细菌菌落总数的测定ppt课件

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食品中菌落总数检验PPT推荐版

• 培养时间 48±2h。
检测方法—计数
• 菌落读取培养到时间后，应立即计数。选定适宜菌落数的平板来读取。可用肉眼观察，或借助计数工具(如：放大镜、菌落计数器等)。
菌落计数器
全自动菌落分析仪
注意：应在充足柔和的光线下进行菌落计数。避免将平板上
来源于未溶解的培养基、样品
或沉淀物的颗粒计数成菌落。
• 样品稀释误差为减少样品稀释误差，在连续倍比稀释时，每一稀释液应充分振摇使其均匀，同时每一稀释度应更换一支吸管，将吸管内液体沿管壁流入，吸管尖端不能伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。
为减少稀释误差，SN标准采用取 10mL稀释液，注入90mL缓冲液中。
检测步骤—接种
• 接种方式倾注接种法，涂布接种法，螺旋接种法等。
检测方法-计数菌落计数和计算 GB/T 4789.2-2003方法
• 规则一：选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数即为样品中菌落数。(例1)
规则二：若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～ 300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字。(例2和例3)
检测方法-计数菌落计数和计算 SN 0168-1992方法
规则五：若所有稀释度均无菌落生长
，则以小于1乘以最低稀释倍数即为菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
菌落计数器
样品中菌落数，加*号表示。(例5) 检样处理参照GB/T 4789.
3M 纸片法
检测方法
• 国内外菌落总数测定方法基本一致。基本操作一般包括：检样→样品的稀释→ 倾注平皿→培养48小时→计数报告。

水质检测微生物指标培训课件

⑥若所以稀释度的平板上均无菌落生长，则以未检出报告之。
⑦如果所以平板上都菌落密布，不要用“多不可计”报告，而应在稀释度最大的平板上，任意数其中2个平板1cm2中的菌落数，除2求出每平方厘米内平均菌落数，乘以皿底面积63.6cm2，再乘其稀释倍数作报告。
水质检测微生物指标
11
❖ 分离培养
将产酸产气的发酵管分别转钟在伊红美兰琼脂平板上，于36 ℃+1 ℃培养箱内培养18h～24h，观察菌落形态，挑取符合下列特征的菌落作革兰染色、镜检和证实试验。
深紫黑色、具有金属光泽的菌落；
紫黑色、不带或略带金属光泽的菌落；
淡紫红色、中心较深的菌落
水质检测微生物指标
水质检测微生物指标
27
7.不同稀释度的选择及报告方法
①首选30～300之间进行计算，若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表 1实例1）。
②若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均数（见表1实例2），若大于或等于2则报告其中稀释度较小的菌落数（见表1实例3、4）。
3
注意事项
❖ （1）操作要快而准，包括材料、加样、倒培养基。
❖ （2）吸液体时液体不能进入吸头。 ❖ （3）样品稀释时一定要混匀。 ❖ （4）倒培养基前，瓶口要过火焰。 ❖ （5）一定要有空白对照。 ❖ （6）培养基温度控制，培养基薄厚。
水质检测微生物指标
5
6.菌落计数及报告方法
作平皿菌落计数时，可用眼睛直接观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此平皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。

《细菌菌落计数》PPT课件

做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
（2）菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择
选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
细菌菌落计数
精选课件ppt
1
▪直接法
✓血球记数板 ✓活菌染色：美蓝、吖啶橙、TTC
▪间接法
精选课件ppt
2
直接法—血球记数板
细菌计数板和血球计数板都用来侧微生物的总菌数。血球计数板用来测
较大微生物如酵母菌和霉菌孢子的总数，细菌计数板用来测细菌的总菌
数。两种计数板的构造相似，不同的是细菌计数板的深度仅为血球计数
6
精选课件ppt
7
• 适用领域：
1.广泛用于生物制品检验(如活菌制剂)，以及食品、饮料和水(包括水源水)等的含菌指数或污染程度的检测。 2.疾病诊断
*泌尿系感染性疾病的诊断------尿培养 3.细菌感染及药物治疗效果
*临床病人 *实验动物
精选课件ppt
8
3、灭菌吸管取2～3个适宜稀释度的稀释菌液0.1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀释度重复做两个平板，涂布均匀后，置 37℃，培养24-48h。
12
3
4
5
6
0.1ml
1
样本
0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml
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微生物检验实例菌落总数ppt课件

界限，作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算。 + （3）、如片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。
11
+ （1）、选取菌落数在30～300之间的平板（SN标准要求为25～250个菌落），若有二个稀释度均在30～300之间时，比值小于或等于2取平均数，比值大于2则其较小数字。
+ 3、吸管插入试样液内的深度不得小于 2.5cm,调整时要使管尖与容器内壁紧贴;
+ 4、进行稀释时,吸管口不得与稀释液接触;
15
+ 5、检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min.
+ 6、稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象，不可作为检样计数报告的依据。
12
+ （2）、如均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告
+ （3）、如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告
+ （4）、如菌落数有的大于300，有的又小于30，不在30～300之间，以最接近300或 30的平均菌落数乘以稀释倍数报告
+ （5）、如所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以最低稀释倍数报告。
8
+ 普通食品:37 ℃ 48h 倒放平板 + 清凉饮料、调味品、糕点、酒类： 37 ℃
24h + 水产品: 30℃ 48h
9
+ 到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0－4℃，但不得超过24h。
10
+ （1）、单个菌做一个菌落计 + （2）、呈链状生长的菌落之间无任何明显

《菌落总数测定》幻灯片

《菌落总数测定》幻灯片
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菌落总数测定
菌落的概念：
菌落〔colony〕是指细菌在固体培养基上经培养后生长繁殖而形成的能被肉眼所识别的生长物集落，它是由数以万计的一样细菌集聚而成的。
菌落总数的检验程序图
检样 10倍系列稀释
选择2~3个适宜样品匀液，各取1mL分别参加无菌培养平皿内
每皿内参加适量培养基 (PCA)
36±１℃ 48±2h
菌落计数
报告
样品的稀释
▪ 固体和半固体样品：称取25g样品至盛有 225 mL磷酸盐缓冲稀释液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000 r/min均质1min～2min，或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1min～2min，制成1:10的样品匀液。
▪ 按上述操作制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。
▪ 根据对样品污染状况的估计，选择2～3个适宜稀释度的样品匀液〔液体样品可包括原液〕，在进展10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL稀释液参加2个无菌平皿作空白对照。
结果的表述-菌落总数的计算方法
▪ 假设只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值再将平均值乘以相应的稀释倍数，作为每g(ml)中的菌落总数结果。
▪ 假设有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按以下公式计算：

教学课件-菌落总数的测定(精)

菌落总数的检验程序
检样 25g(mL)样品+225mL稀释液，均质
检验程
10倍系列稀释选择2个~3个适宜样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内每个培养皿中加入15~20mL 平板计数培养基，混匀 36℃±1℃ 48h±2h 计算各平板菌落数计算菌落总数报告
序
微生物检测菌落总数测定
菌落总数简介
菌落总数？菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
Байду номын сангаас
菌落总数测定的依据
饮用水卫生标准（BG5749-85)
国家标准规定
食品微生物卫生标准（GB 4789.2— 2010）

食品中细菌菌落总数的测定05536 ppt课件

食品中细菌菌落总数的测定05536
4、根据标准要求或对污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
同时分别取1ml稀释液（不含样品）加入两个灭菌平皿内作空白对照。
食品中细菌菌落总数的测定05536
食品中细菌菌落总数的测定05536
食品中细菌菌落总数的测定05536
2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，应以两者比值决定。若其比值小于2，应报告两者的平均数；若大于等于2，则报告稀释度较小的菌落数。
食品中细菌菌落总数的测定05536
食品中细菌菌落总数的测定05536
（二）菌落记录方法做平板菌落数记录时，可用肉眼观察，
必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0～4℃，但不要超过24h。
食品中细菌菌落总数的测定05536
五、步骤
(一) 取样、稀释和培养
1、以无菌操作取检样25g（mL），放于 225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。
固体和半固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000～10000r/min的速度处理 1～2min，制成1:10的均匀稀释液。
5 、稀释液移入平皿后，将冷却至 46℃琼脂培养基注入平皿约15～20ml，并转动平皿，混合均匀。
食品中细菌菌落总数的测定05536
6、待琼脂凝固后，翻转平板，置 36±1℃温箱内培养48±2h，水产品 30±1℃温箱内培养72±3h。

微生物检测-第四章菌落总数的测定课件

乳酸菌乳链球菌双歧杆菌?酸奶及保健制品评价产品质量?吸取检样液体稀释液1ml于培养皿中注入已4的b培熔化并冷却至45的溴甲酚紫bcp培养基或改良的lab培养基豆芽汁培养基改良mrs琼脂心脑培养基等轻轻摇匀静置冷凝后3537倒置培养72h计数
卫生细菌学检验
第四章菌落总数的测定
第一节菌落总数(Total colony count)的概念和测定意义
美国药典MPN法测菌落总数，三级三管制
阳性管数 1 mL(g) ×3 2 2 2 2 0.1 mL(g) ×3 2 2 2 2 0.01 mL(g) ×3 0 1 2 3 MPN CFU/100mL(g) 210 280 350 420 95%可信限下限上限
40 100
470 1500
3 3 3 3
三、注意事项
器具干净，灭菌样品具有代表性稀释液要有空白对照蛋白胨水最合适，含盐量高时，用水最合适
培养基的温度
梯度稀释要换管，每管充分振摇培养基的琼脂1.5%
混合检样时向两个方向旋转
稀释倍数越高，检样数越少
出现链状菌落时以一个菌落记，片状菌落不宜采用无菌操作计数准确
所有平皿菌落密布时，在稀释度最大的平皿上，任意数2cm2,除以2，乘以63.6cm2，再乘以稀释倍数
5.乳酸菌、乳链球菌、双歧杆菌

酸奶及保健制品，评价产品质量吸取检样液体稀释液1mL于培养皿中，注入已熔化并冷却至45℃的溴甲酚紫（BCP）培养基、或改良的LAB培养基、豆芽汁培养基、改良MRS 琼脂、心脑培养基等，轻轻摇匀，静置，冷凝后，35-37℃倒置培养72h，计数。 BCP用于乳酸菌、乳链球菌， MRS琼脂用于乳酸菌，豆芽汁用于链球菌，心脑培养基用于双歧杆菌，LAB用于三种菌。

【医学PPT课件】菌落总数的测定

职业任务模块五菌落总数的测定 —撞击法
什么是生物污染----炭疽热事件
室内空气中的细总数
1.室内空气微生物的分类非致病性腐生微生物；来自人体的病原微生物；尘
螨；真菌； 2.危害
空气传播的病原微生物可引起肺炎、鼻炎、水痘、麻疹和流感、呼吸道、皮肤过敏等疾病；
空气中传播的生物性物质会诱发变应性疾病如外源性变应性肺泡炎、变应性鼻炎和哮喘等；
经常食用被致病微生物群污染的粮食、食品、饮料、水可引起消化道疾病；螨虫是强致敏原，可使人患过敏性鼻炎、过敏性湿疹及过敏性哮喘。
室内空气中的细菌总数的检测 ——撞击法
1. 撞击法是采用撞击式空气微生物采样器采样，通
过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，在37℃环境下、经48h培养后，计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

实验三水中细菌总数的测定PPT课件

03
CATALOGUE
实验步骤
实验步骤
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实验步骤
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实验步骤
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02
培养数据分析能力
通过对实验数据的分析，可以培养数据分析能力，提高数据处理水平。
03
学习并掌握实验报告撰写的基本方法
通过撰写实验报告，可以培养报告撰写能力，提高文字表达能力。
02
CATALOGUE
实验原理
细菌总数的概念及测定意义
细菌总数
指在一定条件下，每毫升水样中可以生长的细菌菌落的总数。
测定意义
中细菌总数。
学习并掌握无菌操作技术
02
在实验过程中结果的准确性。

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细菌菌落总数的测定
• 例如：
稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度）
菌落数
232，244
33，35
232+244+33+35
•
(2+0.1×2) ×10-2
•
=544/0.022=24727
• 四舍五入表示为: 2.5 × 104
细菌菌落总数的测定
细菌菌落总数的测定
发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、
有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于
现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生
长。
细菌菌落总数的测定
•
菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，
也不能区分其中细菌的种类，只包括一群在计数
平板琼脂中生长发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧
的细菌菌落总数，所以有时被称为杂菌数，需氧
1～2min，制成1:10的均匀稀释液。
细菌菌落总数的测定
•
2、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1
mL，沿管壁徐徐注入含有9 mL灭菌生理盐水
或磷酸盐缓冲液的试管内，振摇试管或反复吹
打混合均匀，制成1:100的稀释液。
•
细菌菌落总数的测定
•
3 、另取1 mL灭菌吸管，按上项操作顺
序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一
出较全面的评价。
细菌菌落总数的测定
• 2、细菌总数
•
指一定数量或面积的食品样品．经过适
当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数
。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。
细菌总数也称细菌直接显微镜数。通常以1 g或
1 mL样品中的细菌总数来表示。
细菌菌落总数的测定
三、材料
• 1、食品检样 2、培养基平板计数培养基，无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 3、其它无菌培养皿，无菌吸管，电炉、恒温培养箱等。
食品微生物学检验菌落总数的测定
细菌菌落总数的测定
• 一、目的
• 1、学习并掌握食品中菌落总数测定方法和原理。 2 、了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义。
细菌菌落总数的测定
二、原理
•
细菌数量的表示方法由于所采用的计数
方法不同而有两种：菌落总数和细菌总数。
细菌菌落总数的测定
• （三）菌落总数的计算
• 1、若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜
计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。
细菌菌落总数的测定
细菌菌落总数的测定
• 2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计
数范围内时，按如下公式计算： N=∑C/（n1+0.1n2）d…………（1 ) 式中： N ― 样品中菌落数； ∑C ― 平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和； nl ― 第一个适宜稀释度平板数； n2 ― 第二个适宜稀释度平板数； d ― 稀释因子（第一稀释度）。
脂培养基（约4毫升），凝固后培养。
细菌菌落总数的测定
细菌菌落总数的测定
• （二）菌落记录方法做平板菌落数记录时，可用肉眼观察，必要
时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。 • 到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0～4℃，但不要超过24h。
一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可
以计算半个平板后乘以2，以代表一个平板的菌
落数。
细菌菌落总数的测定
•
3、当平板上有链状菌落生长时，如
呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则
应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源
的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要
把链上生长的每一个菌落分开计数。
细菌菌落总数的测定
• 1、菌落总数
•
是指食品检样经过处理，在一定条件下
培养后，所得1g或1mL检样中形成的细菌菌落
总数。以 CFU/g（mL）来表示。
•
一定条件包括培养基成分、培养温度和时
间、pH、是否需要氧气等。
细菌菌落总数的测定
•
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，
36 ±1℃培养48±2 h，能在平板计数琼脂上生长
5 、稀释液移入平皿后，将冷却至46℃琼
脂培养基注入平皿约15～20ml，并转动平皿，
混合均匀。
细菌菌落总数的测定
•
6、待琼脂凝固1℃温箱内培养72±3h。
•
如样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生
长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼
次即换用1支1 mL吸管。
细菌菌落总数的测定
•
4、根据标准要求或对污染情况的估计，
选择2～3个适宜稀释度，分别在制作10倍递增
稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀
释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
•
同时分别取1ml稀释液（不含样品）加
入两个灭菌平皿内作空白对照。
•
细菌菌落总数的测定
•
菌数等。
•
细菌菌落总数的测定
•
菌落总数主要作为判别食品被污染程度
的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品
中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评
价时提供依据。
细菌菌落总数的测定
•
食品中细菌菌落总数越多，则食品含有
致病菌的可能性越大，食品质量越差；菌落总
数越小，则食品含有致病菌的可能性越小。须
配合大肠菌群和致病菌的检验，才能对食品做
细菌菌落总数的测定
四、流程
• 1、检样 • 2、做几个适当倍数的稀释液 • 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加
入灭菌平皿内 • 4、平皿内倾注15～20 mL琼脂培养基，混
匀 • 5、36 ±1℃培养48±2小时或（24±2）小时 • 6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量 • 7、计算菌落细总菌菌落数总数的测→定报告
五、步骤
• (一) 取样、稀释和培养 1、以无菌操作取检样25g（mL），放于
225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。
•
固体和半固体检样在加入稀释液后，最好
置灭菌均质器中以8000～10000r/min的速度处理
细菌菌落总数的测定
•
• 1、平皿菌落数的选择选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总
数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿，大于300的可记为多不可计。 •
细菌菌落总数的测定
•
2、其中一个平板有较大片状菌落生长时，
则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作
为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的