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⽣理学实验神经⼲动作电位的测定实验四神经⼲动作电位的测定【实验⽬的】学习⽣物电活动的细胞外记录法；观察坐⾻神经⼲动作电位的基本波形、潜伏期、幅值以及时程。
【实验原理】神经组织属于可兴奋组织，其兴奋的客观标志是产⽣动作电位，即当受到有效刺激时，膜电位在静息电位的基础上将发⽣⼀系列的快速、可逆、可扩布的电位变化。
动作电位可以沿着神经纤维传导。
在神经细胞外表⾯，已兴奋的部位带负电，未兴奋的部位带正电。
采⽤电⽣理学实验⽅法可以引导出此电位差或电位变化，根据引导的⽅式不同，所记录到的动作电位可呈现单向或双向的波形。
由于坐⾻神经⼲是由许多神经纤维组成的，所以其产⽣的动作电位是众多神经纤维动作电位的叠加，即为⼀个复合动作电位。
这些神经纤维的兴奋性是不同的，所以在⼀定范围内增⼤刺激强度可以使电位幅度增⼤。
这和单⼀细胞产⽣的动作电位是有区别的。
本实验所引导出的动作电位即为坐⾻神经⼲的复合动作电位。
【实验对象】蛙或蟾蜍。
【实验材料】两栖类⼿术器械 1 套、滴管、BL-410⽣物机能实验系统、神经屏蔽盒、刺激电极、接收电极、任⽒液。
【实验步骤】1．制备坐⾻神经⼲标本坐⾻神经⼲标本的制备⽅法与制备坐⾻神经-腓肠肌标本相似。
⾸先按照制备坐⾻神经- 腓肠肌标本的⽅法分离坐⾻神经，当游离⾄膝关节处时，在腓肠肌两侧找到胫神经和腓神经，任选其⼀剪断，然后分离留下的⼀⽀直⾄⾜趾并剪断。
保留与坐⾻神经相连的⼀⼩段脊柱，其余组织均剪除。
此时，即制成了坐⾻神经⼲标本。
将标本浸于任⽒液中，待其兴奋性稳定后开始实验。
2．接标本与实验仪器1）棉球沾任⽒液擦拭神经标本屏蔽盒内的电极，将标本的脊柱端置于屏蔽盒的刺激电（图 4－1 屏蔽盒）极端（即 0刻度端），其神经部分横搭在各个电极上。
2）取出 BL-410 ⽣物机能实验系统专⽤刺激电极，将其插头插在与主机“刺激”插⼝中，另⼀端的两个鳄鱼夹分别夹在屏蔽盒左侧的两个刺激接⼝上。
红⾊接正极，⿊⾊接负极。
神经干动作电位【实验目的】■学习神经干标本的制备。
■学习电生理仪器的使用方法。
■用电生理学方法测定蟾蛛坐骨神经的刺激阈值、双相和单相动作电位。
【实验原理】 ■ 神经干由许多神经纤维组成。
其动作电位是以膜外记录方式记录到的⅛ι合动作电位■ 电刺激神经,在刺激电极的负极下神经纤维膜内产生去极化，当去极化达到阈电位， 膜上产生一次可传导的快速电位反转，即动作电位■ 如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便 引导出两个方向相反的电位波形，称双相动作电位■ 如果两个引导电极之间的神经纤维完全损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能 传至第二个引导电极，则只能引导出一个方向的电位偏向波形，称单向动作电位 【实验材料与器械】蟾妹的坐骨神经干标本、常用手术器械、计算机采集系统、不锈钢盘或培养皿、神 经屏蔽盒、滴管、任氏液。
【实验方法与步骤】j 结扎线f 1 .坐骨神经标本的制备坐 2.仪器及标本的连结g 一坐骨神经一 3、双相动作电位的观察打开RM6240软件，在“实验”-“神经干动作电位的测定”（同步触发勾选正确）■点击“开 始刺激”•产生双相动作电位4、神经干兴奋阈值的测定刺激强度从IV 开始，逐渐降低刺激强度，当动作电位消失时的电位即为神经干的阈 电位，所对应的刺激为阈刺激。
5双相动作电位在刺激阈值的基础上逐渐加大刺激强度，可见动作电位的图形为双相，而且其幅值随 刺激强度增大而加大。
6、单相动作电位在两个引导电极之间损伤神经干标本，即可使原来的双相动作电位的下相消失，变为 单相；注意上相动作电位的图形有什么变化。
1你认为引起动作电位的刺激需要满足那些条件？ 坐骨神经腓肠肌标本（1）屏蔽盒的的连接。
（2）计算机生物信号采集处理系统进的连接2电刺激波形有很多种，包括锯齿波/正弦波/方波等，但实验中为什么选择方波？3你所观察到的CAP神经干动作电位的双相电位，与AP （动作电位）相同吗？请尝试解释其原因，如何验证你的推测？。
一、实验目的观察蟾蜍或蛙的坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理。
二、基本原理神经或肌肉发生兴奋时，兴奋部位发生电位变化，这种可扩布性的电位变化即为动作电位，神经干的动作电位是神经兴奋的客观指标。
单根神经纤维产生和传导的动作电位是“全或无”式的。
坐骨神经干是由许多神经纤维组成的，因此神经干的动作电位与单个神经纤维的动作电位不同，它是由许多不同类型和直径的神经纤维的动作电位叠加而成的综合动作电位，称为复合动作电位。
复合动作电位不遵循“全或无”的特征。
在一定刺激强度范围内，随着刺激强度的增加，被兴奋的神经纤维的数目逐渐增多。
复合动作电位的振幅也增加。
根据引导方法的不同（双极引导或单极引导），可分别得到双相或单相动作电位。
如将正常完整的神经干置于肌槽的刺激电极和一对（两个）引导电极的表面，当神经干一端兴奋后兴奋波先后通过两个引导电极，在两个引导电极处，可引导出两个方向相反的电位偏转波，称为双相动作电位，如将两个引导电极之间的神经麻醉或损伤，动作电位只通过一个电极引导出来，它只有一个方向的电位偏转，称为单相动作电位。
三、实验用品蟾蜍或蛙，两栖类常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、解剖钳、眼科剪、眼科镊、肾形弯盘、毁髓针和玻璃分针），蛙板（木质或硬泡沫塑料），探针，锌铜弓，培养皿或不锈钢盘，蜡盘，污物缸，滴管，纱布，粗棉线，任氏液。
RM6240B 生理实验系统，BB-3G神经标本屏蔽肌槽。
四、实验方法和步骤1.制备蟾蜍或蛙坐骨神经干标本参考实验2.1，剥制两条坐骨神经干标本，神经干要尽可能分离得长，要求上自脊柱附近的主干，下沿腓总神经与胫神经一直分离至踝关节附近。
在制备过程中，要把神经周围的结缔组织分离干净，但勿损伤神经标本。
2.安置实验设备RM6240B生理实验系统通过USB接口与计算机相连。
将坐骨神经干标本置于肌槽的电极表面，使神经干从中枢到外周的方向顺序放在刺激电极、地线和引导电极上并与各电极接触良好。
实验3 神经干动作电位及其传导速度的测定【目的】应用微机生物信号采集处理系统和电生理实验方法，测定蛙类坐骨神经干的单相、双相动作电位和其中Ａ类纤维冲动的传导速度，并观察机械损伤、药物对神经兴奋和传导的的影响。
【原理】用电刺激神经，在负刺激电极下的神经纤维膜内外产生去极化，当去极化达到阈电位时，膜产生一次在神经纤维上可传导的快速电位反转，此即为动作电位(action potential, AP)。
神经纤维膜外，兴奋部位膜外电位相对静息部位呈负电性质，当神经冲动通过以后，膜外电位又恢复到静息时水平。
如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，称为双相动作电位。
如果两个引导电极之间的神经纤维完全损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传至第二个引导电极，则只能引导出一个方向的电位偏转波形，称为单相动作电位。
神经干由许多神经纤维组成，故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同，神经干动作电位是由许多不同直径和类型的神经纤维动作电位叠加而成的综合性电位变化，称复合动作电位，神经干动作电位幅度在一定范围内可随刺激强度的变化而变化。
动作电位在神经干上传导有一定的速度。
不同类型的神经纤维传导速度不同，神经纤维越粗则传导速度越快。
蛙类坐骨神经干以Aa类纤维为主，传导速度大约30～40m/s。
测定神经冲动在神经干上传导的距离（s）与通过这段距离所需时间（t），可根据n＝s/t求出神经冲动的传导速度。
【预习要求】1．仪器设备知识参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。
2．实验理论实验动物知识参见第三章第一节生理科学实验常用实验动物的种类，第四章第一节动物实验的基本操作；统计学知识参见第五章第四节常用统计指标和方法；生理学教材中兴奋性、兴奋的概念，静息电位和动作电位的形成机制，动作电位传导原理及神经纤维的分类。
反射时测定和反射弧分析神经干动作电位的测定2013级生命科学3班张柏辉学号：201325010761.实验目的1.观察蛙坐骨神经干动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理；2.学习测定反射时的方法，了解反射弧的组成；3.了解脊髓反射的功能特性。
2.实验原理（一）反射时测定和反射弧分析反射是指对某一刺激无意识的应答。
反射活动的结构基础称为反射弧，包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器。
从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间称为反射时。
反射时是反射通过反射弧所用的时间。
反射弧的任何一部分缺损，原有的反射不再出现。
中枢的兴奋和抑制同时存在又相互影响。
在脊髓反射的中枢之间或高位脑和脊髓对低位脊髓反射中枢均存在抑制作用，这些抑制作用保证了机体活动的协调性。
（二）神经干动作电位的测定神经干在受到有效刺激后可以产生复合动作电位，标志着兴奋的产生。
如果在立体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋冲动可以记录出双相动作电位，假如在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断其兴奋传导能力，此时可以记录到单相动作电位。
3.实验对象与实验材料（一）材料：虎纹蛙（二）器具：手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、毁髓针、玻璃分针、木质蛙板、固定针、锌铜弓、瓷盘、污物缸、滴管、纱布、粗棉线、滤纸片、支架、蛙嘴夹、小烧杯、秒表、神经屏蔽盒、PowerLab、刺激线、USB线、电脑（三）试剂：任氏液、2%普鲁卡因、0.5%及1%硫酸溶液4.实验方法与步骤（一）反射时与反射弧的测定1. 屈反射取一只虎纹蛙，只毁脑髓制成脊蛙（只毁脑），用蛙嘴夹夹住蛙下颌悬挂在支架上，右后肢最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2~3mm(<10s),同时开始计时。
当出现屈反射时立即停止计时，并用清水冲洗受刺激皮肤，纱布擦干，重复测屈反射时3次。
同样方法测左后肢最长趾的屈反射时。
2.损毁感受器用手术剪自后肢最长趾基部环切皮肤，后用手术镊剥净长趾上的皮肤，用0.5%硫酸溶液刺激去皮皮肤，并记录侧时结果。
一目的要求：1．学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。
2．学习并掌握蛙类坐骨神经干标本的制备方法。
3．学习电生理学实验方法。
4．观察蟾蜍坐骨神经干复合动作电位的波形，了解其产生的基本原理。
二基本原理：神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。
如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相向动作电位。
神经细胞的动作位是以”全或无”方式发生的。
坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。
复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。
三动物与器材：蟾蜍、常用手术器械（手术剪、手术镊、金冠剪、眼科剪、毁髓针和玻璃分针）、蛙板、固定针、不锈钢盘、污物缸、粗棉线、任氏液、计算机生理信号处理系统、神经屏蔽盒。
四方法步骤：1．蟾蜍的单毁髓与双毁髓一手握住蛙或蟾蜍(可用纱布包裹蟾蜍躯干部)，背部向上。
用拇指压住蛙或蟾蜍的背部，食指按压其头部前端，使头端向下低垂; 另一手持毁髄针，由两眼之间沿中线向后触划，当触及到两耳中间的凹陷处(此处与两眼的联机成等边三角形)时，持针手即感觉针尖下陷，此处即是枕骨大孔的位置。
将毁髄针由凹陷处垂直刺入，即可进入枕骨大孔（图t-1）。
然后将针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以捣毁脑组织。
如毁髄针确在颅腔内，实验者可感到针尖触及颅骨。
此时的动物为单毁髓动物。
再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转冋后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
彻底捣毁脊髓时，可看到动物的后肢突然蹬直，而后瘫痪如棉（图t-2），此时的动物为双毁髓动物。
如动物仍表现肢肌肉紧张或活动自如，必须重新毁髓。
操作过程中应注意使蟾蜍头部向外侧(不要挤压耳后腺)，防止耳后腺分泌物射入实验者眼内(如被射入，则需立即手生理盐水冲洗眼睛)。
2．坐骨神经干标本制备(1) 剥制后肢标本（图t-3）(2) 分离两后肢（图t-4）(3) 分离坐骨神经（图t-5）3．测定：阈刺激、最大刺激，打印不同刺激引起的动作电位重叠显示波形。
神经干动作电位实验报告实验目的，通过对神经干动作电位的测定，了解神经细胞的兴奋传导特性，探究不同刺激条件下神经细胞的反应。
实验原理，神经细胞在受到刺激时，会产生电位变化，即动作电位。
通过电极记录这种电位变化，可以观察神经细胞的兴奋传导过程。
实验仪器，本次实验使用的仪器包括生理记录仪、电极、刺激器等。
实验步骤：1. 将动物神经干置于生理盐水中，使其保持活性。
2. 将电极插入神经干内，通过生理记录仪记录下神经干的基础电位。
3. 使用刺激器对神经干进行刺激，记录下不同刺激条件下的动作电位变化。
4. 分析实验数据，观察神经细胞在不同刺激条件下的反应特点。
实验结果：经过实验记录和数据分析，我们得到了以下结论：1. 在不同刺激条件下，神经细胞产生的动作电位幅度和频率均有所不同。
2. 强刺激下，动作电位幅度较大，频率较高；弱刺激下，动作电位幅度较小，频率较低。
3. 在一定范围内，刺激强度与动作电位幅度呈正相关关系，刺激强度与动作电位频率呈正相关关系。
实验讨论：通过本次实验，我们深入了解了神经细胞的兴奋传导特性。
神经细胞在受到刺激时，会产生电位变化，这种动作电位的幅度和频率受到刺激强度的影响。
这为我们进一步研究神经细胞的兴奋传导机制提供了重要的实验基础。
实验结论：本次实验通过对神经干动作电位的测定，深入了解了神经细胞的兴奋传导特性。
不同刺激条件下，神经细胞产生的动作电位幅度和频率均有所不同，刺激强度与动作电位幅度、频率呈正相关关系。
这为进一步研究神经细胞的兴奋传导机制提供了重要的实验基础。
结语：通过本次实验，我们对神经细胞的兴奋传导特性有了更深入的了解。
希望通过这一实验，能够为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。
神经科学是一个充满挑战和机遇的领域，我们将继续努力，探索更多神经细胞的奥秘。
神经⼲动作电位实验报告神经⼲动作电位实验报Experimental report of neUhtstem action potential告Intern ship report实验报告⼀、实验⽬的：1. 学习蛙坐⾻神经⼲标本的制备2. 观察坐⾻神经⼲的双相动作电位波形，并测定最⼤刺激强度3. 测定坐⾻神经⼲双相动作电位的传导速度4. 学习绝对不应期和相对不应期的测定⽅法5. 观察机械损伤或局⿇药对神经兴奋和传导的影响⼆、实验材料1. 实验对象：⽜蛙2. 实验药品和器材：任⽒液，2%普鲁卡因，各种带USB接⼝或插头的连接导线，神经屏蔽盒，蛙板，玻璃分针，粗剪⼑，眼科剪，眼科镊，培养⽫，烧杯，滴管，蛙毁髓探针，BL-420N 系统三、主要⽅法和步骤：1. 捣毁脑脊髓2. 分离坐⾻神经3. 安放引导电极4. 安放刺激电极5. 启动试验系统6. 观察记录7. 保存8. 编辑输出四、实验结果和讨论1. 观察神经⼲双相动作电位引导（单通道，单刺激）如图，观察到⼀个双相动作电位波形。
Pm 驴：i SQOQOKi 2.0 ms 7 射￥也00z 时间⼀—j .................... : .................. 频率：最⼤值-...... ' ........ ' ......... [ ........ ；...... [协⼩值:-15 --20 _oo: oo. m兀卫EQ创2. 神经⼲双相动作电位传导速度测定(双通道，单刺激)kUUUChz L.U ns ZlT m￥ii J.ttmzj .................. ■:- I2? 1. WV1 I ----------- 14 I I 4 I I IooTio mo oa nr iins on oo oru oom coe co nr no⽇on m nn oo oo ni2 DO on rtu OO CIJ ri^oo oc OIA(1) 选择“神经⾻骼肌实验”⼀“…传导速度测定”(2) 改变单刺激强度(3) 传导速度=传导距离(R1--R2-)/传导时间(t 2-t 1)如图所⽰，两个波峰之间的传导时间△ t = (t 2-t 1) = 0.66ms实验中，我们设定在引导电极1和3之间的距离△ R = (R 1--R2-) = 1cm故传导速度v = △ R/ △ t = 1cm / 0.66ms = 15.2 m/s1 OOY-ID释: 最⼤ii；■⼩值：平均值:嶂赠但?⾯租BJ祠;最知宜.环值：平均值:⽽租3. 神经⼲双相动作电位不应期观察-1B - -20 _I OOV, 4丐砂 |110:00.614 O0:0tJ.fil3 00:00.S22 CiO:OO.S2S 00:00.S30⼆黒 HL LJ倒 UJ S3时间：最⼤值; 最⼩值- 平均値删值时间：［Q1D |CO.QL. 3H g DI 3耨 OD Cd 00 W 3好 0⼝⽫ 11T 0Q D3 驀 1 OO.QJI 3R M ：0i S? QIXQ1,諮孝 00:01.^7由上图可知，当刺激间隔时间为 4.61ms时，两双相动作电位开始融合，此时为总不应期;当刺激间隔时间为1.05ms时，双相动作电位完全融合，此时为绝对不应期。
实验四、神经干动作电位的观测实验报告实验名称:神经干动作电位的观测一、实验目的1、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理。
2、学习测定蛙或蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
3、学习测定神经干兴奋不应期的基本原理和方法。
二、实验原理神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋冲动，可以记录出双相动作电位；假如在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就称为单相动作电位。
神经细胞的动作电位是以“全或无”的方式发生的。
但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增大而增大的。
如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为 m，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为 s。
即可按照公式 u= m/s 来计算兴奋的传导速度(conduction velocity,CV)。
蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为 3~29 um,其中直径最粗的有髓纤维为 A 类纤维，传导速度在正常室温下为 35~40m/s。
神经每兴奋一次及其在兴奋以后的恢复过程中，其兴奋性都要经历一次周期性变化，其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期 4 个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化，首先要给神经施加一个条件性刺激(conditioning stimulus,S1)引起神经兴奋，然后在前一兴奋及其恢复过程的不同时相再施加一个测试性刺激(test stimulus,S2),用以检查神经的兴奋阈值以及所引起的动作电位的幅值，以判定神经兴奋性的变化。
当刺激间隔时间长于 25ms 时，S1 和 S2 分别所引起动作电位的幅值大小基本相同。
当 S2 距离 S1 接近 20ms 左右时，发现 S2 所弓引起的第二个动作电位幅值开始减小。
神经干动作电位实验报告一、实验目的本次实验旨在探究神经干动作电位的产生机制、特点以及影响因素，加深对神经生理学的理解。
二、实验原理神经干由许多神经纤维组成，当受到适当的刺激时，神经纤维会产生兴奋，并以动作电位的形式沿神经纤维传导。
动作电位具有“全或无”特性，即刺激强度未达到阈值时不产生动作电位，一旦达到或超过阈值则产生最大幅度的动作电位。
动作电位在神经干上的传导具有双向性和相对不疲劳性。
三、实验材料与设备1、实验动物：蟾蜍2、仪器设备：生物信号采集处理系统、神经屏蔽盒、刺激电极、引导电极、手术器械等3、药品：任氏液四、实验步骤1、制备蟾蜍坐骨神经干标本破坏蟾蜍的脑和脊髓，仰卧固定在蛙板上。
从脊柱旁开，暴露坐骨神经，分离至膝关节处，剪断分支，取下坐骨神经干。
将神经干置于神经屏蔽盒的电极上，用任氏液保持湿润。
2、连接仪器将刺激电极连接至生物信号采集处理系统的刺激输出端，引导电极连接至输入端。
3、参数设置选择合适的刺激模式（单刺激、双刺激等）和刺激强度。
设置采样频率、增益等参数。
4、进行实验给予神经干一定强度的刺激，观察并记录动作电位的波形。
逐渐增加刺激强度，观察动作电位的幅度和频率变化。
改变刺激间隔时间，观察双刺激时的动作电位变化。
5、数据记录与分析记录不同条件下的动作电位波形和相关数据。
对数据进行测量和分析，计算动作电位的幅度、潜伏期、时程等参数。
五、实验结果1、动作电位的波形观察到神经干动作电位呈现双相波形，包括去极化的上升支和复极化的下降支。
2、刺激强度与动作电位幅度的关系当刺激强度低于阈值时，无动作电位产生。
刺激强度达到阈值后，动作电位幅度不再随刺激强度增加而增大，表现为“全或无”现象。
3、刺激频率与动作电位频率的关系随着刺激频率的增加，动作电位的频率也相应增加，但在一定频率后，会出现不完全强直收缩和完全强直收缩。
4、双刺激的结果当刺激间隔时间较短时，第二个动作电位的幅度可能会减小；当间隔时间足够长时，两个动作电位互不影响。
人体解剖生理学实验教程实验一神经干动作电位测定及兴奋传导速度和不应期测定一、实验目的：1、掌握坐骨神经标本的制备方法并按要求制备出完整的蟾蜍坐骨神经标本2、掌握神经干动作电位的引导、不应期及动作电位传导速度的测定方法二、实验内容：1、坐骨神经标本制备2、坐骨神经干动作电位测定3、坐骨神经干兴奋传导速度和不应期测定三、实验仪器设备和材料清单1、实验材料：蟾蜍或蛙、蛙类手术器械一套（包括探针、粗剪、手术剪、眼科剪、镊子、玻璃分针）、蛙板、滴管、培养皿、烧杯、棉线、棉球、滤纸片。
2、实验试剂：任氏液3、实验仪器：生物信号采集处理系统、打印机、、神经标本屏蔽盒四、实验要求1、学会用细胞外电刺激诱发神经干动作电位的方法；掌握生物电记录的一般原则和方法；熟悉生物信号采集处理系统的操作；2、要求学生了解科研过程，培养学生发现问题、分析问题、解决问题的能力；3、要求学生能独立操作每一个实验步骤，了解和掌握相关的原理，培养学生熟练操作。
五、实验原理：可兴奋组织如神经纤维在受刺激而兴奋时，细胞膜电位将发生一系列短暂的变化。
由安静状态下的膜外正膜内负的静息电位变为兴奋状态下的膜外负膜内正的去极化状态。
因此，在膜外兴奋区相对于未兴奋区来说电位为负。
这种电位差所产生的局部电流又引起邻近未兴奋区的去极化，使兴奋沿细胞膜传向整个细胞，而原来的兴奋区的膜电位又恢复到膜外正膜内负的静息水平。
这种可传播的、短暂的膜电位变化称之为动作电位。
可兴奋组织在一次兴奋之后，其兴奋性要经历一个规律的时相变化，依次是绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后才恢复到正常的兴奋性水平。
六、实验方法：一）、实验步骤和观察指标1、仪器装置准备好生物信号采集处理系统及相关电极。
2、制备蟾蜍坐骨神经标本(3)剪除躯干上部及内脏用左手在背部捏住脊柱尾端，让头与内脏自然下垂，右手持粗剪刀在骶髂关节水平以上1cm处剪断脊柱，剪除全部下垂的头及内脏，保留后肢，腰背部脊柱。
实验四 神经干动作电位的测定
【实验目的】
学习生物电活动的细胞外记录法；观察坐骨神经干动作电位的基本波形、潜伏期、幅值 以及时程。
【实验原理】
神经组织属于可兴奋组织，其兴奋的客观标志是产生动作电位，即当受到有效刺激时， 膜电位在静息电位的基础上将发生一系列的快速、可逆、可扩布的电位变化。
动作电位可以沿着神经纤维传导。
在神经细胞外表面，已兴奋的部位带负电，未兴奋的 部位带正电。
采用电生理学实验方法可以引导出此电位差或电位变化， 根据引导的方式不同， 所记录到的动作电位可呈现单向或双向的波形。
由于坐骨神经干是由许多神经纤维组成的， 所以其产生的动作电位是众多神经纤维动作 电位的叠加，即为一个复合动作电位。
这些神经纤维的兴奋性是不同的，所以在一定范围内 增大刺激强度可以使电位幅度增大。
这和单一细胞产生的动作电位是有区别的。
本实验所引 导出的动作电位即为坐骨神经干的复合动作电位。
【实验对象】
蛙或蟾蜍。
【实验材料】
两栖类手术器械 1 套、滴管、BL410生物机能实验系统、神经屏蔽盒、刺激电极、接 收电极、任氏液。
【实验步骤】
1． 制备坐骨神经干标本
坐骨神经干标本的制备方法与制备坐骨神经腓肠肌标本相似。
首先按照制备坐骨神经 腓肠肌标本的方法分离坐骨神经， 当游离至膝关节处时， 在腓肠肌两侧找到胫神经和腓神经， 任选其一剪断，然后分离留下的一支直至足趾并剪断。
保留与坐骨神经相连的一小段脊柱， 其余组织均剪除。
此时，即制成了坐骨神经干标本。
将标本浸于任氏液中，待其兴奋性稳定 后开始实验。
2．接标本与实验仪器
1）棉球沾任氏液擦拭神经标本屏蔽盒内的电极，将标本的脊柱端置于屏蔽盒的刺激电
（图 4－1 屏蔽盒）
极端（即 0刻度端），其神经部分横搭在各个电极上。
2）取出 BL410 生物机能实验系统专用刺激电极，将其插头插在与主机“刺激”插口 中， 另一端的两个鳄鱼夹分别夹在屏蔽盒左侧的两个刺激接口上。
红色接正极， 黑色接负极。
保持两鳄鱼夹的间距为 1cm。
3）取出 BL410 生物机能实验系统专用生物电信号引导电极。
引导电极的一端是一个5 芯插口，将该插口与主机的 1 通道相连；另一端有三个不同颜色的鳄鱼夹，其中黑色的夹子 用于接地，夹在屏蔽盒的接地接口上并和屏蔽盒本身的接地鳄鱼夹相对应的接在同一电极 上；红色的夹子引导正电信号，黄色的夹子引导负电信号，分别夹在屏蔽盒的两个接收电极 接口上（红、黄鳄鱼夹的连接位置可以任选，但要保证间距为 1cm，且所接的电极上搭有神
经） 。
（图 4－2 引导电极）
3．打开计算机，进入 BL410 生物机能实验系统，开始实验数据的采集
1）菜单条中点击“实验项目”按钮，在“肌肉神经实验”中选择“神经干动作电位的 ，进入该实验模块。
此时，1 通道的信号类型位置已标注为“动作电位” 。
引导”
2）观察双向动作电位：在窗口下方刺激器栏中将刺激类型定为“单刺激” ，强度定为 “1.5V” ，之后单击右侧的“启动/停止刺激”按钮，此时在 1 通道中可观察到一个刺激伪迹 和随后出现的双向动作电位。
此双向动作电位的第一相和第二相的方向相反（先上后下）， 注意两者是否对称。
3）观察单向动作电位：用一小块浸有高浓度 KCl 溶液的滤纸片贴附在后一个记录电极 上或用眼科镊夹伤两个记录电极之间的神经，按(2)中的刺激条件给予刺激，可见到双向动 作电位的第二相逐渐减小，数分钟后完全消失。
此时得到的即为单向动作电位。
①刺激强度与复合动作电位幅度的关系：用上述记录单向动作电位的方法进行如下实 验。
②“打开刺激器设置对话框”中选择对话框中的“设置”面板，选择 “设置”面板，。
将强度调整 在“模式”下拉菜单中选择“细电压”
；在“方式”下拉菜单中选择“单刺激”
为最小值即 0.005V，并开始刺激。
注意观察此时 1 通道是否有动作电位波形出现。
之后逐 渐增大刺激强度，并仔细观察，直至当强度增大到某一特定数值时，波形突然出现，标志着 此时在神经干中兴奋性最好的某个神经纤维发出了一个动作电位。
那么引起这第一个动作电 位的刺激强度即为该神经纤维的阈值；该刺激称阈刺激。
③进一步增大刺激强度， 观察不同神经纤维共同产生的复合电位的幅度以及刺激伪迹的 变化。
待复合电位的幅度不再随刺激强度而增大时， 记录此时的刺激强度值， 即为最大刺激。
再继续增大刺激强度，观察波形是否变化。
【参数设定】
实验参数详见下表（可据实际情况调整各参数）
通道 电极类型 增益选项 时间常数 滤波调节 扫描速度 50Hz滤波
采样参数
1 引导电极 200 DC 10k 0.63ms/div 关
刺激模式 刺激方式 延时 波宽 波间隔 频率 强度
刺激器参数
粗电压 单刺激 1.00V 【注意事项】
1．标本的神经部分一定要尽量长一些， 并应仔细清除附着于神经干上的结缔组织 及血管。
2．神经在屏蔽盒中摆放时不可折叠，并应与各个电极均接触良好。
3．实验过程中屏蔽盒盖应保持关闭。
【思考题】
1．采用细胞外记录法所记录的神经干动作电位的原理是什么？
2． 在引导神经干双相动作电位时， 为什么动作电位的第一相的幅值比第二相的幅值大？
3．在实验中，神经干复合动作电位的幅值可在一定范围内随刺激强度的增加而增大， 这与“全或无”定律矛盾吗？。
