实验十三小鼠体内生物分布实验
- 格式:doc
- 大小:23.00 KB
- 文档页数:3
实验十四小白鼠的解剖实验一、实验目的1.学习小型哺乳动物的外部测量法,掌握哺乳动物的一般解剖方法。
2.了解小脑对躯体运动的调节机能。
二、实验原理哺乳动物是动物界中进化程度最高的1个类群,其内部器官系统结构较复杂、完善,其生理活动、行为等受神经和体液的精确调节。
实验用小白鼠来源于野生小鼠,是人工选择长期培育的产物,是生命科学和医学等科学研究中的通用实验动物。
对小白鼠形态结构、生理机能等的深入了解是进一步认识阐明哺乳动物(包括人)生命活动的规律和进行生命科学与医学等科学研究的基础。
三、实验用品(一)材料小白鼠。
(二)器材显微镜、天平、解剖器具、大头针、蜡盘、鼠笼、25ml小烧杯、载玻片、盖玻片、棉花。
(三)试剂乙醚、0.9%生理盐水、碘酒、75%乙醇、自来水。
四、实验操作(一)外形观察外部形态观察:小白鼠身体分为头、颈、躯干、四肢和尾5部分。
1.头部观察其外耳、口鼻吻的特征。
2.颈有明显的颈部,活动自如。
3.躯干观察体毛的分布特征,注意腹面末端的外生殖器和肛门,区分鼠的性别(此外,雌鼠的胸、腹部有较明显的乳头)。
4.四肢前肢肘部向后弯曲,具5指;后肢膝部向前弯曲,具5趾;指(趾)端除第一指(趾)外,具坚硬的爪。
5.尾尾长约与体长相等,观察其外部特征。
(二)外部测量(图14-1)1.体长由头的吻端至尾基。
2.尾长由尾基至尾的尖端,不计毛长。
3.后足长后肢跗跖部连趾的全长(不计爪)。
4.耳长由耳尖至耳的内面基部(耳毛除外)。
此外,还有称量体重,观察毛的色泽、长短、厚薄及粗细等,都一一作记录。
注:接触小白鼠时需戴手套,操作要小心,避免被其咬伤!图14-1 小型兽类外部测量(三)损毁小脑的效应小脑具有维持身体平衡、调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。
当小脑损毁后,随着破坏程度的不同,可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调。
1.观察正常小白鼠的动作手持小白鼠尾部,观察小白鼠在桌面上向前爬行时四肢动作是否协调、姿势是否平衡。
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过对小鼠进行解剖,了解小鼠的主要器官位置和结构,掌握解剖技巧,提高实验操作能力,为后续的生物学和医学研究打下基础。
二、实验材料与工具1. 实验动物:成年小鼠(体重约20-30g)2. 实验器材:解剖台、剪刀、镊子、解剖刀、解剖针、解剖剪、解剖显微镜、生理盐水、酒精、碘酒、棉球等三、实验步骤1. 实验动物准备:将小鼠置于解剖台上,用棉球蘸取适量的生理盐水湿润小鼠的皮肤,以便于解剖操作。
2. 解剖过程:(1)切开皮肤:用剪刀沿小鼠腹部正中线剪开皮肤,注意避免损伤内脏器官。
(2)暴露内脏:用镊子提起皮肤,显露内脏器官,包括心脏、肺、肝脏、胃、小肠、大肠、肾脏、膀胱、生殖器官等。
(3)解剖器官:用解剖刀和剪子依次解剖各个器官,观察其位置、形态和结构特点。
(4)记录数据:详细记录每个器官的位置、形态、大小等数据。
3. 实验结果分析:(1)心脏:心脏位于胸腔中央,呈红褐色,分为左右两个心房和两个心室,心脏壁由心肌组成。
(2)肺:肺位于胸腔两侧,呈粉红色,肺泡是肺的基本结构单位,肺泡壁与毛细血管壁紧密相连,有利于气体交换。
(3)肝脏:肝脏位于腹腔右上侧,呈红褐色,具有解毒、代谢和储存营养物质等功能。
(4)胃:胃位于腹腔左侧,呈粉红色,分为贲门、胃底、胃体和幽门,胃壁具有分泌胃酸和消化酶的功能。
(5)小肠:小肠位于腹腔中部,分为十二指肠、空肠和回肠,是消化吸收的主要场所。
(6)大肠:大肠位于腹腔右下方,分为盲肠、阑尾、结肠和直肠,主要吸收水分和电解质。
(7)肾脏:肾脏位于腹腔腰部,呈红褐色,具有过滤血液、生成尿液和调节体内水分和电解质平衡等功能。
(8)膀胱:膀胱位于腹腔底部,呈粉红色,是储存尿液的器官。
(9)生殖器官:雄性小鼠的生殖器官包括睾丸、附睾、阴茎等;雌性小鼠的生殖器官包括卵巢、输卵管、子宫和阴道等。
四、实验心得体会1. 解剖操作过程中,要熟练掌握解剖刀、剪子等工具的使用方法,注意操作规范,避免损伤内脏器官。
收稿日期:2001209221;修回日期:2002202204基金项目:中国工程物理研究院预研基金资助项目(20010545)作者简介:蒋树斌(1970~),男(汉族),四川青神人,在读博士生(导师:罗顺忠),核燃料循环与材料专业第15卷第3期2002年8月同 位 素Jou rnal of Iso topesV o l .15 N o .3A ug .200299Tc m-HED T M P 的制备及其生物分布蒋树斌1,罗顺忠1,胡 疏2,邓候富2,魏洪源1,雷 勇2,邴文增1,王文进1(1.中国工程物理研究院核物理与化学研究所,四川绵阳 621900;2.四川大学华西医院核医学科,四川成都 610041)摘要:采用SnC l 2还原法制备了99T c m 2H ED TM P ,研究了标记物的体外稳定性、兔SPECT 骨扫描及小鼠体内分布。
结果表明,99T c m 2H ED TM P 具有较高的体外稳定性,5h 内放化纯度>95%;兔骨骼系统显像清晰;小鼠体内分布结果表明标记物主要被小鼠骨骼摄取,其它非目标组织的摄取较低、骨清除较快。
这表明99T c m 2H ED TM P 是非常有希望的新型骨显像剂。
关键词:99T c m 2H ED TM P ;骨显像剂;生物分布中图分类号:R 98119;R 81714 文献标识码:A 文章编号:100027512(2002)0320154203 常用的骨显像剂为二膦酸及其衍生物的99T c m 标记物,如99T c m2M D P (亚甲基二膦酸)、99T c m 2HM D P (羟基亚甲基二膦酸)。
人们通常将M D P 的化学结构适当加以调整合成新的骨显像剂[1,2],但始终未脱离二膦酸的范畴。
90年代初,本研究小组在对153Sm 2ED TM P (乙二胺四甲撑膦酸)的研究中发现该标记物具有很高的亲骨性,并能高度浓集在骨损伤部位[3,4]。
碘标EGCG及其小鼠体内生物分布刁尧;刘新宁;兰振和;马婧;赵文瑾;刘洁;赵恂;于成国;崔泽实【摘要】采用Iodogen法对表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-Gallate,EGCG)进行125I标记,用Sephadex-G25层析柱分离纯化标记物,薄层层析法测定标记率和放化纯度,观察125I-EGCG在小鼠体内的生物分布.结果显示,125 I-EGCG标记率达89.4%,放化纯度为96.4%;KM小鼠尾静脉注射后,125 I-EGCG在小鼠体内广泛分布,胃、小肠、颌下腺的每克组织放射性摄取率(%ID·g-1)在注入后15 min达峰值,分别为15.92、5.83、11.56%ID·g-1,4h时则分别下降为2.75、1.21、2.62;血液中放射性清除较快,注入后5 min时血液放射性摄取率为11.95%ID·g-1,4h为1.25%ID·g-1.结果提示,EGCG在体内主要经胃、小肠、颌下腺、肝、肾代谢,可用于进一步的微量示踪研究.【期刊名称】《同位素》【年(卷),期】2013(026)002【总页数】5页(P86-90)【关键词】表没食子儿茶素没食子酸酯;放射性碘标记;体内分布【作者】刁尧;刘新宁;兰振和;马婧;赵文瑾;刘洁;赵恂;于成国;崔泽实【作者单位】中国医科大学实验技术中心,辽宁沈阳 110001;中国医科大学实验技术中心,辽宁沈阳 110001;阜新市第二人民医院,辽宁阜新 123000;阜新市第二人民医院,辽宁阜新 123000;阜新市第二人民医院,辽宁阜新 123000;中国医科大学实验技术中心,辽宁沈阳 110001;中国医科大学实验技术中心,辽宁沈阳 110001;中国医科大学实验技术中心,辽宁沈阳 110001;中国医科大学实验技术中心,辽宁沈阳110001;中国医科大学实验技术中心,辽宁沈阳 110001【正文语种】中文【中图分类】R324茶多酚(teapolyphenols,Tp)是茶叶的有效成分之一,主要由儿茶素、黄酮、酚酸、花色素4大类物质组成,作为其主要成分的儿茶素(catechins)占茶多酚总量的60%~80%,主要包括的单体化合物有表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)等[1]。
!第!"卷第#期核!化!学!与!放!射!化!学$%&’!"(%’#!!))*年!月+%,-./&!%0!(,1&2/-!/.3!4/35%1627589-:;2<’!))*!!收稿日期!!))=>)P >!=!!修订日期"!))=>##>)#!!基金项目!中国科学院知识创新工程重大资助项目#b +I _J >]‘>)"$!国家自然科学基金资助项目##)?)=)A ?$!!作者简介!夏姣云##@P ?%$&女&湖南邵阳人&博士研究生&无机化学专业’!!文章编号!)!=A >@@=)#!))*$)#>))A #>)P 铼羰基化合物的制备及其在小鼠体内的生物分布夏姣云!汪勇先!李世强!于俊峰!郑明强!李谷才!刘振锋!程登峰!唐!林!刘秀青!尹端沚中国科学院上海应用物理研究所放射性药物研究中心&上海!!)#"))摘要!选择三齿配基C #&C !&C A 及C ?#C #f 组氨酸&C !f 次氮基三乙酸&C A f !>吡啶甲基胺>,&,>二乙酸&C f 二#!>吡啶甲基$>胺$作为双功能螯合剂可以连接受体(多肽(蛋白等靶向分子&用于设计合成新的以)#""42#I M $A *^为核心的放射性药物’标记实验表明&?个配基的浓度在#Z #)i =!#Z #)i ?7%&+C &反应时间为A )75.时&放射化学产率大于@)[&用a L C I 分离后&放射化学纯度大于@=[’电泳实验表明&配合物显示不同的价态’稳定性实验表明&种配合物在体外稳定&!?6几乎不发生分解’组氨酸与半胱氨酸竞争实验说明&!?6内?个配合物很难发生配基与半胱氨酸的交换反应&而在组氨酸溶液中&除C !形成的配合物相对来说不稳定外&其它A 个较稳定’是否在体内有很高的稳定性&还需实验进一步证实’小鼠动物试验表明&个配合物均能较快地从血液和多数组织器官中清除&主要在肝和肾中浓集&是较理想的双功能螯合剂’关键词!铼>#""!双功能螯合剂!标记中图分类号!4"#P Y @!!文献标识码!D!9,%/$-)-’,.N )".)-%&);7%)","4>J JV $U :&)*’&;",92+"#32$R $-_J D+5/%>:,.&‘D (E c %.H >O 5/.&C J ]65>h 5/.H &c F+,.>02.H &G a K (E \5.H >h 5/.H&C JE ,>1/5&C J FG 62.>02.H &I a K (E X 2.H >02.H &B D (EC 5.&C J F _5,>h 5.H&c J (X ,/.>S 654/35%R 6/-7/12,951/&I 2.92-&]6/.H 6/5J .8959,92%0D R R &523L 6:8518&962I 65.282D 1/327:%0]152.12&]6/.H6/5!)#"))&I 65./5;-%&’*%"4/35%&/<2&5.H %0<5%&%H 51/&&:/195T 27%&21,&28U 59696223)>)#""42#I M $A #a !M $A *^,.596/8<22.%0R -57/-:5.92-2895.-212.9:2/-8’B 62-20%-2&9629-532.9/92&5H /.38C #!C ?#C #f6589535.2&C !f .59-5&%9-5/12951&C A f !>R 51%&:&/75.2>,&,>35/12951/153&C ?f <58#!>R :-53:7296:$/75.2$U 2-22T /&,/9235.-/35%162751/&-2/195%.8U 59696223)>)#""42#I M $A #a !M $A *^’B 6282-2/195%.8:52&323962-/35%/195T 2<,5&35.H <&%1V 823)>)#""42#I M $A C *#C f C #!C ?$&U 6516U 2-2532.950523<:a L C I ’B -51/-<%.:&1%7R &2O 28&U 596&H 4T /&,28-/.H 5.H 0-%7i!’!A9%!’#"&U 2-2%<9/5.235.:52&3865H62-96/.@)[,85.H &5H /.31%.12.9-/95%.8U 5965.962#Z #)i =!#Z #)i ?7%&+C-/.H 2’I %7R29595%.89,3528U 5961:8925.2/.36589535.2-2T 2/&2365H 689/<5&59:0%-/&&%096282-/35%/195T 21%7R&2O 28&/.3<5%3589-5<,95%.89,35285.75125.351/923/0/89-/92%0<&%%31&2/-/.12/.365H6-/92%09%9/&-/35%/195T 59:2O 1-295%.%11,--5.HR -57/-5&:96-%,H 6962-2./&>,-5./-:R /96U /:’J .8,77/-:!1%7R &2O 28"C #!C ?#/-2R %92.9162&/9%-80%-9620,9,-20,.195%./&5S /95%.%0<5%7%&21,&28’<$9="&.-$#""42%<50,.195%./&162&/95.H /H 2.98%&/<2&5.H !!铼和锝羰基化合物"23)>&\"I M #A "a !M #A ’^!\f #""42!@@B 17#标记生物分子已经得到了广泛应用!并实现了在水溶液常压下制备!成为目前铼和锝放射性药物研究的热点&#’(23)>&\"I M #A"a !M #A ’^可以直接与组氨酸的咪唑基团结合!直接标记含组氨酸残基的蛋白)单抗或多肽&!>?’(另外其A 个a !M 分子很容易被单齿)两齿或多齿双功能配体"含"(!(!(#!"(!(!M #!"(!(!]#!"L !L #!"L !L !M #!"]!]#等配位原子#取代!形成含羰基金属的螯合物(这种螯合物很容易与单抗)多肽等生物分子稳定结合!甚至是很小的生物分子!也能高比度结合而不丧失其生物活性(虽然铼和锝同处于周期表的第七副族!化学性质类似!但国内外有关23)>&#""42"a !M #A "I M #A ’^标记放射性药物的研究并未像23)>&@@B 17"a !M #A"I M #A ’^那样充分!主要因为铼需要苛刻的条件从^P 还原到低价态!且氧化成高价态的趋势更强(要进一步研究23)>&#""42"I M #A "a !M #A ’^间接标记生物小分子)蛋白)多肽)单抗及磁微粒子等!双功能螯合剂的选择很关键(近年来!许多研究表明&=>"’!理想的羰基锝配体应含有一个或多个氮!尤其是芳香性氮原子作为配位原子(本文选择了种双功能螯合剂!结构见图#!并进行23)>&#""42"I M #A "a !M #A ’^的放射性标记!研究标记化合物的体外稳定性!以及组氨酸和半胱氨酸与标记化合物的竞争实验!同时合成出相应的三羰基铼&42’与配基的冷化合物!并进行a L C I 对照分析(本工作希望研制出稳定性好)水溶性好的羰基铼化合物!为寻找新的双功能螯合剂奠定基础(>!实验部分>?>!试剂与仪器四乙基溴化铵!二乙二醇二甲醚!硼氢化氨!三乙胺磷酸盐缓冲溶液"B K L D #!二"!>吡啶甲基#>胺!!>氯甲基吡啶盐酸盐!均为分析纯!瑞士;&,V /公司产品%溴化五羰基铼!分析纯!德国D 1-l 8公司产品%组氨酸!次氮基三乙酸以及其它试剂均为分析纯或化学纯!中国医药"集团#上海图#?种双功能螯合剂的结构图;5H ’#!]9-,19,-28%00%,-<50,.195%./&162&/95.H /H2.98!!!!C #***组氨酸"a 589535.2#!C !***次氮基三乙酸"(59-5&%9-5/12951#!C A ***!>吡啶甲基胺>,!,>二乙酸"!>L 51%&:&/75.2>,!,>X 5/12951/153#!C ***二"!>吡啶甲基#>胺"N 58"!>R :-53:7296:#/75.2#化学试剂公司产品%&(K 9?’!&42"I M #A N -A ’化合物根据文献&@’合成%!>吡啶甲基胺>,!,-二乙酸根据文献&#)’合成%a L C I 所用的溶剂在使用前均过滤!层析硅胶E ;!=?板和聚酰胺薄膜购自浙江台州四青生化材料厂%实验用水均为二次蒸馏水((/#""42M 淋洗液!由上海应用物理研究所生产的#""‘>#""42医用核素发生器淋洗%D 4>!)))型放射性薄层扫描仪!美国N 5%81/.公司生产%高效液相色谱"a L C I #配有D 72-51/L X D >#))紫外检测器)L *")泵"美国戴安公司产品#和放射性检测器"美国N 5%81/.公司产品#%分析柱I #"反相柱",N %.3/R /V !#),7!#=)77Z?’*77#!美国‘/92-8公司产品%=))\a S 的超导核磁共振仪!瑞士N -,V 2-公司产品%\51-%\/88E I B I D )==质谱仪!美国;5.5H/.公司产品%D $D B D 4A P );B >J 4型红外光谱仪!德国B 62-7%(51%&29公司产品%"=>!型恒温磁力搅拌器!上海闵行江浦仪器厂%Ra ]>!I 型R a 酸度计!上海大普仪器有限责任公司%X c c >?型稳压稳流电泳仪!北京市六一仪器厂(>?@!冷羰基铼配合物的合成>?@?>!&42"I M #A >C #’配合物的合成!根据文献!A 核化学与放射化学第!"卷!@"合成了化合物!(K 9?"!!42#I M $A N -A "%称取A #!’)7H #)’?A77%&$!(K 9"!!42#I M $A N -A "和*@’"7H #)’?=77%&$C #&溶于#=7C 水中&")g 加热P 6&减压蒸干溶剂近#’=7C &在)g 冷却!6后&有白色固体析出&得到产物*P ’P7H %>?@?@!!42#I M $A >C !"配合物的合成!称取!#=’=7H #)’!"77%&$!(K 9"!!42#I M $A N -A "和=P ’A7H #)’A )77%&$配基C !&溶解于#)7C 甲醇中&P )g 加热回流*6&冷却至室温&过滤后&滤液蒸干&白色固体溶解在少量二氯甲烷中&再加入正己烷#5#二氯甲烷$d 5#正己烷$f #d =$分层重结晶&有白色固体析出&产物=!’!7H%>?@?A !!42#I M $A >C A "配合物的合成!根据文献!#)"合成配基C A %称取!@"’*7H #)’A @77%&$!(K 9?"!!42#I M $A N -A "和"@’*7H #)’?)77%&$C A &溶解于#)7C 水中&")g 加热P6&减压蒸干溶剂至约#’=7C &在)g 冷却!6后&有白色固体析出&得到产物#!P ’@7H%>?@?E !!42#I M $A >C ?"配合物的合成!称取A !#’#7H #)’?!77%&$!(K 9?"!!42#I M $A N -A "和"@’P7H #)’?=77%&$配基C &溶于#=7C 水中&")g 加热?6&减压蒸干溶剂至约#’=7C &在)g 冷却#6后&有黄色晶体析出&得到产物#P =’P7H%>?A !羰基铼!>J JV $"配合物的放射化学合成种#""42#I M $A>C 配合物制备流程示于图!%合成前体!#""42#I M $A #a !M $A "^按照文献!##"的方法&取纯化后的!#""42#I M $A #a !M $A "^@)),C &分别加入#)),C 的配基C #&C !&C A 及C ?溶液#C #&C A 及C ?的浓度为#Z #)>=7%&’C (C !的浓度为#Z #)i ?7%&’C $&充分混匀后在孵育器上P =g 反应A )75.可得到相应的#""42#I M $A>C 配合物%用a L C I 检测放化产率和分离纯化产物%>?E !电泳实验磷酸盐#L N ]&RafP ’?&)’#7%&’C $)(/D 1>aD 1#R af ?’P &)’#7%&’C $和(a A >a !M >(a ?I &#Raf@’!&)’#7%&’C $A 种缓冲液分别作电泳液&新华滤纸条#!)17Z#’=17$先用电泳液浸湿&再将配合物点到原点处&然后在#=)$电压下电泳!6%取出干燥后&在放射性薄层扫描仪上检测配合物的位置%>?G !羰基铼!>J JV $"配合物脂水分配系数#2("$的测定取分离纯化后的#""42#I M $A>C#)),C &加入图!!#""42#I M $A>C 配合物的合成;5H ’!]:.962858%0#""42#I M $A>C1%7R %,.38到=7C L N ]缓冲液中#RafP ’?&)’#7%&’C $&充分混匀后&取出!7C 于离心试管中&再加入!7C 正辛醇溶液&再次混匀后离心分层&分别取等体积的有机相和水相测定放射性计数&由有机相和水相计数比的对数计算#""42#I M $A>C 的脂水分配系数%>?H !羰基铼!>J JV $"配合物体外稳定性测定将分离纯化后的#""42#I M $A>C 分别取=),C 于小试管中&加入=),CL N ]#Ra fP ’?&)’#7%&’C $缓冲液&分别于#&?&!?6取样&用a L C I 测定其放射化学纯度&分析其在室温下放置的稳定性变化规律%>?I !羰基铼!>J JV $"配合物体外竞争实验在两个小试管中分别加入=),C 的组氨酸和半胱氨酸#浓度均为#77%&’C $&再加入=),C分离纯化后的羰基铼!#""42"配合物&于#&?&!?6取样测定配合物的放射化学纯度&分析其在体外稳定性%>?J !生物分布实验取!)H 左右的雄性昆明小白鼠A *只#购于复旦大学生物医学部$&尾静脉注射#""42#I M $A>C 溶液)’#7C #约)’"\N h$&注射后#&?&!?6断颈处死&取心)肝)脾)肺)肾)肌肉)头骨)肠)胃及血液&称重并测定放射性计数&计算每克组织的摄取百分数#[*Hi #$%AA 第#期夏姣云等+铼羰基化合物的制备及其在小鼠体内的生物分布@!结果和讨论@?>!羰基铼配合物的分析与鉴定配合物42!I M "A >C #的产率为"*’P [#红外分析结果!b N -$17i #"为%A A A )!7"$A #=)!7"$A ##)!7"$!)!)!T 8"$#"@)!T 8"$#"*)!T 8"$#*?)!U "$#*!)!U "$#?@)!U "##a (\4分析结果!%$X \]M >3*"为%"’#=!8$a "$P ’#)!8$#a "$=’P P !<-%/38$#a "$=’#)!<-%/33$!a "$A ’P =!3$#a "$A ’)=!9$!a "#\]分析结果!K ]J $6&7"为%计算值!I @a "(A M =42"为?!?’!@$测定值为!=’=*’\^#(^#元素分析结果!I @a "(A M =42$""为%计算值$I $!=’?=[)a $#’"@[)($@’@)[)测定值$I $!=’?![)a $#’"=[)($@’"A [#配合物42!I M "A >C !的产率为?)’*[#红外分析结果!b N -$17i #"为%#@@)!T 8"$#"*)!T 8"$#*?)!7"$#?")!7"$#A @)!U "$##P )!U "$#)=)!7"$P "A !U "$*?"!U "$=)=!U "##a (\4分析结果!-$X \]M >3*"为%A ’!A !7$#!a "$!’=)!9$!a "$#’#"!7$#!a "#\]分析结果!K ]J $6&7"为%计算值!I #P a !P (!M @42"为="@’*!$测定值为=@)’?@’\^#(^#元素分析结果!I #P a !P (!M @42$""为%计算值$I $A ?’*)[)a $?’=@[)($?’P =[)测定值$I $A ?’P #[)a $?’*"[)($?’"#[#配合物42!I M "A >C A 的产率为*"’P [#红外分析结果!b N -$17i #"为%!)A )!T 8"$#@A )!T 8"$#"@)!T 8"$#P !)!U "$#*!)!T 8"$#?=)!8"$#A ")!U "$#A #)!8"$#!))!U "$#)@)!U "$"P )!8"$P P =!8"$?*=!8"##a (\4分析结果!-$X \]M >3*"为%"’"!!3$#a "$"’#!!7$#a "$P ’P *!3$#a "$P ’=*!9$#a "$=’!@!33$#a "$?’**!7$!a "$?’?#!33$#a "$?’#)!33$#a "$A ’"?!33$#a "#\]分析结果!K ]J $6&7"为%计算值!I #A a ##(!M P 42"为?@A ’?=$测定值为?@?’*A ’\^#(^#元素分析结果!I #A a ##(!M P 42$""为%计算值$I $A #’*#[)a $!’!A [)($=’*P [)测定值$I $A #’P @[)a $!’=?[)($=’@P [#配合物42!I M "A >C ?的产率为@=’*[#红外分析结果!b N -$17i #"为%!)A )!T 8"$#@A )!T 8"$#@))!T 8"$#*#)!U "$#?")!U "$#A !)!8"$#)A )!8"$P P #!U "$*!@!8"$=A "!U "##a (\4分析结果!-$\2M X >3"为%"’@!!3$!a "$P ’@=!9$!a "$P ’*#!3$!a "$P ’A "!9$!a "$’"!!h $?a "#\]分析结果!K ]J $6&7"为%计算值!I #=a #A (A M A 42N -"为=?@’?))测定值为==@’=*’\^#(^#元素分析结果!I #=a #A (A M A 42N -$""%计算值$I $A !’P *[)a $!’A P [)($P ’*?[)测定值$I $A !’@#[)a $!’="[)($P ’@"[#@?@!铼!>J JV $"羰基配合物的放射化学合成配基C #$C !$C A 及C ?与前体羰基铼化合物能形成很好的螯合物$它们的摩尔比为#d ##在最佳反应条件下%L N ]!Raf P ’?$)’#7%&&C "$温度为P =g $反应时间为A )75.$配基C #$C A $C ?的浓度为#Z#)i =7%&&C 及C !的浓度为#Z#)i ?7%&&C $反应得到的配合物标记率均达@)[以上$并用a L C I 分析比较冷配合物和相应的热配合物$结果列入表##由表#看出$它们的保留时间基本一致#混合物使用a L C I 分离$流动相D 为甲醇$N 为B K D L !R af?’=$浓度#’=7%&&C "#梯度法%)*A75.$#))[N )A **75.$P =[N $!=[D )**@75.$**[N $A ?[D )@*!)75.$)[N $#))[D )!)*!!75.$)[N $#))[D )!!*!=75.$P =[N $!=[D )!=*A )75.$#))[N #配合物的放化纯度均达@=[以上#表#!铼’#""42&42(羰基化合物的a L C I 保留时间B /<&2#!a LC I-292.95%.95728%0#""42&429-51/-<%.:&1%7R&2O 28化合物!I %7R&2O "!!#""42"&75.!!42"&75.#""42&42!I M "A >C #"’*"’?#""42&42!I M "A >C !#=’!#?’@#""42&42!I M "A >C A#*’?#*’##""42&42!I M "A >C ?#=’"#=’#!!注!(%92"%紫外检测器的波长为!=?.7!&F $f!=?.7"@?A !电泳实验电泳实验完成后$用放射性扫描仪测定在新华一号滤纸上的放射性分布#实验结果表明$#""42!I M "A >C #和#""42!I M "A >C ?在Ra 为?’P $P ’?和@’!时$#""42!I M "A >C #聚集在原点不带电荷$而#""42!I M "A >C ?聚集在电极的负极#表明两种配合物在酸性+中性及碱性中$#""42!I M "A >C #均不带电荷$#""42!I M "A >C ?带正电荷)而#""42!I M "A >C !在酸性+中性及碱性中均聚集在电极的正极$本身带负电荷)配合物#""42!I M "A >C A在酸性溶液中聚集在原点$不带电荷$在中性和碱性溶液中聚集在正极$带负电荷#?A 核化学与放射化学第!"卷@?E !羰基铼!>J JV $"配合物脂水分配系数#2("$的测定分别取等体积的有机相和水相溶液测定放射性计数!计算R af P ’?时#""42"I M #A>C 的脂水分配系数"&H 4#!测定结果列入表!$从表!可看出!配合物水溶性按下列顺序递减%#""42"I M #A >C ?/#""42"I M #A >C A /#""42"I M #A >C #/#""42"I M #A >C !$表!!羰基铼&#""42’化合物的&H 4值B /<&2!&H 4T /&,28%0#""429-51/-<%.:&1%7R&2O 28化合物"I %7R&2O ##""42"I M #A >C ##""42"I M #A >C !#""42"I M #A >C A#""42"I M #A >C ?&H 4i )’)?j )’)#!’#"j )’)?i )’!A j )’)!i !’!A j )’)=!!注"(%92#%+f A @?G !羰基铼!>J JV $"配合物体外稳定性测定#""42"I M #A >C #!#""42"I M #A >C !!#""42"I M #A >C A和#""42"I M #A >C ?在室温放置!?6后标记率几乎没有变化$表明在室温条件下!这些标记配合物稳定性都比较好$@?H !羰基铼!>J JV $"配合物体外竞争实验在!个小试管中分别加入?=),C 的组氨酸和半胱氨酸"浓度均为#77%&(C #!以及=),C 分离纯化后的羰基铼&#""42’配合物!于#!?!!?6取样!用a L C I "a L C I 分离条件同上#测定配合物的放射化学纯度!结果列入表A $从表A 看出!?种配合物在半胱氨酸中十分稳定!几乎不发生配体交换反应$#""42"I M #A >C A 和#""42"I M #A >C ?在组氨酸溶液中同样!?6也几乎不发生配体交换反应!而#""42"I M #A >C !在组氨酸溶液中!?6时有=[左右的配基发生交换!可能是配基C #!C A !C ?中含有吡啶或咪唑环!吡啶或咪唑环上的(原子有更强的配位能力$@?I !生物分布研究#""42"I M #A >C #!#""42"I M #A >C !!#""42"I M #A >C A和#""42"I M #A >C ?在小鼠体内的生物分布实验结果列入表?"静脉注射!?6后#$实验结果表明!这?种标记化合物的肝脏和肾摄取较高)清除较慢*而?种配合物在心)脾)肌肉和骨中摄取少!易清除$但在肝)肾和肺中!配合物#""42"I M #A >C !的摄取要高于其它A 种配合物!其余器官相对来说也高于另外A 种$从?种配合物的脂水分配系数来看!#""42"I M #A >C !为!’#"!要远高于其它A 种配合物!有可能会影响配合物在小鼠体内的生物分布!但可能不是唯一的影响因素$表A !配合物在组氨酸和半胱氨酸溶液中的稳定性B /<&2A ]9/<5&59:%01%7R &2O 28/H /5.89&5H /.382O 16/.H 25.#77%&(C6589535.2%-1:8925.2化合物"I %7R&2O #组氨酸"a 589535.2##6?6!?6半胱氨酸"I :8925.2##6?6!?6#""42"I M #A >C #iii"@P j !#["@*j !#["@?j =#[#""42"I M #A >C !"@)j !#["""j A #[""=j =#["@=j ##["@A j !#["@)j A #[#""42"I M #A >C A"@"j !#["@*j ##["@!j ?#["@"j ##["@P j !#["@*j !#[#""42"I M #A >C ?"@"j ##["@P j !#["@=j A #["@"j !#["@"j ##["@P j ?#[!!注"(%92#%L N ]!Ra f P ’?!A Pg !+f A =A 第#期夏姣云等%铼羰基化合物的制备及其在小鼠体内的生物分布表?种#""42羰基配合物在小鼠静脉注射后生物分布B/<&2?N5%3589-5<,95%.%0#""429-51/-<%.:&1%7R&2O285..%-7/&7512/092-5.9-/T2.%,8配合物!I%7R&2O"!##摄取率!F R9/V2-/95%"#![$H>#"血!N&%%3"肺!C,.H"心!a2/-9"肝!C5T2-"脾!]R&22."#""42!I M"A>C###’#"j)’@)#’)=j)’?=#’!@j)’#*A’?=j!’#))’"@j)’A A ?#’)#j)’#!)’=*j)’#!)’=P j)’#A!’P A j#’!!)’?P j)’#! !?)’)P j)’)A)’?=j)’#*)’A=j)’)=!’="j)’!))’A"j)’)P#""42!I M"A>C!#?’P)j)’?#=’=!j)’#!=’!)j)’?P"’#?j)’=)A’"*j)’#" ?A’@=j)’!?A’=#j)’!?A’P?j)’!*=’!=j#’A##’@=j)’!? !?#’#P j)’?P!’"P j)’!!)’@P j)’)@?’A=j)’P!)’"@j)’A A#""42!I M"A>C A#!’A?j#’=P!’A)j#’A?#’#@j)’P P=’P A j!’="#’@@j)’*P ?#’#?j)’P##’*?j)’"!)’"*j)’A*?’?A j#’?))’*A j)’!= !?#’)@j)’###’*#j)’=#)’P*j)’)*A’A#j)’=")’=A j)’)"#""42!I M"A>C?##’?@j#’#)!’P!j#’#)!’!#j)’"@?’?*j#’#"!’!#j)’#! ?)’"*j)’#P#’!A j)’#@#’=*j)’A#A’##j#’!=#’"=j)’?! !?)’)@j)’)=#’)#j)’P))’"*j)’#!!’A#j)’=))’!#j)’#"配合物!I%7R&2O"!##摄取率!F R9/V2-/95%"#![$H i#"胃!]9%7/16"肠!J.92895.28"肾!b53.2:8"肌肉!\,81&2"股骨!N%.2"#""42!I M"A>C##A’*?j!’@)A’?@j#’#)?’=?j#’#?)’@@j)’###’)#j)’)# ?!’A)j#’!*!’#!j)’=*A’!=j)’??)’*!j)’!!)’*"j)’#" !?)’!A j)’#P)’!!j)’#*!’?*j)’*#)’?"j)’#))’??j)’!)#""42!I M"A>C!#"’@A j#’#A?’P!j)’##@’#@j!’"*#’!#j)’#!#’P"j)’"= ?=’P=j!’#)!’@A j)’=*P’=!j#’!P)’@#j)’#P)’@"j)’?! !?)’@?j)’#?#’@=j)’*@?’!=j)’A*)’*@j)’!?)’P A j)’#P#""42!I M"A>C A#=’*)j!’###’?!j)’"A?’)"j#’A##’!=j)’)##’!"j)’#! ?!’@P j#’@##’A)j)’?!=’#=j#’#?)’"A j)’!@)’"?j)’?? !?)’*=j)’#P#’!!j)’"P A’@A j)’A")’*P j)’!#)’P?j)’#"#""42!I M"A>C?#A’=*j)’?#A’!#j#’#!"’??j!’#?#’=*j)’A!!’?#j)’"? ?!’)#j)’A P!’A=j)’!?=’!#j)’@!)’=@j)’#P#’A*j#’#@ !?)’?=j)’A!)’"!j)’*A!’#A j)’=*)’=#j)’A#)’#"j)’)A!!注!(%92"%+f A A!结!论配基C#&C!&CA和C?能与前体三羰基铼’#""42(形成很好的螯合物!金属与配基比为#d#"&并且配基的浓度低&反应时间短)个配合物体外稳定性均较高&!?6几乎不发生分解)在半胱氨酸溶液中&种配合物几乎不发生配基交换反应*而在组氨酸溶液中&除#""42!I M"A>C!!?6时有=[左右的配基发生交换外&其余A个配合物较稳定&可能是配基C#&CA&C?中的吡啶或咪唑环上的(原子有更强的配位能力的缘故)?个配合物均能较快地从血液和多数组织器官中清除&只在肝和肾中摄取比其它器官高&主要是通过排泄系统排出体外)初步研究的个配合物在小鼠体内的生物分布行为可能与它们的脂水分配系数&H4有关)&H4值高的配合物&!?6时在各个器官中放射性保留均高于其它A个配合物&在肾+肝及肺中稍明显&但可能不是唯一的影*A核化学与放射化学第!"卷响因素!从这些试验结果来看"个配基是可用于设计合成新的以##""42$I M %A &^为核心的放射性药物潜在的双功能螯合剂!参考文献!##&!D &<2-9%4"]165<&54"K H&5D "29/&’D (%T 2&M ->H /.%729/&&51D h ,/I %7R&2O%0B 216.295,70%-962C /<2&5.H %0N 5%7%&21,&/-28’]:.962858%0#@@B 17>$a !M %A $I M %A &^;-%7@@B 17M i ?5.D h ,2%,8]%&,>95%./.3J 9842/195%.‘596/N 50,.195%./&C 5H/.3#+&’+D 7I 627]%1"#@@""#!)$A #%’P@"P >P@""’#!&!]165<&54"]16,<5H2-LD’I ,--2.9F 82/.3;,9,-2L %92.95/&%0M -H /.%729/&&514/35%R6/-7/12,951/&8#+&’K ,-+(,1&\23\%&J 7/H 5.H "!))!"!@$##%’#=!@>#=?!’#A &!D&<2-9%4"]165<&54"D <-/7]"29/&’L %92.95/&%0962(#\$I M %A &^)$\f42"B 1%\%529:0%-962C /<2&5.H %0N 5%7%&21,&28#+&’4/35%1657D 19/"#@@P "P @’@@>#)A ’#&!]95162&<2-H2-D "‘/5<2&4"X ,7/8I "29/&’$2->8/95&2]:.962951D R R-%/169%(2U N 50,.195%./&I 62&/95.H D H 2.98B /5&%-\/320%-C /<2&5.H ‘59696223)>#\$I M %A &^I%-2$\f B 1"@@B 17"42%’]:.962858"8+58!09"/.38+58:9N 26/T 5%-%0962\%32&I %7R &2O #\$D L L D %$I M %A &$D L L Df #$=>D 75.%>L 2.9:&%>L :-535.>!>:&>\296:&/75.%&>D 12951D 153%#+&’(,1&\23N 5%&"!))A "A )’?*=>P )’#=&!I /%+e "‘/.H c _"c ,+;"29/&’L -2R/-/95%./.34/35%&/<2&5.H %0],-0/12>\%350523\/H .2951(/.%R /-951&28‘596462.5,7>#""0%-\/H .2951B /-H 29234/35%962-/R :#+&’+\/H .\/H.\/92-"!))?"!P P ’#*=>#P ?’#*&!D&<2-9%4"]165<&54"‘/5<2&4"29/&’N /851D h ,2%,8I 627589-:%0#\$M a !%A $I M %A &^$\f 42"B 1%X 5-21923B %U /-384/35%R6/-7/12,951/&D R R&51/95%.#+&’I %%-3I 62742T "#@@@"#@)*#@!’@)#>@#@’#P &!]165<&54"D &<2-9%4"C /N 2&&/4"29/&’;+58!09/.38+58:9K T /&,/95%.%0N 50,.195%./&I 62&/9%-80%-962C /<2&5.H ‘59623)>#@@B 17$M a !%A>$I M %A &^#+&’+C /<2&&23I R 34/35%R 6/-7"#@@@"!$],R R&’#%’]!!">]!A )’#"&!]165<&54"C /N 2&&/4"D &<2-9%4"29/&’J .0&,2.12%0962X 2.95159:%0C 5H /.3]:89278%.9628+58!09/.38+58:9N 26/T 5%-%0@@B 17$J %>B -51/-<%.:&I %7R&2O 28’/a 5.90%-962;,9,-2;,.195%./&5S />95%.%0N 5%7%&21,&28#+&’N 5%1%.Q ,H I627"!)))"##’A ?=>A =#’#@&!D &<2-9%4"K H &5D "D <-/7F "29/&’]:.962858/.342/195T 59:%0#(K 9?&!#42N -A $I M %A &^;%-7/>95%./.3]9-,19,-/&I 6/-/192-5S /95%.%0962I &,892-8#(K 9*A $,A >M a %$,>M a %$I M %@&/.3#(K 9?*!$,>M a %$I M %*&<:D &V /&5.2B 59-/95%.#+&’+I 627]%1X /&9%.B -/.8"#@@?"!"#=>!"!)’##)&!I%OXX "N 2.V %T 51]+"N &%%7C \"29/&’I /92>16%&/92C \I B N /.38/8L -%<280%-962D 195T 2]5928%0(%.6272J -%.M O :H2./828#+&’+D 7I 627]%1"#@"""##)$P %’!)!*>!)A !’###&!]165<&54"]16U /-S </164"D &<2-9%4"29/&’]92R8B %U /-3a 5H 6]R 215051D 195T 59:C /<2&5.H %0N 5%7%&>21,&280%-9624/R 2,951D R R &51/95%.’L -2R/-/95%.%0L -21,-8%-##""42$a !M %A $I M %A &^/.3]:.962>858%0B /5&%->\/32N 50,.195%./&C 5H /.3]:89278#+&’N 5%1%.Q ,H I627"!))!"#A $?%’P =)>P =*’PA 第#期夏姣云等’铼羰基化合物的制备及其在小鼠体内的生物分布。
荧光标记的纳米颗粒进入小鼠体内的活体成像实验引言荧光标记的纳米颗粒在生物医学领域中具有广泛应用。
通过将荧光染料或荧光蛋白标记到纳米颗粒表面,可以实现对生物体内组织和细胞的高分辨率成像。
本文将介绍一种利用活体成像技术观察荧光标记的纳米颗粒进入小鼠体内的实验方法。
实验设计实验目的本实验旨在通过活体成像技术观察荧光标记的纳米颗粒在小鼠体内的分布和动态变化,以了解其在生物体内的行为。
实验步骤1.制备荧光标记的纳米颗粒:选择合适尺寸和表面性质的纳米颗粒,并将荧光染料或荧光蛋白与其结合,完成荧光标记。
2.小鼠模型制备:选择合适品系和年龄相近、健康状况良好的小鼠作为实验对象。
3.注射纳米颗粒:将荧光标记的纳米颗粒溶液注射到小鼠体内,选择合适的途径(如静脉注射、腹腔注射等)。
4.活体成像:使用荧光显微镜或活体成像系统对小鼠进行实时观察和记录,以获取纳米颗粒在小鼠体内的分布和动态变化信息。
5.数据分析:对活体成像数据进行处理和分析,包括图像处理、信号定量测量等。
实验工具与材料•荧光标记的纳米颗粒:选择合适尺寸和表面性质的纳米颗粒,并选择合适的荧光染料或荧光蛋白进行标记。
•小鼠模型:选择合适品系和年龄相近、健康状况良好的小鼠。
•注射器与针头:用于将纳米颗粒溶液注射到小鼠体内。
•荧光显微镜或活体成像系统:用于观察和记录小鼠体内纳米颗粒的分布和动态变化。
•数据处理软件:用于对活体成像数据进行处理和分析。
实验步骤详解1. 制备荧光标记的纳米颗粒在实验之前,需要选择合适尺寸和表面性质的纳米颗粒,并将荧光染料或荧光蛋白与其结合,完成荧光标记。
这一步骤可以通过化学合成、生物合成等方法完成。
2. 小鼠模型制备选择合适品系和年龄相近、健康状况良好的小鼠作为实验对象。
在实验之前,需要对小鼠进行适当的驯化和适应环境。
3. 注射纳米颗粒将荧光标记的纳米颗粒溶液注射到小鼠体内。
注射途径可以根据实验需要选择,常用的有静脉注射、腹腔注射等。
注射时需要注意剂量控制和注射速度。
第1篇一、实验目的1. 学习和掌握小鼠的解剖学结构,了解其内部器官的分布和功能。
2. 培养实验操作技能,包括动物抓取、麻醉、解剖等。
3. 增强对生物学基本知识的理解和应用能力。
二、实验材料与仪器1. 实验动物:健康昆明小鼠2只2. 实验仪器:解剖台、手术刀、剪刀、镊子、解剖剪、解剖针、生理盐水、纱布、注射器、酒精、棉球、解剖显微镜等。
三、实验步骤1. 动物准备- 将小鼠置于解剖台上,用纱布包裹四肢,使其固定。
- 用酒精棉球对小鼠进行消毒。
- 在小鼠的头部进行标记,以便后续操作。
2. 麻醉- 称量小鼠体重,根据体重计算所需戊巴比妥钠的剂量。
- 将戊巴比妥钠溶液注射至小鼠腹腔,剂量为0.5ml/100g体重。
- 观察小鼠的反应,待其进入麻醉状态。
3. 解剖- 在小鼠腹部正中线处切开皮肤,暴露腹壁肌肉。
- 用解剖剪沿腹壁肌肉剪开,暴露腹腔。
- 观察腹腔内的器官,包括肝脏、胃、肠、脾、肾脏、卵巢/睾丸等。
4. 器官分离- 用解剖剪将肝脏、胃、肠、脾、肾脏、卵巢/睾丸等器官与腹腔相连的组织分离。
- 将器官放在解剖显微镜下观察,记录其形态和结构。
5. 系统观察- 观察心脏,记录其形态、大小和结构。
- 观察肺脏,记录其形态、大小和结构。
- 观察大脑,记录其形态、大小和结构。
- 观察眼睛,记录其形态、大小和结构。
- 观察骨骼系统,记录其形态、大小和结构。
6. 器官保存- 将器官用生理盐水清洗,并用纱布包裹。
- 将器官放入福尔马林溶液中保存。
四、实验结果1. 腹腔器官- 肝脏:呈暗红色,质软,表面光滑。
- 胃:呈暗红色,质软,分为胃底、胃体和胃窦。
- 肠:呈暗红色,质软,分为小肠和大肠。
- 脾:呈暗红色,质软,呈椭圆形。
- 肾脏:呈红褐色,质软,呈豆形。
- 卵巢/睾丸:呈淡红色,质软,呈椭圆形。
2. 系统器官- 心脏:呈粉红色,质软,分为心房和心室。
- 肺脏:呈粉红色,质软,呈海绵状。
- 大脑:呈粉红色,质软,分为大脑半球、小脑和脑干。
177Lu-DOTMP在荷瘤小鼠体内的生物分布和兔SPECT显像研究邓新荣;向学琴;李凤林;樊彩云;刘子华;陈阳;罗志福【摘要】以1,4,7,10-四氮杂环十二烷和亚磷酸为原料合成了1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四甲撑膦酸(DOTMP),并对其进行了177Lu标记;观察了1777Lu- DOTMP在骨转移癌模型鼠体内的生物分布,并对日本大耳白兔进行显像.荷瘤鼠体内的生物分布结果显示:177Lu- DOTMP可以选择性地在骨组织吸收,具有良好的靶向性,而且在血中清除较快,在其它脏器只有少量的摄取.日本大耳兔显像结果显示:177Lu -DOT-MP主要聚集于膀胱组织,即177Lu-DOTMP主要通过肾排泄;注射后22h骨骼放射性摄取明显,46 h骨骼中放射性积聚更多.以上结果表明,177Lu- DOTMP具有良好的骨靶向性,值得进一步研究.%Cyclend ,4,7,10-tetraazacyclododecane) and H3POS were used to synthesis DOT-MP (1, 4, 7, 10-tetraazacyclododecane-l, 4, 7, 10-Tetraaminomethylenephosphonate), and then DOTMP was labelled with l77Lu. The research of biodistributionof 177 Lu-DOTMP in model mice bearing S180 sarcoma and SPECT imaging in Japanese white rabbit were also carried out. The results of biodistribution of bearing S180 mice indicated that 177 Lu-DOTMP cleared rapidly from blood and was selectively delivered to target bone. The radioactivity uptake was mainly in bone and less in other organs and tissues. The results of SPECT imaging of Japanese white rabbit showed that the radioactivity was accumulated in bladder. l77Lu-DOTMP was mainly excreted by kidney. The uptake of the activity in the skeleton was observed significatantly within 22 h post-injection and it became quite significant at46 h post-injection. It indicated that177 Lu-DOTMP has good bone targeting and is worthy of further study.【期刊名称】《同位素》【年(卷),期】2012(025)003【总页数】5页(P160-164)【关键词】1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四甲撑膦酸(DOTMP);177Lu;荷瘤小鼠;生物分布;日本大耳白兔;SPECT显像【作者】邓新荣;向学琴;李凤林;樊彩云;刘子华;陈阳;罗志福【作者单位】中国原子能科学研究院同位素研究所,北京102413;中国原子能科学研究院同位素研究所,北京102413;中国原子能科学研究院同位素研究所,北京102413;中国原子能科学研究院同位素研究所,北京102413;中国原子能科学研究院同位素研究所,北京102413;中国原子能科学研究院核工业401医院核医学科,北京102413;中国原子能科学研究院同位素研究所,北京102413【正文语种】中文【中图分类】R817恶性肿瘤患者发生骨转移的几率较高,肿瘤转移到骨上,会出现伴随着骨质溶解性的骨破坏,其症状为骨痛、病理性骨折、脊椎压迫和高钙血症。
第1篇一、实验背景随着科学技术的不断发展,生物医学研究在疾病预防、治疗和机理研究等方面取得了显著的成果。
小鼠作为实验动物,因其与人类基因的高度相似性、繁殖周期短、易于饲养等特点,被广泛应用于生物医学研究中。
本实验旨在探讨某药物对小鼠某种疾病模型的治疗效果及其作用机制。
二、实验目的1. 观察药物对小鼠疾病模型的治疗效果;2. 分析药物对小鼠相关生理指标的影响;3. 探讨药物的治疗作用机制。
三、实验方法1. 实验动物:选取健康、体重相当的C57BL/6小鼠,随机分为实验组和对照组,每组20只。
2. 疾病模型建立:采用某种方法建立小鼠疾病模型。
3. 药物处理:实验组给予药物干预,对照组给予生理盐水处理。
4. 观察指标:观察小鼠的体重、饮食、活动状况等生理指标,并记录相关数据。
5. 数据处理:采用SPSS软件对实验数据进行分析,比较实验组和对照组的差异。
四、实验结果1. 药物对小鼠体重的影响:实验结果显示,实验组小鼠的体重显著高于对照组,说明药物对小鼠有明显的增重作用。
2. 药物对小鼠饮食的影响:实验结果显示,实验组小鼠的饮食量显著高于对照组,说明药物能促进小鼠的食欲。
3. 药物对小鼠活动状况的影响:实验结果显示,实验组小鼠的活动状况显著优于对照组,说明药物能提高小鼠的活力。
4. 药物对小鼠相关生理指标的影响:实验结果显示,实验组小鼠的相关生理指标(如肝功能、肾功能等)显著优于对照组,说明药物对小鼠的生理功能有明显的改善作用。
五、实验分析1. 药物对小鼠体重的影响:药物可能通过促进小鼠食欲、提高消化吸收功能等途径,导致小鼠体重增加。
2. 药物对小鼠饮食的影响:药物可能通过调节小鼠肠道菌群、促进营养物质的吸收等途径,提高小鼠的饮食量。
3. 药物对小鼠活动状况的影响:药物可能通过改善小鼠的神经系统功能、提高肌肉活力等途径,提高小鼠的活动状况。
4. 药物对小鼠相关生理指标的影响:药物可能通过调节小鼠的内分泌、免疫系统等功能,改善小鼠的生理功能。
实验十三小鼠体内生物分布实验
学生:学号:同组:
一、实验目的
1.学习小鼠的抓取固定方法、尾静脉注射、小鼠的处死及小鼠的间剖实验等基
本技能。
2.学会动物分布实验的数据处理。
二、实验原理
小鼠的品种和品系很多,是实验动物中培育品系最多的动物。
在微生物和各种实验研究中,以小白鼠最为普遍,有英国种、法国种、德国种和瑞士种等,而以瑞士种最著名。
目前我国各生物制品、医学研究单位繁育的小白鼠为昆明种,该品系为封闭种群,最早在抗日战争时期从缅甸而来,在云南昆明繁殖,经过多年培育繁殖而成,该品系小鼠体型较大,繁殖力强。
1. 小鼠的抓取固定方法:
小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤(见图一),将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可(图二)。
有经验者直接用左手小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。
这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。
如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时,则需将小鼠作一定形式的固定,解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位(必要时先行麻醉),再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。
图1 小鼠的抓取与固定
2. 小鼠尾静脉注射练习:
静脉注射时,用小鼠尾静脉注射架固定(图三),先根据动物大小选择好合适的固定架,并打开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动物头对准鼠筒口并送入筒内,调节鼠筒长短合适后,露出尾巴,固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。
图2 小鼠尾静脉注射方法
尾静脉注射时,鼠尾静脉在背侧和腹侧各一根,背侧比较容易固定,多采用。
操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中,使尾巴露出,尾部用45~50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张(也可用一米距离外红外灯烤半小时),并可使表皮角质软化,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,用中指从下面托起尾巴,以无名指和小指夹住尾巴的末梢,右手持注射器连4(1/2)号细针头,使针头与静脉平行(小于30℃),从尾下四分之一处(约距尾尖2-3厘米)
处进针,此处皮薄易于刺入,先缓注少量药液,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入。
注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。
如需反复注射,应尽可能从末端开始,以后向尾根部方向移动注射(图四)。
图3 小鼠尾静脉注射方法
3. 小鼠的处死:
(1) 脊椎脱臼法
右手抓住小鼠用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头,将脊髓与脑髓拉断,鼠便立即死亡;如左手拇指与食指放在脊椎第三四节处,鼠下肢瘫痪。
(2) 断头法
用左手食指和拇指用力按住小鼠鼠头并将小鼠尾巴缠绕在左手无名指和食指间,用力使小鼠无法动弹,此时小鼠颈部出现勒痕,按此勒痕果断将小鼠头部剪掉。
若实验需取血,可在此时用吸管快速将血液转移至容器中。
4. 小鼠的解剖实验:
(1) 先解剖已处死小鼠的头部,取出完整的脑部;
(2) 用镊子夹住小鼠肚皮上的皮毛,用剪刀剪去皮毛下的腹膜,此时可以看到小鼠腹部的脏器,依次完整的取出肝、胆、脾、肾;
(3) 剪开胸腔与腹腔之间的隔膜,完整的取出胸腔中的肺和心脏;
(4) 最后取出大腿骨,并在大腿上取一块与心脏大小差不多的肌肉。
三、实验仪器与试剂
主要仪器:放射性活度计, FW-2000锝分析仪,天平,1 ml一次性注射器,解剖工具,毛细管,聚酰胺薄片,烧杯等。
主要试剂:Na99m TcO4淋洗液,生理盐水,乙腈,MDP药盒等。
四、实验步骤
将2ml生理盐水注入MIBI药盒,振荡使充分溶解。
加入0.3ml约1.1mCi
新鲜淋洗的99m TcO4-溶液,振荡使混合均匀,室温静置15min。
以生理盐水-聚酰胺薄膜体系检测标记率。
用生理盐水将药物99m Tc-MIBI稀释至约200μCi/ml。
取6只约18-20g的昆明小白鼠,尾静脉注射0.1ml(约25μCi)的99m Tc-MIBI (放射化学纯度大于90%),分别在注射后5、30、和60 min将小鼠断头处死,取出心、肝、肺和血等组织,称重并用锝分析仪测其放射性计数,计算每克组织的放射性摄取率
X ID/g=[(A组织/A注)×100%]/m组织
五、实验结果
本次实验,由于操作不熟练,无法及时有效的完成实验内容,因而我们没有得到实验有效数据,只是进行了抓取固定方法、小鼠静脉注射、处死及解剖的练习。
六、问题讨论
1. 在做动物体内生物分布实验时需要特别注意哪些事项?
答:需要注意的事项有:
1)注射时应排尽注射器内的气泡;
2)如需反复注射,应尽可能从末端开始,以后向尾根部方向移动注射;
3)注射完毕后,应先用棉花堵住伤口,再拔针,以免药液漏出;
4)取血时,应避免取到尿液。
取一次血,换一个滴管;
5)血液应尽快称重,以免其挥发后引入误差;
6)解剖完一个器官后或组织后,应擦拭镊子等器具,以防止上面的残留物影响其他数据。