药物分析 第十一章 生物碱类药物的分析

99x：116．硫酸奎宁片经氯仿提取后 用HClO4滴定（D）
99x：117．硫酸阿托品在冰醋酸中用
HClO4滴定 （A） 99x：118. 硫酸奎宁原料药用HClO4滴 定 （B） 99x：119. 磷酸可待因用HClO4滴定（A） 99x：120. 硝酸士的宁用HClO4滴定 (A)
96：129. 生物碱类药物制剂的测定方法 A. 直 接 用 有 机 溶 剂 提 取 后 ， 用
咖啡因
茶碱+HCl+KClO3 氨 蒸气 干紫色 KOH紫色消
8、还原反应 吗啡与磷酸可待因的区分反应
吗啡 + 3K [Fe(C 6] N) K2[Fe(C 6] N Fe3+)普鲁士
二、一般鉴别反应
1、沉淀反应
生物碱 + 生物碱沉淀试剂H+ ↓
常用的生物碱沉淀试剂为：
（1） 重金属盐类，如K2HgI4、KBiI4、
4、Marquis反应 吗啡生物碱
盐酸 +吗 甲啡 醛硫 紫酸 堇
5、Frohde反应 吗啡生物碱
盐酸吗 +钼啡 硫酸 紫色 兰色棕绿色
6、 官能团反应 吲哚生物碱 1）利血平 + 新制香草醛→玫瑰红色
2）利血平 对二甲氨基苯甲醛
冰 醋 酸、 硫 酸 绿色冰 醋 酸 红色
7、紫脲酸胺反应 黄嘌啉类生物碱
I2—KI、二氯化汞等；
（2）大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。
2、熔点测定 3、显色反应
常用的显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、 钼硫酸、钒硫酸、硒硫酸、甲醛硫酸 等
第三节 含量测定 一、非水溶液滴定法（非水碱量法）
原料药 1 原理
水溶液中滴定突跃不明显，在非水 介质中，碱性增强，使滴定顺利进行
(1) 溶剂--酸性溶剂：冰醋酸、 冰醋酸+醋酐、醋酐
图1 反相HPLC法测定胃肠宁颗粒剂盐酸小檗碱的色谱图 见:中药新药与临床药理,2005,16(5):361~363
2、气相色谱法 不论是游离碱还是其盐类，均是
以游离碱出峰
生物碱盐 碱 化 、 有 机 溶 剂 游 提离 取 生物碱 生物 碱 衍 生 化衍生物
本章重点内容
1 如何鉴别生物碱？ 2 生物碱类药物有哪些类别？ 3 如何定量测定生物碱含量？
pKb2=9.7
pKb1=6.0
N
N O
pKb2=11.7 O
士的宁
CH 3O CH 3O
O CH 3
CH 2
O CH 3
N pKb=7.87
罂粟碱
O CH 3
N
ON CH 3 咖啡因
CH 3 N
N
pKb=14.15
pKb=6.13
N CH 3 H
HO
pKa=9.85
O
OH
吗啡
O CH 3
二、提取中和法
游离生物碱不溶于水，易溶于有机 依据性质
生物碱盐类可溶解于水，不溶于有
游 生离 物生 碱物 盐H 碱 类 稀 2O或 酸 或so(lB+H) 过滤 sol
水层
OH-
中和法测定 有机层 B） （ 有机溶剂
1. 碱化（氨水） 2. 有机溶剂提取 3. 中和法测定 （1）直接滴定法--用于碱性较强的 生物碱
99：78. 非水溶液滴定法测定硫酸奎宁 原料的含量时，可以用高氯酸直接滴 定冰醋酸介质中的供试品，1摩尔硫酸 奎宁需要消耗高氯酸的摩尔数为
A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 E. 5
99x：[116—120]滴定反应中 A. 被测物与HClO4的摩尔比为1∶1 B. 被测物与HClO4的摩尔比为1∶3 C. 两者均是 D. 两者均不是
H2SO4标准液滴定 B. 碱化后用有机溶剂提取，再用
NaOH水溶液滴定
C. 碱化后用有机溶剂提取，蒸去 有机溶剂后用中性醇溶液，再用H2SO4 标准液滴定
D. 碱化后用有机溶剂提取，蒸去 有机溶剂，再加入定量的H2SO4，再用 NaOH标准液回滴
E. 酸化后，用有机溶剂提取，采 用适宜方法滴定
96：77. 酸件染料比色法中，水相的 pH值过小，则
有机层 B） （ ， 蒸 干 残渣B（ ）
中 性 乙 s醇 o（ lB） 酸 滴 定 液滴 终定 点
（2）剩余滴定法 用于碱性较弱的生物碱
有机层B（） ，蒸 干 残渣（ B） 定 量过 量的酸 标准 溶 so（ l液BH H） 碱滴定 液滴定 终点
来自百度文库
（3）酸滴定液返提后剩余滴定法 用于对热不稳定的生物碱
A. 能形成离子对 B. 有机溶剂提取能完全 C. 酸性染料以阴离子状态存在 D. 生物碱几乎全部以分子状态存在 E. 酸性染料以分子状态存在
95：[111—115]可选择的药物： A. 阿托品 B. 吗啡 C. 两者均可 D. 两者均不可
95：111. 具有酯结构（A） 95：112. 为两性化合物 （B） 95：113. 显较强碱性 （A） 95：114. 用提取容量法测定（C） 95：115. 用碱性染料比色法 （D）
BH+In- + OH- →B + H2O + In-
（3）定量分离出有机提取液，脱水 后，酸化，则水相呈色，测定水相中 HIn的吸收度，间接求出有机碱的含 量 BH+In- + H+ →BH++ HIn
如： 硫酸阿托品注射液 ChP（2000） 对照法比色测定
五、色谱法
1 、高效液相色谱法 反相 HPLC 分析生物碱类 和有机含氮药物
N
ON CH 3 茶碱
H N
N
二、生物碱类药物的通性 1. 碱性
季铵碱＞脂肪胺、脂环胺＞芳胺、 N—芳杂环＞酰胺
小檗碱＞麻黄碱、阿托品＞罂粟 碱＞咖啡因
吗啡具酸碱两性
2. 溶解性 游离生物碱不溶或难溶于水，能
溶或易溶于有机溶剂，在稀酸中成盐 而溶解
生物碱盐类易溶于水，不溶于有 机溶剂
3. 旋光性 一般多为左旋体有效。
例[1～5]
A. 双缩脲反应 B. Marquis反应 C. 两者皆是 D. 两者皆不是 1. 盐酸麻黄碱 （A） 2. 某些生物碱类药物 （C） 3. 盐酸吗啡 （B） 4. 咖啡因 （D） 5. 硫酸奎尼丁 （D）
例6. 生物碱类药物的一般鉴别试验包 括
A. 熔点测定 B. 显色反应 C. 沉淀反应 D. 光谱法（紫外、红外） E. 薄层色谱法
A. 5％醋酸汞冰醋酸液 B. 盐酸 C. 冰醋酸 D. 二甲基甲酰胺 E. 高氯酸
97：130．非水溶液滴定法测定硫酸奎 宁含量的反应条件为
A．冰醋酸一醋酐为溶剂 B. 高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定 C．1mol的高氯酸与⅓mol的硫酸奎 宁反应 D. 仅用电位法指示终点 E．溴酚蓝为指示剂
药物分析 第十一章 生物碱类药物的分析
典型药物的结构
CH 3O CH 3O
OH-N+
pKb=2.5
O
O 小檗碱
pKb=4.42
OH NHCH3 C C CH3 HH 麻黄碱
CH 3
N
pKb=4.35
O CO 阿托品
CH CH 2OH
CH CH 2
CH 3O
H
OH C
N
H
pKb1=5.07
N 奎宁
第二节 鉴别试验
一、特征鉴别反应
1、双缩脲反应 侧链具有氨基醇结构
醚层 紫
盐 盐酸 酸麻 伪 +C 黄 麻 uSO 碱 黄 4O H -碱 紫堇 乙色 醚
水层 兰
2、Vitali反应 托烷生物碱
氢硫 溴酸 酸阿 山托 莨 +品 发 菪碱 烟 HNO3· 黄色醇制深紫色
KOH
3、绿奎宁反应 硫酸奎宁、硫酸奎尼丁
A. 1∶1 B. 1∶2 C. 1∶3 D. 1∶4 E. 1∶1.5
例10. 酸性染料比色法测定生物碱类药 物，有机溶剂萃取测定的有色物是
A. 离子对和指示剂的混合物 B. 生物碱盐 C. 指示剂 D. 离子对 E. 游离生物碱
2. 有机溶剂提取（CHCl3、CH2Cl2 ）
离子对BH+·In-被有机溶剂提取，使有机 相呈色。剩余的酸性染料留于水相
3. 比色法测定 （1）定量分离出有机提取液，脱水后，测 定A，求出有机碱含量
（2）定量分离出有机提取液，脱水后， 碱化，则水相呈色，测定水相中In-的吸收 度，间接求出有机碱的含量
例7. 能够发生Vitali反应的药物是 A. 盐酸吗啡 B. 硫酸奎宁 C. 磷酸可待因 D. 盐酸麻黄碱 E. 硫酸阿托品
例9. 检查硫酸阿托品中莨菪碱时，应 采用
A. 色谱法 B. 红外分光法 C. 旋光度法 D. 显色法 E. 直接检查法
例8. 用非水溶液滴定法测定二盐酸奎 宁时，二盐酸奎宁和HClO4的摩尔比 是
有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类：
8＜pKb＜10 冰醋酸作溶剂
10＜pKb＜12 冰醋酸+醋酐
pKb＞12
醋酐
(2) 滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液 或高氯酸的二氧六环溶液
(3) 指示终点的方法 电位法：玻璃—甘汞电极系统 指示剂法：结晶紫、喹哪啶红等
如： 咖啡因 ChP(2000)
取 本 品 约 0.15g ， 精 密 称 定 ， 加 醋 酐—冰醋酸（5∶1）的混合液 25ml，微 热使溶解，放冷，加结晶紫指示液 1滴， 用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定，至溶 液显黄色，并将滴定的结果用空白试验校 正。每 1ml 高氯酸滴定液（0.1mol/L）相 当于 19.42mg 的C8H10N4O2。
97 ： 83 ． 咖 啡 因 和 茶 碱 的 特 征 鉴 别 反应是
A. 双缩脲反应 B. Vitali反应 C. Marquis反应 D. 紫脲酸铵反应 E. 绿奎宁反应
试题
98：139．盐酸吗啡中应检查的特殊 杂质为
A. 吗啡 B. 阿朴吗啡 C. 罂粟碱 D. 莨菪碱 E. 其它生物碱
96：136．用非水溶液滴定法测定盐 酸吗啡含量时，应使用的试剂是
m2m1mB
四、酸性染料萃取比色法 制 剂
在适当的pH介质中
B+ +H
B+ H
HIn
+ +H I-n
(BH+·In-)水相 (BH+·In-)有机相
1. 水相中与酸性染料溴甲酚绿、溴麝香草酚 蓝 （BTB）等反应 水相的最适pH值：如果水相pH值过小，酸性染 料几乎仍以分子状态存在；如果水相pH值过大， 则生物碱几乎全部以游离碱的形式存在。
有机层B（ ）定 量 过 量 的 酸 滴水 定 有层 液 机B（层 H（ H） 弃 水层 碱 滴 定 液 滴终 定点
三、提取重量法
游 生离 物生 碱物 盐H 碱 类 稀 2O或 酸 或so(lB+H) 过滤 sol
水层
OH-
有机层 B） （ 有机溶剂
有机溶剂 (B)提 置取 已液 知重量器 且m （ 恒 1）重 中 的 残渣 B） （ 容器，干燥量 至m （ 恒 2）重，称