血球计数板的使用.ppt
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血球计数板的计数方法
血球计数板是一种常用的实验仪器,用于计算血球数量。
具体的计数方法如下:
1. 准备工作:首先,确保血球计数板干净,无污染。
可用洗涤剂和双蒸水进行清洗和冲洗,然后用无纹纸巾擦干。
2. 取血样:使用无菌针头采集一定量的血液样本,通常使用的样本量为0.02毫升。
3. 加样:将血液样本滴入血球计数板的计数区。
滴落的血液应均匀地分布在计数区的每个小方格内。
4. 观察:视觉放大镜或显微镜的帮助下,通过目镜观察计数区的血球数量。
5. 计数:随机选择若干个小方格,计算这些方格中血球的数量。
一般使用的计数面积为3个或4个方格。
6. 计算:将所选方格中的血球数量相加,然后乘以血球计数板的稀释倍数和倒干涉系数。
根据计算公式,可得出血球的浓度,常用单位为每立方毫米的血液中血球的数量。
7. 结果:将最终计算出的血球浓度记录下来,并报告给相关的医务人员或研究人员。
使用血球计数板进行血球计数时,需要严格按照操作规程进行,
避免出现污染或操作错误。
在完成计数后,要及时清洗血球计数板,以备下次使用。
耶赛明(南通)保健有限公司目的 Purpose规范计数板的标准操作,确保设备的操作有章可循。
范围 Scope适用于计数板的日常使用。
职责 Responsibility质检部的检验员负责遵守该规程,质检部负责人负责监督与管理。
内容Procedure1 概述1.1 测定微生物细胞和动物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。
1.2 显微直接计数法:将小量待测样品悬浮液置于计菌器上,于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如酵母、细菌、霉菌孢子等1.3 血球计数板1.3.1 是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。
1.3.2 中间平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个方网格(图1)。
图1:血细胞计数板构造(一) 图2:血细胞计数板构造(二)1.3.3 每个方网格分为9个大方格,正中间的大方格为计数室,计数室内的刻度有两种:一种是每个计数室内分为16个中方格(中方格用三线隔开),而每个中方格又分成25个小方格(图2);另一种是每个计数室内分成25个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数室内都由400个小方格组成。
1.3.4 计数室边长为1mm,则计数室的面积为lmm2,每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。
1.3.5 使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物或细胞的数量,再换算成每毫升样液(或每克样品)中微生物或细胞的数量。
已知:1cm3体积=10mm×10mm×10mm=1000mm3=1ml;所以:1cm3体积应含有小方格数为1000mm3/1/4000mm3=4×106个小方格,即系数K=4×106。