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DNA的粗提取和鉴定PPT课件

DNA的粗提取和鉴定PPT课件

损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞
液
2020/1/16
18
讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液 中的上清液？
答：血液分为两部分，一部分是血浆，一部分 是血细胞，离心后除去的上清液是血浆
5、方法步骤
①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到
50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL，
3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
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4
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5
实验用具：铁架台；铁环；镊子；三角
架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒； 滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧 杯；（100ml，一个，50ml、500ml各 二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试 管夹；纱布。
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（四） DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出
DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒 精溶液（体积分数为95％），静置2-3min，溶 液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。 用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用 滤纸吸取上面的水
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三、实验案例 （一）案例一：以鸡血为实验材料进行DNA的 粗提取 1、鸡血细胞做实验材料的原因
①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得
②用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和 离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长
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4、课前准备鸡血细胞液
①过程
取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝
③析出含DNA的粘稠物

选修一5.1DNA的粗提取和鉴定人教版高二生物下课件(共29张PPT)

选修一5.1DNA的粗提取和鉴定人教版高二生物下课件(共29张PPT)
再用来自mol/L的NaCl溶液溶 解DNA。
Q1：在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，搅拌 1min，注意应沿一个方向，目的是？
目的是使DNA充分溶解
过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液，目的是什么？
含DNA的滤液、除去不溶的杂质
含核物质的滤液
Q2：再加蒸馏水的目的是？同时搅拌的目的是？（轻轻地沿 一个方向不停地均与搅拌）过滤含DNA黏稠物的0．14mol/L 的NaCl溶液，目的是什么？
部分发生盐析(沉淀) 溶解 某些蛋白质可溶
（二）对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶水解蛋白质，对DNA没有影响。 ②60～80°C的高温中，蛋白质变性后溶解度降 低而产生沉淀，DNA在80°C以上才会变性。 ③洗涤剂瓦解细胞膜（脂质），对DNA没有影 响（在植物材料中提取DNA使用）。
DNA具有耐受性
提取DNA的方法：利用DNA与蛋白质、 RNA 和 脂质等在 物理和 化学 性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
一、DNA的提取的原理： （一）溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 液中和酒精中的溶解度不同。
❖ 据图： ❖ ①在什么浓度下，DNA的溶解度最小？
0.14 mol/L
课题 DNA的粗提取与鉴定
人教版高二年级 选修1
生物体内的DNA犹如“雾中花”，神秘莫 测，真实的DNA是什么模样？
探究DNA的提取与鉴定的原理
【问题思考】 1.细胞中有哪些生物大分子？ 2.DNA与蛋白质的物理化学性质有哪些主要差异？ 3.提取生物大分子的基本思路是什么？ 4.提取DNA分子的方法是什么？
DNA含量相对较高的组织，成功的可能性更大。
材料：新鲜的鸡血（注意要加入柠檬酸钠，防止血液凝固）

专题DNA的粗提取与鉴定ppt

专题DNA的粗提取与鉴定ppt
刑事侦查
利用DNA粗提取技术，可对犯罪现场遗留的生物检材进行提取和分析，为刑事侦查提供重 要线索。
亲子鉴定
通过DNA粗提取和基因比对，能够准确地判定亲属关系，为家庭纠纷、遗产继承等问题的 解决提供科学依据。
dna粗提取在生物医学研究中的应用前景
01
疾病诊断与预测
通过DNA粗提取技术，可对疾病相关基因进行快速、准确的检测和分
解决方法
控制好温度、酸度以及机械搅拌程度，使用低温乙醇沉淀法等更稳定的提取方法 ，减少DNA降解的发生。
dna出现污染的原因与解决方法
原因
DNA出现污染可能是由于外界物质进入提取液中，如容器不 干净、试剂未纯化等。
解决方法
使用干净的容器和纯度高的试剂，对提取液进行过滤除杂， 减少污染物质对DNA提取的影响。
专题dna的粗提取与鉴定ppt
xx年xx月xx日
目 录
• 引言 • dna粗提取的基本步骤 • dna粗提取的实验操作流程 • dna粗提取过程中的问题与对策 • dna粗提取的优化方案 • dna粗提取的应用前景和发展方向
01
引言
什么是dna粗提取
从细胞或生物体内提取出DNA分子的过程。 不需要知道DNA的具体序列和结构。
dna提取效率低的原因与解决方法
原因
DNA提取效率低可能是由于多种因素导致，如细胞裂解不完全、蛋白去除不 彻底、方法操作不当等。
解决方法
采用更有效的细胞裂解方法、优化洗涤步骤、使用蛋白酶K处理细胞等措施， 提高DNA提取效率。
dna出现降解的原因与解决方法
原因
DNA出现降解可能是由于提取过程中高温、高酸度、过度机械搅拌等不利条件导 致。
析，为疾病的早期诊断和预测提供帮助。

《DNA的粗提取与鉴定》PPT课件6 人教课标版

《DNA的粗提取与鉴定》PPT课件6 人教课标版
18、只要愿意学习，就一定能够学会。——列宁 19、如果学生在学校里学习的结果是使自己什么也不会创造，那他的一生永远是模仿和抄袭。——列夫·托尔斯泰
20、对所学知识内容的兴趣可能成为学习动机。——赞科夫 21、游手好闲地学习，并不比学习游手好闲好。——约翰·贝勒斯 22、读史使人明智，读诗使人灵秀，数学使人周密，自然哲学使人精邃，伦理学使人庄重，逻辑学使人善辩。——培根 23、我们在我们的劳动过程中学习思考，劳动的结果，我们认识了世界的奥妙，于是我们就真正来改变生活了。——高尔基 24、我们要振作精神，下苦功学习。下苦功，三个字，一个叫下，一个叫苦，一个叫功，一定要振作精神，下苦功。——毛泽东 25、我学习了一生，现在我还在学习，而将来，只要我还有精力，我还要学习下去。——别林斯基、学习外语并不难，学习外语就像交朋友一样，朋友是越交越熟的，天天见面，朋友之间就亲密无间了。——高士其 2、对世界上的一切学问与知识的掌握也并非难事，只要持之以恒地学习，努力掌握规律，达到熟悉的境地，就能融会贯通，运用自如了。——高士其 3、学和行本来是有联系着的，学了必须要想，想通了就要行，要在行的当中才能看出自己是否真正学到了手。否则读书虽多，只是成为一座死书库。——谢觉哉、你的假装努力，欺骗的只有你自己，永远不要用战术上的勤奋，来掩饰战略上的懒惰。 11、时间只是过客，自己才是主人，人生的路无需苛求，只要你迈步，路就在你的脚下延伸，只要你扬帆，便会有八面来风，启程了，人的生命才真正开始。 12、不管做什么都不要急于回报，因为播种和收获不在同一个季节，中间隔着的一段时间，我们叫它为坚持。 13、你想过普通的生活，就会遇到普通的挫折。你想过最好的生活，就一定会遇上最强的伤害。这个世界很公平，想要最好，就一定会给你最痛。
7、人往往有时候为了争夺名利，有时驱车去争，有时驱马去夺，想方设法，不遗余力。压力挑战，这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。 8、真想干总会有办法，不想干总会有理由;面对困难，智者想尽千方百计，愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠，但可靠的必定是老实人;时间，抓起来是黄金，抓不起来是流水。 9、成功的道路上，肯定会有失败;对于失败，我们要正确地看待和对待，不怕失败者，则必成功;怕失败者，则一无是处，会更失败。1、快乐总和宽厚的人相伴，财富总与诚信的人相伴，聪明总与高尚的人相伴，魅力总与幽默的人相伴，健康总与阔达的人相伴。

课件2：5.1DNA的粗提取与鉴定

课件2：5.1DNA的粗提取与鉴定
↓ (9)DNA的鉴定
比较
加入物质
结果
实
溶液
丝状物
验 均加入：①4 mL二苯
逐渐
(DNA)
组
胺试剂
变蓝
对 ②质量浓度为2 mol/L
不
照
NaCl溶液5 mL
——
变
组
蓝
图示
特别提醒 (1)动、植物细胞在获取DNA滤液方面的比较
原理
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
方法
动物细胞 (鸡血细胞)
在低渗溶液中会 吸水涨破
在鸡血细胞液中加入一定量的蒸 馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤 后收集滤液
4．DNA的鉴定 在 沸水浴 的条件下，DNA遇二苯胺会染成 蓝色 。注意二 苯胺试剂要 现配现用 。
[思维激活1] 为提取到DNA，曾先后使用不同浓度的 NaCl溶液，则在质量浓度为2 mol/L NaCl溶液及0.14 mol/L NaCl溶液中应取滤液，还是滤得的固体物？ 提示 在质量浓度为2 mol/L NaCl溶液中DNA呈溶 解状态，应取滤液，在质量浓度为0.14 mol/L NaCl 溶液中DNA溶解度极低，易析出，应取固体物。
深度剖析 题图A、B、C所示为本实验的三个关键步骤。图 A通过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于 低渗的环境之中，细胞因大量吸水而最终破裂，并释放出胞 内物。图B通过纱布过滤使血细胞释放出的DNA滤入收集的 滤液中(将大量胶状物滤出)，再在滤液中加入质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液使DNA的溶解度增加。DNA在不同浓度的 NaCl溶液中溶解度不同，如在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl 溶液中溶解度只有水中的1%，而在质量浓度为1 mol/L的 NaCl溶液中的溶解度为水中的2倍。

课件14：5.1 DNA的粗提取与鉴定

课件14：5.1 DNA的粗提取与鉴定

第四次： DNA存在于滤液里
DNA粗提取操作中4次过滤的比较
可省略
归 纳
六次搅拌的目的
归 纳
快速搅拌
后5次都是 缓慢搅拌，防止DNA分子断裂
课堂小结
DNA
DNA的理化性质
✓ DNA在NaCl溶液和酒精中的溶解度 ✓ 蛋白酶、高温（60～80℃）和洗涤剂对DNA
无影响 ✓ DNA用二苯胺鉴定
的 DNA粗提取 实验材料的选取 破碎细胞，获取含DNA的滤液
搅拌1
除杂
析出与 鉴定
加蒸馏水
过滤1 含DNA的滤液1
三、以鸡血为材料，回顾实验操作
加2mol/LNaCl
选材
可省略 过滤2
4次搅拌
加蒸馏水至丝状 物不再增加
碎细胞 得滤液
除杂
析出与 鉴定
加2mol/LNaCl 过滤4
加酒精
过滤3
三、以鸡血为材料，回顾实验操作
选材
碎细胞 得滤液
除杂
析出与 鉴定
搅拌6
二、实验设计
（一）实验材料的选取
（二）破碎细胞，获取 含DNA的滤液
（三）去除滤液中 的杂质
（四）DNA的析出与鉴定
滤液中可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。
【方案二】含DNA的滤液＋嫩肉粉（木瓜蛋白酶） →静置10～15分钟→DNA滤液 【方案三】含DNA的滤液→60～75℃恒温保温10~15 分钟→过滤获得DNA滤液
粗 提
实验设计
取 （以鸡血为例） DNA的析出与鉴定
去除滤液中的杂质
与
鉴
定
结果分析与评价
观

（三）去除滤液中的杂质
常用
鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、洋葱、

DNA粗提取与鉴定.ppt


3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( 3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( D ) 遇二苯胺 A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色 A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色 ４.以血液为实验材料时，需要向血液中加 以血液为实验材料时， )，防止血液凝固。 入( )，防止血液凝固。
c
A.醋酸钠 A.醋酸钠 C.柠檬酸钠 C.柠檬酸钠
控制 相对性状 等位基因 非等位基因 质基因 核基因 基因分离 自由组合 伴性遗传
细胞质遗传 遗传
遗传规律
细胞核遗 进化的内因 传
小的变异 大的 变异
准确无误 遗传
出现差错 变异 变异规律 基因突变 新基因 新基因型 基因重组 染色体变异
生存斗争 适者 动力） （动力） 生存 可遗传变异
三个环节 新物种
(五)、课题成果评价
观察你提取的DNA颜色， 观察你提取的DNA颜色，如果不是白 DNA颜色 色丝状物，说明DNA中的杂质较多； DNA中的杂质较多 色丝状物，说明DNA中的杂质较多；二苯 胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功， 胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果 不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低， DNA含量低 不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低， 或是实验操作中出现错误，需要重新制备。 或是实验操作中出现错误，需要重新制备。
DNA的析出与鉴定 （四） DNA的析出与鉴定 1、DNA的析出 DNA的析出 DNA的析出用的是与 DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却 的析出用的是与滤液体积相等的冷却 的酒精溶液（体积分数为95 95％） 静置2 的酒精溶液（体积分数为95％） ，静置23min，溶液中会出现白色丝状物 白色丝状物， 3min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿 一个方向搅拌，卷起丝状物， 一个方向搅拌，卷起丝状物，这就是粗提取 DNA。 DNA。

2023人教版选修一课题1《DNA的粗提取与鉴定》ppt4

课题1 DNA的粗提取与鉴定
序言
下载提示：该PPT课件是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解 决实际问题。PPT课件下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!
本编为大家提供各种类型的PPT课件，如数学课件、语文课件、英语课件、地理课件、 历史课件、政治课件、化学课件、物理课件等等，想了解不同课件格式和写法，敬请下载!
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不会凝固，因为鸡血红细胞、白细胞都有细胞核， DNA主要存在于细胞核中，所以在离心或静置沉淀 后，要弃出上层清液——血浆。
(2)DNA 溶 于 一 定 浓 度 的 NaCl 溶 液 ， 但 不 溶 于 酒 精，而冷却的酒精可以降低分子运动，有利于 DNA的聚合、析出；同时低温有利于增加DNA分 子的柔韧性以减少断裂，便于用玻璃棒卷起；此 外冷却的酒精还可以降低并抑制核酸水解酶的活 性 ， 防 止 DNA 降 解 ， 从 而 提 取 到 较 多 的 DNA 物 质。

专题DNA的粗提取与鉴定ppt


优劣分析
各种方法均有优缺点，应根据实际 情况选择合适的方法，或结合多种 方法提高鉴定准确性。
04
DNA粗提取实验结果分析与解读
实验结果展示
DNA粗提取结果
通过在显微镜下观察，可以看到细胞中的DNA呈现为细长的丝状，有时甚至可以看到 DNA的螺旋结构。
电泳结果
通过电泳技术，可以看到DNA在凝胶中的迁移情况。纯DNA应该呈现一条明亮的带状， 而杂质则会影响带状的形成。
紫外光谱分析
通过紫外光谱分析，可以确定DNA的纯度和浓度。纯DNA应该在260nm和280nm处有强 烈的吸收峰。
结果差异分析
01
DNA纯度差异
不同样品间的DNA纯度存在差异。有些样品的DNA纯度较高，而有
些则较低。这可能与样品的来源、提取方法等因素有关。
02 03
DNA浓度差异
不同样品间的DNA浓度也存在差异。有些样品的DNA浓度较高，而 有些则较低。这可能与样品中细胞的数目、细胞中DNA的含量等因素 有关。
。通过OD260/OD280 的比值来判断DNA的纯 度。
3. 将DNA溶液进行凝胶 电泳检测，观察DNA条 带的亮度、完整度和分 子量大小来判断DNA的 质量。
03
DNA粗提取中的关键步骤及注意事 项
细胞破碎方法的选择与优化
物理破碎
使用研磨杵、珠磨机、匀浆器等方 法破碎细胞。
化学破碎
使用溶菌酶、EDTA、SDS、Triton X-100等化学物质溶解细胞壁。
THANKS
谢谢您的观看
DNA粗提取涉及从生物样品中分离出细胞，破碎细胞并释放 出其中的DNA，接着通过一系列的洗涤和沉淀步骤将DNA分 子纯化出来。
DNA粗提取的重要性

DNA的提取与鉴定ppt课件


琼脂糖浓度(％) 线型DNA分子的分离范围(kb)
0.3
5～60
0.6
1～20
0.7
0.8～10
0.9
0.5～7
1.2
0.9～6
1.5
0.2～3
12.0
0.1～. 2
.
琼脂糖凝胶电泳有许多优点：
操作简单，电泳速度快，分离核酸范围广； 电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好； 电泳后区带易染色，便于定量测定； 可用于核酸的纯化和分离（电洗脱法）； 可制成干膜可长期保存。
经离心后溶液分为三层：上层是核酸溶液、 中间不溶物为变性蛋白质，下层是苯酚氯 仿溶液。
核酸溶液 蛋白质 苯酚氯仿
.
3.沉淀DNA
有机溶剂沉淀DNA：2倍体积无水乙醇（或1倍体积的异戊醇） 再用75%乙醇清洗多次。
4.重新溶解DNA
将DNA溶于水或TE溶液。
.
DNA提取的一般流程
.
二、核酸的鉴定
.
电泳
根据电泳支持介质分为
琼脂糖凝胶电泳： 多用于鉴定较大核酸片段（0.1~60 kb）
聚丙烯酰胺凝胶电泳： 用于鉴定较小的核酸片段（50~1000 bp）
琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖是从琼脂中提纯出来的一种多糖。凝胶具有刚性的滤孔，凝胶孔径的 大小决定于琼脂糖的浓度，低浓度的琼脂糖形成较大的孔径，而高浓度的琼 脂糖形成较小的孔径。
（3）培养细胞： 离心，弃细胞培养液； 用缓冲液多次漂洗；
.
3、微生物培养物样品
离心获取菌体细胞， 加缓冲液洗涤， 加缓冲液悬浮菌体细胞。
4、微生物混合样品
用缓冲液悬浮菌体，低速离心，沉淀杂质。 高速离心获取菌体细胞。 用缓冲液洗涤菌体细胞。 加缓冲液悬浮菌体细胞。
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讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？ 讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？ 答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白， 使提取的DNA与蛋白质分开； DNA与蛋白质分开 使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是 DNA和蛋白质对高温耐受性的不同， DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋 和蛋白质对高温耐受性的不同 白质变性， DNA分离 白质变性，与DNA分离
6、DNA在酒精溶液中的溶解性 DNA在酒精溶液中的溶解性 DNA不溶于酒精溶液 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质 不溶于酒精溶液， 则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA 则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA 与蛋白质进一步分离 7、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 DNA对酶、 对酶 ①蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响 DNA没有影响 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA ②大多数蛋白质不能忍受60－80°C的高温， 大多数蛋白质不能忍受60 80° 的高温， 60－ DNA在80° 而DNA在80°C以上才会变性 ③洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和 洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜， 蛋白质,但对DNA DNA没有影响 蛋白质,但对DNA没有影响
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 DNA的滤液 破碎细胞，获取含DNA 1、动物细胞 动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中 动物细胞的破碎较易，例如， 加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌，过 同时用玻璃棒搅拌， 滤后收集滤液即可 讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体， 答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体， 水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂， 水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂， 再加上搅拌的机械作用， 再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的 破裂(细胞膜和核膜的破裂) 从而释放出DNA 破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA
2、植物细胞 ①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解 细胞膜 讨论：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 讨论：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜， 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜， 有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl DNA的释放 NaCl， 有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl， 有利于DNA DNA的溶解 有利于DNA的溶解 ②实例：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加 DNA时 实例：提取洋葱DNA 入一定的洗涤剂和食盐，进行从分的搅拌和研 入一定的洗涤剂和食盐， 磨，过滤后收集研磨液
讨论：如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样 讨论：如果研磨不充分， 的影响？ 的影响？ 答：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全， 研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全， DNA释放不完全 提取的DNA量变少，影响实验结果， DNA量变少 提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到 丝状沉淀物、 丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等 （三）去除滤液中的杂质 为了纯化提取的DNA 为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理 DNA需要将滤液作进一步处理 讨论：此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞 讨论： 成分？ 成分？ 答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质 RNA等杂质 可能含有核蛋白、多糖和RNA
5、讨论： 讨论：
①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图， 根据DNA NaCl溶液中的溶解度曲线图， DNA在 溶液中的溶解度曲线图 思考在什么浓度下， DNA的溶解度最小 的溶解度最小？ 思考在什么浓度下， DNA的溶解度最小？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的 溶液中的溶解度是如何变化的？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？
讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去 讨论：为什么反复地溶解与析出DNA DNA， 除杂质 用高盐浓度的溶液溶解DNA DNA， 答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高 盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出， DNA析出 盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出， 能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此， 能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反 复溶解与析出DNA 就能够除去与DNA DNA， DNA溶解度 复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度 不同的多种杂质
3、实验材料和用具： 实验材料和用具： 鸡血细胞液（5~10ml）；体积分数为95%的冷 鸡血细胞液（5~10ml）；体积分数为95%的冷 ）；体积分数为95% 酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；蒸馏 24h）； 酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；蒸馏 质量浓度为0 g/ml的柠檬酸纳溶液 的柠檬酸纳溶液； 水；质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸纳溶液；务 质量的浓度分别为2mol/L 2mol/L和 015mol/L的 质量的浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的 氯化纳溶液；二苯胺试剂。铁架台；铁环；镊子； 氯化纳溶液；二苯胺试剂。铁架台；铁环；镊子； 三角架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒； 三角架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒；滤 滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯； ）；烧杯 纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯； 100ml，一个，50ml、500ml各二个）；试 各二个）； （100ml，一个，50ml、500ml各二个）；试 20ml，二个）；漏斗；试管夹；纱布。 ）；漏斗 管（20ml，二个）；漏斗血为实验材料进行DNA的 案例一：以鸡血为实验材料进行DNA DNA的 粗提取 1、鸡血细胞做实验材料的原因 ①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得 鸡血细胞核的DNA含量丰富， DNA含量丰富 ②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞 鸡血细胞极易吸水胀破， 作实验材料常常需要匀浆和离心， 作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求 较高，操作繁琐， 较高，操作繁琐，历时较长
讨论1 构成生物体的遗传物质是什么？ 讨论1：构成生物体的遗传物质是什么？
讨论2 如何证明他们是遗传物质？ 讨论2：如何证明他们是遗传物质？
讨论3 怎样才能将细胞内的这些物质分离出来？ 讨论3：怎样才能将细胞内的这些物质分离出来？
DNA的粗提取与鉴定 DNA的粗提取与鉴定
一、基础知识 提取DNA DNA的方法 （一）提取DNA的方法 1、提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理 或化学性质的生物大分子 2、生物大分子 主要指蛋白质、酶和核酸 主要指蛋白质、 3、提取DNA的基本思路 提取DNA DNA的基本思路 利用DNA RNA、 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化 DNA与 学性质方面的差异，提取DNA DNA， 学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分
①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图， 根据DNA NaCl溶液中的溶解度曲线图， DNA在 溶液中的溶解度曲线图 思考在什么浓度下， DNA的溶解度最小 的溶解度最小？ 思考在什么浓度下， DNA的溶解度最小？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的 溶液中的溶解度是如何变化的？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？
4、DNA的溶解性 DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl 液中溶解度不同，利用这一特点， 液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的 盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀， 盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀， DNA充分溶解 或者相反
在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时，DNA的溶 NaCl溶液浓度低于 溶液浓度低于0.14 mol/L时 DNA的溶 解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低； NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低 解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在 mol/L时 DNA溶解度最小 溶解度最小； NaCl溶液 0.14 mol/L时，DNA溶解度最小；当NaCl溶液 浓度继续增加时，DNA的溶解度又逐渐增大 的溶解度又逐渐增大。 浓度继续增加时，DNA的溶解度又逐渐增大。 ②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液 如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液 中溶解或析出？ 中溶解或析出？ 当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L时，DNA mol／ 的溶解度最大， mol／ 的溶解度最大，浓度为 0．14 mol／L时，DNA 的溶解度最低。利用这一原理，可以使DNA DNA在盐 的溶解度最低。利用这一原理，可以使DNA在盐 溶液中溶解或析出
2、 DNA的鉴定 DNA的鉴定
鉴定DNA 鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为 DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为 NaCl溶液5ml于两只试管中 溶液5ml于两只试管中， 2mol/L 的NaCl溶液5ml于两只试管中，其中一 只加入DNA丝状物，各加入二苯胺 DNA丝状物 二苯胺4ml 试剂。 只加入DNA丝状物，各加入二苯胺4ml 试剂。 混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min, 5min,待试 混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min,待试 管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化， 管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看 看溶解有DNA的溶液是否有蓝色 看溶解有DNA的溶液是否有蓝色 DNA的溶液是否有
8、DNA的鉴定 DNA的鉴定 ① DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因 DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色， 与二苯胺 二苯胺可以作为鉴定DNA DNA的试剂 此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂 ②甲基绿 （蓝绿色） 蓝绿色）
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （一）实验材料的选取 1、材料：鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、 材料：鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、 哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、 哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、 在液体培养基中培养的大肠杆菌。（ 。（从中选取 在液体培养基中培养的大肠杆菌。（从中选取 种实验材料） 2～3种实验材料） 2、原则：凡是含有DNA的生物材料都可以考 DNA的生物材料都可以考 原则：凡是含有DNA 但选用DNA含量相对较高的生物组织， DNA含量相对较高的生物组织 虑，但选用DNA含量相对较高的生物组织，成功 的可能性更大