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冠状动脉粥样硬化性心脏病的中西医研究进展冠状动脉粥样硬化性心脏病是一种常见的心血管疾病，它是由于冠状动脉内皮细胞受损、脂质代谢紊乱和炎症反应等多种因素引起的。
近年来，中西医结合研究取得了一些重要进展，为该疾病的治疗提供了新的思路和方法。
本文将从中西医结合的角度，对冠状动脉粥样硬化性心脏病的研究进展进行综述，探讨其临床应用和未来发展方向。
（一）中医药防治冠心病疗效明显中医药在治疗冠心病方面具有独特的优势，传统药物如丹参、川芎、天麻等对冠心病有很好的防治作用。
丹参是一种有益于心血管系统的中草药，其有效成分丹参酮对冠心病有显著的抗缺血、抗心肌梗死作用，可降低心肌的氧耗量，增加心肌对缺血的耐受性。
川芎具有活血通络，舒筋活血的功效，对冠心病合并症和病因的调理作用显著。
天麻对冠心病伴有心绞痛、狭窄性心绞痛有一定疗效。
针灸作为中医传统疗法，被广泛应用于冠心病的治疗中。
针刺穴位可以改善心脏供血和心脏功能，降低血压和血脂，减少冠心病发作的次数和减轻症状。
针灸治疗冠心病的机制主要是通过调节自主神经、改善心肌供血、减轻心脏负荷等途径发挥作用。
临床研究表明，针灸治疗冠心病的有效率较高，受到患者的广泛认可。
中医药在冠心病的预防方面也具有重要作用。
中医强调“治未病”，提倡“调理阴阳”，通过药膳调养心脏，增强体质，改善冠心病的易感因素，起到预防作用。
中医治疗也强调“因病施治”，提倡根据个体体质和病情特点，个性化地选取药物治疗，达到个体化预防冠心病的目的。
随着生物技术的发展，科学家们对冠状动脉粥样硬化性心脏病的分子机制有了更深入的认识。
其发病机制涉及多种信号通路和分子因子的参与，如炎症因子、氧化应激、细胞凋亡等。
这些研究为治疗冠心病提供了新的靶点和策略，为疾病的治疗提供了新的思路。
（二）介入治疗技术不断进步冠状动脉粥样硬化性心脏病的介入治疗技术包括冠状动脉支架植入术（PCI）和冠状动脉旁路移植术（CABG）等，取得了长足的进步。
内皮祖细胞与冠状动脉支架置入术后再内皮化的研究进展冠状动脉内支架置入术已成为目前冠状动脉粥样硬化治疗的最重要手段之一，支架内涂层药物能抑制平滑肌细胞的生长，降低血栓发生率，但也抑制了内皮细胞的爬行，延迟了再内皮化的进展。
如何促进再内皮化已成为关注的焦点，内皮祖细胞的发现和不断的研究进展，为再内皮化打开了一条新道路。
标签：经皮冠状动脉介入治疗；内皮祖细胞；再内皮化自Puel和Signant在1986年实行第1例支架置入手术至今已二十余年，其已发展成为目前冠状动脉硬化性心脏病最重要的治疗手段之一。
随着2003年药物涂层支架正式应用于临床，冠状动脉介入治疗被带入了一个新的具有里程碑意义的时代。
然而随着技术的广泛应用，一些新的、需要解决的问题也随之而来。
经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention，PCI）能很好地实现冠状动脉血运重建，显著改善患者的症状和生活质量，但同时也会造成血管再狭窄。
在裸支架时代，PCI术后6个月再狭窄的发生率高达20%～30%[1]。
支架内涂层药物的释放能抑制血管平滑肌细胞的增殖，降低术后再狭窄率，但也同时抑制了内皮细胞的生长，导致内皮细胞功能紊乱，延迟支架内内皮细胞爬行，这使得晚期支架内血栓的形成和再狭窄仍不容忽视[2]。
冠状动脉支架内再狭窄（instent restenosis，ISR）已成为一个亟待解决的难题，ISR发生是一个多因素造成的血管应激反应，内皮细胞损伤是ISR的始动因子，而炎性反应、平滑肌细胞增殖及细胞外基质产生是发生狭窄的三个主要环节，通过修复内皮细胞，进而促进血管再内皮化，是治疗ISR的根本途径[3]。
血管支架置入术后再内皮化的途径包括宿主内皮细胞的增殖迁移，内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）动员、迁移、归巢和分化等。
支架临近的原有宿主内皮细胞增殖，向支架内迁移，逐渐覆盖支架是重要的内膜修复方式之一。
冠状动脉病变的病理与诊断冠状动脉病变是一种常见的心血管疾病，严重影响着人们的生活质量。
研究表明，冠状动脉病变伴随着血管壁的异常，如内膜增厚和斑块形成等。
然而，冠状动脉病变的病理与诊断并不简单，需要进行综合性的分析和评估。
病理学是病理诊断的基础，通过对组织的形态和构造进行分析，可以揭示病变的本质。
在冠状动脉病变中，最常见的病理变化是血管壁的异常增厚，导致血管管腔狭窄和缺血。
这种增厚主要发生在动脉内膜层和中膜层，其中内膜增厚是病变最早出现的征象之一。
内膜增厚是由于内皮细胞的异常再生和过度增生形成的，同时也可能伴随着胆固醇和甘油三酯等脂质物质的聚积。
此外，宏观上可见的斑块形成也是冠状动脉病变的重要特征之一。
斑块是由血管壁的细胞和胆固醇等物质沉积在动脉壁上构成，通常分为黄色斑、纤维斑和复合性斑等。
其中黄色斑是最为常见，其主要由胆固醇晶体、脂质单质和巨噬细胞等组成。
尽管病理分析可以揭示病变的本质，但是往往需要进行多种影像学检查才能得到准确的诊断。
与传统诊断方式相比，现代医学的影像学技术已经发展到了一个新的高度。
目前，常见的影像学诊断技术包括心电图、血管造影、超声心动图、核素显像和计算机断层扫描等。
其中，计算机断层扫描（CT）是最常用的诊断技术之一，其可以非常清晰地显示冠状动脉的内在情况。
CT检查可以通过组织对放射线的吸收程度来获取血管图像，从而准确地检测冠状动脉的病变程度和位置。
除此之外，还有很多与病变相关的影响因素。
其中，高血压、高血脂和糖尿病等慢性病是冠状动脉病变的重要病因。
高血压可以导致血压异常升高、动脉壁应力过大，从而增加心血管疾病发作的风险。
而高血脂会导致胆固醇等脂质物质在血管内聚积，最终导致动脉管腔狭窄和血流减少。
此外，糖尿病患者往往会出现胰岛素抵抗和高血糖等现象，这些现象会导致动脉硬化和心血管疾病的发作。
总之，冠状动脉病变是一种常见的心血管疾病，其病理与诊断需要进行综合性的分析和评估。
病理分析可以揭示病变的本质，而影像学检查则是一个重要的辅助诊断手段。
冠状动脉微循环障碍的研究进展冠状动脉微循环障碍（coronary microvascular dysfunction，CMVD）是一种常见但容易被忽视的心脏疾病，它主要表现为心绞痛或心肌缺血，但并不伴随着冠状动脉狭窄或堵塞。
近年来，随着医学科技的发展和对心脏疾病认识的不断深入，人们对CMVD的研究也日益深入，使得对这一疾病的认识逐渐提高，治疗水平也在不断改善。
本文将对CMVD的研究进展进行综述，以期为医学界对该疾病的认识和治疗提供一定的参考。
一、CMVD的病理生理机制研究CMVD的病理生理机制一直是医学界关注的焦点。
近年来的研究表明，CMVD与内皮功能障碍密切相关。
内皮细胞是冠状动脉微循环的主要构成细胞，它们在血管壁内形成连续的内皮单层，并通过释放多种血管调节因子调节血管张力和通透性，参与调节血管舒缩和维持血液流动。
内皮功能异常会导致血管舒缩功能受损和血管通透性增加，从而影响冠状动脉微循环的血流动力学，导致心肌缺血。
炎症反应和氧化应激也被认为是CMVD发生发展的重要因素。
研究表明，炎症反应和氧化应激可导致内皮细胞功能异常，进而诱发CMVD。
针对内皮功能异常、炎症反应和氧化应激进行干预治疗，已成为当前CMVD研究的热点方向。
二、CMVD的临床诊断方法研究CMVD的临床诊断一直是医学界的难点和热点。
传统的诊断方法主要是依靠心肌灌注显像、冠状动脉造影和内皮功能检测等手段，但这些方法仍存在一定的局限性，对CMVD的诊断准确性和灵敏度有一定的影响。
近年来很多研究致力于寻找更准确、更简便的诊断方法。
一些研究表明，通过测定心肌对乳酸的代谢情况可以判断冠状动脉微循环是否受损，从而实现对CMVD的早期诊断。
还有研究利用心肌灌注磁共振成像技术，结合机器学习等方法，实现对CMVD的精准诊断。
这些新的诊断方法有望为CMVD的早期诊断提供更有效的手段。
针对CMVD的治疗也是当前的研究热点之一。
传统的治疗方法主要是针对冠状动脉病变的介入治疗和药物治疗，但这些方法对CMVD的治疗效果并不显著，且存在不少副作用。
㊃综㊀述㊃内皮细胞在缺血性心脏病及心力衰竭中的作用牛宇,张丽晖∗,王静,秦俊楠(山西医科大学附属白求恩医院综合医疗科,太原030000)ʌ摘㊀要ɔ㊀内皮细胞是上皮细胞的一种,广泛分布于心㊁血管和淋巴管腔面,在人体生理稳态中参与止血㊁血管调节㊁血管生成等重要过程㊂近年来有研究发现,内皮细胞除上述作用外,还促进了缺血性心脏病等多种疾病的病理进展,并且表现出独特的多向分化能力,其中内皮间质转分化能力与心肌纤维化及心力衰竭关系密切㊂本文主要探讨血管内皮细胞生理特点及在缺血性心脏病㊁心力衰竭治疗中的研究进展,为相关疾病治疗提供新思路㊂ʌ关键词ɔ㊀内皮细胞;内皮间质转分化;缺血性心脏病;心力衰竭ʌ中图分类号ɔ㊀R541㊀㊀㊀㊀㊀ʌ文献标志码ɔ㊀A㊀㊀㊀㊀ʌDOI ɔ㊀10.11915/j.issn.1671-5403.2021.03.051收稿日期:2020-02-20;接受日期:2020-04-03基金项目:山西省自然科学基金面上项目(201801D121202)通信作者:张丽晖,E-mail:134****5229@Role of endothelial cells in ischemic heart disease and heart failureNIU Yu,ZHANG Li-Hui ∗,WANG Jing,QIN Jun-Nan(Department of General Medicine,Bethune Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan 030000,China)ʌAbstract ɔ㊀Endothelial cells are one kind of the epithelial cells that widely adhere to the lumen of the heart,blood vessels,andlymphatic vessels.They are involved in important processes such as hemostasis,regulation of blood vessels,and angiogenesis in humanphysiological homeostasis.In addition,recent studies have found that endothelial cells contribute to the pathological progress of variouscardiovascular diseases and also have unique capability of multi-directional differentiation.Endothelial-mesenchymal transition is closely related to myocardial fibrosis.This article focuses on vascular endothelial cells,mainly exploring their physiological characteristics and their role in ischemic heart disease and heart failure with a view to providing new ideas for the treatment of cardiovascular disease.ʌKey words ɔ㊀endothelial cells;endothelial mesenchymal transition;ischemic heart disease;heart failureThis work was supported by the General Project of Natural Science Foundation of Shanxi Province (201801D121202).Corresponding author :ZHANG Li-Hui ,E-mail :134****5229@㊀㊀心血管疾病的发病率和死亡率逐年攀升,我国每年约有300万人死于此类疾病㊂缺血性心脏病和心力衰竭是其中重要的组成部分,了解疾病的病理机制有助于早期实施医疗干预,改善预后㊂内皮细胞在人体心血管系统中广泛分布,在维持生理稳态中起重要作用㊂近年来研究发现,病理状态下内皮细胞可以促进缺血性心脏病和心力衰竭的病情进展㊂关注并探究内皮细胞在心血管疾病中的作用机制及靶点,有望为此类疾病提供新的诊疗思路㊂本文就内皮细胞在缺血性心脏病和心力衰竭中的作用进行阐述㊂1㊀内皮细胞1.1㊀内皮细胞生理特点㊀㊀内皮细胞为鹅卵石状单层扁平上皮细胞,衬贴在心㊁血管和淋巴管腔面,在不同组织中表现出相应的器官适应性,即具备特异的形态及功能㊂例如,内皮细胞在中枢神经系统中形成血脑屏障,在子宫中表达雌激素受体,在血管系统则具备不同程度的出芽能力[1]㊂㊀㊀心脏中主要为心内膜内皮细胞和血管内皮细胞㊂前者位于心腔内侧,而后者位于心肌致密层㊂二者分别表达不同的特异性标志物,其中,apelin㊁细胞质1等为心内膜内皮细胞标志物,酸性结合蛋白4为血管内皮细胞标志物[2-5]㊂内皮细胞是人体血管系统的核心部分,在人体生理稳态中起到保障运输㊁控制血管通透性和调节血管张力的重要作用[1],其损伤㊁过度活化和功能障碍是许多心血管疾病的病因之一㊂1.2㊀内皮细胞对心血管系统的作用㊀㊀内皮细胞对血流量非常敏感,生理状态下可以适应不同的血流量条件并对其进行反应性调节,这一功能逐步丧失往往意味着内皮细胞功能障碍,并且与心血管疾病的不良预后相关[6]㊂内皮细胞可以分泌内皮素,在心肌梗死区域观察到的大量中性粒细胞浸润现象可能与内皮素的促炎症作用相关㊂同时,内皮素也能以旁分泌的方式作用于血管平滑肌细胞,促使后者收缩,而这一作用在一定程度上可以限制局部炎症反应㊂内皮细胞还可以分泌内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS),从而升高NO水平,抑制内皮素1,并且起到抑制动脉粥样硬化的作用[7]㊂此外,内皮细胞还可以分泌前列环素㊁血栓素A2等多种活性物质参与血管生理的调节㊂2㊀内皮细胞与缺血性心脏病2.1㊀内皮细胞的影响因素㊀㊀内皮细胞对缺氧的耐受性较好,但是对缺血再灌注损伤敏感,坏死的心肌细胞和缺氧都可以激活内皮细胞,使其被白细胞识别并攻击[8]㊂内皮细胞还容易受到氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的损害,研究表明,适度的ROS刺激对细胞生命活动有利,但长期线粒体ROS负荷可以促使冠状动脉内皮细胞凋亡[9]㊂脉动层流利于内皮细胞分泌eNOS㊁维持血清中NO水平,从而抑制内皮素1,而湍流及高剪切应力可以促进内皮细胞重塑,打破NO和内皮素1的平衡,进而促进不稳定动脉粥样硬化斑块形成㊂高血糖也是激活内皮细胞的重要因素,通过TLR2和TLR4/MyD88/NF-kB/AP1等信号通路导致内皮细胞糖萼脱落,促进白细胞黏附和增加ROS负荷,使糖尿病患者更易发生心血管损害㊂2.2㊀内皮细胞对缺血性心脏病的影响㊀㊀内皮细胞参与了缺血性心脏病病理机制的多个环节,并对病情进展起到重要作用㊂心肌梗死区域微血管灌注不足是决定不良心血管事件的关键因素,而这一过程与内皮细胞功能障碍密切相关㊂由于梗死区域的局部炎症作用,内皮细胞屏障功能丧失㊁糖萼损耗,加之离子泵丧失引起的电解质浓度变化,导致血管通透性增加㊁水肿形成,而局部压迫作用又进一步减少了微血管灌注[10]㊂此外,在梗死区域,内皮素作用更占优势,血管活动往往表现为过度收缩,进一步导致血管重塑㊁微循环障碍㊂当冠状动脉粥样硬化病灶出现斑块脱落㊁或接受介入治疗后产生微量血栓栓塞时,这些栓子均可能因黏附分子表达增加而形成细胞聚集体,从而进一步减少微血管灌注[11]㊂㊀㊀在缺血性心脏病中,内皮细胞既是受损靶点,也是促进疾病进展的始动因素㊂病理状态下,内皮细胞促血管生成作用激活导致屏障功能丧失,水肿形成,促炎症作用激活增加了黏附分子表达,并引起白细胞大量浸润㊂过多的免疫细胞浸润进一步对已受损组织造成二次打击㊂内皮细胞合成NO的能力下降进一步加重了心脏的血管闭塞㊂此外,内皮细胞活化有利于血栓形成㊂㊀㊀综上所述,大多数血管病变始于经典内皮功能破坏,加之内皮细胞在免疫应答中的核心作用,加剧了损伤㊂因此,有必要在心血管疾病的传统治疗方案中加入靶向性内皮细胞治疗㊂有学者建议,在足够的侧支循环存活的情况下,可以采取心脏保护性干预措施来增加危险区域的微血管灌注[12]㊂目前,已有临床试验显示内皮祖细胞移植疗法在急性脑梗死患者中取得显著成效[13]㊂远端缺血预处理也在动物模型中体现出了心脏保护作用,并且涉及内皮细胞的相关分子机制研究已取得初步进展,这使得内皮细胞成为治疗缺血性疾病新的潜在靶标㊂3㊀内皮细胞与心力衰竭3.1㊀内皮间质转分化作用㊀㊀内皮间质转分化是指内皮细胞失去原有的细胞形态及紧密连接和特异性标志物,迁移到周围组织并获得间质细胞特征形态,表达间质细胞产物的分化过程㊂间质细胞呈星形或纺锤形,因缺乏细胞间黏附与紧密连接,可以自由迁移并通过细胞外基质,形成结缔组织并起到器官支持的作用[14],具有多向分化能力,也称为间充质干细胞㊂近年来在多种纤维化疾病中均发现间质细胞具有促进成纤维细胞生成的作用[15]㊂内皮细胞发生间质转分化后特异性标志物表达发生改变:内皮细胞标志物(如VE-钙粘蛋白㊁CD31)丢失,间质细胞标志物(如波形蛋白㊁前胶原I㊁成纤维细胞特异性蛋白1)表达上调[16]㊂㊀㊀在心脏发育过程中,心内膜的内皮细胞也发生了内皮间质转分化,并进一步形成房室垫㊁瓣膜原发层及隔膜的基质㊂研究表明,这一过程也为成熟心脏瓣膜提供了多向分化的祖细胞储备,特定条件下可以转化为多种细胞群㊂内皮间质转分化可能会在整个生命活动过程中参与内皮细胞的修复和补充[17]㊂3.2㊀内皮间质转分化与心力衰竭㊀㊀近年来,由于人口年龄结构和生活模式的改变,以及急性心肌梗死存活率显著升高等因素,全球心力衰竭的发病率逐年攀升㊂心力衰竭始于心肌损伤,导致病理性重塑,最终多种神经-体液机制激活诱发直接细胞毒性,引起心肌纤维化,导致心力衰竭㊂成纤维细胞通过促进心室重构,加速心肌梗死后心肌细胞功能丧失,在心肌纤维化及心力衰竭中起到重要作用㊂而内皮细胞可以通过内皮间质转分化参与成纤维细胞的形成,从而促进心室重构和心肌纤维化[18]㊂这一作用可能与内皮细胞多向分化能力㊁间质的相互作用以及复杂的内分泌因子调节作用相关[19]㊂心肌纤维化的主要介导细胞为成纤维细胞㊂除了常驻间质成纤维细胞外,还可以由骨髓细胞或上皮细胞分化而来㊂Zeisberg等[20]利用谱系分析和免疫荧光双染技术确定了内皮细胞通过内皮间质转分化作用成为心脏成纤维细胞的来源之一,约占总数的1/3㊂并且这一过程在体内外均可发生㊂随着相关研究进一步深入,目前可以确定成纤维细胞是异质群体,在纤维化疾病中具有多种来源㊂此外,内皮间质转分化不仅参与心肌纤维化,也可能参与狭窄血管中新内膜的形成㊂㊀㊀心肌纤维化过程会显著损害心脏功能,不仅可以直接导致心室壁弹性及收缩力下降,还会导致心脏电传导异常㊂不论何种原因导致的心肌纤维化,均与间质中成纤维细胞过度聚集以及细胞外基质蛋白过量分泌有关㊂这些间质中的成纤维细胞,有很大一部分是通过转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)依赖性过程由内皮细胞经过内皮间质转分化转化而来[21]㊂除涉及多种相关信号通路外,研究者还观察到,内皮间质转分化与表观遗传学关系密切,DNA甲基化㊁组蛋白修饰及一些调控因子有望成为阻断内皮间质转分化过程的潜在靶标[22]㊂也有研究表明,慢性肾脏病患者心脏内源性Klotho丢失促进了TGF-β1信号转导增强,从而上调Wnt信号转导,促进心肌纤维化[23],也为阻断内皮间质转分化提供了有效途径㊂此外,目前已经观察到参与胚胎时期心内膜内皮间质转分化过程的多种信号通路与心血管疾病中涉及的信号通路一致,且在多种心血管疾病(包括心脏瓣膜疾病㊁心肌梗死㊁心力衰竭㊁心内膜弹力纤维增生症㊁动脉粥样硬化和肺动脉高压)中发现有内皮间质转分化参与,例如在动脉粥样硬化中,巨噬细胞可以促进内皮间质转分化,而这种改变可以影响动脉粥样硬化斑块的形成[24]㊂3.3㊀内皮间质转分化抑制因子㊀㊀内皮细胞可以经过内皮间质转分化成为成纤维细胞,但生理状态下这一过程在体内受到不同程度的抑制㊂研究人员观察到,在缺血性二尖瓣反流中二尖瓣小叶增厚,内皮细胞发生内皮间质转分化,同时二尖瓣内皮细胞和间质细胞分泌可溶性因子,分别抑制间质细胞激活以及TGF-β诱导的内皮间质转分化㊂骨髓来源的间充质干细胞也能够抑制TGF-β诱导的瓣膜内皮细胞间质转分化,研究者观察到这种细胞与间质细胞具有相同的特异性标志物㊂TGF-β以外的许多因素,例如不稳定剪切应力和振荡剪切应力㊁TNF-α和白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)㊁高糖等均可诱导内皮间质转分化,但尚未明确间质细胞分泌的这种可溶性因子是否能够预防由上述刺激因素所诱导的内皮间质转分化[25]㊂有人推测间质细胞产生的可溶性因子可能作用于生长因子的下游,通过刺激成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)受体或下游信号分子来降低内皮细胞对TGF-β的反应能力㊂目前,该分泌因子的性质和特性以及它们阻止内皮间质转分化的机制尚未明确㊂㊀㊀内皮间质转分化在其他纤维化疾病(如肺纤维化和肾脏纤维化)以及癌症进展期,均表现出诱导成纤维细胞形成的作用[26]㊂明确内皮间质转分化抑制因子的生化性质及作用机制可能为多种纤维化疾病的治疗提供新思路㊂4㊀结论与展望㊀㊀综上所述,内皮细胞在生理及病理状态下,都不仅仅表现为静态的机械保护,而是动态的参与其中并发挥重要作用㊂在缺血性心脏病中,内皮细胞不仅是受害者,也是疾病的促发因素,其免疫作用和促血管生成作用的激活成为疾病进展的核心环节,并导致恶性循环㊂内皮细胞独特的内皮间质转分化作用不仅在心脏发育和瓣膜修复中扮演重要角色,更参与了心力衰竭及其他多种纤维化性疾病的形成和进展,并且已发现体内存在内皮间质转分化抑制因子㊂在未来的研究当中应进一步探讨干预内皮细胞功能的有效靶点,这有望为缺血性心脏病及心力衰竭等纤维化性疾病提供新的治疗思路㊂ʌ参考文献ɔ[1]㊀Sattler S,Kennedy-Lydon T.The Immunology of CardiovascularHomeostasis and Pathology[M].Lydon:Springer International Pub-lishing,2017:17-118.[2]㊀Zhang H,Pu W,Liu Q,et al.Endocardium contributes to cardiacfat[J].Circ Res,2016,118(2):254-265.DOI:10.1161/CIRCRESAHA.115.307202.[3]㊀Zhang H,Pu W,Li G,et al.Endocardium minimally contributesto coronary endothelium in the embryonic ventricular free walls[J].Circ Res,2016,118(12):1880-1893.DOI:10.1161/CIR-CRESAHA.116.308749.[4]㊀He LJ,Tian XY,Zhang H,et al.BAF200is required for heartmorphogenesis and 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iNOS在不同年龄正常和冠状动脉粥样硬化血管内皮细胞中的表达发表时间：2018-11-22T15:10:00.447Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2018年5月上第9期作者：苏琳[导读] 如何通过iNOS抑制剂的使用，抑制iNOS 的表达，减少NO的生成，减少急性心肌坏死和凋亡，仍需要循证医学的不断探索。
浙江大学医学院附属邵逸夫医院全科医学科浙江杭州 310000【摘要】目的：研究不同年龄段正常人群和冠状动脉粥样硬化患者血管内皮细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达，验证iNOS 对冠状动脉粥样硬化疾病的作用。
方法：每个年龄组（20-40岁、41-50岁、51-60岁、61-70岁、70岁以上）取心脏左前降支中的一段，每组正常人群及患者各2个。
制成石蜡切片，通过免疫组化染色，观察结果。
结果：iNOS在冠状动脉粥样硬化患者血管内皮细胞中的表达明显高于正常人群血管内皮细胞中的表达。
结论：iNOS在冠状动脉粥样硬化患者血管内皮中的表达高，说明iNOS在冠状动脉粥样硬化的发生发展中起重要作用。
【关键词】iNOS；冠状动脉粥样硬化；内皮细胞冠心病是动脉粥样硬化导致器官病变的最常见类型，也是严重危害人类健康的常见病。
动脉粥样硬化的病理改变是内皮舒张因子产生减少及内皮细胞受损，平滑肌细胞增殖、脂质沉积，从而引起血管壁增厚乃至管腔狭窄，血管张力增加。
一氧化氮（nitric oxide，NO）是体内的主要舒血管活性物质，具有维持血管张力，调节血压，扩张冠状动脉，调节心肌收缩与舒张[1]，增加心肌供血等作用。
在体内，NO 主要由一氧化氮合酶（nitric oxide synthasen，NOS）催化L-精氨酸产生。
NOS在体内广泛分布[2]，其中血管内皮细胞是最为集中的部位[3]。
NOS 主要有三种不同的亚型[4]：神经型NOS（nNOS）、诱导型NOS（iNOS）及内皮细胞型（eNOS）。
当内皮细胞受到炎症等细胞因子刺激时，iNOS 会受刺激诱导而开始表达[5]。
冠状动脉微循环障碍的研究进展【摘要】本文为您介绍了冠状动脉微循环障碍的研究进展。
在概述了该领域的研究现状。
接着，探讨了影响冠状动脉微循环障碍的因素、诊断方法、治疗进展、病理生理机制以及新技术研究，全面展示了该领域的最新进展。
文章对冠状动脉微循环障碍研究的未来展望进行了分析和讨论。
通过本文的阐述，读者可以更深入地了解冠状动脉微循环障碍的相关内容，为未来研究方向提供重要参考。
【关键词】关键词：冠状动脉微循环障碍、影响因素、诊断方法、治疗进展、病理生理机制、新技术研究、未来展望。
1. 引言1.1 冠状动脉微循环障碍的研究进展概述冠状动脉微循环障碍是一种常见的心脏疾病，其发病机制至今尚未完全明确。
随着医学技术的不断发展，冠状动脉微循环障碍的研究取得了一系列重要进展。
本文将对冠状动脉微循环障碍的研究进展进行概述，以期为临床诊断和治疗提供参考。
在影响冠状动脉微循环障碍的因素方面，研究表明，高血压、高脂血症、糖尿病等心血管疾病是冠状动脉微循环障碍的重要危险因素。
心理因素、遗传因素等也可能对冠状动脉微循环产生影响。
冠状动脉微循环障碍的诊断方法也在不断完善。
包括心电图、超声心动图、核素显像等检查手段，可以帮助医生更准确地诊断患者是否患有冠状动脉微循环障碍。
在治疗方面，药物治疗、介入治疗和手术治疗等方法被广泛应用于冠状动脉微循环障碍患者，取得了一定的疗效。
新的治疗技术也在不断研究和推广，为患者提供了更多的治疗选择。
冠状动脉微循环障碍的病理生理机制和新技术研究也成为研究的热点。
通过深入了解其病理生理机制，可以为准确诊断和有效治疗提供理论依据。
新技术的引入，将为冠状动脉微循环障碍的研究和治疗带来全新的机遇和挑战。
冠状动脉微循环障碍的研究进展涉及多个方面，目前已取得一定成果，但仍需进一步深入研究才能更好地了解其发病机制和治疗方法，为患者提供更好的医疗服务。
2. 正文2.1 影响冠状动脉微循环障碍的因素影响冠状动脉微循环障碍的因素可以分为多个方面，包括生物学因素、心理因素、社会因素等。
冠心病的发病机制简介冠心病是一种常见的心脏疾病，是由于冠状动脉狭窄或阻塞导致心肌供血不足所引起的。
本文将简要介绍冠心病的发病机制。
一、动脉粥样硬化是主要原因之一动脉粥样硬化是冠心病的主要发病机制之一。
它是指在动脉内壁出现胆固醇、脂质等物质沉积，形成斑块并逐渐增大，最终形成斑块破裂、溃疡或出血，导致动脉狭窄或阻塞。
斑块内的血小板和纤维蛋白形成血栓，加剧动脉狭窄，并可能脱落形成栓子，引起心肌梗死。
二、冠状动脉痉挛也是一种发病机制冠状动脉痉挛是冠心病的另一种发病机制。
一般来说，正常情况下，血管内皮细胞会分泌一种叫做一氧化氮的物质，它具有扩张血管的作用，保持心肌血流畅通。
然而，冠心病患者的冠状动脉内皮细胞功能受损，一氧化氮的分泌减少，导致冠脉痉挛，使心肌供血不足，引发冠心病的发作。
三、血液黏稠度增加是导致冠心病的因素之一血液黏稠度增加也可能导致冠心病的发生。
当血液黏稠度增加时，血液流动变慢，容易形成血栓，导致冠状动脉狭窄或阻塞。
这种现象在高血压、高血脂、糖尿病等患者中较为常见。
四、炎症反应与冠心病发病相关炎症反应也与冠心病的发病相关。
慢性炎症是导致动脉粥样硬化的基础。
当动脉内膜受损时，炎症细胞会聚集于损伤部位，释放大量炎性介质，引起动脉内膜增厚，形成斑块。
炎症反应还能促使斑块不稳定，易于破裂形成血栓，进而阻塞冠状动脉。
五、其他发病机制除了上述几种发病机制外，冠心病的发病还与一些其他因素相关。
例如，高血压会增加心脏负荷，导致心肌供血不足；高血脂会促进动脉硬化；糖尿病会损伤内皮细胞，加速动脉粥样硬化的发展。
此外，吸烟、不良饮食习惯、缺乏锻炼等也会增加罹患冠心病的风险。
总结：冠心病的发病机制是多方面的，其中动脉粥样硬化、冠状动脉痉挛、血液黏稠度增加、炎症反应以及其他相关因素都在特定条件下促成了冠心病的发生。
进一步研究发病机制，可以为冠心病的防治提供更有效的方法和药物。
冠心病的预防和治疗策略主要包括控制危险因素（如高血压、高血脂、糖尿病）、改善生活方式（戒烟、饮食健康、适量运动）、定期体检、药物治疗等。
Human Coronary Artery Endothelial Cells(HCAEC)Catalog Number: 6020 Cell SpecificationEndothelial cells constitute the natural interface between the blood and the underlying tissue. Changes in endothelial cell function appear to play a key role in the pathogenesis of atherosclerosis. Endothelial cells synthesize and secrete activators as well as inhibitors of both the coagulation system and the fibrinolysis system in addition to mediators that influence the adhesion and aggregation of blood platelets. Endothelial cells also release molecules that control cell proliferation and modulate vessel wall tone [1]. Human endothelial cells produce antithrombotic and thrombotic factors such as t-PA and PAI-1 and respond to TNF-alpha by modifying growth characteristics, producing cytokines such as GM-CSF, expressing ICAM-1 on the surface and producing large amounts of nitric oxide and endothelin [2]. Endothelial injury, with consequent endothelial dysfunction, is caused by percutaneous transluminal coronary angioplasty [3] and may play an important role in subsequent restenosis [4]. Many of the endothelial processes can be studied in vitro using cultured cells, and HCAEC will surely be very useful to studying and understanding the molecular mechanisms involved in coronary artery diseases.HCAEC from ScienCell Research Laboratories are isolated from human coronary artery. HCAEC are cryopreserved at passage one and delivered frozen. Each vial contains >5 x 105 cells in 1 ml volume. HCAEC are characterized by immunofluorescent method with antibodies to vWF/Factor VIII and CD31 (P-CAM) and by uptake of DiI-Ac-LDL. HCAEC are negative for HIV-1, HBV, HCV, mycoplasma, bacteria, yeast and fungi. HCAEC are guaranteed to further expand for 15 population doublings at the conditions provided by ScienCell Research Laboratories.Recommended MediumIt is recommended to use Endothelial Cell Medium (ECM, Cat. No. 1001) for the culturing of HCAEC in vitro.Product UseHCAEC are for research use only. It is not approved for human or animal use, or for application in in vitro diagnostic procedures.StorageDirectly and immediately transfer cells from dry ice to liquid nitrogen upon receiving and keep the cells in liquid nitrogen until cell culture needed for experiments.ShippingDry ice.Reference[1] Elhadj, S. and Forsten, K. E. (2001) Chronic shear stress affects bovine aortic endothelial cell secreted proteoglycanproduction in vitro. Bioengineering Conference, Vol. 50:767-768.[2] Donnini, D., Perrella, G., Stel, G., Ambesi-Impiombato, F. S., Curcio, F. (2000) A new model of human aortic endothelialcells in vitro. 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Leave the flask in incubator overnight.2.Prepare complete medium: decontaminate the external surfaces of medium and mediumsupplements with 70% ethanol and transfer them to sterile field. Aseptically open each supplement tube and add them to the basal medium with a pipette. Rinse each tube with medium to recover the entire volume.3.Aspirate fibronectin solution and add 20 ml of complete medium to the flask. Leave theflask in the hood and go to thaw the cells. The fibronectin solution can be used twice.4.Place the vial in a 37o C waterbath, hold and rotate the vial gently until the contents arecompletely thawed. Remove the vial from the waterbath immediately, wipe it dry, rinse the vial with 70% ethanol and transfer it to a sterile field. Remove the cap, being careful not to touch the interior threads with fingers. Using a 1 ml eppendorf pipette gently re-suspend the contents of the vial.5.Dispense the contents of the vial into the equilibrated, fibronectin coated culture vessels.A seeding density of 5,000 cells/cm2 is recommended.Note: Dilution and centrifugation of cells after thawing are not recommended since these actions are more harmful to the cells than the effect of DMSO residue in the culture. It is also important that endothelial cells are plated in fibronectin coated flask that promotes cell attachment and growth.6.Replace the cap or cover, and gently rock the vessel to distribute the cells evenly. Loosencap if necessary to permit gas exchange.7.Return the culture vessels to the incubator.8.For best result, do not disturb the culture for at least 16 hours after the culture has beeninitiated. Change the growth medium the next day to remove the residual DMSO and unattached cells, then every other day thereafter. A healthy culture will display cobblestone or spindle shaped morphology, non-granular cytoplasm and the cell number will be double after two to three days in culture.Maintenance of Culture:1.Change the medium to fresh supplemented medium the next morning after establishing aculture from cryopreserved cells.2.Change the medium every three days thereafter, until the culture is approximately 70%confluent.3.Once the culture reaches 70% confluence, change medium every other day until theculture is approximately 90% confluent.Subculture:1.Subculture the cells when they are over 90% confluent.2.Prepare fibronectin coated flasks (2 μg/cm2) one day before subculture.3.Warm medium, trypsin/EDTA solution (T/E, cat. no. 0103), trypsin neutralizationsolution (TNS, cat. no. 0113), and DPBS to room temperature. We do not recommend warming the reagents and medium at 37o C waterbath prior to use.4.Rinse the cells with DPBS.5.Add 10 ml of DPBS first and then 2 ml of trypsin/EDTA solution into flask (in the caseof T-75 flask); gently rock the flask to make sure cells are covered by trypsin/EDTA solution; incubate the flask at 37o C incubator for 1 to 2 minutes or until cells are completely rounded up (monitored with inverted microscope). During incubation, preparea 50 ml conical centrifuge tube with 5 ml of fetal bovine serum (FBS, cat. no. 0500);transfer trypsin/EDTA solution from the flask to the 50 ml centrifuge tube (a few percent of cells may detached); continue incubate the flask at 37o C for 1 minutes (no solution in the flask at this moment); at the end of trypsinisation, one hand hold one side of flask and the other hand gently tap the other side of the flask to detach cells from attachment; check the flask under inverted microscope to make sure all cells are detached, add 5 ml of trypsin neutralization solution to the flask and transfer detached cells to the 50 ml centrifuge tube; add another 5 ml of TNS to harvest the residue cells and transfer it to the50 ml centrifuge tube. Examine the flask under inverted microscope to make sure the cellharvesting is successful by looking at the number of cells left behind. There should be less than 5%.Note: Use ScienCell Research Laboratories’ trypsin/EDTA solution that is optimized to minimize the killing of the cells by over trypsinization.6.Centrifuge the 50 ml centrifuge tube (harvested cell suspension) at 1000 rpm (BeckmanCoulter Allegra 6R centrifuge or similar) for 5 min; re-suspend cells in growth medium.7.Count cells and plate cells in a new, fibronectin coated flask with cell density asrecommended.Caution: Handling human derived products is potentially bioharzadous. Although each cell strain testes negative for HIV, HBV and HCV DNA, diagnostic tests are not necessarily 100% accurate, therefore, proper precautionsmush be taken to avoid inadvertent exposure. Always wear gloves and safety glasses when working these materials. Never mouth pipette. We recommend following the universal procedures for handling products of human origin as the minimum precaution against contamination [1].[1]. Grizzle, W. E., and Polt, S. S. (1988) Guidelines to avoid personal contamination by infective agents in research laboratories that use human tissues. J Tissue Culture Methods. 11(4).。
