的方法达到快速纯化质粒DNA的目的。
适合于从1-4 ml细菌培养物中提取多至20 μg高纯的质粒DNA，用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
说明书，耗材：DNA制备管，2 ml 离心管，1.5 ml 离心管。
RNase A：50 mg/ml，室温保存。
Buffer S1：细菌悬浮液。
加入RNase A后，4°C贮存。
Buffer S2：细菌裂解液，室温密闭贮存。
(若出现沉淀，应于37°C温浴溶解并冷却至室温后再使用。
）Buffer S3：中和液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。
使用前，根据瓶上数量加入乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。
可用100%乙醇或95%乙醇。
Eluent：2.5 mM Tris-HCl，pH 8.5，室温密闭贮存。
二、注意事项
Buffer S2、Buffer S3和Buffer W1含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备
1. 第一次使用前，RNase A全部加入Buffer S1 中，4°C贮存。
2. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。
3. 第一次使用前，Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。
四、操作步骤
第一次使用时，将试剂盒携带的RNase A全部加入到Buffer S1 中，混合均匀，4°C保存。
1. 取1-4 ml 在LB培养基中培养过夜的菌液（若使用丰富培养基，菌液体积应减半或更少），
12,000×g离心1 min，弃尽上清。
2. 用250 μl 已加入RNase A 的Buffer S1 悬浮细菌沉淀，悬浮需均匀，不应留有小的菌块。
3. 加入250 μl Buffer S2，温和并充分地上下翻转混合4-6次均匀使菌体充分裂解，直至形成透亮的溶
液。
此步骤不宜超过5 min。
4. 加入350 μl Buffer S3，温和并充分地上下翻转混合6-8次，12,000×g离心10 min。
步骤5～7可以选择负压法或离心法纯化质粒DNA。
A. 负压法
5A. 将质粒DNA制备管插到负压装置的接口上。
吸取步骤4中的离心上清并转移到制备管中，开启并调节负压至-20-30英寸汞柱，缓慢吸走管中溶液。
6A. 加500 μl Buffer W1，吸尽管中溶液。
7A. 加700 μl Buffer W2，吸尽管中溶液；以同样的方法再用700 μl Buffer W2 洗涤一次。
* 确认在Buffer W2 concentrate中已按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇。
B. 离心法
5B. 吸取步骤4中的离心上清并转移到DNA制备管（置于2 ml 离心管中），12,000×g离心1 min。
6B. 将制备管置回离心管，加500 μl Buffer W1，12,000×g离心1 min，弃滤液。
7B. 将制备管置回离心管，加700 μl Buffer W2，12,000×g离心1 min，弃滤液；以同样的方法再用700 μl Buffer W2洗涤一次。
弃滤液。
* 确认在Buffer W2 concentrate中已按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇。
8. 将制备管置回2 ml离心管中，12,000×g离心1 min。
9. 将制备管移入新的1.5 ml 离心管中，在DNA制备膜正中央加60-80 μl 水或Eluent，室温静置1 min。
12,000×g离心1 min。
