正常人尿蛋白质组学研究

尿液蛋白质组学简介尿液蛋白质组学是一种研究尿液中蛋白质的组成、结构和功能的方法。

通过对尿液中蛋白质的分析，可以了解人体健康状况、疾病发展过程以及治疗效果等信息。

尿液作为一种非侵入性的样本来源，具有易采集、操作简便等优势，因此在临床诊断和生物医学研究中得到广泛应用。

尿液蛋白质组学的方法尿液样本采集与处理尿液样本采集通常使用无菌容器收集晨尿或随机尿样。

为了避免污染和降解，应及时将样本转移到低温条件下，并加入蛋白酶抑制剂等辅助剂以保护蛋白质完整性。

蛋白质提取与富集从尿液中提取和富集目标蛋白质是进行后续分析的关键步骤。

常用的方法包括有机溶剂沉淀法、超滤法、离心浓缩法和亲和层析法等。

这些方法可以去除干扰物质，提高目标蛋白质的检测灵敏度。

蛋白质分离与鉴定分离和鉴定是尿液蛋白质组学研究的核心环节。

常用的方法包括二维凝胶电泳（2-DE）、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）和免疫沉淀等。

2-DE可以将蛋白质按照等电点和分子量进行分离，LC-MS/MS则可以通过质谱技术鉴定蛋白质的氨基酸序列。

数据分析与生物信息学尿液蛋白质组学数据量庞大，需要进行复杂的数据分析和生物信息学处理。

主要包括差异表达蛋白质的筛选、功能注释、互作网络构建以及通路富集分析等。

这些方法可以帮助研究人员挖掘出与特定疾病相关的生物标志物。

尿液蛋白质组学在临床应用中的意义疾病诊断与预测尿液蛋白质组学可以通过分析尿液中的蛋白质组成，帮助医生进行疾病的早期诊断和预测。

例如，尿液中某些特定蛋白质的表达水平与肾脏疾病、泌尿系统肿瘤等密切相关。

通过检测这些蛋白质的异常表达，可以提前发现潜在的疾病风险。

疾病机制解析与药物靶点发现通过对尿液中蛋白质组成的深入研究，可以揭示特定疾病的发生机制以及相关信号通路。

这有助于寻找新的治疗靶点，并推动药物开发。

同时，尿液蛋白质组学还可以评估药物治疗效果，为个体化治疗提供指导。

健康管理与个体化医学随着健康管理和个体化医学理念的兴起，尿液蛋白质组学在健康监测和预防保健方面也有广泛应用。

蛋白质组学在疾病研究中的应用
随着科学技术的不断进步，蛋白质组学作为生物医学研究中的重要分支，在疾病研究领域发挥着越来越重要的作用。

蛋白质组学是研究生物体内所有蛋白质的总体结构、功能和相互作用的科学，通过对蛋白质的组成、表达、修饰等方面的研究，可以深入了解疾病的发病机制、诊断方法及治疗策略。

在疾病研究中，蛋白质组学可以帮助科学家们快速准确地发现潜在的生物标志物，这对于疾病的早期诊断和治疗至关重要。

通过比较健康人群和患病人群的蛋白质组学数据，可以发现特定蛋白质在某种疾病中的表达水平是否异常，从而为疾病的早期诊断提供重要依据。

例如，乳腺癌的早期诊断可通过检测血清中特定蛋白质的表达水平来实现，这为患者尽早接受治疗提供了可能。

蛋白质组学还可以帮助科研人员深入了解疾病的发病机制。

通过研究蛋白质在疾病发生发展过程中的变化，可以揭示疾病发生的生物学基础，为疾病的治疗提供新的思路和方法。

例如，糖尿病的发病机制与蛋白质的糖基化修饰密切相关，通过研究这些修饰对蛋白质功能的影响，可以为糖尿病的治疗提供新的靶点。

蛋白质组学在药物研发领域也发挥着重要作用。

通过研究药物与蛋白质相互作用的机制，可以为新药的开发提供重要信息。

例如，通过蛋白质组学技术可以筛选出与某种药物相互作用的蛋白质，从而
加快新药的研发进程。

总的来说，蛋白质组学在疾病研究中的应用，不仅可以帮助科学家们发现新的生物标志物，提高疾病的诊断准确性，还可以深入了解疾病的发病机制，为疾病的治疗提供新的思路和方法。

随着蛋白质组学技术的不断发展，相信在未来的疾病研究中，蛋白质组学将发挥越来越重要的作用，为人类健康做出更大的贡献。

人尿液蛋白质N-糖肽富集和质谱鉴定的新方法研究HUANG Jun-jie;JIAO Feng-long;WANG He-ping;ZHU Li-hua;QIN Wei-jie;QIAN Xiao-hong【摘要】蛋白质的N-糖基化修饰参与了许多重要的生理过程,是研究多种重大疾病诊断标志物的热点.与其他体液活检样本相比,尿液可以无创、大量获取,并且不受稳态调节的影响,能够在一定程度上反映整个机体的生理和病理状态.因此,人尿液蛋白质N-糖基化的规模化研究对疾病诊断标记物的筛选和治疗靶点的发现均具有重大意义.由于人尿液中的N-糖蛋白含量有限,修饰比例较低,在质谱分析时N-糖肽易被高丰度的非糖肽所掩盖,难以鉴定.因此,发展高效、高选择性的富集材料是实现尿蛋白N-糖基化深度覆盖的必要前提.本研究利用巯基-烯点击化学反应,使用[3-(甲基丙烯酰氨基)丙基]二甲基(3-硫代丙基)氢氧化铵内盐(SPP)制备了两性离子修饰亲水硅胶材料(SPP-SiO2).该材料成功地应用于标准糖蛋白和健康人尿蛋白N-糖肽的富集和质谱检测,共鉴定了包含1065个位点的633个尿液糖蛋白,比文献报道的鉴定规模提高了12.2％,证明了该亲水材料在尿液糖蛋白质组研究中的应用潜力.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2018(039)002【总页数】9页(P149-157)【关键词】巯基-烯点击化学法;尿蛋白;N-糖肽;富集;质谱鉴定【作者】HUANG Jun-jie;JIAO Feng-long;WANG He-ping;ZHU Li-hua;QIN Wei-jie;QIAN Xiao-hong【作者单位】;;;;;【正文语种】中文【中图分类】O657.63N-糖基化修饰作为一种重要的蛋白质翻译后修饰，在细胞粘附、信号转导、细胞凋亡、免疫应答等生物学过程及生理机能的调节中发挥着关键的作用[1-4]。

异常的糖基化修饰与人类多种重大疾病，如肿瘤、炎症以及神经退行性疾病等密切相关[5]。

尿液蛋白质组实验流程一、实验准备样本收集选择清洁无菌的尿液收集容器，避免样本被污染。

采集早晨第一次尿液样本，因其含有的蛋白质浓度较高，能更好地代表体内状态。

标记样本，记录收集时间和其他相关信息。

样本处理收集的尿液样本应立即处理，以防蛋白质降解。

样本处理步骤如下：将尿液样本离心，去除沉淀物和细胞碎片。

将上清液转移至干净的离心管中，进行冷冻保存。

保存温度通常为80℃。

处理样本时，应穿戴适当的防护装备，并在无菌条件下操作。

二、蛋白质提取样本解冻取出冷冻的尿液样本，放置于4℃冰箱中解冻。

解冻过程应缓慢进行，以避免蛋白质变性。

蛋白质沉淀通过加入适当的沉淀剂（如三氯乙酸、冰醋酸等），使尿液中的蛋白质沉淀。

常见的沉淀方法包括：加入沉淀剂后，充分混匀样本，通常在室温下静置一定时间。

通过离心分离沉淀的蛋白质，弃去上清液。

用适当的缓冲液洗涤沉淀物，以去除多余的沉淀剂。

蛋白质溶解将洗涤后的沉淀物重新溶解在适当的缓冲液中，通常使用含有去垢剂（如尿素、硫脲）的溶液，以帮助溶解蛋白质。

三、蛋白质定量与分离蛋白质定量使用比色法（如BCA法、Bradford法）测定蛋白质浓度。

定量方法的选择应根据实验需求和样本特性来决定。

蛋白质分离常用的蛋白质分离方法包括：SDSPAGE：用于初步分离蛋白质，评估样本中蛋白质的分子量范围。

液相色谱：例如反相色谱（RPHPLC）和离子交换色谱（IEC），用于进一步分离和纯化蛋白质。

四、蛋白质鉴定与分析蛋白质酶解将分离纯化后的蛋白质进行酶解，常用的酶有胰蛋白酶。

酶解过程如下：根据蛋白质的性质选择合适的酶解条件。

在适宜的温度和pH条件下进行酶解，通常在37℃的水浴中进行。

酶解完成后，将消化液进行冷冻保存，或立即进行下一步的分析。

质谱分析采用质谱（MS）技术进行蛋白质鉴定和定量。

常见的质谱方法包括：MALDITOF MS：用于蛋白质的质谱分析，适用于大分子蛋白质。

LCMS/MS：液相色谱联用质谱技术，适用于复杂样本的详细分析。

尿液蛋白质组学
尿液蛋白质组学指以尿液为样本进行蛋白质组学研究，尿液是临床蛋白质组学研究的主要样本之一，可用于疾病的机制研究和生物标志物的发现。

百泰派克生物科技提供基于质谱的尿液蛋白质组学分析服务。

尿液蛋白质组学
尿液蛋白质组学指利用蛋白质组学技术在整体水平上系统性地分析尿液中的蛋白质组成及其生物学功能。

尿液易于通过无创程序大量重复收集，是临床蛋白质组学研究的一个较好的资源。

与在取样期间和取样后容易发生蛋白质水解降解的血浆或血清等其他生物体液相比，尿液的蛋白质组成相对稳定。

虽然正常尿液中的蛋白质总量远小于血浆，但是超过数千个蛋白质已经在尿液中被发现。

由于70％的尿蛋白来自肾脏和泌尿道，而30％的尿蛋白来自分泌到血液循环中的其他器官，因此尿液蛋白质可以被用于研究全身性和肾脏疾病的病理过程，以及发现新的生物标志物等。

随着技术的发展，尿液蛋白质组学已成为最为普遍的生物标志物发现研究领域之一。

尿液蛋白质组学。

尿液蛋白质组检测
尿液蛋白质组学分析主要包括鉴定不同疾病或治疗阶段的尿排泄蛋白和多肽，并确定其数量、功能和相互作用等。

常见的尿液蛋白质组检测方法包括二维凝胶电泳结
合质谱技术、液相色谱与质谱联用技术、毛细管电泳与质谱联用技术，以及蛋白质微阵列等。

其中，质谱技术是蛋白质组鉴定和定量分析的一个主要技术。

一般人群中尿蛋白水平对主要不良心脑血管事件及全因死亡的影响王剑利;李俊娟;周靖;刘艳;吴寿岭【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2017(25)3【摘要】目的研究一般人群中尿蛋白水平对主要不良心脑血管事件(MACCE)及全因死亡的影响。

方法采用前瞻性队列研究方法,入选2006年7月至2007年10月参加开滦集团健康体检人群中资料完整者共87292例作为研究对象,平均年龄51.12±12.29岁。

采用尿常规试纸法检测晨尿,以尿蛋白水平分为3组:尿蛋白阴性组(-)、微量尿蛋白组(±/+)、大量尿蛋白组(≥2+)。

应用COX比例风险模型分析尿蛋白与MACCE及全因死亡的关系。

结果平均随访6.90±0.72年,随访期间共发生MACCE 3091例,累积发病率为5.25/千人年;全因死亡事件4087例,累积发病率为6.84/千人年。

3组MACCE累积发病率分别为4.84/千人年、7.34/千人年、12.06/千人年;全因死亡率分别为6.10/千人年、10.28/千人年、19.30/千人年,差异均具有统计学意义(P<0.01)。

校正其他传统危险因素后,与尿蛋白阴性组相比,微量尿蛋白组、大量尿蛋白组发生MACCE的RR值分别为1.24(95%CI 1.10~1.40)、1.58(95%CI 1.38~1.81),全因死亡的RR值分别为1.41(95%CI 1.27~1.56)、2.15(95%CI 1.93~2.39)。

结论尿常规显示的尿蛋白是一般人群MACCE及全因死亡的独立危险因素。

【总页数】5页(P288-292)【关键词】尿蛋白;主要不良心脑血管事件;全因死亡【作者】王剑利;李俊娟;周靖;刘艳;吴寿岭【作者单位】开滦集团开滦总医院;开滦集团开滦职工健康保障中心【正文语种】中文【中图分类】R18【相关文献】1.慢性肾功能不全对中老年非瓣膜性房颤患者全因死亡、心脑血管疾病死亡及血栓终点事件的影响 [J], 王海军;郭艳;司全金;王玉堂2.尿蛋白对糖尿病人群心脑血管事件及全因死亡的影响 [J], 王剑利;李俊娟;周靖;刘艳;吴寿岭3.健康行为和因素评分对心脑血管事件及全因死亡的影响及研究 [J], 张立杰;王晓玲;宋巧凤;王希柱;周文华;李志坤;刘小雪4.老年男性人群血尿酸对心脑血管事件及全因死亡的影响 [J], 王丹; 王剑利; 陈朔华; 周靖; 李慧心; 吴寿岭5.静息心率对老年人群心脑血管事件及全因死亡的影响 [J], 王丹; 陈朔华; 刘颖辉; 李璐; 吴寿岭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基础医学与临床Basic & Clinical MedicinvApdi 2021VoV41 NeD2221年 4月 第41卷第4期文章编号：144)-6325(2421)44-4528氟5研究论文从健康人尿液筛选年龄相关蛋白质郑舒心、，赵敏迪4,邵 晨2孙海丹、，刘晓燕、，郭正光、，孙 伟、**收稿日期：2424W 、W4 修回日期：242、氟、表3基金项目：中国医学科学院医学科学创新基金(2417D2M-)909)* 通信作者(ccrresponding authoe ) : sunwei@ iSms.4111110.1X44/(1.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院药理系，北京140045；2.北京医院国家老年医学中心检验医学科，北京144732； 8.国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心北京生命组学研究所，北京142202)扌商要：目的筛选健康成人尿液中与年龄相关的差异表达蛋白质，探讨成人因年龄增长而发生的蛋白质改变。

方法选取2名健康男性及2名健康女性,按年龄各分为3组(24~ 34、44~ 53和M 64周岁)，用非标记定量蛋白质组学 技术进行尿液蛋白质组分析，筛选年龄相关尿液蛋白。

结果从男性尿液中共获得14个与年龄增长相关的尿蛋白，其中上调66个，下调34个。

从女性尿液中共获得94个与年龄增长相关尿蛋白，其中上调77个，下调15个。

获得男女共有的年龄增长相关尿蛋白1个。

蛋白功能分析显示,这些蛋白与凝血系统、蛋白泛素化.LXR/RXR 激活、糖酵解等通路相关。

结论尿液中存在与年龄增长相关的蛋白质，有可能成为衰老相关的尿液标志物，并为后续疾病生物标志物发现提供基础。

关键词：尿液蛋白质组学;个体差异;年龄中图分类号:R32文献标志码:AScreening aying related protein) in udnc from hea/hy adult)ZHENG SSuwin 1, ZHAO Mis-dO, SHAO Chen 7, SUN HaOdan 、，LIU XOe-ysn 、，GUO Zhepg-auang 1, SUN Wei 1 *(1. DepaPmeo) of Pharmacologp , Institute of Basic Medical Sciences CAMS , School of Basic Medicixc PUMC , BeijOg 120005 ；4. Depadmeo) of Lakoratop McdRixc , National Center of Gerontologp , BeijOg Hospital ,BeijOg 120736 ；3. Beijmg Institute of Lifeomics, National Centos for Protein Sciences (Beijmg),BeijOg Proteomc Research Ceotes, BeijOg 122226, Chixa)Abstrach : Objective To screen the diOerextial proteins related W aping in human udne and W find out the func-tioxal changes of proteins related te aping. M ethods Fondeen healthy men and 15 healthy women woo oplUdand divided them inte three gAups accorVing W their ages (22-36, 40-54 and over 66 years olU) . The diOerential proteins were screened Sy laXel-Zrev quanti/cahox and 2DLC-MS/MS. R csu IS s In male gAVp , there were 120 pre ­Wins di/erentially expres/d in three gAups ； 66 wca over-axpres/d and 34 wca under-axpres/d. In female gAnp , there were 94 proteins UPoo/XU expressed in three gAups, 77 were overexpressed and 15 were undo a x -pressed. Thera were 1 diPerextial expressed proteins related W aping in Soth male and female gAups. Thou protein pathways mainly fochsed on coagulation system , protein uUiqui/na/ox pathway , LXR RXR vhWxWn and lactoso UepraSatiox III, etc. Conclusions Proteins related te aping can Sv found in udne , which may Sv used as SiomarVers of aping and previding Seis far suUsepuext discaveA of iisoso SiomarVers.郑舒心从健康人尿液筛选年龄相关蛋白质529 Key words:uh/c proteomics;individual vaha/on;aging近年来，尿液逐渐成为寻找疾病标志物的重要来源⑴。