三聚氰胺对动物的危害及其在饲料中的检测方法研究

渔用饲料中三聚氰胺检测的必要性及方法摘要对三聚氰胺的理化性质、用途、代谢、危害以及渔用饲料中存在三聚氰胺的可能性进行阐述，并对渔用饲料中三聚氰胺现有的检测方法进行综述。

关键词三聚氰胺；渔用饲料；危害；检测方法2007年3—4月，美国发生多起猫、狗等宠物食用含有三聚氰胺宠物食品而中毒死亡的事件；2008年9月我国发生了震惊社会各界的“三鹿奶粉事件”；随后，内地鲜鸡蛋在港被检出含有三聚氰胺而被禁售。

这些食品安全事件引起了国内外对三聚氰胺的高度重视。

因此，有必要对三聚氰胺的理化性质及相关检测方法进行探讨分析，为提高食品质量安全提供参考。

1 三聚氰胺的理化性质三聚氰胺（Melamine），别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚氰酰胺，无色至白色晶体，不可燃，少量溶于水。

分子式为C3H6N6，结构式如图1所示。

三聚氰胺显弱碱性，在弱酸性（pH值5.5～6.5）条件下，可以与羟甲基的衍生物发生缩聚反应生成树脂；在微碱性或中性环境下可与甲醛发生缩合反应，其生成物为各种羟甲基三聚氰胺。

但三聚氰胺在受热或燃烧时，会发生分解反应，产生具有刺激性气味和毒性的烟雾，其中包括氮氧化物、氢化氰、氨等。

2 三聚氰胺的用途三聚氰胺主要用途是作为工业原料，用于生产三聚氰胺甲醛树脂，同时其作为基本有机化工中间产品，用途也相当广泛。

三聚氰胺甲醛树脂具有良好的绝缘性能，耐老化、耐水、耐电弧、耐热、不易燃、耐化学腐蚀，机械强度与光泽度较佳，其硬度高于脲醛树脂，在各个行业广泛应用，如医药、木材、涂料、皮革、塑料、纺织、造纸等。

此外，三聚氰胺还可以用于生产减水剂、阻燃剂、甲醛清洁剂等。

3 三聚氰胺的危害三聚氰胺在机体内不会迅速发生任何类型的代谢变化，属于不活泼代谢或惰性代谢，其进入机体后通过尿液原样排出。

三聚氰胺对不同动物的毒性有所差异，试验表明，长期喂食三聚氰胺可导致动物发生膀胱结石、肾结石。

因此，农业部“关于严厉打击非法生产经营和使用‘蛋白精’违法行为的通知”（农牧发〔2007〕8号）中明确规定，以三聚氰胺等为原料的“蛋白精”已经被列为我国明令禁止的非法添加物，禁止在任何饲料中使用。

饲料中三聚氰胺的检测方法三聚氰胺(melamine)简称三胺，学名三氨三嗪，是一种重要的氮杂环有机化工原料，在饲料工业中作为粘合剂使用。

目前国际上通常采用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白质的含量。

即求出氮的含量，再乘以一定的换算系数(通常用6．25系数计算)得出蛋白质含量。

由于三聚氰胺分子中含有大量氮元素，每个三聚氰胺分子中都含有6个氮原子，而在原料的粗蛋白检测过程中，用浓硫酸消化过程可以将三聚氰胺分解掉．但在最后的计算中，三聚氰胺中的氮原子即可提高粗蛋白的比率，造成蛋白含量虚假增高。

因此只要在饲料中添加一些含氮量高的化学物质，就可在检测中造成蛋白质含量达标的假象。

饲料中非法添加化工原料．可以提高蛋白质检测数值，而用全氮测定法测饲料和食品中的蛋白质含量时根本不能区分这种伪蛋白氮。

在饲料中少量添加三聚氰胺即可大大提高蛋白含量。

l三聚氰胺的性质1．1物理性质分子式C3N6H6或C3N3(NH2)3，分子量126．12,为纯白色单斜棱晶体，无味，低毒，密度1．573 g ／cm3〔16℃〕。

常压熔点354℃(分解)；快速加热升华，升华温度300℃。

溶于热水，微溶于冷水，极易溶于热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。

在一般情况下较稳定，但在高温下可能会分解放出氰化物。

1．2化学性质三聚氰胺的水溶液呈弱碱性(pKb=8)，与盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等都能形成三聚氰胺盐。

在中性或微碱性情况下，与甲醛缩合而成各种羟甲基三聚氰胺，但在微酸性环境中(pH值5．5-6．5)与羟甲基的衍生物进展缩聚反响而生成树脂产物。

在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸。

三聚氰胺与醛类反响生成加成化合物，其中三聚氰胺与甲醛水溶液的反响是最重要的反响。

2饲料中三聚氰胺的检测方法2．1试剂盒检测法fELISAl利用萃取液通过均质与震荡的方式提取样品中的三聚氰胺进展免疫测定。

普通蛋白质含氮量只有16%，但三聚氰胺含氮量可达66.7%，为提高饲料中蛋白质的含氮量，部分非法分子将三聚氰胺添加到饲料和食品中。

动物长期摄入含三聚氰胺的饲料，会产生很大的毒性作用。

动物会不仅出现肾衰竭而死亡，而且会危害人体健康。

我国明令禁止在任何饲料中添加以三聚氰胺等为原料的“蛋白精”。

检测三聚氰酸的常用方法有GC-MS/MS 法、LC-MS/MS法、HPLC法等。

目前只有农业行业有对饲料中三聚氰胺残留的标准，国家标准尚没有。

GC-MS法、HPLC法是农业行业标准中的规定方法。

GC-MS 法的前处理比较繁琐，需衍生化。

饲料及食品添加剂中有复杂的基质成分，存在许多干扰因素，影响检测结果。

本文优化质谱条件，应用高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS），为从源头控制饲料及食品安全提供保障。

1　材料与方法1.1　仪器与试剂　三聚氰胺分析纯，不低于99.5%的纯度。

称取10 mg三聚氰胺，使用10 mL容量瓶，设置三聚氰胺标准溶液，作为标准储备液，用流动相定容。

分析纯为甲酸、乙醇。

使用仪器为安捷伦1100LC-Trap-XCT系统。

1.2　处理样品　在批发市场购买饲料与食品样品。

粉碎样品，将5 g样品放入具塞锥形瓶中。

加入20 mL体积比1∶1的水-乙醇溶液，含体积分数0.1%的甲酸。

10 min超声波振荡，然后过滤，使用20 mL上述提取液再次提取残渣。

过滤，合并滤液。

定容至 5 mL。

使用氮吹仪上浓缩，使用滤膜0.45μm过滤。

1.3　检测条件　质谱条件：扫描范围为m/ z44-150。

4.0×105Pa的雾化器压力，97.4 V的毛细管出口电压，3909 V的毛细管电压，正离子化模式的电喷雾电离，9 L/min的干燥气流量，0.5 V的碎裂电压，350℃的干燥气温度。

色谱条件：体积比5∶95，流动相为乙腈-0.1%甲酸。

色谱柱Kromasil-C18柱，5μm，4.6 mm×250 mm，进样量5μL，0.4 mL/min的流速。

氮吹仪在宠物饲料样品中三聚氰胺的最新检测方法及应用三聚胺学名三氨三嗪, 分子量：126.12，是一种重要的氮杂环有机化工原料。

三聚氰胺显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐。

在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸。

三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物。

三聚氰胺与醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料、厨房用具、防火纤维、商业滤膜、胶水和阻燃剂，部分亚洲国家，也被用来制造化肥。

一、实验材料宠物饲料样品；二、实验试剂甲醇、乙腈；氨水、乙酸铅、三氯乙酸、三聚氰胺标准品三、实验仪器自动氮吹仪固相萃取仪四、实验方法1) 标准样品配制：取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000 ppm的标准溶液，使用时，以提取液(0.1%三氯乙酸)稀释至所要的浓度。

2) 提取：称取饲料样品5g，加入50ml 0.1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL 2%乙酸铅溶液，超声20min。

然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心1 0min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)。

3) 净化(PCX小柱，60mg/3mL) ：4) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水5) 上样：加入提取液3mL6) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；弃去淋洗液并开启空气源压力通过固相萃取小柱。

7) 洗脱：5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱。

(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL甲醇)。

8) 浓缩：50℃，全自动氮吹仪空气吹干，20%甲醇/水定容至2mL，HPLC分析或衍生后GC/MS分析。

饲粮三聚氰胺对肉鸡生产性能、健康的影响和组织残留、消除规律的研究的开题报告一、选题背景三聚氰胺是一种有毒的化学物质，常被用于生产工业品和农业用品中。

在饲料中添加三聚氰胺也常常被用于提高禽畜的生长速度和肉质鲜嫩程度。

然而，过量使用三聚氰胺会对肉禽的健康和生产性能造成严重的影响。

因此，研究三聚氰胺饲料对肉鸡的影响及其组织残留、消除规律具有重要意义。

二、研究目的本文旨在探究饲粮中添加三聚氰胺对肉鸡生产性能和健康的影响，以及其在肉鸡体内的组织残留和消除规律，为科学合理地使用饲料提供理论参考和实践指导。

三、研究内容和方法1. 研究内容（1）调查三聚氰胺在饲料中的使用情况及其影响程度。

（2）分析饲粮中添加不同浓度的三聚氰胺对肉鸡生产性能（体重、增重和饲料转化率）的影响。

（3）评估不同浓度三聚氰胺在肉鸡体内的组织残留情况，以及在撤离之后的消除规律。

（4）探究不同浓度的三聚氰胺对肉鸡健康的影响。

2. 研究方法（1）文献调研法。

调研国内外有关三聚氰胺在饲料添加中的使用情况及其对肉鸡的影响及现状。

（2）实验法。

将肉鸡分为实验组和对照组，实验组分别添加不同浓度的三聚氰胺，观察其生产性能和健康状况。

然后检测其体内三聚氰胺的残留及消除规律。

四、研究意义和预期结果本研究意义在于从科学角度探究三聚氰胺在饲料添加中的合理使用方法，保证肉禽的生产性能，并减轻对肉鸡健康及人民群众安全生产造成的危害。

预期结果是，三聚氰胺在肉鸡体内的消除会受到许多因素的影响，例如三聚氰胺的摄入量，肉鸡的性别、年龄、种类、生长环境等，因此三聚氰胺的使用应在饲料中谨慎使用，选择低浓度，同时进行科学监督与管理，为市场提供安全的肉鸡产品。

三聚氰胺对断奶仔猪的毒性效应和血浆清除规律的研究的开题报告题目：三聚氰胺对断奶仔猪的毒性效应和血浆清除规律的研究摘要：三聚氰胺是一种广泛应用于各种工业产品中的化学物质。

但是，由于其被添加到动物饲料中以提高蛋白质含量的行为，引发了全球2008年的三聚氰胺事件。

在这次事件中，很多猪、狗和猫死亡，引起人们对三聚氰胺毒性的关注。

本研究旨在探究三聚氰胺对断奶仔猪的毒性效应和血浆清除规律。

本研究将拟定如下研究内容和方法：1、实验目的：探究不同剂量三聚氰胺对断奶仔猪生长发育的影响；研究三聚氰胺在断奶仔猪体内的清除规律。

2、实验方法：①实验设计：本实验将三聚氰胺按不同剂量添加到断奶仔猪饲料中，分为实验组和对照组，每组分别设3个剂量。

实验期为28天。

②实验对象：选择健康断奶仔猪40头，随机分配到实验组和对照组中，每组20头。

实验开始时，对每个猪体重、身高、腰围、胸围进行测量。

③药物剂量：实验组每头猪每天给予不同剂量的三聚氰胺添加在饲料中，对照组给予普通饲料。

④实验观察：每3天测量猪的身高、体重等指标，并进行饲料摄入量的记录。

实验期结束后，取血样品收集血浆。

⑤实验数据处理：对实验过程中的生长数据进行记录和分析，比较观察实验组和对照组之间的生长发育差异；采用高效液相色谱法测量血浆中三聚氰胺浓度并比较实验组与对照组的差异。

3、预期结果：本实验所得数据将分析三聚氰胺对断奶仔猪生长发育的影响，研究三聚氰胺在断奶仔猪体内的清除规律，为人们对三聚氰胺危害的认识提供新的数据和实验结果。

4、研究意义：本研究将对三聚氰胺的毒性影响进行较为全面的探究，为保护农牧业生产动物的身体健康提供基础数据和研究思路。

此外，本研究也将提高大众关于三聚氰胺等有害物质危害的认识，增强防范意识和科学精神。

三聚氰胺检测方法
三聚氰胺是一种有机化合物，常用于制造塑料、胶粘剂和涂料等工业产品。

然而，由于其毒性较高，三聚氰胺被广泛用作食品和饲料中的掺假物质，这对人和动物的健康构成了威胁。

因此，需要采用有效的方法进行三聚氰胺的检测。

以下是几种常用的三聚氰胺检测方法：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：这是一种常用的分析方法，可以在饲料和食品中测定三聚氰胺含量。

样品经过净化、提取和洗脱等步骤后，通过高效液相色谱进行分离和定量分析。

2. 饲料掺假检测：主要通过检测饲料中的蛋白质含量来排除三聚氰胺的掺假情况。

由于三聚氰胺会增加饲料样品中的蛋白含量，因此检测饲料中的蛋白质含量可以间接检测三聚氰胺。

3. 红外光谱法（IR）：通过测量样品在红外光谱范围内的吸收和散射特性来确定三聚氰胺的存在。

这种方法需要先将样品制备成片状，然后使用红外光谱仪进行测量和分析。

4. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）：这是一种基于抗体-抗原特异性反应的分析方法，可以快速准确地测定三聚氰胺的含量。

ELISA方法可以用于快速筛查食品和饲料样品中的三聚氰胺。

这些方法都具有各自的优缺点和适应范围，选择合适的方法应根据实际需求和样品性质进行综合考虑。