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HPLC法测定去甲斑蝥素片的含量
王波;周维利;司淑媛
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2005(024)006
【摘要】目的建立去甲斑蝥素片中去甲斑蝥素的HPLC含量测定方法.方法用C18柱,流动相为0.020mol·L-1磷酸二氢钾溶液-甲醇(70:30)(用磷酸调节pH值至3.1);检测波长为213nm.结果线性范围为0.068～0.340mg·ml-1.去甲斑蝥素的高、中、低三个加入量的回收率分别为98.9%(RSD=1.1%),98.4%(RSD=1.2%)和
99.5%(RSD=0.9%).结论本法结果准确,重现性好.
【总页数】2页(P351-352)
【作者】王波;周维利;司淑媛
【作者单位】山东省药品检检所济南 250012;山东省药品检检所济南 250012;济南槐荫人民医院,济南,250021
【正文语种】中文
【中图分类】TQ460.7+2
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田葳;潘淑明
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5.HPLC法测定氨酚那敏片、维B1那敏片复合包装中维B1那敏片二种成分的含量 [J], 袁哲; 尹燕杰; 张昊天
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RP-HPLC法测定固体脂质纳米粒中斑蝥素的含量
孙萍;张钟月
【期刊名称】《山东中医杂志》
【年(卷),期】2011(30)9
【摘要】目的:建立固体脂质纳米粒混悬液中斑蝥素的含量测定方法。
方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Phenomenex C18(150 mm×460 mm,5μm);流动相:
乙腈-水(40∶60);检测波长:233 nm;柱温:30℃。
结果:斑蝥素与其他组分分离良好,
线性范围2.4～24.0μg.ml-1(r=0.9997),平均回收率为99.8%,RSD为0.68%(n=5)。
结论:该方法简便、准确,可作为该制剂的质量控制方法。
【总页数】2页(P657-658)
【关键词】斑蝥素;反相高效液相色谱法;固体脂质纳米粒;含量测定
【作者】孙萍;张钟月
【作者单位】山东中医药大学附属医院;山东中医药大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R282.5
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第31卷第6期吉林医药学院学报v01．31N o．62010年12月Jour nal of Ji li n M e di cal C ol ege D e e．2010—333一文章编号：1673-2995(2010)06-0333-03论著H PL C法测定斑蝥中斑蝥素的含量林长旭1，王彦1，鞠成国2，赵红丹1，荆丽波3(1．沈阳双鼎制药有限公司，辽宁沈阳110179；2．辽宁中医药大学，辽宁大连116600；3．湖北中医药大学，湖北武汉430061)摘要：目的建立斑蝥中斑蝥素的含量测定方法。
方法采用A gi l ent1100液相色谱仪，A gl i e nt TC—C。
8 (4．6m mx250m m)色谱柱；流速：1m E／r ai n；柱温：30℃；流动相：甲醇-水(22：78)；检测波长：230nm。
结果斑蝥素在0．042—0．462I xg范围内线性关系良好，r=0．9991，平均回收率为98．4％，R SD=0．90(n=6)。
结论法简便快速，结果准确，重现性好，可作为斑蝥中斑蝥素的含量测定方法。
关键词：斑蝥；斑蝥素；H PL C中图分类号：R284．I文献标识码：AD et er m i nat i on of c ont e nt of C ant har i di n i n B l i st er B e et l e by H PL CL I N C hang—X U l，W A N G Y anl，JU C heng—gu02，Z H A O H ong—danl，J I N G L i—b03(1．Shenyang Shuangdi ng Ph ar m aceu t i cal C o．，L t d．，She nyang，L i a oni ng Provi nce，110179；2．Li a oni ng U ni ver s i t y ofTra di t i onal C hi n es e M e di ci ne，D al i a n，Li aoni n g Provi nce，116600；3．H ubei U ni ver s i t y of C hi nese M edi cine，W uhan，H ubei Pr ovi nce，430061，C hi na)A bst r act：O bj ect i ve T o est abl i sh a m et h od of det e rm i ni ng c o nt e n t of C a nt l l ar i di n i nB l i s t er B e e t l e by H PL C．M et h-ods A gi l e nt1100H P LC and A gi l e nt T C-C l B colum n(4．6m m X150删)w鹊used t O s et t he m obi l e phas e at m e t ha—nol-w at er(22：78)。
注射用去甲斑蝥酸钠细菌内毒素检查方法研究曾晓黎;闫凌霄【摘要】目的建立注射用去甲斑蝥酸钠的细菌内毒素检测方法.方法利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理对注射用去甲斑蝥酸钠中细菌内毒素进行测定.结果注射用去甲斑蝥酸钠稀释浓度1 g·L-1为不干扰测定浓度,限值确定为每1mg注射用去甲斑蝥酸钠中细菌内毒素含量应小于3.3 EU.结论细菌内毒素检查法可用于控制注射用去甲斑蝥酸钠中内毒素的含量,方法灵敏、可靠、经济.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2009(024)006【总页数】2页(P480-481)【关键词】注射用去甲斑蝥酸钠;细菌内毒素;干扰实验【作者】曾晓黎;闫凌霄【作者单位】陕西省安康市药品检验所,陕西,安康,725000;陕西省食品药品检验所,陕西,西安,710061【正文语种】中文【中图分类】R927去甲斑蝥酸钠是目前国内外少有的新型抗肿瘤药，临床用于肝癌、食管癌、胃癌等术前用药或联合化疗[1]，具有较强的抗肿瘤、抗病毒、抑真菌、升高白细胞数等多种活性。
随着对多种疾病治疗效果的发现，临床使用愈加宽泛。
目前注射用去甲斑蝥酸钠粉针剂为一新剂型，尚无国家标准，有关控制其细菌内毒素方法也无报道，笔者实验拟建立注射用去甲斑蝥酸钠的细菌内毒素检查方法。
1.1 仪器 ZH-2型自动漩涡混合器(天津药典标准仪器厂)；DC3A型干湿恒温器(南京三爱斯技术开发有限公司)；BET-32型细菌内毒素测定仪(天津大学仪器厂)。
1.2 药品注射用去甲斑蝥酸钠(西安海欣药业有限公司，批号070201，070501，070503)；注射用去甲斑蝥酸钠(吉林市卓怡康纳制药有限公司，批号080306)。
1.3 试剂鲎试剂(湛江博康海洋生物有限公司，灵敏度(λ)0.5 EU·mL-1，批号0803031；鲎试剂(厦门市鲎试剂实验厂有限公司，灵敏度(λ)0.5 EU·mL-1，批号070841)；细菌内毒素工作标准品(中国药品生物制品检定所，规格120 EU·支-1，批号150601-200862)；细菌内毒素检查用水BET(湛江博康海洋生物有限公司，规格5 mL·支-1，批号081231)。
注射用去甲斑蝥酸钠中甘露醇的含量测定
祝晶;王璐;何劼毅;漆欣筑
【期刊名称】《贵州师范大学学报:自然科学版》
【年(卷),期】2022(40)5
【摘要】通过采用磺化交联的苯乙烯二乙烯基苯共聚物为填充剂的强阳离子钙型
交换柱,以水为流动相,流速0.5 mL/min,柱温80℃,检测温度为55℃。
结果显示:甘露醇在0.04936~0.2468 mg范围内,线性关系良好(r=0.9999),精密度RSD为
0.19%,重复性RSD为0.30%,平均回收率为99.34%,RSD为0.67%(n=9)。
3个批次的样品含量测定分别为952.5225 mg/g、954.1896 mg/g、345.7485 mg/g。
建立高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RID)测定去甲斑蝥酸钠中辅料甘露醇的含量。
此方法专属性强,精密度稳定性良好,准确度较高,可用作注射用斑蝥酸钠中辅料甘露醇的含量测定方法,为完善此药品的检验标准提供参考。
【总页数】5页(P75-79)
【作者】祝晶;王璐;何劼毅;漆欣筑
【作者单位】贵州省食品药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R917
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RP-HPLC法测定斑蝥素脂肪乳剂中斑蝥素的含量邹建军;蒋春莲;张胜强;肖大伟【期刊名称】《药学与临床研究》【年(卷),期】2003(011)005【摘要】目的首次建立RP-HPLC法测定斑蝥素脂肪乳剂中斑蝥素的含量.方法采用C18柱,甲醇-水系统为流动相,梯度洗脱,紫外检测器(检测波长为227 nm,灵敏度为0.005AUFS),对斑蝥素脂肪乳剂中斑蝥素进行含量测定.结果样品处理简单,且能将斑蝥素与脂肪乳中的油脂、磷脂等主要杂质分离出来,斑蝥素在2.08～31.2μg*ml-1范围内峰面积与浓度线性关系良好(r=0.994),最低可定量浓度为1.04μg*ml-1,样品回收率为94.8%以上,进样精密度为1.02%(n=5).结论该法测定脂肪乳样品分离效果好,回收率高,可作为斑蝥素脂肪乳剂质量控制方法.【总页数】3页(P31-33)【作者】邹建军;蒋春莲;张胜强;肖大伟【作者单位】中国药科大学,南京,210009;湖南省衡南县第二人民医院,衡南,421001;中国药科大学,南京,210009;南京市第一人民医院,南京,210006【正文语种】中文【中图分类】TQ460.7+2【相关文献】1.HPLC法测定绿芫菁中斑蝥素的含量 [J], 王腾蛟;赵成坚;谷颖乐;徐永莉;李力2.HPLC法测定5个产地斑蝥药材中斑蝥素的含量 [J], 刘沁;陈建伟;李祥;蔡宝昌3.气相色谱-质谱法测定育发类化妆品中氮芥、斑蝥素的含量 [J], 任睿;李坤丽;汪瑾彦;康威;苏进;杨淑珍;张园园4.高效液相色谱内标法测定斑蝥中斑蝥素的含量 [J], 刘小松;王方方;国光梅;汪冶5.RP-HPLC法测定固体脂质纳米粒中斑蝥素的含量 [J], 孙萍;张钟月因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定去甲斑蝥酸钠注射液含量及有关物质杜宁（江苏省食品药品检验所南京２１０００８）摘要：目的：建立去甲斑蝥酸钠注射液含量HPLC及有关物质的测定方法。
方法:以C18柱，0.1mol·L-1磷酸氢二钾溶液-乙腈（80∶20）（磷酸调节pH值至2.6）为流动相，流量为1.0ml·min-1，柱温30℃。
检测波长为210nm。
结果:在浓度为20.00～200.04μg·mL-1范围内，本法线形关系良好，相关系数r＝0.9997（n=7）。
结论:该方法简单，准确，可以作为去甲斑蝥酸钠注射液含量和有关物质的测定方法。
关键词：去甲斑蝥酸钠注射液含量测定有关物质HPLC中图分类号：Ｒ９２７．２文献标识码：Ｂ文章编号：１６７２－８３５１（２０１２）０１－０００７－０２Determination of Sodium Demethylcantharidate Injection and its Related Substances by HPLCDu Ning（Jiangsu Institute for Food and Drug Control，Nanjing210008，China）Abstract：Objective:To develop a HPLC method of determinating of sodium demethylcantharidate injection and its related substances. Methods:The determination was carried out on a C18column.The mobile phase was0.1mol·L-1dipotassium hydrogen phosphate solution－acetonitrile（80∶20）（adjusted pH to2.6with phosphoric acid）with flow rate of1.0ml·min-1and the column temperature was30℃。
去甲斑蝥素片的制备工艺及其含量测定目的建立一种去甲斑蝥素片的制备方法，采用HPLC法检测去甲斑蝥素片的含量。
方法以去甲斑蝥素为主药，以淀粉、微晶纤维素（MCC）、乳糖为填充剂，以羧甲基淀粉钠（CMS-Na）为崩解剂，以聚乙烯吡咯烷酮-K30（PVP-K30）为黏合剂，以硬脂酸镁为润滑剂，制备去甲斑蝥素片。
采用高效液相色谱法（HPLC）检测去甲斑蝥素片的含量；HPLC色谱条件为Spherigel ODS-C18色谱柱；流动相：乙腈-pH 3.1磷酸水溶液（10∶90）（V/V）；流速：1.0 ml/min；柱温：25℃；检测波长：210 nm；进样量：20 μl。
選定A（淀粉）、B（MCC）、C （CMS-Na）为考察因素，采用U7（73）均匀设计，通过溶出度指标优化去甲斑蝥素片的制备工艺。
结果HPLC标准曲线方程：Y=925.374X-1778.8（r=0.9999）；线性范围：20～800 μg/ml。
日内精密度RSD：1.880%、0.172%、0.945%；日间精密度RSD：1.420%、1.126%、1.468%。
低、中、高浓度的回收率分别为（98.77±1.24）%、（100.08±1.14）%、（99.59±0.58）%（n=5）。
均匀设计回归方程为：K=-0.107-0.004A+0.017B-0.025C-0.0002B2+0.007C2（F=245.312，P＜0.05）；确定优化处方组成为：淀粉10%、MCC 40%、乳糖43%、CMS-Na 7%；验证得溶出速率常数K为（0.332±0.019）/min。
结论按优选处方制备的去甲斑蝥素片外形美观，流动性、润滑性、压缩成形性均良好；采用HPLC法可有效控制片剂质量。
[Abstract] Objective To establish a preparation method of Norcantharidin tablets，and to detect content of Norcantharidin Tablets by using HPLC method. Methods Norcantharidin tablets were prepared with norcantharidin as the main drug，microcrystalline cellulose （MCC）and lactose as the fillers，sodium carboxymethyl starch （CMS-Na）as the disintegrating agent，polyvinylpyrrolidone K30 （PVP-K30）as adhesive.Content of Norcantharidin tablets was detected with the method of HPLC；HPLC chromatographic conditions were：Spherigel ODS C18 chromatographic column；mobile phase：acetonitrile - pH 3.1 phosphoric acid aqueous solution （10∶90）（V/V）；the flow rate of 1.0 ml/min；column temperature 25 ℃；detection wavelength of 210 nm；sample quantity 20 μl.The factors A （starch），B （MCC）and C （CMS-Na）were selected，U7 （73）uniform design was adopted，and preparation of Norcantharidin tablets was optimized through the dissolution index. Results HPLC standard curve equation：Y=925.374X-1778.8 （r=0.9999）；linear range：20～800 μg/ml.The intra-day precision RSD were 1.880%，0.172%，0.945%；inter-day precision RSD were 1.420%，1.126% and 1.468%.Coefficient of recovery in low，medium and high concentrations were separately （98.77±1.24）%，（100.08±1.14）%，（99.59±0.58）% （n=5）.Uniform design regression equation was K=-0.107-0.004A+0.017B-0.025C-0.0002B2+0.007C2 （F=245.312，P＜0.05）；the optimized prescription composition was 10% starch，40% MCC，43% lactose and 7% CMS-Na；dissolution rate constant K was validated of （0.332±0.019）/min. Conclusion Norcantharidin tablets prepared with the optimized prescription preparation are with beautiful shape，good liquidity，lubricity and compressionformability；HPLC method can effectively control the quality of tablets.[Key words] Norcantharidin tablets；High performance liquid chromatography；Dissolution；Uniform design去甲斑蝥素是人工合成的新型抗癌药物，其作用机制在于促进肿瘤细胞及感染的细胞死亡，在G2期与M期特异性地抑制肿瘤细胞的增殖及癌细胞DNA的合成，干扰细胞分裂，破坏癌细胞骨架及其超微结构，提高癌细胞呼吸控制率，调节机体免疫力；在抗癌的同时，可减少机体的不良反应。
RP-HPLC法测定注射用去甲斑蝥酸钠的含量及有关物质
发表时间：2011-08-08T10:39:51.980Z 来源：《中国健康月刊（学术版）》2011年第6期供稿作者：高坤1于艳萍2王晓英1 [导读] 目的:建立高效液相色谱法测定注射用去甲斑蝥酸钠的含量及有关物质。
高坤1于艳萍2王晓英1
【摘要】目的:建立高效液相色谱法测定注射用去甲斑蝥酸钠的含量及有关物质。
方法:色谱柱为ODS-C18柱（4.6×200mm, 5μm），流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢铵溶液（8:92，磷酸调节pH3.1），检测波长为211nm。
结果:去甲斑蝥酸素浓度在0.25～4.0mg·mL 范围内线性关系良好，r=0.9997，两种制剂规格的平均回收率为分别为99.48%和99.63%,RSD分别为0.62%和0.44%。
结论:该方法结果准确，适用于注射用去甲斑蝥酸钠的质量控制。
【关键词】注射用去甲斑蝥酸钠；含量测定；有关物质
【中图分类号】R485【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)06-0413-02 去甲斑蝥酸钠是一种抗肿瘤药物，由去甲斑蝥素与氢氧化钠反应制得。
去甲斑蝥酸钠临床用于肝癌、食管癌、肺癌等的书签用药或联合用药，能够干扰癌细胞的分裂，抑制癌细胞DNA合成，但对正常骨髓细胞不抑制，并能升高白细胞[1]。
在去甲斑蝥酸钠注射液的国家标准中[2]，采用在外分光光度法进行含量测定，以去甲斑蝥素为对照品。
注射用去甲斑蝥素尚无国家标准，本文则采用RP-HPLC法对注射用去甲斑蝥酸钠的含量及有关物质进行了测定。
1仪器与试药
日立L2000高效液相色谱仪；注射用去甲斑蝥酸钠（自制，规格：10mg/支）；去甲斑蝥素对照品；磷酸二氢铵（分析纯，天津市博迪化工有限公司）；乙腈（天津康科德化工有限公司）；磷酸（分析纯，天津市博迪化工有限公司）。
2方法与结果
2.1 色谱条件:通过酸、碱、氧化、热、光破坏试验，确定一下色谱条件，在该条件下，所有降解产物色谱峰与主成分色谱峰分离度良好。
色谱柱：ODS-C18柱（4.6× 200mm，5μm）；流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢铵溶液（8:92，磷酸调节pH3.1），检测波长：211nm；流速：1.0mL·min-1；柱温为35℃，进样量为20μL。
2.2专属性考察:①取流动相20 μL注入液相色谱仪，结果表明流动相不干扰有关物质的检查。
②取辅料适量，加流动相适量使溶解，摇匀，滤过；取滤液20 μL注入液相色谱仪，结果表明辅料无干扰。
2.3定量限:取去甲斑蝥素浓度为1.0 mg·mL-1的对照品溶液1mL，加水稀释至100mL，进样20μL测定，确定定量限为2.1μg。
2.4标准曲线的绘制：对照品溶液：取去甲斑蝥素对照品约50mg,精密称定，置10mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
精密量取对照品溶液适量置10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，配制成含去甲斑蝥素对照品0.25，0.5，1.0，2.0，
3.0，
4.0 mg·mL 的溶液，分别精密量取20μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线，得回归方程A=474766C，r=0.9997。
去甲斑蝥素质量浓度在0.25～4.0mg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5精密度试验:为考察方法的精密度，取同一份去甲斑蝥素浓度为1.0 mg·mL 的对照品溶液20μL，重复进样6次，测得峰面积的RSD 为0.18%。
2.6稳定性试验：取去甲斑蝥素浓度为1.0 mg·mL 的对照品溶液，室温放置，分别于0，2，4，6，8，10h取20μL进样，测得峰面积的RSD为0.71%，说明溶液室温放置在10h内稳定。
2.7回收率试验：按处方量的80%，100%和120%进行回收率试验。
分别取去甲斑蝥素对照品适量（约80，100，120mg），精密称定，然后按处方比例加入辅料，加流动相稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件测定，计算回收率。
结果表明低、中、高三种浓度的回收率（n=3）分别为100.3%，99.4%和99.2%，平均回收率（n=9）为99.63%，RSD为0.62%。
说明选取的高效液相色谱法准确度良好。
2.8含量测定：取自制样品，倾出内容物，精密称定（约相当于去甲斑蝥素10mg），置10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取对照品约10mg，精密称定，置10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
分别去上述溶液各20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果表明三批样品的含量分别为101.7%，101.7%，101.8%。
2.9有关物质测定:
2.9.1 测定方法:取装量差异项下的本品适量，精密称定（相当于去甲斑蝥素20 mg）于10mL量瓶中,加流动相稀释制成每1mL中约含去甲斑蝥素2mg的溶液作为供试品溶液；精密量取2 mL于100mL量瓶，加流动相制成每1mL中含40μg去甲斑蝥素的溶液，作为对照溶液。
以高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录V D)测定，精密量取对照溶液20μL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高约为满量程的20%。
精密量取供试品溶液20μL注入液相色谱仪，记录时间为去甲斑蝥素保留时间的3倍。
在供试品溶液色谱图中，所有杂质峰面积之和，不得大于对照溶液的主峰面积。
测得三批样品的有关物质量为0.92%，0.84%，0.93%。
3 讨论
由于目前仍无注射用去甲斑蝥酸钠的国家标准，根据去甲斑蝥酸钠注射液的相关标准，采用乙腈-0.01mol·L 磷酸二氢铵溶液（8:92，磷酸调节pH3.1）为流动相，系统色谱峰对称性良好，保留时间在7.1min左右，能使主峰与酸、碱、氧化、高温破坏产生的降解产物分离。
潘正[3]等人曾报道C18柱对去甲斑蝥酸钠的保留能力较差，可能是由于他们测定的是去甲斑蝥酸钠冻干粉针，该制剂的辅料对C18柱的保留能力产生了一定的影响。
陈杰[4]等曾经用HPLC法测定注射用去甲斑蝥酸钠含量与有关物质，流动相为0.02 mol·L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）-甲醇（75:25），采用DAD检测。
本法pH与其接近，但用乙腈代替甲醇，降低了有机相用量；采用紫外分光光度法，使主峰与破坏后的降解产物峰和杂质峰都得到了良好的分离。
本法对三批样品进行了检验，结果有关物质均不大于1.0%。
本法方便、准确，可以用作注射用去甲斑蝥酸钠的质量控制方法。
参考文献
[1] 李柏, 凌昌全. 去甲斑蝥素基础及临床研究进展[ J ]. 中草药, 2002, 33(2) : 184-185
[2]国家药典委员会.国家药品标准（三册）[S]. 北京：人民卫生出版社，2002: 62
[3]潘正, 付侃, 付晓泰. RP-HPLC法测定去甲斑蝥酸钠冻干粉针的含量[J]. 中国药物应用与检测, 2009, 6 (4): 215-217
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